根霉的研究IV．根霉淀粉葡萄糖苷酶的研究

本文研究根霉属内各种羣产生淀粉葡萄糖苷酶的情况及选择高活性的菌种。我们由150株根霉中选择出3株淀粉葡萄糖苷酶很强的根霉,共名称和菌号为Rhizopus japonicus AS 3.849(日本根霉),Rh. Tonkinensis AS 3.1175(河内根霉)和Rh.chinensis AS 3.2746(中国根霉)。酶作用的最适pH是4.5—5.0,最适温度因菌而异,一般以50一55℃最好,其中3．2 746耐热性最强,稳定性最高。根霉睫粉酶对原料的选择性不强,对6种不同的淀粉(可溶性淀粉、马铃薯、甘薯、玉米、大米和高粱),几乎都能全部水解成葡萄糖。3种根霉的性能,在很多方面都不相同,在一般条件下,3．849糖化力最强,3.1175次之,3.274 6糖化之初速度较低,而它的优点是生长迅速,酶的耐热性和稳定性强。     

产气气杆菌茁霉多糖酶的研究I．酶的提纯和性质

产气气杆菌(Aerobacter aerogenes) 10016的茁霉多糖酶(pullulanase E．C．3．2．1．41)用Sephadex G100凝胶过滤、聚丙烯酰胺垂直板型凝胶电泳进行纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的纯酶。纯酶作用的最适温度为50℃,最适pH为5．3—5．8,耐热性较差,50℃ 4小时后仅存活力10％。纯酶在pH4．3一8．6稳定。酶作用于糯米淀粉的米氏常数Km为2.0×10-2克／毫升。用聚丙烯酰胺薄屡凝胶等电聚焦测定酶的等电点pI为3．8,用SDS凝胶电泳测定酶的分子量为51,000—52,000;此酶是一种糖蛋白;含糖总量为6．5—7．0％;纯酶能专一性的水解茁霉多糖、糯米淀粉,也能分解糊精,而不作用于糖原、纤维二糖以及环状糊精。     

赤霉烯酮的微生物还原

用Rhodtorula sp.Saccharomyces sp.Arthorbacter sp.和Candida sp．四属20株菌对由Fusarium graminearum 产生的类雌激素——赤霉烯酮(Zearalenone)的还原转化进行了研究。实验结果证明,Rhodotorula sp和 Arthrobacter sp．的还原产物主要是α-赤霉烯醇(α-Zearalenol,经HPLC鉴定含量分别为96％和84％)。Saccharomyces sp．和Candidasp.的主要还原产物是β-赤霉烯醇(β-Zearalenol,经HPLC鉴定含量分别为91％和92％)。产物均经HPLC、13C—NMR和MS鉴定确证。     

玉米赤霉烯酮产生菌在我国的分布及其特性*

从全国29个省、自治区和直辖市分离到的镰刀菌中,随机抽取335株分别接种到大米培养基上,进行变温培养。用薄层扫描法定量检测培养物在不同温度阶段的玉米赤霉烯酮含 量。检测结果表明,50.7％的受检菌株具有产生玉米赤霉烯酮的能力,分布广泛,产量范围为0.3—5143.8mg/kg大米．玉米赤霉烯酮产置与低温无必然相关性。 125株菌株(占产生菌的73.5％)在常温下即可产生玉米赤霉烯酮。经低温处理后,它们之中仅有41.6％的菌株显著增加了产量。产生菌分属7个种：禾谷镰刀菌(F．Grammearum)大刀镰刀菌(F．Culmorum),燕麦镰刀菌(F．Avenaceum),半裸镰刀菌(F．Semitectum),木贼镰刀菌(F. equiseti),紧密 镰刀菌(F．Compactum)和克地镰刀菌(F. crookwellense)。其中,禾谷镰刀菌占85.3％。     

