姬松茸多糖抑制肿瘤细胞增殖的研究

姬松茸(Agaricus blazei)又名巴西蘑菇,是一种药食兼用的珍稀食用菌,具有显著的防癌、抗癌活性^[1]。本实验用水提法提取姬松茸菌丝体(深层发酵制备)及子实体多糖,测定姬松茸多糖体外对小鼠s-180癌细胞及人结肠癌细胞抑制杀伤作用。     

基于转录组测序的姬松茸镉胁迫下内参基因筛选

[目的] 筛选不同实验条件下,尤其是镉胁迫下的姬松茸内参基因,为研究姬松茸镉富集相关基因功能研究奠定基础。[方法] 根据不同浓度Cd（0、2、5 mg/L）胁迫下菌丝中转录组表达量数据,筛选出18个候选基因,设计了30对引物;根据引物扩增的特异性、扩增效率初步筛选出来自不同基因的5对引物;运用qRT-PCR检测了5个基因在不同浓度Cd胁迫下的菌丝样品、原基、菌柄和菌盖中的C_t值,利用geNorm、NormFinder和BestKeeper对这些基因的表达稳定性进行评价。[结果] SGT2和STK是菌丝阶段Cd胁迫下最稳定的2个候选内参基因,GAPDH是不同组织中最稳定的内参基因,SGT2、STK和GAPDH是所有实验条件下最稳定的3个内参基因。[结论] 在姬松茸镉胁迫条件下,本研究筛选出的SGT2和STK比常用的内参基因表现出更强的稳定性。     

Agaricus Blazei Murrill的药用价值及栽培

姬松茸 (ＡｇａｒｉｃｕｓＢｌａｚｅｉＭｕｒｒｉｌｌ)原产巴西 ,1 96 5年发现 ,由日本三重大学农学部岩出亥之助教授栽培成功。姬松茸具较高的抗癌、抑肿瘤的药用价值。美国宾西法尼亚大学Ｗ·Ｊ辛迪博士 ,日本药理学会总会、药学会都曾报道过。姬松茸的组成成份 ,见表 1～表 4。表 1　子实体化学成分名　　称鲜物 %干物 %水　分 86 590粗灰分 0 74 5 54粗蛋白 5 794 3 19粗脂肪 0 50 3 73粗纤维 0 816 0 1糖　类 5 57 4 1 56麦角甾醇 0 0 2 0 14表 2　子实体维生素含量维生素类 (ｍｇ/10 0ｇ干物 )维生素Ｂ11 79胆…     

氮离子束注入姬松茸担孢子的生物学效应研究

氮离子束注入与紫外线辐射对姬松茸担孢子萌发的影响显著不同,表现出一定程度的马鞍型效应.不同剂量的氮离子束注入姬松茸担孢子,其产生的生物学效应不同:氮离子注入束流为200×2.6×1013N /cm2,筛选到一株箱栽生物学效率提高47.0%的姬松茸新菌株AbML11;氮离子注入束流为400×2.6×1013N /cm2,筛选到一株子实体呈现白色突变的姬松茸新菌株AbML7;氮离子注入束流为500×2.6×10"N13/cm2,筛选到一株具有AEC抗性突变的姬松茸新菌株AbML2.     

姬松茸的研究与进展

概述了大型真菌姬松茸的生物学特性、保健功能以及近年来的研究进展,并对其主要功效物质如多糖等成分、姬松茸深层发酵技术的现状和菌丝体应用情况作了介绍。     

姬松茸凝集素的分离纯化及性质

凝集素是一类能够识别特异性糖并与之非共价结合的蛋白或糖蛋白,因其具有特定的识别受体,故在免疫系统和发育过程中发挥了重要的作用。使用DEAE-Sepharose FF弱阴离子交换层析、SP-Sepharose强阳离子交换柱层析、Sephadex G-75分子筛凝胶层析对姬松茸凝集素进行分离纯化,研究理化因素对其凝血活性的影响及其抗菌活性。结果表明:纯化的样品经SDS-PAGE电泳分析得到单一条带,姬松茸凝集素是含有2个相同亚基的同源二聚体,其分子量都为1.20×10~5。纯化后的姬松茸凝集素相对粗提液的回收率为28.99%,纯化倍数为19.06倍。姬松茸凝集素对热有较好的耐受性,但温度为90℃时失去凝血活性;在强酸或强碱下丧失活性,最适pH为7～9;凝集活性不受金属离子的影响;葡萄糖是其专一性结合糖。姬松茸凝集素对褐腐菌的生长起到了明显的抑制作用,而对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉、西瓜枯萎病菌和黑曲霉的生长没有明显的影响。     

发酵法生产富铁姬松茸菌丝体的产业化研究

对发酵法生产富铁姬松茸菌丝体进行了产业化研究.结果表明,姬松茸的耐铁能力和富铁能力都很强,在铁浓度为0.1～1.5g/L的液体培养基上,菌丝均能生长,当铁浓度超过1.5g/L 时,菌丝生长受到一定影响;采用液体深层培养,最佳的铁源为FeSO4·7H2O ,最佳铁添加量为0.4～0.5g/L.此时,姬松茸菌丝体的生物量得率和富铁率达到最高,同时,菌丝体含铁量和多糖含量也较高.另外,扩大到10t罐进行工业化生产,富铁姬松茸干菌粉得率达到2.82%,菌丝体含铁量可达14.77mg/g.姬松茸菌丝体产品产量高,质量稳定, 已推向市场,提供给一些企业,初步实现了产业化.     

