脱落细胞涂片免疫组织化学技术有关问题的探讨

脱落细胞涂片免疫组织化学技术最需要注意的问题是背景染色和涂片粘附的牢固程度。因为背景的存在会影响对阳性结果的判断,尤其是抗原表达少的弱阳性的病例,而涂片涂的不好,厚薄不均,粘贴不牢都将会在操作时把涂上的细胞冲掉,造成染色的失败。因此我们采用了敏感性高,效果好的免疫组织化学真空负压ＬＳＡＢ法进行标记,ＡｒｔｃｒａｙｏｔａＡｒｔ和Ｃｒａｆｔｇｌｕｅ等涂于载玻片上,干后再涂片。经多次反复的实验证明,获得的结果好,背景清晰,阳性物明显突出,易于判断,涂片上的细胞黏附牢固,未出现细胞被冲洗脱落的现象。保证…     

细胞块的制备方法

随着免疫组织化学技术的发展和针对各种特异性抗原抗体的出现，免疫组织化学方法为肿瘤的病理诊断提供了客观依据，大大提高了诊断的准确率，免疫组织化学用于细胞学诊断也日益受到人们的重视，它能为细胞学诊断和鉴别诊断提供一个新的手段，从而进一步提高细胞学诊断水平。但是用于细胞学染色的细胞涂片，常因收集的细胞太少而致癌细胞检查假阴性；有时由于细胞分布不均匀，有重迭而使免疫组织化学显色时，阳性物质在细胞内的定位不清楚，背景不清晰。为了克服这些缺点，我们把针吸物制成细胞块，这样就可以多次切片，弥补了常规细胞涂片制…     

介绍一种简单适用的胸腹水脱落细胞石蜡包埋法

常规胸腹水脱落细胞检测多采用直接涂片法,该法简便、快速,在临床上得以广泛应用。但在实际工作中,我们发现直接涂片常出现细胞重叠,堆积,厚薄不均匀,细胞结构及背景不清晰,细胞量少,细胞脱落等现象,往往导致癌细胞检出率低。特别是某些需要通过免疫细胞化学进行鉴别诊断的病例,如转移性腺癌细胞与问皮源性细胞,诊断前一般并未预留涂片,在进行HE染色涂片观察后,     

提高细胞学标本阳性检出率的制片技术探讨

细胞学检查以其简便、快速、经济实用等优势,对肿瘤的早期发现发挥着重要的作用.细胞学的正确诊断对指导临床诊断及治疗也起到决定性作用.细胞学标本包括痰、尿、胸腹水、妇科标本等.高质量的细胞学涂片及染色是获得准确诊断的重要环节.多数细胞学的漏诊与误诊始于低劣的制片和染色技术.重视细胞学的制作质量无疑是提高细胞学阳性检出率的重要保证.     

利用改进的荧光染色法对宫颈涂片脱落细胞学诊断的探讨

吖啶橙（ａｃｒｉｄｉｎｅｏｒａｎｇｅ,简称ＡＯ）荧光染色法能显示细胞和病原微生物的形态结构及微生物的大小和分布,又能观察细胞内两种核酸（ＤＮＡ和ＲＮＡ）的含量变化,从而可以清楚地了解细胞的增生状态。根据细胞的形态学和细胞化学两方面的变化进行脱落细胞学观察,有利于较早期地发现癌细胞。本文应甩改进的ＡＯ荧光染色法对２０Ｄ００例宫颈涂片进行了脱落细胞学诊断,并对天津市各种妇科疾病所占的百分率进行了统计。该染色法染色结果稳定可靠、速度快、图象鲜明。     

应用H.E染色的鼻咽癌细胞涂片进行DNA含量测定和EB病毒基因原位杂交的研究

分析鼻咽癌常规 H.E染色细胞涂片分别作 Feulgen染色检测 DNA含量和原位杂交检测 EB病毒编码 RNAs(EBERs)的效果 ;将常规 HE染色的 9例正常鼻咽细胞涂片和 38例鼻咽癌细胞涂片用 1%酸性酒精褪色 ,然后作 Feulgen染色 ,应用图象分析仪测定涂片细胞 DNA含量 ,并将 38例鼻咽癌细胞病例的阳性涂片进行 EBERs原位杂交检测 ;结果显示正常鼻咽细胞均为 DNA二倍体核型 ,38例癌阳性涂片中呈 DNA二倍体者 6例 ,DNA非二倍体者 32例 (84.2 % ) ,癌细胞核 EBERs阳性者 35例 (92 .1% ) ;结果表明 HE染色的鼻咽癌细胞学涂片经褪色后作 Feulgen染色和原位杂交检测 ,能较满意进行 DNA和 EBERs分析 ,表明常规 H.E染色和褪色处理均不影响 Feulgen染色和 EB病毒原位杂交的质量效果。本检测方法可靠、可行 ,适用于常规染色细胞学样本的回顾性研究和随访研究 ,并可用于鼻咽癌可疑病人的诊断和鉴别诊断     

脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色的影响

目的:探讨脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色影响.方法:用不同脱钙液处理小鼠颅骨标本,组织切片后进行苏木素一伊红染色、甲苯胺蓝染色、醛品红染色以及免疫组织化学染色.结果:经过不同脱钙液处理后的颅骨组织切片组织结构保存完好,肥大细胞的组织化学染色(甲苯胺蓝和醛品红染色),及肥大细胞中胰蛋白酶的免疫组织化学染色清晰.结论:不同脱钙液(8%盐酸脱钙液、EDTA脱钙液、混合酸脱钙液)处理不影响鼻腔粘膜中肥大细胞的组织化学和免疫组织化学染色.     

真空SABC法检测各种组织相关抗原的应用研究

常规免疫组织化学方法需时长,增加背景染色,经酶消化后切片易脱落。为了解决上述问题,蔡俊杰等应用真空负压ＡＢＣ法和ＬＳＡＢ法,我们使用ＳＡＢＣ法进行检测,亦获得满意的结果。材料和方法选用我院病理科活检蜡块,其中恶性纤维组织细胞瘤５例,乳腺浸润性导管癌１...     

微波Envision免疫组织化学标记的特异性和敏感性研究

本文应用新建立的快速微波－Ｅｎｖｉｓｉｏｎ两步法免疫组织化学技术,分别对福尔马林固定和石蜡包埋切片的良恶性肿瘤进行免疫组织化学标记,观察该法的敏感性和特异性。所有２３种抗原均获得强阳性、低背景。整个程序在１８分钟内完成。结果表明：该法是一种特异性强、敏感性高、背景染色轻、快速和简便的新方法,可用于常规病理诊断。     

周末组织处理程序的改进

目的探讨周末切取组织处理程序的改进方法。方法收集40例乳腺癌根治术标本,每例连续取3块组织,随机分为日常程序处理组(常规组)、延时程序处理组(延时组)和改进程序处理组(改进组),比较3组切片裂痕或脱片的发生率、HE染色质量、免疫组织化学检测质量、荧光原位杂交实验结果。结果切片裂痕或脱片的发生率在延时组明显高于常规组,改良组与常规组基本相同;改良组与常规组切片核质对比清晰,红蓝适度,延时组稍不清晰,组织结构稍模糊;免疫组织化学检测阳性率在3组基本相同,但常规组和改良组切片染色更强,背景清晰,而延时组切片染色强度较弱、背景欠清晰;FISH结果阳性率在常规组和改良组相同,而延时组显著低于常规组和改良组。结论改进的周末切取组织处理程序固定、透明、浸蜡3个环节与标准程序相同,而将多余的时间分配给脱水环节,组织脱水彻底,有利于后期制片,特别是有利于后期的HE染色、免疫组织化学检测或FISH检测,值得推荐。     

两种操作方法在EBER原位杂交染色中的比较与应用

目的比较全自动免疫组织化学染色机染色和手工染色在EBER原位杂交技术中的应用。方法收集EBER染色阳性表达的不同组织标本35例,每例切片2张,分别采用罗氏Ventana免疫组织化学染色机染色和手工染色两种方式进行EBER原位杂交染色,对染色结果进行比较和分析。结果 35例手工组与仪器组染色结果一致,但仪器组阳性细胞着色深,与背景染色对比鲜明,且仪器组节省时间11h。结论两种方法在EBER染色中结果一致,但仪器组图像质量更好,且操作方法简便,更适合临床推广。     

肾缺血再灌注损伤大鼠肾内AQP2表达水平降低

目的了解肾脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury, IRI)时肾内水通道蛋白-2(aquaporin 2, AQP2)免疫组织化学表达特点。方法建立大鼠右侧肾IRI 45min模型,随机分为缺血再灌注1d、3d、5d、7d组和假手术1d组,检测尿常规、尿比重、尿素氮、血肌酐;HE染色观察肾脏病理形态学变化;免疫组织化学染色观察IRI时肾脏AQP2表达的变化。结果 IRI后,大鼠出现尿量增多,尿比重降低,血肌酐、尿素氮均增加;HE染色示右侧肾充血,水肿以及肾小管上皮细胞肿胀、坏死和脱落;免疫组织化学染色显示AQP2免疫反应性在右肾降低,左肾增强。肾组织的变化在第7d基本恢复正常。结论肾IRI时肾内AQP2表达降低,可能与IRI后尿量增多、尿比重降低相关。     

课堂教学中疟原虫血涂片染色方法的改进

疟原虫血涂片染色是高校寄生虫学实验课中的重要内容。传统的疟原虫血涂片染色采用的是经典的Giemsa染色法,但是染色效果受各种因素影响不稳定,严重影响教学质量。采用Diff-Quik染色方法进行染色发现,血涂片上的红细胞及疟原虫的形态与Giemsa染色结果相比更加明显和典型,染色背景干净无杂质,有利于进一步分辨疟原虫形态和进行数据统计。     

微波用于检测五项乙型肝炎病毒标志物

微波用于检测五项乙型肝炎病毒标志物王力（安徽省凤阳县二院检验科,２３３１２２）近年来有人利用微波所具有的反射、穿透、吸收的三种特性,将微波应用于骨髓涂片铁染色,免疫组织化学等方面。我们以微波辐射代替加温作ＥＬＩＳＡ法测定五项ＨＢＶ标志物（ＨＢＳＡｇ、...     

