从九连小檗细胞培养物中分离和鉴定药根碱

九连小檗的叶片,在含有2,4-D(1mg/l),KT(0.1mg/l),琼脂(0.8%),蔗糖(2%)的B,培养基上,诱导出愈伤组织,在25±2℃条件下进行固体、液体培养、收集悬浮培养20天的细胞进行化学抽提和分离,得到一种橙黄色结晶,经 HPLC、UV、IR、MS 和 NMR 等分析鉴定,证明为药根碱。经药理试验表现有明显的生理活性。     

基因型和培养条件对大麦花药培养的影响

不同基因型大麦(Hordeum vulgare)的花粉愈伤组织诱导率不同。带大麦黄花叶病抗性基因的品种、品系或F_1杂种的诱导率(8.83—14.21％)高于不带抗性基因的材料(1.04～6.25％)。MS基本培养基舔加2,4-D,1 mg/l,Kt0.1 mg/l,BA0.2 mg/l,生物素0.1 mg,其诱导率(平均11.0995)高于MS添加2,4-D3 mg/l和Kt0.1 mg/l的诱导率(6.33％)及MS添加2,4-D 1 mg/l和Kt0.1 mg/l的诱导率(8.21％)。接种后先15℃暗培养5天,再转入25℃暗培养,其产生愈伤组织的高峰期推迟2—4天,但诱导率却从对照的5.84％提高到11.59％;25℃暗培养与25℃光-暗交替培养,诱导率无显著差异。     

秃叶黄皮树的快速繁殖

l植物名称秀叶黄皮树（————””ar·ghlDr21‘ecl‘LZll71）。／2材料类别幼嫩茎段。取其嫩枝，经70％酒精和0．l％升汞表面消毒后，在无菌条件下演切成长0．5cm茎段作为外植体。3培养条件培养基分别为：（）MS＋BA03mg／L（单位下同）＋NAA0．5；（2）MS＋BA0．5＋NAA0．5；（）MS＋BAI．5＋NAAos；（）Ms＋BAI．0＋NAAo】；（）Ms＋EAos＋NAAI．o；（6）1／ZMs＋NAAI．o＋IEA代0；（7）l／ZMS＋NAAI．0＋IBAZ．0；（8）l／2MS＋NAAI．0。培养基均附加蔗糖3％，琼脂0．7％，PH5．8。培养温度25士IC，每日…     

光头稗的愈伤组织形成及体细胞胚胎发生

植物名称:光头稗(Echinochloa colonum)。材料类别:雌雄蕊分化期的幼穗。培养条件:诱导培养基为N_6附加2.4-D2mg/L,CH500mg/l,肌醇100mg/l,蔗糖3％,琼脂1％,pH5.8;分化培养基为N_6基本培养基,附加CH500mg/l,活性炭少许,蔗糖、琼脂和pH同前。培养温度为26±2℃,每日光照10小时,光照度     

几种生长抑制剂对当归早期抽苔的控制

针对生产中提早抽苔制约当归生产的问题,本文对几种生长抑制剂控制当归早期抽苔进行了探讨。实验材料当归（A）luntcxl——栅）来自甘肃漳县什川乡,田间试验和盆栽试验干1993～1995年分别在甘肃省农科院会川试验点和本校园内进行。1993年设PP333（30、100和170mg·L‘）、CCC（0125％、0．2％和04％）、Bg（025％和04％）、MH（1700mg·L‘）各项处理。1994年和1995年设（l）0．25％B。＋100mg·L’PP333和（2）0．25％B。＋02％CCC两种处理及与微肥（0．l％和0．2％B、Mn及0．1％稀土）的混合处理。结果（表1、2）表明：1．增叶…     