姬松茸高产栽培技术及主要杂菌、害虫发生与防治研究

阐述了姬松茸的特征特性及在鄂东大别山区高产栽培的方法,介绍了姬松茸的主要杂菌和害虫发生情况,并提出了综合防治方法。从中也筛选几种低毒、高效,适合湖北省鄂东大别山地区食用菌无公害栽培的新农药,在栽培生产中应用,从而减轻了病虫害的危害。     

姬松茸胞内多糖碱提取工艺

为了进一步提高姬松茸胞内多糖得率,采用单因素实验和响应曲面法,对姬松茸菌丝体胞内多糖碱提取工艺进行了研究。结果表明优化的碱提取工艺为提取时间4．63h,碱液浓度1．03mol／L,提取温度60．90℃,液料比85．85mL／g,在此条件下胞内多糖的提取得率为（273．49±1．59）mg／g干菌体,明显高于水提取所得到的胞内多糖得率。这为姬松茸碱提胞内多糖理化性质、生理活性等方面进一步的研究提供切实可行的高效提取方法。     

营养因子对姬松茸深层发酵的影响

研究了营养性因子对姬松茸深层发酵的影响。结果表明玉米粉、蛋白胨,豆饼粉有利于姬松茸菌体生长和胞外多糖的形成,进一步的正交优化实验得到最佳培养基组成,玉米粉2%,蔗糖1%,豆饼粉1%。KH2PO40.3%,MgSO40.2%,0.2%的棕榈酸能促进胞外多糖的提高,在此基础上进行摇瓶发酵曲线测定,确定姬松茸适宜发酵周期为108h,胞外多糖最高可达3.48g/L。     

培养料配方对姬松茸子实体产量和氨基酸、有害物含量的影响

采用3种培养料配方,研究其对姬松茸(N2)产量和氨基酸含量有害物含量的影响。结果表明:姬松茸子实体中镉含量比培养料中高184～215倍,姬松茸有富集镉的特性。配方1、配方2、配方3子实体镉含量分别为13,10,9.6mg/kg,产量分别为9.5,9.4,8.8kg/m2,氨基酸总量分别为27.59%,25.80%,20.58%。配方2子实体中镉含量显著低于配方1,其产量、氨基酸总量与配方1相近;配方3的产量、氨基酸总量最低,与配方1、配方2差异显著,表明采用KH2PO4代换过磷酸钙,可以降低子实体镉含量,而不宜用化学氮代换牛粪;配方1子实体砷含量最高,与配方2、配方3差异显著。3种配方子实体中六六六、滴滴涕、敌敌畏、四环素等有害物含量基本相同。     

蕈中珍品——松茸

松茸,又称松口蘑、松蘑、松蕈、鸡丝菌、松了蘑,是一种价值很高的食用菌。其鲜品烹饪,美味异常,余香满口,自古就深受我国人民喜爱,有“蕈中珍宝”之称。在国际市场上,松茸也享有盛誉,日本和欧洲人尤其喜食松茸,在日本素有“海里的鲱鱼子,陆地上的松茸”之说。松茸不仅味道鲜美,而且具有很高的食疗价值。据分析,松茸除含有人体所需的多种氨基酸,维生素Ｂ１、Ｂ２、Ｃ、ＰＰ及钙、磷、铁等物质外,尚含有激素类、松茸聚糖、甘露醇、松茸醇、异松茸醇等活性成分。现代科学研究表明,松茸具有治疗糖尿病、抗癌等特殊功能。日本科学…     

姬松茸栽培料配方筛选及栽培工艺的研究

对姬松茸栽培料配方进行了优化选择,并系统地研究了姬松茸的栽培工艺。结果表明:最佳栽培料配方为玉米芯4.5kg/m2、稻草5.25kg/m2、牛粪4.65kg/m2、麸皮1.8kg/m2、石灰0.075kg/m2、过磷酸钙0.375kg/m2、尿素0.15kg/m2、石膏0.15kg/m2,其产量达到6.29kg/m2,显著高于对照。栽培料最佳厚度为17.5cm,播种量为6%;播种方式采用2层播,垄式覆土。     

2种不同寄主对桉树枝瘿姬小蜂体内细菌多样性的影响

[目的]桉树枝瘿姬小蜂是一种林业的重要入侵害虫,为了探明桉树枝瘿姬小蜂的寄主适应机制,研究2种不同寄主植物对桉树枝瘿姬小蜂体内细菌群落组成及多样性的影响.[方法]以分别取食巨园桉DH 201-2和窿缘桉的桉树枝瘿姬小蜂雌性成虫为材料,采用Illumina HiSeq高通量测序技术对桉树枝瘿姬小蜂体内细菌16S rDNA...     

