CD105shRNA对激光诱导的脉络膜新生血管的干预作用及其机制

目的：观察CD105shRNA对激光诱导的大鼠脉络膜新生血管的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法：40只BN大鼠单眼采用半导体激光建立CNV模型。随机取20只大鼠于建模后1天使用Pgenesil-eng2转染大鼠视网膜和脉络膜作为实验组。在建模后第14天行FFA检查,观察实验组与对照组视网膜激光斑的渗漏情况。各取5只实验组和5只对照组大鼠,行脉络膜铺片,检测并比较脉络膜新生血管渗漏面积。另32只BN大鼠任取一眼建立CNV模型,其中任取20只大鼠于建模后次日进行Pgen-esil—eag2转染,作为实验组。12只建模眼作为对照组,未建模眼作为空白对照组。于基因转染后1w,2w,3w和4w各取5只实验组大鼠和3只对照组大鼠眼球,获取每个时间点实验组、对照组和空白对照组的脉络膜组织。检测各组每个时间点CDl05和VEGF在mRNA水平的表达。结果：FFA显示光凝后第14天时,对照组的渗漏率为63．2％,实验组为24．6％。实验组的BN大鼠眼底渗漏点数较对照组少,渗漏强度较弱。两组间比较有显著性差异。脉络膜铺片结果显示：2周时对照组大鼠的CNV面积为（31．22±1．46）×10^3μm2,实验组大鼠的CNV渗漏面积为（14．46±0．82）×10^3μm2,两组间比较有显著性差异。RT—PCR结果显示：实验组VEGFmRNA及CDl05mRNA的表达变化规律与对照组相似,但各个时间点的表达量较对照组均明显下降,其中实验组VEGFmRNA于2w时的表达约为对照组的36．7％;实验组CD105mRNA在第2w时约为对照组的21．68％。结论：通过沉默CD105基因的表达可以抑制大鼠CNV的生成,下调VEGF的表达可能是其作用机制之一。CD105基因有望成为CNV的基础研究热点和临床治疗的新靶点。     

CD105 shRNA对激光诱导的脉络膜新生血管的干预作用及其机制

目的:观察CD105shRNA对激光诱导的大鼠脉络膜新生血管的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:40只BN大鼠单眼采用半导体激光建立CNV模型。随机取20只大鼠于建模后1天使用Pgenesil-eng2转染大鼠视网膜和脉络膜作为实验组。在建模后第14天行FFA检查,观察实验组与对照组视网膜激光斑的渗漏情况。各取5只实验组和5只对照组大鼠,行脉络膜铺片,检测并比较脉络膜新生血管渗漏面积。另32只BN大鼠任取一眼建立CNV模型,其中任取20只大鼠于建模后次日进行Pgen-esil-eng2转染,作为实验组。12只建模眼作为对照组,未建模眼作为空白对照组。于基因转染后1w,2w,3w和4w各取5只实验组大鼠和3只对照组大鼠眼球,获取每个时间点实验组、对照组和空白对照组的脉络膜组织。检测各组每个时间点CD105和VEGF在mRNA水平的表达。结果:FFA显示光凝后第14天时,对照组的渗漏率为63.2%,实验组为24.6%。实验组的BN大鼠眼底渗漏点数较对照组少,渗漏强度较弱。两组间比较有显著性差异。脉络膜铺片结果显示:2周时对照组大鼠的CNV面积为(31.22±1.46)×103μm2,实验组大鼠的CNV渗漏面积为(14.46±0.82)×103μm2,两组间比较有显著性差异。RT-PCR结果显示:实验组VEGF mRNA及CD105 mRNA的表达变化规律与对照组相似,但各个时间点的表达量较对照组均明显下降,其中实验组VEGFmRNA于2w时的表达约为对照组的36.7%;实验组CD105 mRNA在第2w时约为对照组的21.68%。结论:通过沉默CD105基因的表达可以抑制大鼠CNV的生成,下调VEGF的表达可能是其作用机制之一。CD105基因有望成为CNV的基础研究热点和临床治疗的新靶点。     

