腹腔镜下根治先天性巨结肠围手术期的护理

先天性巨肠又称结肠无神经节细胞,是小儿常见消化道先天性畸形。近年来,我院采用腹腔镜下行先天性巨结肠根治术18例,效果满意,现将护理体会报告如下。     

先天性巨结肠病结肠壁内P物质能神经的免疫电镜观察

本研究应用电镜免疫细胞化学方法,对小儿先天性巨结肠病结肠壁内含Ｐ物质（ＳＰ）神经进行了观察。结果发现：狭窄段与结肠扩张段相比较,狭窄段含ＳＰ神经元缺失,神经终末减少,含无颗粒囊泡的神经终末增多,而含小颗粒囊泡的神经终末相对较少。本研究在超微结构水平为先天性巨结肠病结肠壁内肽能神经成份的改变及其与临床症状的可能关系提供了形态学证据。     

EDNRB基因编码区点突变及多态性在浙江地区散发性先天性巨结肠症中的检测与分析

本实验应用聚合酶链反应-单链构象多态性(single strand confbrmation polymorphism analysis of polymerase chain reaction products,PCR-SSCP)和DNA直接测序技术,对75例浙江地区散发性先天性巨结肠病例EDNRB基因编码区的全部7个外显子,进行了点突变与单核苷酸多态性的检测与分析,探讨浙江地区先天性巨结肠患者EDNRB基因的突变特征,阐明EDNRB基因与散发性先天性巨结肠症发病之间可能存在的关系。结果有6例患者在第4外显子上检测到密码子277位点 CTG→CTA的置换,导致亮氨酸的同义突变(L277L),属于单核苷酸多态性,发生率为8％(6/75)。有 2例患者在第2外显子上检测到密码子185位点GTG→ATG的置换,导致缬氨酸到蛋氨酸的错义突变(V185M),此突变型未在国内外文献中报道过,认为是新的基因突变型,突变率2．7％(2/75)。研究结果表明,浙江地区先天性巨结肠群体可发生EDNRB基因的杂合性突变,提示EDNRB基因与先天性巨结肠症的发病存在一定程度的关联。     

改良乙酰胆碱酯酶染色在快速病理诊断先天性巨结肠中的应用

目的对乙酰胆碱酯酶组织化学染色方法进行改良,使染色操作更加快速和简单,以便能用于术中先天性巨结肠的快速病理诊断。方法以传统的亚铁氰化铜法为基础并进行改良,将底物碘化乙酰硫代胆碱的浓度增加10倍,高浓度的底物加快渗透组织,缩短孵育染色时间。在孵育染色后用DAB(二氨基联苯胺)处理,使阳性产物更加稳定,颜色由棕色加深为棕黑色,不容易退色,更易于观察。结果先天性巨结肠症的直肠黏膜固有层腺体之间可见增生的胆碱能纤维,乙酰胆碱酯酶阳性呈棕黑色,而正常直肠黏膜固有层腺体之间没有增生的胆碱能纤维,乙酰胆碱酯酶染色为阴性。与传统的亚铁氰化铜法相比较,本改良法染色特异性无明显差异,但孵育染色时间从原来的60~120min缩短至10~15min。结论本改良法使乙酰胆碱酯酶染色操作比传统方法更加快速和简单,结果稳定可靠,可用于手术中先天性巨结肠的快速病理诊断,对临床医生制定先天性巨结肠的治疗方案具有十分重要的意义。     

经肛门改良Soave术和经腹治疗先天性巨结肠的疗效对比研究

目的：探讨经肛门改良Soave术和经腹治疗先天性巨结肠的临床疗效。方法：对大于3岁的41例患儿（经肛门改良Soave术治疗28例,经腹治疗24例,在术后并发症和排便功能等方面进行回顾性对比分析。结果：并发症的总发生率经肛门改良Soavc术明显少于经腹。HAEC发生率低于经腹组,有统计学意义。总的排便控制和大便形态方面经肛门改良Soave术优于经腹。结论：经肛门改良Soave术治疗先天性巨结肠方法可行、安全,效果优于经腹,但是术后仍有诸多并发症,特别在排便控制方面,仍需大量的病例进行长期的随访研究评估。     

经肛门改良Soave 术和经腹治疗先天性巨结肠的疗效对比研究

目的:探讨经肛门改良Soave术和经腹治疗先天性巨结肠的临床疗效。方法:对大于3岁的41例患儿(经肛门改良Soave术治疗28例,经腹治疗24例,在术后并发症和排便功能等方面进行回顾性对比分析。结果:并发症的总发生率经肛门改良Soave术明显少于经腹,HAEC发生率低于经腹组,有统计学意义。总的排便控制和大便形态方面经肛门改良Soave术优于经腹。结论:经肛门改良Soave术治疗先天性巨结肠方法可行、安全,效果优于经腹,但是术后仍有诸多并发症,特别在排便控制方面,仍需大量的病例进行长期的随访研究评估。     