姬松茸原生质体形成和再生的研究

报道了溶壁酶系统、酶浓度、不同菌龄、脱壁促进剂、渗透压稳定剂和酶解温度对姬松茸原生质体释放率及不同再生培养基、渗稳剂种类、菌丝酶解时间和单双层平板对原生质体再生的影响。结果表明 ,菌龄为3～ 5d的菌丝以 1.5 %溶壁酶、0 .5 %蜗牛酶和 0 .5 %纤维素酶组成的酶系统在 30℃以KCl为渗透压稳定剂时 ,形成率为 1.4～ 1.5ⅹ 10 7/mL酶液 ;以蔗糖为渗透压稳定剂 ,菌丝酶解 1.5～ 3h ,以SMY和MYP为再生培养基 ,姬松茸原生质体再生率为 1.1‰～ 1.3‰。     

镉胁迫对姬松茸生长和镉吸收累积的影响

利用外源镉添加的袋栽试验,系统研究了镉对姬松茸J37和J1两菌株农艺性状、子实体产量、氨基酸和镉含量的影响,以求为低富集镉的姬松茸品种选育和安全栽培提供科学依据。结果表明外源镉添加对姬松茸J37和J1品种子实体的农艺性状的影响各异,两菌株单个子实体重量、子实体高度、菌盖直径、菌盖厚度和菌柄直径等均与外源镉浓度具有显著的负相关性,其中子实体重量与外源镉浓度间的相关性最大;15 mg/kg镉水平是两菌株农艺性状发生显著变化的敏感点。不同镉水平下J37菌株单个子实体重量比J1菌株高10.9%—36.6%,表现为较强镉耐受性。姬松茸J37与J1菌株子实体产量、氨基酸和镉含量均随着潮次的增加而降低,子实体产量和氨基酸含量随着外源镉水平增加而降低,而镉含量随外源镉水平增加而增加。与外源镉0mg/kg处理相比,当外源镉水平达15 mg/kg时,J1和J37子实体总产量分别下降23.4%和13.4%以上,J1和J37子实体镉含量分别提高51.5%、13.7%以上,且J1子实体镉含量已达到食品卫生标准的临界值。当外源镉水平达到35 mg/kg时,J1和J37子实体产量分别下降45%、32%以上,J1和J...     

药用真菌高质量总DNA的制备及基因组文库的构建

灵芝、姬松茸、灰树花等药用真菌对肿瘤、肝炎、心血管疾病等具有良好的疗效,已引起国际医学界的瞩目。现对药用真菌的研究逐渐深入到分子水平,而提取基因组DNA是进行药用真菌分子生物学研究的基本技术之一。目前适用于灵芝等担子菌纲大型药用真菌DNA提取的方法报道较少。按照曲霉等丝状真菌DNA的提取方法提取灵芝、姬松茸、灰树花的基因组DNA时,不但未能有效除去DNA的多糖,而且所得DNA片段小,构建文库时的转化率低。为此我们建立了一种快速提取高质量基因组总DNA的技术,并在此基础上探索出一种构建高质量基因组文库的方法,…     

基于18S基因序列的姬小蜂分子系统发育

本文基于18S rDNA部分序列,用MP和Baysian方法研究了姬小蜂科的系统发育,对姬小蜂科的单系性及其与其它小蜂科间的关系进行了讨论。姬小蜂亚科、灿姬小蜂亚科和啮姬小蜂亚科形成三个独立的支系,研究结果支持它们各自的单系性,但本结果没有明确姬小蜂科的单系性。研究结果同时还支持瑟姬小蜂族、扁股姬小蜂族和狭面姬小蜂族三个族的地位,但不支持姬小蜂族的地位。姬小蜂科的单系性及其与其它小蜂间的关系还需更多的形态学数据和更多的基因序列来进一步研究[动物学报52 (2) : 288 -301 , 2006]。     

松茸发酵中菌丝体生长的营养要求及高产研究

松茸菌属于担子菌亚门、层菌纲、无隔担子菌亚纲、伞菌目、口蘑科、口蘑属[1]。近十多年来,国内外十分重视对食用菌的研究,尤其是对金针菇和香菇等抗癌物质的研究十分活跃,这方面以日本开始较早。目前,国内外由于松茸不能象其它食用菌那样在室内进行人工栽培,它只能在野外松林中生长繁殖,致使松茸的利用研究受到限制。为了充分利用松茸菌,例如生产抗癌物质,首先必须弄清其核菌的最佳营养要求和高产所需生长因子。本研究旨在了解1株新松茸菌在发酵过程中菌丝体生长的营养要求和高产所需最佳碳源、氮源、四队无机盐和生长因子,以便进…     

姬松茸原生质体的制备

对姬松茸(Agaricus blazeiMurrill)原生质体制备的最佳条件进行了研究,结果表明:采用液体发酵培养第7 d的菌体,用2%溶壁酶在30℃下酶解5 h,原生质体产率达9.08×106个/mL。