水杨酸间接酶联免疫法的建立

水杨酸（salicrlicacid，SA）在单子叶和双子叶植物中普遍存在。它能诱导若干天南星科植物佛焰花序产热，抑制乙烯的生物合成。尤其重要的是，SA是诱导烟草、黄瓜等植物产生整株获得性抗性（systemicacquiredrest。tance，SAR）的内源信号物质[5，6]。因此，SA在植物体内的作用越来越引起人们的重视。目前对SA的定量检测大多采用HPLC等理化方法［‘，’，’，“j，这些方法对植物材料的需要量较大，且需冗长的纯化处理。虽然Bennett等“’早在1987年即用个氨基水杨酸（4－－aminosalicylicacid，4－－ASA）与载体蛋白偶联制备了水杨…     

奈氏试剂测定脲酶活性方法的改进

TheImprovingonMethodforMeasuringUreaseActiVityFUHul－Hua,LIXiao－Fang,TIANTing－Liang（Denytl）wnlofBbo,CedndCboA．ffe＊＊＊＊＊＊－［’un,sdy,if,J－to－－rr430070）脲酶（urease）活性的测定方法有多种,主要有电化法［‘””‘、放化法和分光光度法。分光光度法测定服酶活性的具体方法又有多种,如豚酶分解豚产生NH／,NHt与次氯酸钠和苯酚钠溶液反应生成蓝色靛酚,再进行比色测定［’j等。Kaltwasser等［’j采用与谷氨酸脱氢酶（GIDH）相偶联的反应来进行测定,即于340urn处测定NADH的光密度减少量。…     

ATP对单个肺动脉内皮细胞胞浆游离钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和双波长显微荧光分光光度计测定原代培养的单个猪肺动脉内皮细胞胞浆游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）为１０７±１４ｎｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝１０）;三磷酸腺苷使［Ｃａ２＋］ｉ呈双相增加：初相峰型,其后的第二相为平台期。峰相系内钙释放引起,平台期源于外钙内流。     

菠菜中不同等电点的乙醇酸氧化酶全酶分子量的测定

乙醇酸氧化酶（EC1．1．3．15,简称GO）被认为是一个由相同亚基和黄素腺瞟吟单核着酸（FMN）组成的寡聚酶“－‘’,它在不同的生理状态下具有不同的聚合态’‘,’］。所以,GO全酶Mr差异很大,甚至有时不同或同一植物有多种并存：如豌豆为100000”’;菠菜为270000、140000和70000［”‘j;黄瓜为180000和700000［‘j;南瓜为280000～320000［sj;／J’麦、大麦、菠菜、豌豆、烟草等C3植物为160000～180000;而C4植物玉米、甘蔗为290000～310000‘’‘。但GO由相同亚基所组成的观点却难于解释其等电点（PI）也存在较大的差异：如…     

植物生理学实验中朗伯-比尔定律及其推导公式的探讨

在植物生理学实验教学中,对植物某些生物分子如蛋白质、核酸、糖类、光合色素,以及酶活性测定时,常常用到分光光度计,分光光度计定量测定物质的原理是朗伯-比尔定律（Lambert—Beerlaw）。朗伯-比尔定律包括朗伯定律和比尔定律两部分内容,朗伯定律是指有色溶液的光密度与有色溶液的厚度（L）成正比,     

基于SYBR Green I的双链DNA定量方法

摘要 基于SYBR Green I荧光染料与双链DNA（dsDNA）结合产生荧光的原理,建立一种高精度、高通量的双链DNA 定量方法。将梯度稀释后的基因组DNA及已知浓度的?DNA与等体积的SYBR Green I（4×）充分混合后,利用荧光定量PCR仪采集荧光信号,以ROX（1×）作为校正染料进行定量分析;同时利用紫外分光光度计对样品进行平行测定,比较该方法与紫外分光光度法的检测限与准确度。紫外分光光度法的检测限为2 ng/?l,而SYBR Green I荧光定量法的检测限可达到0.015 ng/?l,并且在0.015~2 ng/?l范围内,SYBR Green I荧光强度与?DNA浓度呈线性关系（R2=0.9999）,比紫外分光光度法灵敏100倍以上,并可准确定量低纯度的DNA样品。此方法具有重复性好、高通量的特点,仅需少量的生物样本即可满足定量要求,为分子生物学研究及临床检验等多个领域提供了一种可靠的dsDNA定量方法。     