香蕉组织培养过程中内生菌污染的控制

研究了体外培养一种孟加拉传统香蕉（Musa spp. Cv. Kanthali）的茎尖组织。茎尖的原始细胞表面经无菌处理（0.1% HgCl₂处理12min）,接种6～15d后外植体地下茎部分仍有微生物污染（大部分是细菌）,杀死了85％的外植体。为确定无污染培养基,将等量外植体分别浸泡在含400mg/L氨苄青霉素和200mg/L庆大霉素（两种光谱抗生素）的培养基中1h。结果表明,经抗生素处理的外植体完全没有污染,但培养3周后不能再生。进行二次继代培养后,其中一部分外植体吸收了培养基并胀大,颜色由苍白转变成浅绿或深绿。三次继代培养后数天,不再观察到外植体的生长,所有经抗生素处理过的外植体都开始死亡。在未经抗生素处理的活外植体中,单个茎发育的最佳培养基是：MS+4.0mg/L BA+0.5mg/L KT+15% CW,平均生长时间为18～21d,但再生率很低,只有30％。茎细胞增殖的最佳培养基是：MS+4.0mg/L BA+2.0mg/L IAA+15% CW,每个茎平均只萌发3～4个芽。最后,在添加0.5mg/L IBA的一半浓度的MS培养基中,体外培养茎最大生根率达到90％。     

水稻单倍体幼穗切块的离体培养

长0.5—4厘米的水稻单倍体幼穗,剪切成1毫米左右的碎块,培养在附加2.4-D 1mg/l的N_6培养基上,切块容易被诱导生成愈伤组织。愈伤组织转移到附加NAA0.5-KT 2mg/l的培养基上培养,约30%分化出苗。由单个幼穗的全部切块平均可得30丛绿苗。幼穗切块培养在附加NAA 1 KT 2mg/l的培养基上,切块上颖花不孕稃片与内外稃之间的表皮和皮层细胞被诱导分裂并形成芽和根。通过这种直接出苗方式,每个幼穗的全部切块平均出苗12丛。由上述二种途径再生的小苗中,白化苗均低于2%。98％的再生植株仍为单倍体。用含有2%二甲基亚砜和200mg/l秋水仙碱的培养液浸泡愈伤组24小时(26℃),再生的植株中,能育二倍体植株达50%。     

大花茉莉的组织培养和植株再生

王植物名称大花茉莉（Jasminu。peand～m）。2材料类别茎节、叶片。3培养条件3．五诱导培养基（l）MS＋6－BA0．2～50mg／L（单位下同）;（2）MS＋6－BA0．2～5．0＋KT0．2～2．0＋IAA0．l～1．0;（3）SH＋6－BA0．2～5．0＋NAA0．l～1．0;（4）改良White＋KT02～2．0＋NAAof～1．co3．2生根培养基（回）l／2MS＋IBA0．l～1．0;（2）1／2MS＋IAA0．回～回．0;（3）1／2MS＋NAA0．1～1．0＋2,4－D0．0］十活性炭0．l％。以上均采用固体培养,琼脂06％,蔗糖2％,PH58。诱导培养基中附加少量的水解酪蛋白0．2％～05…     

植物细胞、组织及原生质体培养

94176 7萎叶愈伤组织的再生[英]/johri,A.J.K.…∥Curr.Sci.一1993 9 65(10).一793～796F译自DBA,1994,13(4),94—02101] 将田间生长萎叶的苗尖置于5％’reepol中浸泡5分钟,置于含5 mg/1氯霉素、5mg/l土霉素。50mg/l制霉菌素,150mg/l柠檬酸和100mg/1抗坏血酸的MS培养基上过夜培养。外植体用无菌水洗涤一次、用抗坏血酸溶液(1％)洗涤二次,培养在不同培养基上,诱导愈伤。在含3mg/l NAA、O.05rag/1 BA和100mg/1抗坏血酸的MS培养基上生长良好,不发生褐化。每:隔4周继代。转到含O.9mg/l Kn和O.05mg/l IAA的MS上诱导形成苗和根。在降低…     

