美洲黑杨(中嘉8号)离体叶片再生研究

用中嘉8号杨[Populus deltoids(I-63×I-69)]试管苗叶片作外植体,在添加不同生长素和细胞分裂素浓度配比的1/2(N)MS培养基上,筛选出叶片直接分化不定芽的最适培养基1/2(N)MS 0.2 mg/L BA 0.02 mg/LNAA 25 g/L蔗糖 7 g/L琼脂,不定芽分化率为85%。同时发现,一定浓度的KT对生根具有促进作用,最适生根培养基为MS 0.08 mg/L KT 0.02 mg/L NAA 25 g/L蔗糖 8 g/L琼脂,生根率为82.2%。     

激素对洋桔梗植株再生的影响及生根培养的研究

以MS为基本培养基 ,附加不同浓度的 6 BA、KT、NAA和IBA诱导洋桔梗叶片外植体的再生植株。结果表明 :MS +6 BA 0 .5～ 1 .0mg/L(单位下同 ) +NAA 0 .2和MS +6 BA 0 .5～ 1 .0 +IBA 0 .2培养基都能诱导外植体产生愈伤组织 ,但 6 BA的浓度必须小于 1 .0mg/L ,否则会导致组织的严重玻璃化 ;MS +KT 1 .0～2 .0 +NAA 0 .2或MS +KT 1 .0～ 2 .0 +IBA 0 .2培养基也能诱导外植体产生愈伤组织 ,愈伤组织出现的时间较早且质地较好 ,适合分化。继代培养时 ,MS培养基中仅加 6 BA 0 .5mg/L或KT 0 .5mg/L ,即能获得较高的分化率。生根培养研究中 ,培养液为 1 /2MS+5 0g/L糖 +IBA 2mg/L的前处理 ,生根效果较好 ,生根率接近基质生根培养的生根率。     

树莓茎尖组织培养体系的优化研究

以5个优良树莓栽培品种为试验材料,建立了树莓茎尖组织培养体系.结果表明:原初培养采用培养基MS 0.35 mg/L BA 0.1 mg/L GA3,腋芽萌发率可达85%以上;树莓品种早红和美22增殖培养基采用MS 0.3 mg/L GA3 0.1 mg/LIAA 0.25 mg/L BA 琼脂0.5%,澳洲红采用MS 0.3 mg/L GA3 0.3 mg/LIAA 0.25 mg/L BA 琼脂0.5%,黄树莓采用MS 0.3 mg/L GA3 0.3 mg/L IAA 0.25 mg/L BA 琼脂0.3%,黑莓A4-17采用MS 0.3 mg/L GA3 0.3 mg/LIAA 0.35 mg/L BA 琼脂0.5%,其增殖系数可达5~10;生根培养基采用1/2 MS 1.00 mg/LIBA,生根率可达70%~90%;移栽适应性培养以河沙作为移栽基质最佳,成活率可达80%以上,但不同品种间有一定差异.     

红掌遗传转化受体系统的建立Ⅰ离体高效培养体系的建立

以红掌叶片和叶柄为材料,研究了影响红掌愈伤组织的诱导和分化的因素.结果表明,基因型对愈伤组织诱导有显著的影响,Pink Champion愈伤组织诱导率最高,为90%.基本培养基对愈伤组织诱导影响显著.在改良MS培养基上,愈伤组织诱导率为85%,出愈伤多,质量高.消毒时间和接种方式对愈伤组织诱导率亦有显著影响.初展开叶片用氯化汞消毒8-10min,背面向下接入培养基,愈伤组织诱导率高.外源激素对愈伤组织的诱导和芽分化影响显著.单独使用BA不能诱导红掌叶片产生愈伤组织,高浓度BA、低浓度2,4-D时,愈伤组织诱导率高.在MS+BA0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+CM 5%培养基上,芽分化率为97.5%,平均芽分化数为4.5个/块,芽粗壮.将分化出的芽转入1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1+AC 1 g·L-1培养基上诱导生根,生根率达100%.通过上述研究建立了红掌离体高效培养系统.     