激光诱导大鼠CNV形态变异性的体内和体外特性研究

532 nm激光光凝是诱导啮齿类动物脉络膜新生血管(CNV)的一种既定方法。本研究旨在评价激光诱导CNV在体内和体外随时间变化的形态变异程度,为今后CNV相关研究提供观察指标。本实验首先对棕色挪威(BN)大鼠进行激光造模,随后,根据不同时间点对其进行体内眼底照相、光学相干断层扫描(OCT)、眼底荧光血管造影(FFA)和吲哚菁绿血管造影(ICGA),最后,应用组织病理检查进行体外验证。结果发现,光凝后第7天出现CNV,第21天的CNV总发生率最高。FFA呈典型圆盘状强荧光渗漏,ICGA显示光凝区周边强荧光,中央低荧光,呈花环状形态。光学显微镜下可见,造模后第7天,视网膜下CNV形成,第7~21天,CNV中央厚度逐渐增加,第28天,CNV中央厚度保持相对稳定。这提示,532 nm激光诱导BN大鼠CNV模型造模时间短,成功率高。这种造模方式可以广泛应用于临床前实验研究,为进一步研究CNV发病机制提供了思路。     

姜黄素对阿尔茨海默病小鼠海马InR和IGF1R表达的影响

目的观察姜黄素对阿尔茨海默病（Alzheimer＇sdisease,AD）模型APP／PS1双转基因小鼠胰岛素受体（insulinreceptor,InR）和胰岛素样生长因子1受体（insulin·likegrowthfactor1receptor,IGF1R）表达的影响。方法将3月龄的APP／PS1双转基因小鼠随机分为模型组、阳性罗格列酮对照组（每日10ms／kg）、姜黄素大（每日400mg／kg）、中（每日200mg／kg）、小剂量组（100mg／kg）,正常组为相同背景非转基因小鼠。灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Westernblot方法进行检测。结果InR和IGF1R免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区较正常对照组InR阳性细胞明显增加（P〈0．01）,姜黄素干预组有所恢复;而模型组小鼠大脑海马CA1区较正常对照组IGF1R阳性细胞明显减少（P〈0．01）,姜黄素干预组有所恢复。Western blot检测海马InR和IGF1R的蛋白表达结果与免疫组织化学检测结果一致。结论姜黄素可以使APP／PS1双转基因小鼠海马增加的InR和减少的IGF1R得以恢复,改善APP／PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导。     

姜黄素对大鼠糖尿病防治作用的实验研究

目的：探讨姜黄素对大鼠糖尿病的防治作用及其机制。方法：用四氧嘧啶（alloxan）诱导糖尿病大鼠模型,将sD大鼠30只随机分为3组（n=10）：即正常对照组、糖尿病组和姜黄素治疗组,姜黄素治疗组行姜黄素（200mg／kg）灌胃8周,测定糖尿病大鼠血糖（BG）、血脂,测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活性以及丙二醛（MDA）含量。结果：与正常组比较,糖尿病组大鼠血糖、血脂明显升高,抗氧化酶活性降低,丙二醛含量明显增加（P〈0．05,P〈0．01）;与糖尿病组比较,姜黄素治疗组大鼠血糖、血脂明显降低,抗氧化酶活性增强,丙二醛含量明显减少（P〈0．05,P〈0．01）。结论：姜黄素可降血糖、血脂和提高机体抗氧化能力,具有防治糖尿病的作用。     