玉米原生质体的植株再生

以玉米花粉诱导产生的胚性愈伤组织,在 N6基本培养基附加激动素2 mg/l,6-苄基氨基嘌呤1mg/l,2,4-D 0.3 mg/l,水解酪蛋白500 mg*l 及谷酰胺250 mg/l 的培养基上进行转代培养。用转代培养一年半后的胚性愈伤组织分离原生质体,原生质体培养在附加激动素0.2 mg/l,6-苄基氨基嘌呤0.1 mg/l,2,4-D 0.5 mg/1,水解酪蛋白200 mg/l,谷酰胺100 mg/l及椰乳296的原生质体培养基 Z_2中。培养4—6天后,原生质体的再生细胞进行第一次分裂;培养3星期后发育成肉眼可见的小愈伤组织。此后,需添加降低糖浓度的同样原生质体培养基 Z_2共两次。待再生愈伤组织长到直径2—4 mm 大小时,把它们先后转经第一及第二(即Z_3及 Z_4)分化培养基上诱导器官分化。最后在 Z_4分化培养基上同时有胚状体的发生及植株的分化。     

番茄ACC合酶反义基因对河套蜜瓜的转化

河套蜜瓜（CucumismeloLcvHetau）的子叶经预培养。芽诱导和生根培养,获得再生小植株,诱导率达58％。取带有番茄ACC合酶反义基因的双元载体pMQ6／JM109与农杆菌（Agrobacteriumtumefaciens）LBA4404经三亲融合后,与在MS0上萌发5d、并在MS＋1mg／LNAA培养基上预培养3d的子叶共培养48h,然后转入含50mg／L卡那霉素的MS＋6mg／LZT的芽诱导培养基中,1l个月后诱导生芽,待芽长1．5－2cm时转入生根培养基中,1－2周后可诱导产生大量的根,形成完整的转基因小植株。经PCR和分子杂交检测证明,目的基因已整合入河套蜜瓜的基因组中。     

甜茶的组织培养

植物名称:甜茶(Rubus suavissimus)。材料类别:嫩茎和实生苗。培养条件:基本培养基为MS,培养实生苗的培养基不加任何激素;分化培养基附加 BA0.5—1.0mg/l(单位下同),GA_31.0;继代培养附加BA0.2—0.5,GA_3 1.0:诱导生根为1/2MS+IBA0.25—0.50。白糖3％,琼脂0.5％,pH为5.8。培养温度25±2℃;每天照光9—10小时,光照度约2000lx。生长和分化:实生苗培养:种子经消毒,破口     

梅花离体快速繁殖研究

我们采用自配的基本培养基(以下简称WB)附加植物激素组合,对梅花进行离体快速繁殖试验。以成年母树腋芽作外植体,在WB中附加BA 2mg/l、ZT 1mg/l和IAA0.2mg/l的培养基上培养,腋芽萌发长成丛生芽;再转移到同一培养基上经20天培养,丛生芽长成不太正常的丛生幼苗。把丛生芽或不太正常的丛生幼苗转移到WB附加BA0.25mg/l、IAA0.05mg/l的培养基上,继代培养25天,丛生芽或不太正常的丛生幼苗则长成粗壮的无根苗。无根苗在生根培养基中诱导生根,每株苗自茎基部直接长出2—5条浅黄色的根。生根小植株盆栽于培养土中,并置培养室或温室条件下管理,成活率达80%。关于梅花营养器官的离体培养研究尚未见报道。     

柚子的组织培养

植物名称:柚(Citrus grandis)。材料类别:沙田柚的成熟果仁在培养基上形成无菌苗后,将无菌苗的苗端、幼茎切成小段进行培养。培养条件:培养无菌苗用N_6和0.5MS基本培养基,附加KT 1mg/l(单位下同),NAA0.5、LH500,肌醇100,蔗糖 2％,琼脂0.55％。培养温度为28±2℃,每天光照8小时,光照度为1000lx。     

不同外植体来源和培养条件对拟似棉植株再生的影响

对拟似棉的不同器官(叶、叶柄、茎)在离体培养中的反应以及影响植株分化的各种因素(继代培养时间、激素、光、温度)进行了研究。结果表明:茎段作为外植体效果最佳,并且愈伤组织的诱导能力与茎段切口的面积成正比。外植体的方向性,也就是指茎表皮靠着培养基,切口面暴露于空气中为愈伤组织诱导的重要条件。愈伤组织诱导的最适培养基是MS+2mg/l IAA+1mg/l KT,最佳培养条件是强光(10,000勒克斯)、高温(29±1℃)。在MS+0.1mg/l NAA+3mg/l 2ip+0.5g/l LH分化培养基上,在4,000—5,000勒克斯的光强,28℃条件下,愈伤组织分化成小苗的频率可达20％。     

