用染料修饰吐温80液—固萃取体系从猪心肌匀浆液中分离纯化心肌黄酶

用三嗪类染料 Ｃｉｂａｃｒｏｎ Ｂｌｕｅ Ｆ３Ｇ－Ａ修饰的吐温８０,与吐温８０、硫酸被构成液－固萃取体系,从猪心肌匀浆液中分离纯化心肌黄酶。研究了吐温８０染料修饰物在吐温８０相中所占的比例、分相盐浓度、溶液的酸度、匀浆液的加入量等对匀浆液中酶及杂蛋白在两相中分配的影响。在室温条件下,酶选择性地进入吐温８０固相,杂蛋白主要留在盐水相。匀浆液中心肌黄酶的酶活力平均收得率为８１．４％,一步纯化倍数为６．６。降低盐浓度,提高盐水相酸度,能使酶从吐温８０固相反萃到盐水相。     

固相酶制备与应用的一些研究

在天然情况下,有的酶分泌在细胞外;有的则存在于细胞内。细胞内的酶,有的以溶于水的形式存在于细胞浆内;也有一些酶存在于细胞的细微结构上,在正常情况下不溶于水。不溶于水的酶经过一定处理,也能成为水可溶的酶;水可溶酶经过处理也可变为水不可溶的酶。经过这种处理的酶称为固相酶。近年来,固相酶的研究有了迅速的发展。     

固相酶生产核苷酸的扩大试验获得良好结果

由广东江门甘蔗化工厂、上海啤酒厂和中国科学院上海生物化学研究所组成的固相5′-磷酸二酯酶协作组,于1976年12月在江门甘化厂酿造车间核苷酸工段进行了固相酶降解核糖核酸的扩大中间试验。在几年来的小试验基础上,终于在一个月内获得良好的结果,显示了利用固相酶改革核苷酸生产工艺的优越性,为固相酶在工业生产中的应用展示了美好前景。     

以角叉胶固相化假单胞菌连续生产L-丙氨酸

本研究用固相化假单胞菌从L天冬氨酸连续生产L-丙氨酸。假单胞菌细胞用角叉胶凝胶固相化。固相化细胞的L-天冬氨酸β-脱羧酶的活性通过将固相化细胞置于含有0.1mM吡哆醛-5-磷酸盐(PLP)的1ML-天冬铵盐(pH5.5)溶液里在37℃下恒温培养20多小时以得到提高。固相细胞的酶活性是原细胞活性的59%。酶反应的pH范围固相细胞比游离细胞宽。当使用含有0.1mMPLP底物溶液反复使用固相化细胞仍可保持酶活。当含有0.1mMPLP2ML-天冬氨酸铵(pH6.2)溶液向上通过固相化细胞柱在37℃下保持8小时后L天冬氨酸完全转变为L-丙氨酸。用戊二醛处理固相化细胞结果酶活稍有损失可是显著地增加操作的稳定性。通过戊二醛处理的固相化细胞酶活半衰期是46天。     

酶联免疫吸附测定中固相化方法概述

酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是一项应用广泛的固相酶免疫测定技术。抗原或抗体等反应物的固相化在ELISA检测系统中有着十分重要的作用,可直接影响检测结果。应用稳定性好、固相化物质变性率低及固定效率高的ELISA操作体系,可显著提高检测分析的灵敏性、特异性和可靠性。现就ELISA技术中不同固相介质和固相化方法作一概述。     

氢酶在生物工程上的应用

本文概述了氢酶的稳定和固相化方面的进展,对氢酶在水的脱氚和重水的生产、制备性有机合成、环境保护、太阳能转换和生物固氮上的应用进行了综述,且对有关问题进行了讨论,指出了氢酶应用研究的意义和有关的研究途径。     

防止336菌株老化断裂小试总结

336菌株是产葡萄糖异构酶的优良菌种。但在液体培养过程中,常常出现菌体断裂现象,造成胞内酶的大量流失和使包埋菌体法制的固相酶活力迅速跌落。为提高异构酶的收率及适应固相酶科研工作的需要,从1978年10月开始了进行防止菌体断裂的研究。经过八个月的小型试验,我们进行了二十批,四百五十余瓶的摇瓶发酵试验。达到了总酶活稳定在100单位/毫升以上及培养三天菌体不断裂的原定计划指标。     

Hin P_1I底物片段d-ATGCGCAT的固相磷酸三酯法合成

本文报道用固相磷酸三酯法化学合成了限制性内切酶HinP_1Ⅰ的底物片段d-ATGCGCAT。固相载体采用β-丙氨酰基聚苯乙烯树脂(2%交联度)。合成的产物经顺序分析得到证明,同时能被限制性内切酶HinP_1Ⅰ识别并在专一位置上水解。     

生物固氮在我国农业生产中的研究现状及发展对策

简述了生物固氦在我国农业生产中3个热点的研究现状:提高现有固氦生物的固氦能力、化学模拟固氦酶、固氦微生物的生物工程,同时提出了生物固氦在令后生态农业中的发展对策。     