多巴胺激动剂阿朴吗啡对东莨菪碱诱导小鼠学习记忆障碍的影响

目的：研究多巴胺（DA）对小鼠学习记忆障碍的影响及其机制。方法：实验1采用腹腔注射东莨菪碱0．3mg／kg（SCOP 0．3,n=10）和3．0mg／kg（SCOP3．0）,连续注射60d,在第53天和60天用避暗法测定记忆行为,第60天处死动物后取脑用免疫组化的方法测定TH-ir和Fos-ir的表达。实验2根据实验1结果造小鼠记忆障碍的模型后将小鼠分成4组,1组腹腔注射生理盐水（NS）,其他3组腹腔注射阿朴吗啡0．1mg/kg（APO 0．1）、0．5mg／kg（APO 0．5）和2．0mg／kg（APO 2．0）,每组10只动物,连续30d。在注射阿朴吗啡第23天和30天测定避暗行为。第30天处死动物后取脑用免疫组化的方法测定Fos-ir和TH-ir的表达。结果：避暗法测定记忆发现东莨菪碱抑制小鼠的记忆。第60天,东莨菪碱3．0mg／kg组（SCOP3．0）的潜伏期比NS组显著缩短,仅是NS组的1／4（P〉0．05）,错误次数比Ns组增加了大约4倍（P〉0．05）,SCOP 0．3组的潜伏期和错误次数与NS组没有明显差异。免疫组化结果表明在伏隔核和海马区的CAl和CA3的Fos-ir细胞数明显降低（P〈0．01）,且被盖腹侧区的酪氨酸羟化酶（TH-ir）和共表达TH／Fos-ir细胞显著减少（P〈0．01）。注射阿朴吗啡后明显缓解了小鼠的记忆障碍,且腹侧被盖区TH-ir细胞增加（P〈0．05）。结论：阿朴吗啡明显减轻东莨菪碱诱导的小鼠记忆障碍,是通过增强腹侧被盖区多巴胺神经元的活性来实现的。     

贝伐单抗对ALA—PDT诱导的新生血管形成和胶质瘤生长的影响

探讨贝伐单抗对低剂量5-氨基乙酰丙酸（5-Aminolevulinicacid,ALA）介导的光动力学疗法（photodynamic therapy,PDT）诱导的脑组织新生血管形成和U87脑胶质瘤生长的影响。通过将裸小鼠随机分为对照组、ALA．PDT预处置组（ALA：2．3×10-3mol／kg,能量密度：10J／cm2）、贝伐单抗预处置组（1．6×10-5mol／kg）和联合预处置组（ALA—PDT＋贝伐单抗）,并接受相应处置。第10d,检测PDT照射及相应区域内新生血管形成和VEGF表达并种植U87脑胶质瘤细胞,21d后观察肿瘤体积。与对照组比较,低剂量ALA-PDT预处置后新生血管增多、VEGF表达增高,肿瘤体积增大,这些变化在联合预处置组被抑制;贝伐单抗预处置组的血管形态和VEGF表达虽无明显变化,但肿瘤体积减小。研究结果表明低剂量ALA-PDT可通过刺激VEGF表达诱导照射区新生血管形成,这种微环境的改变有利于U87胶质瘤细胞生长,但这些作用可被贝伐单抗所抑制。     

PDE2A通过影响脉络膜血管生成和NADPH氧化酶/ROS/NF-κB通路参与年龄相关性黄斑变性

摘要 目的：探究磷酸二酯酶2A（Phosphodiesterase 2A,PDE2A）在年龄相关性黄斑变性（Age-related macular degeneration,AMD）中的可能作用及其对脉络膜新生血管（Choroidal neovascularization,CNV）形成的影响。方法：通过qRT-PCR法检测36例湿性AMD患者（AMD组）和36例健康体检者（Healthy组）的血清PDE2A水平。将恒河猴脉络膜血管内皮细胞系（RF/6A）分为Normoxia组、Hypoxia组、Hypoxia+NC组、Hypoxia+PDE2A组。使用Lipofectamine2000分别将NC-shRNA和PDE2A-shRNA慢病毒转染入Hypoxia+NC组和Hypoxia+PDE2A组,转染后,根据分组情况,在RPMI 1640培养基中添加200 mM CoCl₂来对RF/6A细胞进行低氧处理。建立了激光诱导的CNV小鼠模型后,将36只建模成功的小鼠随机分为Model组、NC-shRNA组和PDE2A-shRNA组,每组12只。选取12只未建模的小鼠作为Control组。分别对NC-shRNA组和PDE2A-shRNA组小鼠玻璃体腔注射相应慢病毒,共治疗7 d。然后对小鼠进行眼底荧光血管造影（fundus fluorescein angiography,FFA）检查和眼球HE染色。使用相应试剂盒检测小鼠脉络膜组织中ROS、SOD、MDA的含量。通过qRT-PCR或Western blot检测RF/6A细胞或脉络膜组织中PDE2A、VEGFA、VEGFR2、HIF-1α、NOX2、NOX4和NF-κB p65的表达。结果：与Healthy组相比,AMD组患者的血清PDE2A水平显著升高（1.00±0.23 vs 3.09±1.46, P<0.001）。与Hypoxia组相比,Hypoxia+PDE2A组RF/6A细胞的闭合管腔数量减少（P<0.05）,PDE2A、VEGFA、VEGFR2和HIF-1?琢的mRNA和蛋白表达水平均降低（P<0.05）。与Model组相比,PDE2A-shRNA组CNV小鼠脉络膜病变明显减轻,血管生成和脉络膜增明显减少,CNV相对荧光强度降低（P<0.05）,脉络膜组织中的PDE2A、VEGFA、VEGFR2和HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平均降低（P<0.05）。与Model组相比,PDE2A-shRNA组小鼠脉络膜组织中的ROS和MDA含量均降低,SOD含量升高（P<0.05）。与Model组相比,PDE2A-shRNA组小鼠脉络膜组织中的NOX2、NOX4和细胞核NF-κB p65蛋白相对表达量均降低（P<0.05）。结论：PDE2A通过影响脉络膜血管生成和NADPH氧化酶/ROS/NF-κB通路参与年龄相关性黄斑变性。     