双孢蘑菇上的丝枝霉新种

1980—1981年先后自北京、昆明、福州等地双孢蘑菇[Agaricus bisporus (Lange)Sing.]上分离到一种真菌,在PDA上的培养性状与蘑菇轮枝菌(Vertieillium psalliotae Tresch．)和蛛网丝枝霉中国变种[Aphanocladium aranearum(Petch) Gams var sincase J．D．Chen]近 似。镜检可见其兼具上述两种菌的形态。经反复多次纯化,并挑取单孢子培养,肯定了这种真菌是纯菌。在培养基上已保存4年,形态稳定。它具典型蘑菇轮枝菌形态,而其丝枝霉型瓶梗的形成和瘪缩时间、长度、原瓶梗数量、末端瓶梗数及排列密度等,都与蛛网丝枝霉中国变种有一定差异,与丝枝霉属其它种亦不同,故定为两型丝枝霉新种(Aphanocladium dimorphum sp-nov.)。本文详细描述了该新种的形态,井对文甲所提的五种真菌及其与Engyodontium属间的关系进行了讨论。     

日本根霉IFO5318胞外β-葡萄糖苷酶的纯化及部分特性

采用硫酸铵沉淀及柱层析等步骤纯化了日本根霉IFO5318的β—葡萄糖苷酶,回收率为22％。该酶分子量约为4.0×10~5,由四个相同大小的亚基组成;最适反应温度55℃,最适反应pH5.5;对热较敏感,但能在较大的pH范围内保持稳定。用对硝基苯基—β-D-吡喃葡糖苷为底物,测得的K_m和V_(max)值分别为0.825mg·ml~(-1)和135.4μmol·min~(-1)·mg~(-1)。该酶对纤维二糖的水解能力最强,SDS、Fe³⁺、Hg²⁺等对酶活力有抑制作用。     

几种地霉(Geotrichum)的鉴定

我们研究了186株地霉,鉴定出4个种,其对12种糖类的同化性能如下： 1．白地霉(Geotrichum candidum Link AS2．361)：只同化葡萄糖、牛乳糖、山梨糖、术糖及L一阿拉伯糖(弱)。 2．果香地霉(G．Suaveolens (Krzemeckl)comb．Nov．AS2．364)：只同化葡萄糖、牛乳糖、山梨糖及木糖(弱)。 3．鲁氏地霉(G. ludwigii(Hansen)comb．…．AS2．363)：只同化葡萄糖、牛乳糖及蔗糖。 4．健强地霉(G．Robustum sp．nov．AS2．621)：只同化葡萄糖、牛乳糖、麦芽糖、乳糖、纤维二糖、木糖、山梨糖(弱)、L一阿拉伯糖及D一阿拉伯糖。     

野生植物根围的丛枝菌根真菌Ⅱ*

本文主要报道了野生植物根围Glomus属的17个种,聚球囊霉G.aggregatumSchenck＆Smith,苏格兰球囊霉G.caledonium（Nicol.＆Gerd.）Trappe＆Gerd,近明球囊霉G．claroideumSchenck＆Smith,明球囊霉G．clarumNicolson＆Schenck,缩球囊霉G．constrictumTrappe,透光球囊霉G．diaphanumMorton,幼套球囊霉G．etunicatumBecker＆Gerdemann,集球囊霉G．Fasciculatum（Thaxter）Gerd．＆Trappe,何氏球囊霉G．hoiBerch＆Trappe,地球囊霉G.geosporum（Nicol．＆Derd.）Warker,根内球囊霉G．intraradicesSchenck＆Smith,摩西球囊霉G．Mosseae（Nicol．＆Gerd.）Gerd.＆Trappe,隐球囊霉G.occultumWalker,网状球囊霉G.reticulatumBhattcharjee＆Mukerji,地表球囊霉G.versiforme（Karsten）Berch,台湾球囊霉G…     

细菌超低温冻结保藏的研究

本文报道10属19种19株细菌超低温冻结保藏试验的结果。从细胞存活率看,冻结保藏8个月,10％甘油、10%二甲基亚砜保护剂保藏效果优于蒸馏水作保护剂,少数菌株三种保护剂保藏效果相近。快速冻结与慢速冻结对细咆存活率影响不显著。恶臭醋杆菌混浊变种(Acelobacter rancens var. turbidans) AS 1.41,产氨短杆菌 (Brevibacterium ammoniagenes) AS1．844,细胞悬液浓度大,细胞存活率有增高趋势。电镜观查,超低温冻结细胞死亡率高的产气气杆菌(Aerobacter aerogenes) AS 1.489有胞壁破裂、胞质溢出现象,是细胞死亡原因之一。冻结融化后直接测定,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum) AS 1.557乳酸生成力下降3．4—13.8％,溶壁小球菌(Micrococcus lysodeikticus) AS 1.634对溶菌酶敏感性下降14—23％。冻结融化后移接2代测定,钝齿棒杆菌(Corynebactertum crenatum) AS 1.998 产 L-异亮氨酸,大肠埃希氏菌(Escherichia coli) AS 1.76产青霉素酰化酶酶活力,铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) AS 1．647产2-酮基-L-古龙酸,植物乳杆菌产乳酸均与冻结前相近。     