提高石刁柏花药愈伤组织的诱导及植株再生率的研究

本文就提高石刁柏花药愈伤组织诱导率及其器官分化率和植株生根,移栽成活率的有关于主要因子进行研究.1、适宜浓度的2,4-D、NAA、BA 配比的1/2MS(铁盐除外)培养基,可诱导芦笋单核期的花药产生较高百分率的花药愈伤组织,各激素适宜浓度为2,4-D 1.0mg/L、NAA 0.5—2mg/L、BA 0.5—2mg/L。诱导率最高可达78.05%。     

木立芦荟组织培养pH分化特性及快速繁殖的研究

以木立芦荟的叶片、叶鞘、带腋芽的茎段为外植体进行试管培养 ,结果叶鞘和茎段可诱导形成愈伤组织 ,腋芽直接萌生。经试验筛选出各培养阶段最适宜的培养基为 :( 1 )愈伤组织诱导 ,MS BA 2 .5mg/L NAA0 .1 5mg/L ;( 2 )腋芽萌生 ,MS BA 2 .0mg/L NAA 0 .1 5mg/L ;( 3 )丛生芽分化及继代 ,MS BA 2 .0mg/L NAA0 .1 0mg/L ;( 4)生根 ,MS BA 0 .3～ 0 .5mg/L IBA 0 .2mg/L 活性碳 0 .5%。研究还发现 ,培养基酸碱度对木立芦荟组织培养分化效果的影响非常显著。     

中国野生葡萄组织培养研究

对中国野生山葡萄左山—1、左山—2、燕山葡萄燕山—1和秋葡萄平利—7的叶片、叶柄、茎段及单芽茎段进行了离体培养研究。诱导左山—1叶片分化出不定芽的培养基为MS BA 5．0mg／L NAA0．1mg／L,诱导率2．5％;诱导平利—7叶柄分化出不定芽的培养基为MS BA7．0mg／L NAA0．1mg／L,诱导率1．95％;诱导左山—1、燕山—1和平利—7茎段分化出不定芽的培养基与叶柄相同,但诱导率相对较高,分别为8．25％、4．88％和6．49％;应用这一培养基对平利—7、左山—2的单芽茎段进行培养,丛状不定芽的诱导率均为100％。不定芽继代培养基为MS BA0．5mg／L IBA0．2mg／L;生根培养基为1／2MS IBA0．1—0.2mg／L。     

扁桃愈伤组织诱导及分化的研究

以扁桃优良品种'Naporeil'的茎段、叶片和花药作为外殖体,分别对其进行愈伤组织诱导和分化研究,以筛选愈伤组织的最佳诱导增殖培养基、分化培养基和生根培养基.结果表明,该品种以茎段、花药作为外殖体最易诱导获得愈伤组织,叶片不适宜作为外殖体诱导愈伤组织;愈伤组织的最佳诱导增殖培养基均为B5+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,愈伤组织诱导率为100%,增殖倍数最高可达7倍;茎段愈伤组织的分化培养基为MS+0.2 mg/L NAA+0.8 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT,分化率为71%;花药愈伤组织未见分化.由茎段愈伤组织再分化获得的不定芽在1/2MS+0.5 mg/L IBA培养基上诱导生根,并给以黑暗预处理可使生根率达80%以上.     

中国传统菊花品种‘小林静’再生及转化体系的建立

以中国传统菊花品种‘小林静’叶片为外植体,建立了‘小林静’较好的再生体系及遗传转化体系.结果表明,‘小林静’叶盘最适不定芽分化培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA,不定芽分化率为92.76％,平均再生不定芽数为2.3767个;试管苗最佳生根培养基为1/2MS,生根率达100％.移栽采用灭菌的蛭石,再生苗移栽成活率达90％以上.采用根癌农杆菌C58C1介导的叶盘转化法进行‘小林静’的遗传转化试验,农杆菌OD600=0.5-0.6,侵染10 min后,将叶片外植体接种到MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA的培养基中黑暗共培养2d,之后转接到附加10 mg/L硫酸卡那霉素和400 mg/L羧苄青霉素的分化筛选培养基中进行转化细胞的筛选,待长出抗性芽后转接至生根培养基中进行培养,最终建立了菊花品种‘小林静’的遗传转化体系.     

圆叶葡萄''Alachua''叶柄再生体系的建立

以圆叶葡萄'Alachua'的叶柄为外植体,通过对基本培养基、激素种类及浓度组合的筛选,研究圆叶葡萄Alachua再生体系的建立.结果表明:以B5 2.0 mg/L BA 0.5 mg/L 2,4-D诱导叶柄形成愈伤组织效果较好,叶柄诱导率达86%;再分化培养基以B5 4.0 mg/L TDZ效果较好,达到19.32%;诱导生根以培养基WPM 0.1mg/L IBA的效果较好,生根率达90%.移栽至珍珠岩与营养土(3∶1)的混合基质中,成活率达93%.     