姜黄素对9月龄APPswe／PSldE9双转基因小鼠行为学的影响

目的应用Morris水迷宫,测试AD模型APPswe／PSldE9双转基因小鼠定位航行及空间搜索等学习记忆和记忆保持能力,评价姜黄素对APPswe／PSldE9双转基因小鼠认知功能的影响。方法将3月龄的APPswe／PSldE9双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组（10ms／kg·d）、姜黄素高（400Ing／kg·d）、中（200ing／kg·d）、低剂量组（100mg,,kg·d）,每组6只;并以同月龄遗传背景相同的C57／BL6J小鼠作为对照组。每天灌胃给药1次,连续灌胃6个月。应用Morris水迷宫进行行为学检测。结果姜黄素对APPswe／PSldE9双转基因小鼠空间学习记忆能力障碍有改善作用,尤以姜黄素大剂量和中剂量组效果比较明显。结论姜黄素能改善APPswe／PSldE9双转基因小鼠的认知功能。     

姜黄素改善慢性肺动脉高压肺血管重塑作用途径的研究

目的：探究姜黄素改善慢性低O2高CO2大鼠肺动脉高压肺血管重塑作用途径的研究。方法：建立慢低O2高CO2肺血管重塑模型,以24只雄性大鼠为受试对象,随机分为四组（n=6）：I组（常氧空白对照组）,Ⅱ（低O2高CO2模型组）,Ⅲ组（色甘酸钠对照组）,Ⅳ组（姜黄素实验组）。将后3组动物放入常压低O2高CO2舱中,吸入O2浓度8％～11％,CO2浓度3％～5％,每天8h,每周6d,连续4周,Ⅲ组给予色甘酸钠以20mg／kg体重腹注射处理,Ⅳ组给予姜黄素混悬液按150mg/kg体重灌胃处理。光镜下、透射电镜下观察肺动脉血管壁及其周围大细胞超微结构形态学改变,甲苯胺蓝染色法和免疫组织化学法对肺动脉周围的肥大细胞及其脱颗粒状态进行性定量测定。结果：①电镜下,Ⅱ组肺细小动脉中膜平滑肌增生,外膜胶原纤维密集,内弹力板扭曲,内皮细胞起,血管外肥大细胞内颗粒减少,胞膜不完整;光镜下,Ⅱ组相比1组肺细小动脉管腔／管总面积（WA／TA）明显升（P〈0．05）、管腔／管总面积（EA／TA）明显降低（P〈0．05）,甲苯胺蓝染色肥大细胞细胞数（NMC）、肥大细胞脱颗率（DR）及免疫组化检测类胰蛋白酶阳性细胞数（TBS）高于I组（P〈0．05）;②干预后,电镜下,Ⅲ组、Ⅳ组血管结基本正常,平滑肌增生及胶原增生较Ⅱ组轻,肥大细胞膜完整;光镜下,两干预组相比Ⅱ组WA／TA明显降低（P〈0．05）、ET／TA明显升高（P〈0．05）,甲苯胺蓝染色NMC、DR、TBS阳性细胞数分别低于Ⅱ组（P〈0．05）。结论：姜素可通过Mc途径抑制慢性低O2高CO2导致的大鼠肺血管重塑改变。     