加速康复外科理念辅助治疗小婴儿先天性巨结肠的有效性和安全性研究

目的:探讨加速康复外科(Enhanced recovery after surgery,ERAS)理念用于治疗小婴儿先天性巨结肠(Hirschsprung's,HSCR)的临床疗效和安全性。方法:选择2016年01月至2017年12月在我院新生儿外科接受手术治疗并临床病理确诊的79例HSCR患儿并将其分为对照组和ERAS组。对照组26例给予经腹巨结肠根治术,ERAS组44例入院后据患儿病情进行宣教ERAS,再采用腹腔镜巨结肠根治术。比较两组手术时间、术后肠功能恢复时间、留置管道情况、平均住院日、住院费用、血清C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原、白介素-6(Interleukin,IL-6)、皮质醇水平的变化及围手术期并发症的发生情况。结果:ERAS组手术时间、术中出血量、肠功能恢复时间、术前平均住院天数、术后平均住院天数、平均住院天数、平均费用、留置胃管时间、留置尿管时间均显著短于对照组。术后,ERAS组血清CRP、降钙素原、IL-6、皮质醇水平均明显低于对照组。ERAS组术中并发症发生率显著低于对照组(2.27%vs. 23.08,P0.05)。结论:加速康复外科理念辅助治疗小婴儿先天性巨结肠可促进患者术后病情恢复,减少患者医疗费用并提高治疗安全性。     

先天性巨结肠病NOS阳性神经和VIP能神经的异常改变──酶组织化学与免疫组织化学联合法的研究

本文应用还原型辅酶Ⅱ（ＮＡＤＰＨ－Ｏ）－黄递酶组织化学和血管活性肠肽（ＶＩＰ）的免疫组织化学联合染色法,对１０例先天性巨结肠病扩张段和狭窄段结肠及４例“正常对照”结肠进行观察,结果发现：（１）狭窄段结肠壁丛内均缺失含一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和ＶＩＰ神经元胞体。（２）狭窄段结肠肌层内ＮＯＳ和ＶＩＰ阳性纤维比“正常”结肠明显减少,酶活性或免疫反应性弱。结果表明,二种神经在病变肠段痉挛狭窄的神经病理机制诸因素中起重要作用。     

腹腔镜下改良Soave术对先天性巨结肠患儿肛门功能、肠道菌群及生活质量的影响

摘要 目的：探讨腹腔镜下改良Soave术对先天性巨结肠患儿肛门功能、肠道菌群及生活质量的影响。方法：选取2019年5月~2022年3月期间本院接收的先天性巨结肠患儿68例,根据手术方案的不同将患儿分为常规组（常规经腹腔镜辅助下Soave术,32例）和改良组（腹腔镜下改良Soave术,36例）,比较两组临床指标、肛门功能、肠道菌群、生活质量的变化及并发症发生情况。结果：与常规组比较,改良组手术时间、术后肠蠕动时间、住院时间较短,术中出血量较少（P<0.05）。改良组的优良率高于常规组（P<0.05）。改良组术后3个月健康生活量表简表（SF-36）各维度评分高于常规组（P<0.05）。改良组术后3个月双歧杆菌、乳酸杆菌、粪肠球菌高于常规组（P<0.05）,大肠杆菌低于常规组（P<0.05）。改良组的中期并发症发生率、短期并发症发生率低于常规组（P<0.05）。结论：与常规经腹腔镜辅助下Soave术相比,先天性巨结肠患儿采用腹腔镜下改良Soave术治疗,在改善肛门功能、肠道菌群、生活质量、临床指标、降低并发症发生率等方面效果显著,临床应用价值较高。     

中国人先天性巨结肠RET基因突变特征研究

为了研究中国人先天性巨结肠(HD)RET基因突变特征,从分子水平探讨先天性巨结肠症(HD)的发病机理,揭示中国人群HD与RET基因突变的关系。我们应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)-DNA测序方法,对50例HD患儿和30例无便秘正常对照者,进行RET基因第13外显子突变筛查,并对第13外显子突变阳性患儿家系作研究。结果发现在50例HD患儿中,有7例第13外显子扩增片段在SSCP分析时出现泳动变位。经DNA测序证实,有3种点突变类型(错义、同义和移码),第13外显子突变率为14%(7/50)。在7例第13外显子突变的患儿中,发现2例患儿的父亲存在与其子相同的突变。实验表明中国先天性巨结肠人群存在着RET基因突变,且以杂和性点突变为主,HD具有一定的遗传性。     

中国人先天性巨结肠RET基因突变特征研究

为了研究中国人先天性巨结肠(HD)RET基因突变特征,从分子水平探讨先天性巨结肠症(HD)的发病机理,揭示中国人群HD与RET基因突变的关系。我们应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR—SSCP)-DNA测序方法,对50例HD患儿和30例无便秘正常对照者,进行RET基因第13外显子突变筛查,并对第13外显子突变阳性患儿家系作研究。结果发现在50例HD患儿中,有7例第13外显子扩增片段在SSCP分析时出现泳动变位。经DNA测序证实,有3种点突变类型(错义、同义和移码),第13外显子突变率为14％(7／50)。在7例第13外显子突变的患儿中,发现2例患儿的父亲存在与其子相同的突变。实验表明中国先天性巨结肠人群存在着RET基因突变,且以杂和性点突变为主,HD具有一定的遗传性。     

