美洲斑潜蝇SS-PCR检测技术研究

【背景】美洲斑潜蝇是一种严重威胁瓜果蔬菜、烟草、棉花等经济作物和花卉生产的入侵性害虫。由于潜叶蝇类害虫体型较小、生活方式隐蔽、形态相似,本文针对其难以快速准确地进行形态鉴别的问题,以美洲斑潜蝇为研究对象,以菜田常见的4种潜叶蝇类害虫为参照,采用种特异性PCR方法（species-specific PCR,SS-PCR）,研究其快速分子检测鉴定技术。【方法】调用GenBank中一段936bp的美洲斑潜蝇线粒体DNA（mtDNA）细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因（COⅠ）的序列（Gen-Bank登录号为EU219613）,并根据此基因片段的碱基序列设计引物1对,其扩增片段大小为294bp。【结果】种特异性检验结果显示,该引物只对美洲斑潜蝇的COⅠ基因具有扩增能力,对其他种类如南美斑潜蝇、三叶斑潜蝇、葱斑潜蝇、豌豆潜叶蝇等没有扩增能力。该引物不仅对成虫具有良好的扩增效果,对蛹、幼虫以及单粒卵也具有同样的扩增效果,其最低检出阈值为1/3840头成虫。【结论与意义】SS-PCR技术体系可用于美洲斑潜蝇的鉴定识别与检测监测,对阻止其进一步扩散蔓延具有重要意义。     

江苏泰兴市首次发现三叶草斑潜蝇疫情

2008年7月初泰兴市植物检疫站在泰兴市泰兴镇蔬菜基地发现并采集带有斑潜蝇潜道的药芹叶片,通过对其进行形态特征和分子生物学鉴定,确认为江苏地区首次发现检疫性害虫三叶草斑潜蝇Liriomyza trifolii(Burgess)。通过黄板诱集成虫和田间寄主作物调查,对泰兴市2008-2009年发生特征及年度间、寄主间为害情况差异进行分析,并针对今后加强三叶草斑潜蝇监测与防治工作中存在的问题提出设想与建议。     

美洲斑潜蝇SS PCR检测技术研究

【背景】美洲斑潜蝇是一种严重威胁瓜果蔬菜、烟草、棉花等经济作物和花卉生产的入侵性害虫。由于潜叶蝇类害虫体型较小、生活方式隐蔽、形态相似,本文针对其难以快速准确地进行形态鉴别的问题,以美洲斑潜蝇为研究对象,以菜田常见的4种潜叶蝇类害虫为参照,采用种特异性PCR方法（species specific PCR, SS PCR）,研究其快速分子检测鉴定技术。【方法】调用GenBank中一段936 bp的美洲斑潜蝇线粒体DNA（mtDNA）细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因（CO[KG-*2]Ⅰ）的序列（GenBank登录号为EU219613）,并根据此基因片段的碱基序列设计引物1对,其扩增片段大小为294 bp。【结果】种特异性检验结果显示,该引物只对美洲斑潜蝇的CO[KG-*2]Ⅰ基因具有扩增能力,对其他种类如南美斑潜蝇、三叶斑潜蝇、葱斑潜蝇、豌豆潜叶蝇等没有扩增能力。该引物不仅对成虫具有良好的扩增效果,对蛹、幼虫以及单粒卵也具有同样的扩增效果,其最低检出阈值为1/3840头成虫。【结论与意义】SS PCR技术体系可用于美洲斑潜蝇的鉴定识别与检测监测,对阻止其进一步扩散蔓延具有重要意义。     

两种斑潜蝇及其寄生蜂空间生态位的研究

三叶斑潜蝇和美洲斑潜蝇是广东地区发生和危害比较严重的两种蔬菜潜叶蝇,通过对两种斑潜蝇及其寄生蜂空间生态位的调查研究表明,发现两种斑潜蝇的生态位宽度受寄主影响各有不同,与其寄生蜂的生态位重叠值较小。底比斯釉姬小蜂Chysocharis pentheus(Walker)、冈崎灿姬小蜂Chysonotomyia okazakii(Kamijo)和丽灿姬小蜂Chysonotomyia formosa(Westwood)生态位宽度值相近且均高于其它寄生蜂,分布较其它三种寄生蜂广,三种寄生蜂对斑潜蝇的寄生跟随作用较强;甘蓝潜蝇茧蜂Opius dimidiatus(Ashmead)、黄潜蝇釉姬小蜂Chysocharis oscinidis Ashmead和异角亨姬小蜂Hemiptarenus varicornis(Girault)的时间生态位宽度值(B’i)均小于0.1,在大田中发生的跨度范围很窄,具有季节集中性。三叶斑潜蝇和美洲斑潜蝇的种间竞争,表现在对寄主资源的占有和掠夺上具有一定的竞争性,这也是田间三叶斑潜蝇种群数量一直高于美洲斑潜蝇的主要原因之一。     