对乙酰氨基酚诱导的小鼠药物性肝损伤的模型研究

改良对乙酰氨基酚（acetaminophen,APAP）单独诱导小鼠急性肝损伤的模型和致死模型。随机将小鼠分为4组：空白对照组、APAP3h组、APAP6h组和APAP12h组,每组5只。饥饿15h后用对乙酰氨基酚诱发小鼠肝损伤。测定各组血清ALT、AST及胆红素含量,HE染色观察各组肝组织损伤情况。观察生存率时,小鼠随机分为对照组、禁食＋APAP（500mg／kg）组、禁食＋APAP（300mg／kg）组和不禁食＋APAP（500mg／kg）组,四组同时给药,然后记录各组小鼠的生存情况,绘制四组小鼠的生存曲线。小鼠注射APAP后,随时间的延长,ALT、AST水平逐渐升高,均明显高于空白对照组（P〈0．05）。小鼠肝脏HE染色可见,APAP中毒组小鼠肝细胞坏死及炎性细胞浸润。禁食＋APAP（500mg／kg）组小鼠自16h开始出现死亡,72h时全部死亡,死亡率明显高于不禁食组和禁食＋APAP（300mg/kg）组小鼠。该研究对APAPI起的C57／BL6小鼠药物性肝损伤模型进行改良,使其更加稳定和便于研究,为进一步探究APAP诱导肝毒性的机制及防治措施奠定了基础。     

原癌基因c-myb在体外孕酮诱导小鼠卵母细胞成熟中的作用

目的：本文采用体外培养技术观察原癌基因c-myb对孕酮诱导的生发泡（GV）期小鼠裸卵体外成熟的影响。方法：建立小鼠裸卵体外培养模型,用不同浓度反义C-myb寡脱氧核苷酸（c-myb ASODNs）与GV期小鼠裸卵共孵育观察其对孕酮诱导的小鼠裸卵体外成熟的影响并探讨其机制。结果：在M199培养液中体外培养GV期小鼠裸卵24h,10μmol／L孕酮组与5μmol／L孕酮组比较有显著性差别（2 h GVBD％ P〈0.05,8 h PBI％ P〈0.05）．与20μmol／L孕酮组比较无显著性差别。10μmol／L c-myb AFODNs能抑制孕酮（10μmol／L）诱导的小鼠裸卵体外成熟（2 h GVBD％ P〈0.05,8 h PBI％ P〈0.01）。1×10^-4μmol／L dbcAMP、10μg／ml肝素钠可分别单独抑制孕酮诱导的GV期小鼠卵母细胞体外成熟（2 h GVBD％均P〈0.01,8 h PBI％均P〈0.01）．也可和反义c-myb ODN协同抑制孕酮诱导的卵母细胞体外成熟（2 h GVBD％均P〈0.01,8 h PBI％均P〈0.01）。结论：孕酮、原癌基因c-myb和cAMP、Ca^2＋参与了GV期小鼠卵母细胞的体外成熟,孕酮、cAMP和Ca^2＋调控卵母细胞成熟的机理可能与原癌基因c-myb表达有关。     

姜黄素对高原缺氧大鼠认知功能障碍的预防作用

目的：探讨姜黄素（curcumin）对高原缺氧大鼠认知功能障碍的预防作用。方法：将30只成年雄性SD大鼠随机分为健康对照组、模型组（Model组）、姜黄素【按体重60mg／（kg·d）】治疗组（curcumin组）。采用Morris水迷宫实验方法检测缺氧后大鼠学习记忆功能变化,同时检测脑片水平的LTP变化。结果：（1）模型组大鼠寻找平台的潜伏期明显长于对照组,具有统计学意义（P〈0．05）,姜黄素组寻找平台的潜伏期相对于模型组显著缩短（P〈0．05）。撤离平台后,模型组大鼠在平台所在象限的停留时间明显短于对照组（P〈0．05）,姜黄素干预后大鼠在平台所在象限的停留时间较模型组显著延长（P〈0．05）。（2）给予HFS刺激后各组兴奋性突出后电位（fEPSP）斜率较前明显增加,均可持续1h以上,与模型组比较缺氧组HFS刺激后fEPSP斜率明显减小（P〈0．05）,姜黄素可减轻缺氧所致的fEPSP斜率减小（P〈0．05）。结论：姜黄素可改善慢性缺氧大鼠认知功能障碍,但其具体机制尚有待于进一步研究。     

