农杆菌介导的番茄遗传转化的研究进展

番茄(Lycopersicon esculentum)传转化体系对其功能基因的研究和基因工程育种有重要影响,对农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的番茄遗传转化的研究进展进行了综述,主要包括影响番茄遗传转化效率的几个因素,如番茄的基因型、外植体状态、预培养和侵染过程、分化培养基中的激素和抗生...     

苹果遗传转化的研究进展

苹果的遗传转化技术通过分子手段改良苹果,有助于缩短其育种周期。最近十年,在该领域的研究取得很大进展,涉及到一些重要的苹果基因型及有用的外源基因。迄今,苹果的遗传转化主要采用农杆菌介导法,侵染与转化材料的再生是影响其转化效率的关键过程,了解其影响因素,寻找有利因素以提高转化效率是目前苹果遗传转化研究的重点。     

基因枪转化技术及其在禾谷类作物遗传转化中的应用

基因枪转化法广泛用于禾谷类作物的遗传转化研究,是目前禾谷类作物遗传转化的有效方法。简要介绍了基困枪转化法的产生与发展、转化的特点以及影响转化频率的主要因素;系统地概述了基因枪法在禾谷类作物遗传转化的应用。     

玉米转基因方法研究进展

玉米是重要的粮食作物,玉米的遗传转化取得了重大成就,而玉米的遗传转化又是玉米遗传改良的有效手段。总结了玉米转化过程中受体的选择标准,比较了各种转化方式,如：农杆菌介导法、基因枪法、花粉管通道法,并探讨了如何有效地选择转化后的阳性事件。     

负压处理对农杆菌介导小麦成熟胚转化效率的影响

目的:提高小麦成熟胚遗传转化效率,为建立快速高效的小麦成熟胚遗传转化体系奠定基础.方法:以普通小麦HB341、SN2618、TS021和栽培二粒小麦成熟种子为试材,采用整粒切胚诱愈的方法,通过农杆菌GV3101/pBI121::gus介导,研究负压处理对小麦成熟胚遗传转化的影响.结果:接种侵染过程中的负压处理,对小麦成熟胚愈伤组织的诱导没有显著影响,但对小麦成熟胚的遗传转化却有显著性影响.负压处理10、20、30次,转化率分别较对照组提高了9.37倍、10.90倍和10.03倍,最高转化率可达12.50%.同时负压处理能够提高小麦成熟胚转化效率,具有普遍意义.结论:该研究为快速高效小麦成熟胚转化体系的建立提供了依据.     

水稻遗传转化研究进展

水稻是重要的粮食作物之一,其遗传转化取得了巨大进展.通过对水稻遗传转化的主要方法,用于水稻转化的各种外植体,影响水稻遗传转化和植株分化的各种因素的介绍,概述了水稻遗传转化技术在水稻育种方面的应用.     

根癌农杆菌介导的黑曲霉遗传转化体系的建立及优化

基于根癌农杆菌介导的遗传转化方法的独特优点,研究黑曲霉转化过程中各主要影响因素,建立高效的黑曲霉遗传转化方法。构建双元载体pBI-hph,通过电转导入农杆菌LBA4404中,以黑曲霉TCCC41056为受体菌株,利用潮霉素B基因作为筛选标记,对影响转化效率的孢子悬液的新鲜程度及浓度、农杆菌菌液浓度、共培养时间、共培养温度这五个条件进行分析,建立根癌农杆菌介导的黑曲霉遗传转化体系。实验结果表明,上述条件对黑曲霉的转化效率有较大的影响,通过优化,黑曲霉转化效率可达83个转化子/10⁷分生孢子;整合到黑曲霉基因组的外源基因可以稳定遗传,在转接10代后遗传性能仍保持稳定,并在众多转化子中筛选得到了糖化酶活力提高18%的黑曲霉突变株。根癌农杆菌介导的黑曲霉转化体系的建立,为进一步研究黑曲霉的功能基因以及开发黑曲霉表达系统提供了有力的手段。     

大豆转基因的研究进展

近年来利用基因工程技术,大豆的遗传转化取得了较大的进展。该文介绍了几种主要的大豆遗传转化系统的优点和缺点。探讨了影响农杆菌介导大豆遗传转化的因素。分析了大豆遗传转化中存在的一些问题及其解决办法,评价了转基因大豆的生物安全性,展望了未来大豆遗传转化的发展前景。     