闽西北美洲斑潜蝇的发生危害与防治

美洲斑潜蝇(Liriomyza sativae Blanchard)，属双翅目潜蝇科，起源于美洲，现分布于亚洲、中南美洲、欧洲、大洋洲等许多国家。以幼虫取食叶肉组织形成虫道，是一种严重危害豆、瓜类蔬菜的危险性害虫，现已被列为国内检疫对象。我国1992年12月海南岛三亚农技中心在田间首次发现美洲班潜蝇。     

霞浦县美洲斑潜蝇发生危害及其防治

美洲斑潜蝇(LiriomyzasativaeBlanchard)是我县新近发现的检疫性害虫,可危害多种蔬菜、花卉及杂草,对农业生产威胁严重,为了控制美洲斑潜蝇的发生危害,我们从1996-1999年对该虫在霞浦县的发生和防治做了调查研究。现将结果报道如下。1　美洲斑潜蝇在我县的发生情况1.1　分布范围广在全县乡(镇)普查中已发现12个乡(镇)均有美洲斑潜蝇不同程度的发生危害,占全县乡(镇)数的85.2%,年发生面积达1601.7hm2,占蔬菜种植面积的51.2%。1.2　危害植物种类多美洲斑潜蝇在我县寄主范围很广,在调查的植物中寄主达11科、43种(品种)作物、8种杂草及花卉,主…     

美洲斑潜蝇的传播危害和防治研究

美洲斑潜蝇(Liriomyza sativae B1anchard)是一种危险性害虫。原产地阿根廷，该虫食性杂，许多瓜、菜、豆等作物及花卉、树木、杂草都会受害。而且繁殖快，防治难。已发生危害的国家和地区都遭到严重的经济损失。目前世界上已有许多国家将美洲斑潜蝇列为最危险的一类检疫性害虫，对其实施严格的封锁控制措施。我国于1994年初先在海南、广东一带发现对蔬菜、花卉造成严重为害。古田县于1994年11月初初见美洲斑潜蝇成虫(经鉴定)，1995年底以后扩散蔓延到全县各地。     

三种外来入侵斑潜蝇种间竞争研究进展

美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇、三叶斑潜蝇是危害蔬菜、花卉的世界性大害虫。不同种间相互更替或取代的现象时有发生。根据国内外相关研究报道,综述了对近年来3种斑潜蝇种间竞争的研究。对斑潜蝇种间更替和取代现象的分析显示,生殖干扰、新生物型的出现、天敌、生态位、寄主植物以及抗药性等因素可能是影响它们种间竞争的关键。以期为斑潜蝇种群演替研究及防治策略制定提供参考。     

甘肃白银地区潜叶蝇及其寄生蜂的组成和发生调查

【目的】明确严重危害甘肃省白银地区作物的潜叶蝇及天敌寄生蜂的多样性和种群组成。【方法】采用五点取样法田间调查潜叶蝇危害的蔬菜、花卉、杂草并采样,室内对潜叶蝇及其寄生蜂进行形态鉴定和分子鉴定。【结果】在2016-2020年在甘肃白银地区采集的样本中发现6种常见潜叶蝇,包括本地种豌豆彩潜蝇Chromatomyia horticola和葱斑潜蝇Liriomyza chinensis,入侵种南美斑潜蝇L. huidobrensis、三叶草斑潜蝇L. trifolii、番茄斑潜蝇L. bryoniae和美洲斑潜蝇L. sativae。其中,豌豆彩潜蝇为优势种,可危害多科寄主植物;葱斑潜蝇仅在大葱上发现危害;南美斑潜蝇在温室内的蔬菜上发生严重;三叶草斑潜蝇首次在白银市发现;番茄斑潜蝇与美洲斑潜蝇的危害相对较轻。此外,调查的潜叶蝇寄生蜂包括3科12属24种,优势种包括豌豆潜蝇姬小蜂Diglyphus isaea、芙新姬小蜂Neochrysocharis formosa、万氏潜蝇姬小蜂D. wani和西伯利亚离颚茧蜂Dacnusa sibirica。【结论】一方面白银市应加强监测和预警入侵性潜叶蝇的发生,另一方面白银市潜叶蝇的天敌寄生蜂种类丰富,对田间主要危害的潜叶蝇可能发挥着重要的自然防控作用,建议保护利用本地寄生蜂天敌。     