康柏西普联合视网膜激光光凝对缺血型视网膜中央静脉阻塞患者球结膜微循环指标和血管内皮功能的影响

摘要 目的：探讨康柏西普联合视网膜激光光凝对缺血型视网膜中央静脉阻塞患者球结膜微循环指标和血管内皮功能的影响。方法：选取2016年8月到2019年9月我院收治的缺血型CRVO患者90例,按信封抽签法分为对照组（n=45,视网膜激光光凝治疗）和研究组（n=45,视网膜激光光凝联合康柏西普治疗）,比较两组患者黄斑中心视网膜厚度(CMT)、球结膜微循环指标、最佳矫正视力(BCVA)、疗效、血清血管内皮生长因子（VEGF）、内皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）水平以及不良反应。结果：治疗后6个月研究组临床总有效率高于对照组（P<0.05）。治疗后6个月,研究组的BCVA升高程度以及细动脉管径、细静脉管径扩大程度均大于对照组（P<0.05）,CMT以及红细胞聚集积分降低程度大于对照组（P<0.05）。治疗后3 d,研究组的VEGF、ET-1降低程度大于对照组（P<0.05）,NO升高程度大于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率对比未见差异（P>0.05）。结论：康柏西普联合视网膜激光光凝治疗缺血型CRVO疗效较好,可有效改善患者视力及球结膜微循环,同时还可改善血管内皮功能,安全可靠。     

姜黄素诱导Nrf2核转位对脂多糖引起库普弗细胞分泌炎症细胞因子的影响

目的：研究姜黄素诱导大鼠Kupffer细胞Nrf2核转位对脂多糖（LPS）引起的炎症细胞因子分泌的影响。方法：分别用10μM、20μM和30μM干预Kupffer细胞8h,诱导Nrf2核转位水平;将Kupffer细胞随机分为对照组、LPS组和干预组,对照组正常培养未加姜黄素和LPS,LPS组用10μg／mL的LPS加入Kupffer细胞培养液共同培养2h;干预组用30μM姜黄素干预8h后,余处理同LPS组。Western blot检测Nrf2核转位水平,分光光度法检测细胞MDA、GSH水平,ELISA法检测上清液TNF-α和IL-6,放免法检测IL-1β。结果：①姜黄素诱导Kupffer细胞Nrf2核转位,核转位水平随浓度增加而增高。②LPS组MDA水平较对照组显著升高（P〈0．01）,干预组MDA水平较LPS组显著降低（P〈0．01）,仍显著高于对照组（P〈0．01）。LPS组GSH水平较对照组显著降低（P〈0．01）,干预组GSH水平较LPS组显著升高（P〈0．01）,仍显著低于对照组（P〈0．01）。③LPS组上清液TNF-α,IL-1β和IL-6显著高于对照组（P〈0．01）,干预组均显著低于模型组（P〈0．01）,但显著高于对照组（P〈0．01）。结论：姜黄素通过诱导Kupffer细胞Nrf2核转位,降低LPS诱导的氧化应激损伤,抑制Kupffer细胞分泌炎症细胞因子。     