康氏木霉纤维素酶系中Cx酶多分子型的分离纯化及某些性质

从康氐木霉(Trichoderma kkoningii) 白色变异株 AS 3．4001的粗酶制剂中,获得了纤维素酶系中的一组C_x酶(C_xt C_xz C_z3 C_z4)。分离步骤包括Sephadcx G-75凝胶过滤,DEAE-Sephadex A-50离子交换层析,ConA-Sepharnse亲合层析,SE—Sephadcx C-50离子交换层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳。C_xt 与C_xt 的分子量不同而所带电荷相同,它们的分子量各自为44,500和34,000。C_xz—C_x4 的分子量相同而所带电荷不同。纯化的C_xt—C_z4“经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单带。比较它们对羧甲基纤维素钠(CMC—Na)的糖化力及液化力表明在作用方式的随机性上C_xz>C_z3>C_z1>C_x4。     

农作物秸秆发酵剂的研究

用液体、固体不同培养方式,对异常汉逊酵母（Ｈａｎｓｅｎｕｌａａｎｏｍａｌａ）ＡＳ２．３００、白地霉（Ｇｅｏｌｒｉｃｈｕｍｃａｎｄｉｄｕｍ）ＡＳ２．３６１、康宁木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｋｏｎｉｎｇｉｉ）ＴＫ—２、植物乳杆菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＬＰ—５等菌进行分别培养,然后按一定比例配成农作物秸秆发酵剂。并进行了对玉米秸秆发酵试验：在室温条件下发酵７天,添加５％发酵剂,发酵产物的粗蛋白含量提高一倍左右;添加２０％发酵剂,发     

一个嗜热嗜酸细菌的新属——硫球菌属

本文报道从酸性热泉地区分离出一株比较少见的无机化能自养型嗜热酸细菌,经鉴定是一新属新种,命名为硫球菌属(Sulfosphaerellus gen. Nov.),模式种为嗜酸热硫球菌(Sulfosphae-rellus thcrmoacidophilum sp. Nov.)。细胞球形,直径0.8一1.2μm,有类似纤毛的结构,革兰氏阴性,需气,在无机盐培养条件下,氧化元素硫至硫酸获得能量进行自营生长。生长最适温度70℃,范尉55—80℃。生长最适pH2．5,范围1．0—5．5。DNA中G+C含量为33—39mol％。并将该菌与国外近十多年来分离的硫叶菌(Sulfolobus)等7种高温嗜酸细菌作了比较,并对其命名和分类位置作了讨论。     

中国小麦雪霉叶枯病菌种的鉴定

系统研究和鉴定了产自中国陕西、青海、宁夏、四川、贵州、西藏、湖北、新疆等8个省区的31个小麦雪霉叶枯病菌菌系和1个产自捷克的菌系。结果表明,各菌系的培养性状和形态特征、尤其是环痕状的产孢细胞和具淀粉质顶环的子囊等均符合 Gerlachia nivalis (Ces.Ex Sate．)W．Gares & E．Mdll．[有性态：Monographella nivalis (Schaffn·)E·Mfill·]的鉴别特征。小麦雪霉叶桔病菌对三唑酮等8种药物比镰刀菌敏感,各菌系人工接种小麦幼苗均引起相同症状,人工接种可侵染22属55种禾本科植物。确认了该菌与欧洲、北美发生的红色雪霉病病菌为同种。因此,将中国小麦雪霉叶枯病菌定名为雪腐格氏霉[Gerlaehia nivalis(Ces．Ex Saee．)W．Gams ＆ E. Miill.]。     