非洲菊试管苗叶柄愈伤组织的诱导与分化研究

以非洲菊(Gerbera janesonii Bolus)品种‘Sunanda'试管苗幼叶的带叶叶柄为材料,研究了培养基、外植体类型和继代次数等因素对愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明:培养基上附加不同植物生长调节剂所诱导出的愈伤组织在形态和分化能力上存在显著差异,叶柄基部诱导愈伤组织的最适培养基是MS+TDZ 0.3 mg L-1+NAA0.1 mg L-1.外植体以叶片长度＞0.5 cm,叶片已舒展,颜色嫩绿的幼叶最佳,继代培养基以MS+KT 1.0 mg L-1较适宜,愈伤组织在分化培养基MS+6-BA 2.0 mg L-1+NAA 0.1 mg L-1上分化出芽的同时还会增殖,分化率达87.4%,继代培养2次的愈伤组织分化率可提高至95%.不定芽在生根培养基1/2MS+IBA0.6 mg L-1上的生根率达100%,试管苗移栽45 d后,成活率达97%以上.     

唐菖蒲花色突变株开花后子房组织培养与植株再生的研究

以唐菖蒲花色突变株开花后的子房为外植体,接种于MS+1.0mg/L BA+0.01-0.1mg/L NAA或MS+1.0mg/LBA+1.0mg/L KT+0.01-0.1mg/LNAA的培养基中,从膨大的组织表面直接诱导不定芽.膨大的组织或带不定芽的组织每隔周转入1/2MS_1.0mg/L BA+0.01-0.1mg/L ANN培养基中,不断地诱导产生不定芽,分化的不定芽转入不含激素的1/2MS培养基中,形成幼苗、然后生根,最后可形成小球茎.幼苗转入1/2MS+0.1mg/L NAA培养基中,幼苗生根,再可形成小球茎.1个唐葛蒲突变株子房,经6—7个月培养,获得了上千株试管苗.     

铁皮石斛同源四倍体工厂化快繁工艺研究

以实验室前期诱导的铁皮石斛四倍体为研究材料,利用气孔、叶绿体、染色体计数及流式细胞仪等方法,对铁皮石斛同源四倍体株系的纯合性进行鉴定,在此基础上利用茎段扩繁和原球茎诱导、增殖、分化两种方案比较增殖效率,并对原球茎的倍性稳定性进行再鉴定。结果表明：（1）实验室的‘花自 2’株系为纯合同源四倍体。（2）茎段扩繁最佳增殖培养基为MS＋2.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%香蕉汁,茎段诱导原球茎最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L KT,诱导率达到76.66%;原球茎增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%马铃薯提取液,原球茎分化最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L 6 BA+20%马铃薯提取液,原球茎分化率达到85.70%;生根最佳培养基为1/2 MS＋0.5 mg/L NAA＋15%香蕉汁,生根率达到92.77%。（3）原球茎根尖鉴定结果表明,诱导的倍性可以稳定遗传。（4）瓶苗移栽的最佳炼苗时间为5 d,移栽成活率达92.30%。该试验建立了铁皮石斛同源四倍体株系新的快繁技术体系,为四倍体试管苗的工厂化生产和推广奠定了技术基础。     

从麻疯树上胚轴外植体再生植株

以麻疯树上胚轴为实验材料在MS添加IBA和BA的培养基上进行离体培养实验.结果表明,在IBA O.1 mg/L与BA 0.2～0.7 mg/L组合的条件下,不定芽从上胚轴外植体的表面直接被诱导分化,其中以在MS IBA 0.1 mg/L BA 0.5 mg/L上的诱导率最高.从愈伤组织来源的植株再生需要IBA 0.5 mg/L与BA 0.1 mg/L、IBA 0.5 mg/L与BA0.2mg/L以及IBA1.0mg/L与BA0.5mg/L的激素组合,其分化的最佳培养基是MS IBA1.0 mg/L BA0.5 mg/L.生长健壮的不定芽和再生植株能在无激素的MS基本培养基上生根.发育良好的再生苗可成功地转移到温室栽培而没有可见的变异.     