MEF2C在湿性年龄相关性黄斑变性中的表达及其对脉络膜新生血管和巨噬细胞极化的影响

摘要 目的：揭示肌细胞增强因子2C（MEF2C）在湿性年龄相关性黄斑变性（AMD）中的表达及其对脉络膜新生血管（CNV）和巨噬细胞极化的影响。方法：通过qRT-PCR法检测30例湿性AMD患者（AMD组）和30例健康体检者（健康对照组）的血清MEF2C水平。将MEF2C过表达慢病毒（MEF2C-LV组）和阴性对照过表达慢病毒（NC-LV组）转染至恒河猴脉络膜血管内皮细胞系（RF/6A）。转染后,将RF/6A细胞分为常氧组（Normoxia组）、低氧组（Hypoxia组）、低氧+NC-LV组（Hypoxia+NC-LV组）、低氧+MEF2C-LV组（Hypoxia+MEF2C-LV组）。转染及缺氧处理后,分别测定各组细胞进行Matrigel小管。通过激光诱导CNV C57BL/6J小鼠模型,将建模成功的C57BL/6J小鼠随机分为模型组、NC-LV组和MEF2C-LV组,每组10只,未建模的小鼠作为对照组。然后对NC-LV组和MEF2C-LV组小鼠玻璃体腔注射NC-LV或MEF2C-LV,对照组和模型组小鼠不进行治疗。治疗7 d后进行眼底荧光血管造影（FFA）和眼球苏木精伊红（HE）染色。通过qRT-PCR和Western blot检测MEF2C、VEGFA、VEGFR2、IL-12p35、IL-12p40和IL-10的mRNA和蛋白表达。结果：与Healthy组相比,AMD组患者的血清MEF2C水平显著降低（1.00±0.23 vs 0.48±0.29,t=7.689,P<0.001）。与Normoxia组相比,Hypoxia组的闭合管腔数量增加（P<0.05）。与Hypoxia组相比,Hypoxia+MEF2C-LV组的闭合管腔数量减少（P<0.05）。与模型组相比,MEF2C-LV组视网膜和脉络膜病变程度减轻,结构基本恢复正常,脉络膜组织厚度降低,血管生成减少。与模型组相比,MEF2C-LV组的CNV相对荧光强度降低,脉络膜组织中MEF2C、VEGFA和VEGFR2的mRNA和蛋白表达水平均降低（P<0.05）。与模型组相比,MEF2C-LV组脉络膜组织中IL-12p35和IL-12p40的mRNA和蛋白表达水平均升高,IL-10均降低（P<0.05）。结论：MEF2C在湿性AMD患者血清中低表达,上调MEF2C可抑制脉络膜血管生成,并促进巨噬细胞从M2型向M1型的转换。     

葛根素对冷激诱导的高血压小鼠的影响

目的：检测葛根素灌胃对冷激诱导的高血压小鼠的血压血脂及肾脏结构的影响。方法：小鼠分为正常对照组、冷激对照组、冷激葛根素饲喂组（2,5,10ms／kg bw3组）（n=12）。以寒冷刺激（4±2℃）建立小鼠高血压模型,每天定时灌胃葛根素治疗,对照组给予聚乙烯吡咯烷酮溶液。连续饲喂18d．检测各组小鼠血压、血脂含量,石蜡切片观察肾脏结构。结果：冷激对照组小鼠血压显著高于正常对照组（P〈0．01）,葛根素饲喂组血压显著低于冷激对照组（P〈0．05）。冷激对照组TG含量显著高于正常对照组（P〈0．01）,而冷激饲喂组TG含量明显降低（P〈0．05）;冷激饲喂组TC含量与冷激对照组相比有所降低但无统计学意义;2mg／kg BW葛根素组LDL-C显著低于冷激对照组（P〈0．01）,各组间HDL-C含量比较无统计学意义,但葛根素饲喂组HDL-C／LDL-C值显著高于冷激对照组。冷激对照组肾小管上皮细胞水肿,内腔极度缩小,肾小球明显胀大,肾小囊腔显著变窄,葛根素饲喂组肾小管水肿基本消失,内腔明显增大,肾小球、肾小囊结构趋于正常。结论：葛根素灌服具有降血压、降血脂、改善病变肾脏结构的作用。     