非霍杰金氏淋巴瘤骨髓侵犯的骨髓涂片和骨髓病理分析

目的:探讨非霍杰金淋巴瘤(NHL)骨髓侵犯发生率与临床分期和病理分型的关系。方法:160例NHL患者均做骨髓涂片和骨髓活检,48例骨髓侵犯病例做免疫组织化学染色。结果:骨髓涂片和活检侵犯率分别为18.7%和30.0%,骨髓涂片噬血现象多见Ⅳ期。骨髓侵犯的NHL病理组织分型以B细胞为主,骨髓侵犯模式以弥散型为主。结论:骨髓活检可提高淋巴瘤骨髓侵犯的诊断率,噬血现象出现和临床分期有关。     

酸奶中乳酸菌镜检涂片的特殊染色法

报道了酸奶中乳酸菌涂片的特殊染色法-甲苯胺蓝染色法。涂片固定后,用0．2％甲苯胺蓝染色液染色2min,然后,用1％乙酸溶液脱色数秒,即可使涂片中的菌体着奥蓝色,而背景呈现白色或无色,菌体形状十分清晰。即使涂片很厚且不均,也可清晰看到菌体。便于菌体细胞的计数,形态观察及摄影．     

胸腹水脱落细胞学涂片与瘤包石蜡切片的比较

随着恶性肿瘤及结核病发病率的上升,胸腹水的发病亦呈上升趋势,对胸腹水进行细胞学检查是临床用来排除肿瘤的方法之一。胸腹水脱落细胞学检查是临床常用检查方法,常规涂片大多能做出正确诊断,但某些分化较好的肿瘤细胞和增生间皮细胞在形态学上很难鉴别,缺乏经验时易漏诊或误诊。瘤包石蜡切片技术的应用可以弥补此不足。     

胸腹水内异形间皮细胞的鉴别方法研究

在胸腹水脱落细胞学检查中,细胞核直径测量、核浆比值测定以及核仁计数,这三种方法所得实验数据,有助于异形间皮细胞的鉴别。取新鲜胸腹水抗凝标本10ml,以每分钟2000转离心5分钟,将沉淀物制片4张。MGG复合染色(瑞氏染粉1克,姬姆萨染粉0.5克,加入500ml甲醇溶液,置37℃温箱内,每日振摇2～3次,一周后即可使用)待涂片自然干燥后,加上述染液染1分钟,再以等量pH6.8的磷酸盐缓冲液混合复染5～8分钟,核仁计数染3～5分钟,水洗。选择好的染色涂片于光学显微镜配接目测微计进行数据分析。核直径测量法:在涂片上选择适合部位测定细胞核直径,核最大直径与最小直径的平均值为该细胞核直径,每例随机测量50～100个细胞,求出     

树脂包埋半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用

目的探讨半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用,寻找一种视神经形态学研究和疾病诊断的有效方法。方法健康Sprague-Dawley大鼠视神经分别行树脂包埋制成半薄切片与石蜡包埋制成石蜡切片,分别采用HE、甲苯胺蓝染色及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组织化学方法染色,光学显微镜下观察并比较半薄切片与石蜡切片染色结果的差异。结果石蜡切片HE和甲苯胺蓝染色均显示视神经髓鞘不着色,MBP免疫组织化学染色示MBP阳性着色较重,着色较紊乱,髓鞘着色不清晰。半薄切片HE及甲苯胺蓝染色均显示髓鞘呈环形,着色清晰,颜色对比鲜明;MBP免疫组化染色结果可见髓鞘呈环形,非特异性染色不明显,阳性对比显著,可清晰显示髓鞘结构。结论半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中优于石蜡切片,可用于视神经疾病的诊断和研究。     

网状纤维染色与免疫组织化学方法在显示肿瘤细胞及间质成分中的应用

免疫组织化学技术在判断肿瘤细胞来源、分类及鉴别诊断中应用十分广泛。网状纤维作为细胞外间质成分,存在于人体各组织器官中,通过网状纤维染色观察网状纤维在肿瘤组织中的形态变化是肿瘤鉴别诊断中又一重要参与依据。应用免疫组织化学方法和网状纤维染色,对一些不同类...