地黄组织培养及植株再生的研究

以地黄根茎所获无菌苗为材料,对其愈伤组织诱导、分化和再生植株的获取进行了初步研究。结果表明：取叶片、茎段、叶柄进行愈伤组织诱导,筛选出最适培养基为MS附加2,4-D0．5mg／L、BA1．0mg／L,愈伤组织诱导率可达100％。将叶片接种在分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加BA 3mg／L、NAA 0．1mg／L,分化率为77．5％。试管苗在改良的MS(大量与微量元素、铁盐和有机物质各1／2)附加NAA 0．05mg／L的培养基上,经过15～20d培养,生根率可达100％。     

大豆顶芽组织培养植株再生的研究

栽培大豆(Glycine max)6个品种顶芽组织培养植株再生中,以铁丰18形成愈伤组织的能力最强,在B_5附加2,4-D 1.0mg/L,BA 0.5mg/L的培养基上,诱导率可达80％左右。愈伤组织出现10d后及时转移到MS附加BA 1.0,KT0.5,ZT0.5和IAA0.5mg/L的分化培养基上,分芽化的频率达40％左右。切割的不定芽在1/2MS基本培养基附加IBA 0.2～0.5mg/L、蔗糖2％的琼脂培养基上,可诱导生根,长成完整小植株。     

香叶天竺葵快速繁殖的研究

以柠檬香的皱波天竺葵 (Pelargoniucrispum)的叶片和茎段为外植体进行试管培养 ,结果叶片和茎段可诱导形成愈伤组织。经试验筛选结果为 :培养基MS BA 0 .75mg L NAA 0 .2 0mg L最适于愈伤组织的诱导 ,也适于不定芽分化和从生芽的分化增殖 ;培养基 1 2MS NAA 0 .3mg L IAA 0 .1mg L为根系诱导及生长的最佳配方 ,生根率达 1 0 0 %。     

多基因型黑果枸杞高效快繁体系的建立

旨为建立适用于不同种源多基因型的黑果枸杞高效稳定的组培再生体系,为工厂化育苗与大面积推广奠定基础。收集7个不同种源地的黑果枸杞种子并制备无菌苗,利用植物组织培养技术,研究不同种类、不同浓度植物生长调节剂对黑果枸杞生根和分化的影响。在黑果枸杞的茎段诱导分化培养基筛选过程中,针对黑果枸杞培养过程中容易出现的玻璃化现象,通过多种培养基比较,确定了一种最适合不同种源多基因型黑果枸杞茎段分化的培养基MS+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+6-BA 0.1 mg/L;在黑果枸杞的叶片诱导分化培养基筛选过程中,通过调节生长素类物质及细胞分裂素的浓度,获得一种适合于不同基因型的黑果枸杞叶片分化的培养基MS+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;在黑果枸杞生根培养基的筛选过程中,通过改变生长素浓度,获得了一种最适合于不同种源多基因型黑果枸杞生根的培养基1/2MS+蔗糖30 g/L+琼脂7.5 g/L+IBA0.25 mg/L。在大规模试验的基础上,克服了不同种源黑果枸杞使用一种培养基时在生根分化过程中常出现的玻璃化、不生根、不发芽等问题,建立了适宜不同种源多基因型黑果枸杞高效稳定的组织培养再生体系。     

丽格海棠的离体快繁

取丽格海棠幼叶为外植体,在诱导培养基MS＋BA 0．5mg/L NAA 1.0mm/L上培养20d左右,开始分化花芽,培养40d丛生芽长满整个外植体,丛生芽的增殖培养以MS＋BA 0．5mg/L为佳,芽长得大且粗壮,粗壮芽转入无激素的1／2MS生根培养基,生根率达100％。     

观赏向日葵丛生芽增殖、生根及离体成花

本文以观赏向日葵品种‘富阳'为供试材料,通过MS基本培养基添加不同植物生长调节剂试验,初步建立了适宜观赏向日葵无菌苗增殖、生根和离体成花培养条件.结果表明,MS+低浓度BA对无菌苗增殖效果较佳,丛生芽增殖最适培养基为MS+0.05 mg/L BA;无菌苗生根率受营养水平影响,最适生根培养基为1/2MS;在离体条件下,低浓度BA可延缓植株衰老促进开花,最适开花培养基为MS+0.05 mg/L BA.花芽分化受GA3和PP333所抑制.本研究可为观赏向日葵遗传转化体系建立及转基因植株性状鉴定提供基础.