水稻遗传转化技术

就水稻遗传转化的方法、提高转化细胞再生频率的因素、转化过程中使用的选择标记、报告基因、启动子和目的基因以及未来水稻遗传转化研究的前景进行了概述和展望。     

向日葵遗传转化研究进展

综述了PEG、基因枪和农杆菌介导的转化方法应用于向日葵遗传转化研究所取得的进展,并对影响向日葵遗传转化效率的因素和研究前景进行了探讨。     

An Efficient Agrobacterium-Mediated Genetic Transformation Using Embryonic Axis in Cotton (Gossypium hirsutum L.)

Russian Journal of Plant Physiology - Agrobacterium-mediated genetic transformation approach allows for introducing novel genes in cotton (Gossypium hirsutum L.). Development of efficient...     

Studies on Highly Efficient Planting of Transgenic Cotton

Foreign insecticidal genes were transferred into 4 upland cotton ( Gossypium hirsutum L. ) cultivars by Agrobacterium-mediated transformation. It was found that planting style has a critical influence on the survival rate of the transgenic plantlets. Direct transplanting, culturing in liquid medium or vermiculite before transplanting were not proper for planting transgenic plantlets. The survival rate was quite low and hardening time was rather long. Graft could greatly enhance the survival rate and efficiently reduced the hardening time, thus paves the way for cotton improvements through genetic engineering and other biotechnology.     

转基因棉花高效定植方法的研究

通过根癌土壤杆菌介导法将外源抗虫基因导入4个陆地棉(GossypiumhirsutumL.)栽培品种。对转基因再生植株的移栽和嫁接研究发现,不同的定植方法对成活率和植株生长状态有显著的影响。直接移栽法、蛭石炼苗法和水培法的定植成活率均较低,缓苗时间也相对较长。而嫁接能够极大地提高再生植株的定植成活率并有效地缩短了缓苗时间,从而克服了棉花再生植株不易定植成活的困难,为基因工程乃至其他生物技术能够顺利地应用于棉花遗传改良奠定了基础。     

棉花遗传多样性SCoT和SRAP标记的研究及比较分析

利用SCoT和SRAP两种分子标记技术对30份彩色棉与白色棉种质资源,进行遗传多样性研究。用29对SRAP引物组合和26个SCoT引物分别对供试棉花的基因组DNA进行扩增。SCoT引物共扩增出163条带,多态性比率为61.96%,遗传相似系数GS值变化范围为0.5405～0.9972。SRAP引物组合共扩增条带1067条,多态性比率仅为14.1%,遗传相似系数GS值变化范围为0.5415～0.9109。两种标记系统得到了相似但并不完全相同的聚类图,2种标记方法间存在显著相关性(r=0.5518,P<0.05)。结果表明,SRAP与SCoT标记均适用于棉花种质的遗传多样性分析,且SCoT的标记指数MI高于SRAP标记,为SCoT这种新兴的标记技术在棉花育种中的应用提供了重要的依据。     

陆地棉体细胞胚胎发生过程的cDNA-AFLP分析

以陆地棉标准系TM-1未经诱导的下胚轴、下胚轴经诱导40 d的愈伤组织和胚性愈伤组织为材料,利用cDNA-AFLP差异显示技术对陆地棉体细胞胚胎发生过程中的cDNA差异表达进行了初步分析.经反转录获得3个不同时期的cDNA,利用180对引物组合进行AFLP分析,结果表明,在总共显示的约3 000条谱带中,其中38条为胚性愈伤组织中所特有的差异谱带.对这些差异片段进行克隆、序列测定和同源性分析,其中12个差异片段同已知陆地棉、雷蒙德氏棉和亚洲棉不同发育时期器官的EST序列高度同源,其相似性达到90%以上.结果说明,棉属在形态建成早期（胚胎发育阶段）,其特定器官的相关基因已经表达.     

Nucleolar size at early stages of cotton fiber development in relation to final fiber dimension

Changes in nucleolar size and nucleolar vacuolation at early stages of fiber development and final fiber dimensions were determined for cotton of different species: Gossypium hirsutum L. cv. B49, Gossypium barbadense L. cv. Menoufi and Gossypium arboreum L. cv. Virnar. Size of the nucleolus in combination with its vacuolation at an early stage of development was found to be clearly associated with the final result of fiber development.     