乙烷氧化菌的研究

从油田土中分离得10株乙烷氧化菌。其中七株与My~obacterium lacticolum很相近,但能还原硝酸盐和利用乙烷良好生长,因此定名为Mycobacterium lacticolum var．Etha—micumo另外属于Pseudomona的两株菌和属于Bacterium的一株菌,在研究过程中丧失了氧化乙烷的能力。Mycobacterium lacticolum var．Ethanicum生长要求生长素,如尼古丁酸和稚生素B1;最适pH是7．0;最适乙烷浓度为30％。这种乙烷氧化菌能利用乙烷、丙烷和戊烷良好生长,并能微弱地利用丁烷、己烷、液体石蜡和石蜡生长,但在甲烷、庚烷、十四碳烷、烯烃和CO2及H2的混合气圈存在下不能生长。除烃类化合物外,还能利用多种有机物作为碳及能源。这种菌能利用NH4NO3,(NH4)2SO4,KNO3,蛋白腺或天门冬素作为氮源,但不利用亚硝酸盐、三乙胺和吡啶。NH4NO3是最好的氮源。     

链霉菌S01菌株几丁质酶对植物病原真菌的拮抗作用

纯化后的链霉菌S01菌株几丁质酶用环柱法在PDA平板上对杨树腐烂病菌（Valsasordida）、葡萄孢菌（Botrytissp．AS3．266）、黄瓜黑腥病菌（Cladosporiumcucumerinrm）、辣椒疫病菌（Phytophlhoracopsici）、棉花黄萎病菌（Verliilliumalbo-atrum)、立枯丝核菌（Rhizoctonasolani）等植物病原真菌及产黄青霉（Penlcillumc     

产生葡萄糖淀粉酶的红曲霉的筛选及其发酵条件的研究

筛选出了红曲霉 AS 3．976(Monascus serorubescens)和 AS 3.978(Monascus sp.)作为液体培养生产葡萄糖淀粉酶的优良菌种,并找出了适合的培养基及培养条件。在含玉米粉3％、豆饼粉1．5％(pH 4．5)的培养基申,于30--35℃培养72小时,每毫升培养液的滤液酶活力可达260单位。酶作用的最适温度为50℃,最适pH为4.5,每克干淀粉用酶量0.5毫升,糖化32％(w／w)的浓淀粉液化液,经40小时,葡萄糖值可达99以上。     

氨基多糖生物降解转化模型的建立

以Beauveria-bassiana LB₉₅₀菌作为氨基多糖降解菌,以Candidasp. LB₅₀菌作为氨基糖转化菌,建立的氨基多糖生物降解及转化模型,与纯培养比较,粘度下降比率提高23．0％,可溶性糖含量增加167.7μg／mh。二菌混合生长时呈互生关系。     

腐霉属的五个新种

自1961年开始,从我国(除台湾省以外)的土壤和罹病植物组织中分离出大量腐霉菌种,通过研究,已鉴定者约40个种。本文报告其中5个在生物分类学上的新种,即：顶生腐霉(Pythium acrogynum sp. Nov.)、孤雌腐霉(P．Amasculinum sp. Nov.)、壁合腐霉(P．Connatumsp．nov．)、昆明腐霉(P. kunmingense sp. Nov.)和中国腐霉(P. sinense sp.nov.)。     

非生长产黄青霉吸附铅的研究

本文报道非生长产黄青霉(Penicillium chrysogenum)对溶液中铅离子的吸附。菌体对铅的吸附依赣于溶液的pH值,在pH4-5范围内,其饱和吸附量(116mgPb2+／g干菌)高于活性炭及文献中所报道的蕈状芽抱仟菌(Bacillus mycoidrs),小刺青(Penicillium spinulosum)及长木链霉(Streptomyces longwoodensis)等。当pH4．5时,产黄青霉对铅的选择性高于Zn2+、Cd2+,Cu2+和As3+Cu2+、As3+的存在对铅的吸附无明显影响。Cd2+的存在使铅的吸附量有所提高．而Zn2+的存在则使之降低。在小试规模下,经本法处理过的含铅工业废水,铅含量降至1.0mg／1．以下,达到国家规定的工业废水铅含量的排放标准。     

有味耳霉的分离、培养和鉴定

在吉林市郊大豆蚜(Aphis glycines Matsumura)流行“黑死病”,经作者调查并采集标本进行分离培养,鉴定为有味耳霉(Conidiobolus osmodes Drechsler)。在虫尸上有菌丝段、接合孢子和少量的分生孢子,未见囊状体和假根。易于人工培养,在培养基上,初生分生孢子球形至倒卵形,乳突明显。次生分生孢子与初生分生孢子同形,直径23．4—41．6×23．4一39μm,易发芽,有六六六粉味。