美洲斑潜蝇等重要潜蝇的鉴别

双翅目中的潜蝇科、花蝇科、果蝇科、实蝇科和水蝇科等类群虽然都含有潜叶种类,但只有潜蝇科绝大部分种类以潜叶为主,其潜叶种类包含不少农作物和花卉害虫。在潜蝇科的这些害虫种类中,又以豌豆彩潜蝇ＣｈｒｏｍａｔｏｍｙｉａｈｏｒｔｉｃｏｌａＧｏｕｒｅａｕ,番茄斑潜蝇Ｌｉｒｉｏｍｙｚａｂｒｙｏｎｉａｅ（Ｋａｌｔｅｎｂａｃｈ）,拉美斑潜蝇Ｌ．ｈｕｔｈｅｂｒｅｓｉｓ（Ｂｌａｎ－ｃｈａｒｄ）,美洲斑潜蝇Ｌ．ｓａｔｉｖａｅ　Ｂｌａｎｃｈａｒｄ和三叶斑潜蝇Ｌ．ｔｒｉｆｏｌｉｉ（Ｂｕｒｇｅｓｓ）最为重要,造成较大的损失,…     

两种外来斑潜蝇实验种群生物学特征比较

美洲斑潜蝇LiriomyzasativaeBlanchard和南美斑潜蝇Liriomyzahuidobrensis(Blanchard)是我国的2种重要入侵性害虫。本实验室在标准化流程下饲养了48(L.huidobrensis)-160(L.sativae)个世代的稳定实验种群。美洲斑潜蝇的实验种群需要较大的繁殖规模(>100对)才能保持群体的稳定性。2种斑潜蝇4个发育阶段的形态特征和幼虫为害特征差别明显。南美斑潜蝇的发育历期比美洲斑潜蝇长,总产卵量低于美洲斑潜蝇,但产卵历期明显长于美洲斑潜蝇。这可能是南美斑潜蝇较之容易繁殖的重要原因。该实验种群的建立为物种驯化、寄主选择性、抗性筛选及其它生理学、生态学等诸多研究打下基础。     

三叶斑潜蝇发生特点研究

2007—2009年在浙江杭州对三叶斑潜蝇的发生情况进行了调查。结果表明,在杭州地区范围内该虫的分布已很广,与其他斑潜蝇混合发生。春夏季以美洲斑潜蝇为害为主,6月是为害盛期。秋冬季为多种斑潜蝇混合为害,9月是混发盛期,期间以三叶斑潜蝇为害占多数。目前查到有13种寄主作物受三叶斑潜蝇为害。     

Host plant-related parasitism and host feeding activities of Diglyphus isaea (Hymenoptera: Eulophidae) on Liriomyza huidobrensis, Liriomyza sativae, and Liriomyza trifolii (Diptera: Agromyzidae)

Host plant species can affect the behavior and attributes of parasitoids, such as host searching, oviposition, and offspring fitness. In this study, parasitism, host feeding, and sex ratios of Diglyphus isaea (Walker) (Hymenoptera: Eulophidae) on Liriomyza huidobrensis (Blanchard), Liriomyza sativae Blanchard, and Liriomyza trifolii (Burgess) (Diptera: Agromyzidae) larvae reared on Phaseolus vulgaris L., Pisum sativum L., Solanum lycopersicum L., and Vicia faba L. were determined. In no-choice tests, L. huidobrensis had the highest rate of parasitism when reared on P. vulgaris (46%), L. sativae when reared on V. faba (59%) and P. vulgaris (59%), and L. trifolii when reared on S. lycopersicum (68%). Host feeding in no-choice tests ranged between 2% and 36% and was highest on L. trifolii reared on V. faba. Results of choice tests showed a significant interaction effect for host plant and Liriomyza species on parasitism and host feeding. Within plant mixtures, L. sativae reared on P. vulgaris had the highest rate of parasitism (31%), followed by L. trifolii on S. lycopersicum (29%) and L. huidobrensis on V. faba (28%). Host feeding was highest on L. trifolii reared on S. lycopersicum (14%) and lowest on L. huidobrensis reared on P. sativum and S. lycopersicum (1%). In some instances, plant mixtures resulted in a higher proportion of females of D. isaea than single plant species. The highest proportion of females was obtained in plant mixtures on L. huidobrensis and L. trifolii on V. faba (71 and 72%, respectively). This study suggests that planting crop mixtures can potentially lead to higher proportions of females, thus improving parasitism and host feeding, depending on Liriomyza and host plant species.     