Genetic analysis of the duration of the vegetative period in cotton Gossypium hirsutum L. with background of various nitrogen level in soil

Using Hayman's model of genetic analysis of the F1 hybrids from crosses between early- and late-ripening forms of cotton Gossypium hirsutum L., we examined inheritance of the duration of vegetative period at various contents of nitrogen in soil. Two variants of hybrid plants were studied. With the natural content of soil nitrogen, incomplete directionally dominance of earliness over late ripening with prevalence of additive gene effect of nonallelic interactions was observed. The genetic formulas of this trait proved to change with varying nitrogen nutrition.     

基于陆地棉茎尖转录组序列的genic-SSR标记的开发与评价

利用软件MISA和SSR Locator 对陆地棉（Gossypium hirsutum L.）Coker312茎尖转录组测序得到的73515条Unigene序列进行分析,查找到4507个SSR位点,分布于4039条转录本序列中,SSR出现频率为5.5%,非编码区的SSR位点要显著高于编码区（2853/1654）。SSR重复基元中,三核苷酸重复基元占主导地位（51.03%）,且AAG/CTT （20.08%）类型最多;其次是二核苷酸重复基元（28.76%）,主要为AG/CT（55.47%）。利用引物批量设计软件共开发1569对SSR引物,在陆地棉TM-1、海岛棉3-79 (G. barbadense L.)、阿非利加棉(G. herbaceum L.)、雷蒙德氏棉(G. raimondii Ulbrich.)四个棉种中进行初步评价,其中1117对引物能在四个棉种间扩增出稳定的条带,扩增率为71.2%。选择650对能稳定扩增出条带的引物,在涉及5个棉种（增加了亚洲棉（G. arboreum L.））的13份材料中进一步筛选,83对引物能在13份材料中扩增出特异性条带, PIC变幅在0.121～0.648之间,平均值为0.422,其中80对引物能在7份陆地棉材料中扩增出特异性条带,平均PIC值为0.336;挑选5对在本实验室作图亲本鲁棉研22和鲁原343间有明显多态的引物进行连锁分析,其中4对成功连锁到本实验室构建的遗传图谱上。本研究丰富了棉属genic-SSR的数量,为棉属遗传作图、性状关联分析提供了更多引物选择。     

一种强启动子的分离与功能

以棉花曲叶病毒（ＣＬＣｕＶ）侵染的番茄叶片组织总ＤＮＡ为模板,通过ＰＣＲ反应扩增ＣＬＣｕＶ双向启动子片段并插入克隆载体。序列分析和同源性比较表明,克隆的启动子长４３６ｂｐ,与目前发现的４类ＣＬＣｕＶ分离物的启动子序列的同源性最高为９９．３２％。将启动子片段分别以不同方向与ｇｕｓ报告基因和ｎｏｓ终止子融合,构建了瞬时表达载体。通过基因枪法将质粒载体导入烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）     

The Inheritance of Gossypol Level in Gossypium II: Inheritance of Seed Gossypol in Two Strains of Cultivated GOSSYPIUM BARBADENSE L

Two strains of cultivated Gossypium barbadense L., Sea Island AS-2 and Pima S-4, were used to study the effects of alleles at two loci on the production and/or storage of gossypol in mature embryos. The normal alleles, Gl(2) and Gl(3), are "native" to G. barbadense, whereas the mutant alleles, gl(2) and gl(3), were introduced from Gossypium hirsutum L. through backcrossing. Each strain was grown in three replications per trial, and one, Sea Island AS-2, was grown in three environments. Each experiment consisted of all possible crosses, including reciprocals, of the four true-breeding genotypes, plus parents. Additive effects accounted for more than 90% of the total genetic variance for seed gossypol level in all trials. Epistatic effects, though small, were frequently significant. In G. barbadense Gl(2) and Gl(3) were associated with the production of similar amounts of gossypol, whereas previous trials with cultivated varieties of G. hirsutum showed that Gl(2) was more than twice as expressive as Gl(3). The greater average productivity of seed gossypol in cultivated G. barbadense, as compared with G. hirsutum, was attributed to greater activity at the Gl(3) locus in the former species.