蛋白质粉对小鼠免疫功能的影响

目的探讨蛋白质粉对正常小鼠免疫调节作用。方法将BALB/c小鼠随机分为3批,每批分为4组,分别进行了小鼠免疫器官/体质量比值测定和小鼠碳廓清实验;绵羊红细胞诱导小鼠DTH、抗体生成细胞检测和血清凝血素测定（HC50）;ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和乳酸锂脱氢酶法（LDH）测定NK细胞活性;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。结果10.00 g/kg剂量的蛋白质粉可增强绵羊红细胞诱导小鼠DTH能力（P〈0.05）,促进抗体生成细胞数的生成（P〈0.01）。3.33 g/kg和10.00 g/kg剂量组能促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力（P〈0.05或P〈0.01）和血清凝血素的生成（P〈0.05）;三个剂量组均能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力（P〈0.05或P〈0.01）;3.33 g/kg和10.00 g/kg剂量组能提高NK细胞活性（P〈0.05）;但对小鼠碳廓清能力和免疫器官/体重比值无明显影响。结论蛋白质粉对正常小鼠的细胞、体液免疫和单核-巨噬细胞功能和NK功能有促进作用,即具有增强免疫力功能。     

姜黄素对慢性低氧高二氧化碳大鼠肺动脉高压及肺动脉管壁胶原的影响

目的：研究姜黄素对慢性低氧高二氧化碳大鼠肺动脉压力及肺动脉管壁Ⅰ型胶原的影响。方法：36只SD大鼠随机分为正常对照组（NC组）,低O2高CO2 4周组（HH组）,低O2高CO2 4周＋姜黄素组（HC组）,采用免疫组化、图像分析等方法观察姜黄素对慢性低O2高CO2大鼠肺动脉压力、肺细小动脉显微和超微结构及肺动脉管壁Ⅰ型胶原的影响。结果：①血流动力学检测显示HH组mPAP明显高于NC组（P〈0．01）,HC组mPAP明显低于HH组（P〈0．01）,三组间mCAP无明显差异（P〉0．05）;②光镜下,肺细小动脉管壁面积／管总面积比值（WA／TA）、肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度（SMC）、肺细小动脉中膜厚度（PAMT）HH组较NC组明显增高（均P〈0．01）,HC组WA／TA、SMC和PAMT较HH组明显降低（均P〈0．01）;③电镜下,HH组肺细小动脉中膜平滑肌细胞增生,面积增大,染色质增多,外膜胶原纤维密集,HC组大鼠肺细小动脉内皮细胞结构基本正常,胶原少见,中膜平滑肌细胞和外膜胶原纤维增生较HH组明显为轻;④免疫组化法发现肺细小动脉Ⅰ型胶原平均吸光度值HH组明显高于Nc组（P〈0．01）,HC组明显低于HH组（P〈0．01）。结论：姜黄素具有降低慢性低O2高CO2性肺动脉高压、改善肺血管重建及抑制肺动脉管壁Ⅰ型胶原沉积的作用。     

匹伐他汀对Klotho基因敲除杂合子小鼠血管新生的促进作用

目的：探讨匹伐他汀对Klotho基因敲除杂合子小鼠血管新生的促进作用及其作用机制。方法：建立Klotho基因敲除杂合子小鼠（hetero kl＋／-）和同窝出生野生型小鼠（wild kl＋／＋）下肢缺血模型并分为4组：①hetero正常组;②hetero匹伐他汀组;③wild正常组;④wild匹伐他汀组。使用激光多普勒血流测定仪测定klotho（kl＋／-,kl＋／＋）小鼠投药前、下肢缺血手术后双下肢血流。免疫荧光组化SP法计数Klotho（kl＋／-,kl＋／＋）小鼠缺血肢毛细血管数。免疫酶组化直接法计数Klotho（kl＋／-,kl＋／＋）小鼠缺血肢磷酸化Akt阳性细胞数。蛋白印迹杂交方法检测Klotho（kl＋／-）小鼠缺血肢VEGF蛋白表达。结果：匹伐他汀使Klotho（kl＋／-,kl＋／＋）小鼠术后缺血肢血流恢复明显,缺血肢与非缺血肢血流面积比明显增加;匹伐他汀使Klotho（kl＋／-、kl＋／＋）小鼠缺血肢毛细血管密度增加、p-Akt阳性细胞数明显增加;匹伐他汀使Klotho（kl＋／-）缺血肢VEGF蛋白表达增强。结论：匹伐他汀有促进Klotho基因敲除杂合子小鼠血管新生的作用。其作用机制可能是通过VEGF—p—Akt—NO径路实现的。