不同地理种群美洲斑潜蝇及近缘种的rDNA-ITS1序列分析和比较

【目的】通过对美洲斑潜蝇Liriomyza sativae Blanchard 不同地理种群及近缘种间的核糖体DNA第一内转录间隔区（rDNA-ITS1）进行比较,分析美洲斑潜蝇不同地理种群间的遗传分化情况,并为美洲斑潜蝇与近缘种间提供分子鉴别标记。【方法】用PCR产物直接测序法及克隆测序法对我国美洲斑潜蝇8个地理种群的rDNA-ITS1序列进行测序,并调用GenBank中3个近缘种的rDNA-ITS序列,运用软件MEGA3.1对美洲斑潜蝇不同地理种群及近缘种间的rDNA-ITS1序列进行分析。【结果】美洲斑潜蝇8个地理种群间的分化程度较低,只有8个变异位点,遗传距离都在0.02以下,但4个近缘种间的碱基差异显著,遗传距离为0.149～0.390,有126个变异位点,12个美洲斑潜蝇特异性识别位点。【结论】虽然基于rDNA-ITS1序列所显示的美洲斑潜蝇各地理种群之间的遗传分化很小,但是其分化趋势与地理分布基本相吻合;得到的12个特异性识别位点不仅可以作为美洲斑潜蝇与其近缘种间鉴别的分子标记,而且可为今后设计鉴别性PCR引物提供重要的参考依据。     

福州郊区美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇寄主植物初步名录

本记录了福州郊区美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇寄主植物的初步名录。发现该地区美洲斑潜蝇可取食20科85种植物,南美斑潜蝇可取食20科73种。最后讨论了这两种斑潜蝇的主要寄主作物和杂草,并提出套种和清除田间杂草的农防措施;斑潜蝇的适应性很强,寄主范围正逐步扩大,应密切关注其动态。     

三叶草斑潜蝇和美洲斑潜蝇的分子鉴定

以三叶草斑潜蝇Liriomyzatrifolii(Burgess)与美洲斑潜蝇LiriomyzasativaeBlanchand为材料,通过特异引物18SP1和5.8SP2,分别扩增出它们的rDNA非编码区ITS1的片段,根据序列分析和比较结果,重新设计出2条新的特异性引物Fly3和Flyus,并筛选到2个特异性内切酶,通过PCR和PCR产物的酶切分析,即可将这2种近缘昆虫区分开来。     

Species displacements are common to two invasive species of leafminer fly in China, Japan, and the United States

Under field conditions, species displacements have occurred in different directions between the same invasive species of leafminers (Diptera: Agromyzidae). Liriomyza sativae (Blanchard) was displaced by L. trifolii (Burgess) in the western United States, with evidence suggesting that lower insecticide susceptibility of L. trifolii is a factor. However, in Japan, the opposite has occurred, as L. trifolii was recently displaced by L. sativae. This displacement is probably because of the higher fecundity of L. sativae and differential effects of parasitoids on the two leafminer species. Here, we carried out long-term surveys of these same two invasive leafminer species during January through March in 1999, 2007, and 2011, as well as June through July in 2011, in eight locations (Sanya, Dongfang, Haikou, Leidong, Lingshui, Wuzhisan, Qionghai, and Danzhou) across Hainan Island of southern China. Our results indicate that, between 2007 and 2011, L. trifolii rapidly replaced L. sativae as the predominant leafminer of vegetables on Hainan Island, similar to the situation in the western United States. Further surveys of growers revealed that avermectins and cyromazine are the two most frequently used insecticides against leafminers on Hainan Island. Dose-mortality tests showed that L. trifolii populations from Hainan Island are less susceptible to avermectins and cyromazine compared with L. sativae populations. This lower insecticide susceptibility of L. trifolii may be associated with the displacement of L. sativae by L. trifolii, although additional ecological or environmental factors cannot be ruled out.