一种基于荧光强度分析的高通量定量检测细胞凋亡方法

根据正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞膜对核酸荧光染料的不同选择通透性,用4μmol/L YO-PRO-1（YP）和4μg/ml 碘化丙啶（Propidium iodide, PI）染色96孔板中的细胞样品。分别在485/538 (Ex/Em, nm) 和530/590 (Ex/Em, nm) 的检测波长下借助荧光分光光度计检测细胞样品孔的YP和PI荧光强度。将YP和PI荧光强度值与用荧光显微镜对同一细胞样品细胞凋亡和坏死的定量分析结果相对应,通过对YP荧光强度值与凋亡细胞数的直线回归分析 (r = 0.999,P<0.01),得到依据YP荧光强度值求得凋亡细胞数的直线相关方程。该方法可检测出样品中少至180个的凋亡细胞,具有灵敏度高和快速高效的特点。     

地衣对重金属的累积效应用于大气监测的初步研究

以采自不同污染区的3个种共18个地衣样本作为试验材料,利用原子吸收分光光度计,测定样品中铅、镉的含量,评估环境质量。结果表明:铅是其中两个样点中的重要沉积物,在各地衣样品中有不同程度的积累,离子积累的浓度与污染源的相对位置具有直接的关系。根据累积浓度不同,可以推测当地的空气质量。     

重组生物制品十二烷基硫酸钠含量检测方法的建立

目的：用亚甲基蓝-分光光度法检测重组生物制品中十二烷基硫酸钠（SDS）的含量。方法：将送检样品按比例稀释后与亚甲基蓝混合,加入氯仿进行萃取,然后用紫外分光光度计测定各样品的吸光度D值。结果：SDS浓度为0～0.01mg/mL时,SDS与D651nm值呈线性关系。结论：在一定的SDS浓度范围内可用亚甲基蓝-分光光度法检测重组生物制品中SDS的含量。     

利用荧光分光光度计定量分析GFP基因的表达水平

以3种表达水分高低不一的绿色组织特异性启动子驱动绿色光蛋白（green fluorescent protein,GFP）基因转化烟草植株,设计了一种利用荧光分光光度计对组织中GFP的表达水平进行定量分析的新方法,利用该方法对获得的102株转基因烟草中不同部位叶片中的GFP表达水平进行了定量分析.其结果与荧光显微镜观察结果高度一致,从而证实利用这种新方法对GFP基因进行定量分析是可行的。     

离体植株器官连续自动称重同步测定气孔和角质层蒸腾

植物的水分基本是通过器官表皮气孔和角质层两种通道散失到大气中去的,尤以气孔蒸腾为主,而且与光合作用有着十分密切的关系。气孔蒸腾（Tr）可用多种方法测定。最常用的为气孔计法,但往往限于叶片,较难应用于其它器官或部位。角质层蒸腾则常用离体叶片称重测定其失水速率（＊＊U。二者同步联合测定的报道较少（棉花有Quisenberry等［‘j,小麦有Wang和Clarke［‘j及马瑞昆等［‘j）,叶片以外的其它器官测定则更未见报道。本文以小麦为材料,提出用离体植株器官连续自动称重方法同步联合测定气孔和角质层蒸腾的技术,同时对取样、数…     

人参硝酸还原酶活力与氮肥效应的关系

针对氮肥不能使人参增产甚至减产的结果,1991年6月21日在公主岭六年生参床上开沟追施（NH4）。SO4210g／m2,以后分期测定硝酸还原酶的活性（华东师范大学．植物生理实验指导．北京：教育出版社,1980．73）、非蛋白态氮［硝酸盐用紫外分光光度法、亚硝酸盐用萘基盐酸二氨基乙烯（萘己二胺）法〕和NH4．N及酸胺一N（波钦诺克,荆家海泽．植物生物化学分析法．北京：科学出版社,1981．107）。获得以下结果：NR活性单位：umolNO,s－‘FWh－‘。同时测定的玉米和向日葵NR活性,07－08分别为队伍,0．24;08－06分别为585,3．30。1·…     

受照狗血清-菲啶溴红络合物的荧光变化

自六十年代后期Lepecq提出利用荧光探针菲啶溴红(Ethidium Bromide)测定微量核酸的荧光方法以来,已广泛应用在生物组织细胞样品中核酸测定上。1972年Richard C.K.用菲啶溴红染料测定了正常人血浆中核酸的含量。1979年我们曾用此法测定组织中微量的     

利用荧光探针直接测定线粒体活性氧的形成

目的与方法：根据荧光探针－还原型二氯荧光素（2‘,7‘-dichlorodihydrofluorescin,DCFH)可与活性氧（reactive oxygen species,ROS)反应生成荧光物一氧化型二氯荧光素（2‘,7‘-dichlorofluorecin,DCF)的原理,设计了利用荧光分光光度计直接定量检测线粒体活性氧生成并可观察在各种实验条件下线粒体活性氧产生动态变化的方法。结果与结论：线粒体在态4呼吸状态下,DCF的荧光强度随时间呈线性增加,表明活性氧以恒定速率产生。将荧光强度随时间变化的数据点拟合,线性回归直线斜率与活性氧产生的速率呈正比,测定中加入叠氮钠和丙二酸可分别使线粒体活性氧产生增加和减少。DCF荧光强度增加速率与线粒体浓度在一定范围内呈线性关系。复管实验表明重复性良好。     