白芷经胚状体途径形成再生植株

植物名称:白芷(Angelica dehurica) 材料类别:2—3年生植株的幼叶培养条件:以MS为基本培养基,附加水解酪蛋白0.5—1mg/l,蔗糖30g/l。pH5.8,并以7g/l琼脂固化培养基,按需要加入2,4-D和BA,培养温度为25—28℃,光照用30W荧光灯,培养材料距灯管20—40cm每天照光10—12小时。生长与分化情况:幼叶经0.1％升汞液表面灭     

普通小麦×栽培大麦杂种体细胞无性繁殖系建立

取小大麦杂种幼穗在含有2,4-D 2mg/l的N_6培养基上诱导出愈伤组织。在继代培养中不断产生胚状体和再生植株。经过筛选,N_6+KT1.0mg/l+IBA0.5mg/l和N_6+KT1.0mg/l+ZT0.1mg/l,为较好的继代分化培养基。培养近三年,继代23次,仍具有增殖分化能力。小植株移入土中均能成活及正常生长。     

放线菌素D和环己亚胺对伊贝母胚性愈伤组织中胚性细胞团和球形胚发生及大分

伊贝母（F,pallidiflora Schrenk)胚性愈伤组织接种于NAA1．0mg/L 6=BA2.0mg/L的MS培养基上,在培养10天前可产生大量单细胞到多细胞胚性细胞团,培养10至15天,逐渐形成大量球形胚,利用这样一个实验体系,在培养0,1,2,3和4天后加入放线菌素D（AMD,20ug/ml)和环己亚胺（CHM,20ug/ml),继续培养至第6天,分析大分子代谢动态和观察胚性细胞团的形成情况;培养6和10天后加入同样浓度的AMD和CHM,继续培养至第15天,分析大分子代谢动态及观察球形胚形成情况,结果表明：（1）培养0,1,2,3和4天加入AMD的分别抑制胚性细胞团的100％,63％和45％,加入CHM的抑制100％,85％和75％,培养6和10天后加入CHM抑制球形胚的100％和75％;（2）DNA,RNA和蛋白质在胚性细胞团和球形胚形成时出现两个峰值,其中RNA变化剧烈,最早出现峰值,AMD和CHM分别抑制RNA和蛋白质的合成;（3）过氧化物酶同工酶带对胚性细胞团和球形胚形成过程中顺序表达。AMD和CHM分别在转录和转泽水平上对其进行规律性抑制,根据以上结果,本文对伊贝母体细胞胚胎发生的机制进行了初步讨论。     

紫背天葵叶片培养体细胞胚状体发生的研究

SH液体培养基附加2,4－D（0．125mg/l),BA(0.25-0.5mg/l),CM(10%v/v)或CH（0．2%w/v),摇床培养,同一培养基中培养50天后,出现球形,心形,鱼雷,子叶胚,虽然胚状体和不定芽同样来源于叶片的表皮细胞,但它们之间有下列区别;体细胞胚状体发育有4个不同时期,而不定芽没有;球形胚形成后,能脱落分散在培养液中,芽始终和外植体连在一起;鱼雷－子叶胚有明显的苗端和根端之分,苗端有两片子叶,叶间是顶端分生组织,有原形成层结构,而不定芽仅有芽原基。     

稀土元素对霍山石斛试管苗生长的影响

目的：研究稀土元素镧（La）、钐（Sm）、铱（Ye）对霍山石斛试管苗生长的影响。方法：运用植物组织培养技术在基本培养基中添加不同种类、不同浓度的稀土元素,60d后统计其对霍山石斛试管苗各项生长指标。结果：1／2MS＋10％香蕉培养基中添加l0mg／L Sm、l0mg／L Ye对其试管苗有矮化作用和促使密集的分蘖和生根;添加l0mg／L La促进植株增高、鲜重增加、叶绿素含量提高、芽分化加快、根数目增多、;而添加l00mg/L La对其试管苗生长起明显抑制作用。结论：稀土元素对霍山石斛试管苗的生长有显著的影响。