克隆同源性高的基因的技术

参加神奈川科学技术研究所(KAST)项目的顺天堂大学医学部第2病理学助手鹤井博理等与KAST第五研究室主任加藤诚志合作开发了高效克隆基因的方法,即使用固相化DNA探针,搜集同源性高的cDNA,并高效地克隆了其基因。利用这种方法,大幅度提高了从克隆的动物基因的碱基序列中克隆人基因时和钓出家族基因的工作效率。这项成果在福冈市召开的日本分子生物学会上发表。鹤井等首先使用固相化DNA探针开发从液相分离核酸片段,以此为酶,使其双链化,整合到载体上     

固相萃取材料在蛋白质组学研究中的应用进展

随着蛋白质组学的发展,蛋白质的分离将发挥越来越重要的作用。固相萃取是近年发展起来的一种样品预处理技术,在对某些目标蛋白质的分离纯化中作用明显。与传统的液液萃取法相比,固相萃取可以提高分析物的回收率,操作简便、省时省力。萃取材料的选择对固相萃取效果有着极为重要的影响,硅胶和磁性纳米材料是常用的萃取材料。石墨烯的出现为萃取技术的发展提供了新思路。我们简要综述了近年来固相萃取材料在蛋白质组学研究中的应用进展。     

基因工程技术在降解农药中的应用

综述了基因重组、原生质体融合、外源基因、降解酶和固相反应器等基因工程技术在降解农药中的研究及应用进展,提出了几种高效降解农药的基因工程菌的构建策略和构建手段。     

酶在非水相介质中的生物催化

本文主要综述了酶在非水相介质中实现生物催化反应的各种反应体系如液－液两相、反胶团、液－固两相、气相等的特点,性质及应用。     

抗体固定化方法研究进展

在免疫分析和生物芯片中,抗原-抗体特异性结合被广泛应用,其中抗体的固定化是研发高效诊断和分离工具的关键环节。生物分子工程、材料化学与交联剂化学的进步极大地促进了抗体固定化技术的发展。 抗体可以通过物理吸附、共价偶联和亲和相互作用固定到不同类型的固相表面。 抗体固定化的目标是以一种正确的空间取向将抗体固定到固相表面,在完全保留抗体构象和活性的同时最大化抗原的结合能力,这对固相化抗体的分析性能至关重要。 对固定抗体到固相载体表面的各种最新方法进行了阐述,包括物理吸附法,通过羧基、氨基、巯基、糖基和点击化学的共价结合法以及基于生物亲和作用的固定法,并对固定化抗体的表征方法进行了归纳,最后对抗体固定化方法的发展方向进行了展望。     

酶联免疫吸附测定技术在食品卫生检验中的应用

酶联免疫吸附技术是一种酶联免疫技术,能够对包裹在固相板孔中的待测抗体或者抗原进行监测。该方法操作简单,针对性强,快速有效,因此常被用于食品的安全检测当中。本文就酶联免疫吸附测定技术在食品卫生检验中的应用进行了综述,希望对酶联免疫吸附测定技术的进一步发展和应用起到一定的参考作用。     

“生物技术实践”教学研讨(2) “酶的应用”的教学组织

“酶的应用”包括“研究酶的存在和简单制作方法”、“尝试利用酶活力测定的一般原理和方法”、“探讨酶在食品制造中的应用”、“探讨酶在洗涤等方面的应用”、“尝试制备和应用固相化酶”等5项具体内容标准。下面谈谈对“酶的应用”专题的教学组织。     

固相3′-核糖核酸酶的制备及应用

1.对β-硫酸酯乙砜基苯胺通过醚化连接于葡聚糖凝胶G200,制成固相化的载体ABSE-葡聚糖凝胶。2.将红酵母3′-RNase 共价结合于重氮化的ABSE-葡聚糖凝胶G200制成固相3′-RNase。3.对于影响偶联及固相酶活力的一些因素进行了观察。4.固相3′-RNase 已应用于工业生产3′-单核苷酸,实际效率提高十余倍,产品质量符合要求。     

光敏蛋白菌紫质固相支撑人工膜系统的界面电荷

以固相支撑的菌紫质人工膜系统,在分子电子器件研究中占有重要地位。本文对其两种类型,Ｎ固相型和Ｃ固相型的界面电荷进行了研究,并提出了相关的模型。     

光敏蛋白菌紫质固相支撑人工膜系统的界面电荷

以固相支撑的菌紫质人工膜系统,在分子电子器件研究中占有重要地位。本文对其两种类型,Ｎ固相型Ｃ固相型的界面电荷进行了研究,并提出了相关的模型。     

福尔马林固定微丝蚴免疫酶染色试验检测丝虫抗体的初步观察

以马来丝虫微丝蚴为固相抗原,做免疫酶染色试验(IEST)检测丝虫病人血清抗体,具有较好的效果。但是,微丝蚴固相抗原在常温下极易腐败变质,影响了其在基层的推广应用。我们用福尔马林处理抗原后,在常温下保存60天,IEST的效果仍较满意。