在大鼠发育过程中β1,4半乳糖基转移酶的组织分布及其变化的研究

用ＨＰＬＣ纯化了荧光标记的底物用β－１,４－半乳糖基转移酶的荧光标记底物的ＨＰＬＣ测定方法,测定了在发育过程中大鼠肝,肾,脑中的酶活性的变化,结果表明,（１）在正常成年大鼠中,各组织酶活性具有组织特异性,（２）不同的发育期,其酶活性不同,胎地最高,以后就渐渐下降,各组织酶活力变化幅度是不一致的,这些变化的生理意义有待于进一步研究。     

荧光分光光度法检测交联透明质酸中交联剂残留量

目的建立一种1,4丁二醇二缩水甘油醚（1,4-Butanediol diglycidyl ether,BDDE）透明质酸中交联剂BDDE的残留量的检测方法。方法采用荧光分光光度法测定BDDE的残留量。BDDE与烟碱反应在激发光380nm作用下产生荧光,其荧光强度与BDDE的量成正比,用荧光分光光度计在波长为435nm处检测其强度。结果BDDE在0．25ug／g～8ug／g线性关系良好,线性相关系数r=0．9999,平均回收率为101．5％（RSD为0．9％）。结论测量结果准确,方法简单可靠,可用于交联透明质酸水凝胶产品质量控制。     

关于用硫酸钡比浊法测定叶片中硫化物的探讨

采用硫酸钡比浊法法测定叶片中的硫化物。植物样品经强酸的消解和氧化产生硫酸根离子,加起浊剂(BaCl2)硫酸根与钡离子生成微细的硫酸钡胶体(BaSO4)微粒悬浮于溶液中,然后用分光光度计测定其浊度。该法是经典方法,简单实用。     

日本血吸虫病鼠肝微量元素的测定

用原子吸收分光光度计测定日本血吸虫病鼠肝组织的微量元素。结果表明：微量元素Ｚｎ、Ｆｅ含量比正常对照组明显增多（Ｐ＜０．０１）。而Ｃｕ在实验组和对照组之间无差别。（１９９２年７月－１９９２年１０月）。     

一种测定蛹虫草中虫草酸含量的酶标仪微量反应方法

研究和建立一种基于酶标仪-96孔板高通量测定虫草酸含量的检测方法,并对该方法进行性能评价。以酶标仪为检测仪器,在96孔板内按照设定反应条件微量加入样品和试剂进行显色反应,利用酶标仪测定吸光度值并计算虫草酸含量。通过检测精密度、重复性、回收率,并与分光光度计法进行比较,综合评价该方法的准确度、精确度。结果表明,测定数据具有较高的精密度（样品CM1的RSD值0.829%;样品CM2的RSD值1.772%)、重复性（标准样品B40的RSD值2.061%;样品CM2 的RSD值1.599%)、回收率（平均回收率99.24%,RSD值3.666%）,测定结果与分光光度法检测结果无显著差异(P>0.05)。结果表明,酶标仪微量法测定准确、重复性好,并可大大减少样品和试剂的用量,该方法方便、快捷、高效,可以替代分光光度法用于虫草酸含量的测定。     

SB202190调节蚕豆保卫细胞中SA诱导H2O2产生

运用激光共聚焦扫描技术,在p38MAP激酶专一抑制剂SB202190处理下,探索植物促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAP激酶）介导蚕豆（Vicia faba）保卫细胞中H2O2为代表的活性氧（reactive oxygen species,ROS）信号机制,发现：p38MAP激酶专一抑制剂SB202190处理没有导致蚕豆保卫细胞中H2O2和Ca^2＋探针荧光强度增强,与水杨酸（salicylic acid,SA）或脱落酸（abscisic acid,ABA）迅速加强2种探针荧光强度形成鲜明对比;而该抑制剂分别与SA和ABA共同处理,前者H2O2探针荧光强度没有增加,而后者荧光强度仍然能够增加;而进一步使用Ca^2＋螯合剂BAPTA和SB202190＋SA共同处理,H2O2探针荧光强度没有增加。这些结果初步表明：无论胞质Ca^2＋浓度高低,SB202190调节蚕豆保卫细胞中SA诱导H2O2产生,但是不调节植物逆境信使分子ABA此类的反应。因此推测,植物细胞中可能有类似动物和酵母细胞中的p38MAP激酶类,并可能专一调节植物保卫细胞中H2O2信号通路。据我们所知,这是首次报道SB202190和SA共同调节植物保卫细胞中ROS信号过程。