人体胚胎发育概况与新进展(五)——先天性畸形的发生与预防

人体胚胎在发育过程中受某些不利因素的影响而导致胎儿外形或内部结构的异常,称为先天性畸形。先天性畸形的发生率,可因检查方法、受检婴幼儿的年龄、种族和地区等条件的差异而有很大出入,但国际上一般认为先天性畸形的发生率为2.7％。早期流产的胚胎,畸形率可达50％,围产期胚儿或婴儿死亡的约有20％属于先天性畸形。当前由于环境污染日趋严重,畸形率有上升趋势。研究致畸因子的类型和作用机制,以及如何预防畸形的发生,做到优生优育,已是现代医学主要问题之一,而我国对这个问题更应高度重视。     

皮纹嵴图型与先天畸形

由于保健工作的改进和医学科学的进步,传染病的发病率和死亡率已大为下降,先天性畸形的发病率和死亡率却相对上升。以目前英国为例,儿童死于先天性畸形者已超过感染性疾病,达病死儿童全数的1/4。此外,这些患儿即使在童年未死,也往往会有终生的残疾畸形,甚至还有将疾病传给后代的危险。所以,防治先天性畸形就愈来愈显得重要起来。     

双向凝胶电泳在先天性肛门直肠畸形中的初步应用

目的：寻找先天性肛门直肠畸形患儿直肠末端组织中异常表达的蛋白质。方法：通过二维凝胶电泳分离先天性肛门直肠畸形患儿直肠末端组织及正常新生儿直肠末端组织,用Image Master2D Platium6．0软件比较电泳图谱中的异常蛋白质点。结果：筛选出19个表达差异的蛋白质点,其中有12个蛋白质点表达上调,7个蛋白质点表达下调,差异具有统计学意义。结论：先天性肛门直肠畸形可以导致血清中多种蛋白的异常表达。这些差异表达的蛋白可以为先天性肛门直肠畸形的进一步研究提供了依据。     

EMA3C/SEMA3D基因错义突变对蛋白稳定性和受体亲合力的影响

目的：明确先天性巨结肠患者携带的5 个基因错义突变对Semaphorin 3（Sema3）蛋白自身稳定性和受 体亲合力的影响作用。方法：构建Sema3-Neuropilin-Plexin 配体-受体复合物蛋白质模型,对全部5个错义突变进行定位,通过计 算标准能量功能赋值（驻驻G）和复合物界面值（驻I_sc）预测突变对Sema3 的影响作用。将野生型和突变型AP-tagged Sema3 质粒分 别转染HEK293T 细胞,72 h后收集含有融合蛋白的细胞培养液上清并与分别表达Neuropilin 1（Nrp-1）或Neuropilin 2（Nrp-2）的 COS-7 细胞孵育,洗脱未结合的蛋白后加入碱性磷酸酶底物显色拍片,或提取细胞总蛋白,利用融合蛋白N- 末端含有的碱性磷 酸酶在底物PNPP 存在时可以发生颜色变化的特性,对与受体结合的野生型和突变型AP-Sema3 蛋白进行定量。结果：5 个错义突 变中的4 个都会不同程度地影响相应Semaphorin 3蛋白与其受体Neuropilin 的结合（与Nrp-1 的结合：SEMA3C S329G,V337M, SEMA3D H424Q,V457I,P615T 分别与野生型相比：1.12± 0.15,0.37± 0.03,0.56± 0.07,0.51± 0.05,0.66± 0.05;与Nrp-2 的结合： SEMA3C S329G,V337M,SEMA3D H424Q,V457I,P615T 分别与野生型相比：1.18 ± 0.09,0.37 ± 0.03,0.76 ± 0.01,0.65 ± 0.06,0.85± 0.03,n=3,单因素方差分析,差异有统计学意义),说明它们可能通过严重影响分子通路的信号转导而妨碍蛋白功能的 正常行使。结论：先天性巨结肠患者携带的基因错义突变可不同程度影响蛋白与其受体的结合,提示 Semaphorin 3这类经典的神经元轴突导向因子在功能失常的情况下可能参与先天性巨结肠的发生。     

金双歧对先天性巨结肠患儿术后炎症因子水平及肠道微生态的影响

目的探讨金双歧对先天性巨结肠患儿术后炎症因子水平及肠道微生态的影响。方法选取2014年3月-2019年3月福建医科大学附属泉州第一医院收治的60例行先天性巨结肠手术的患儿为研究对象,将其随机分为对照组与观察组,每组各30例,对照组给予常规治疗,观察组在对照组基础上给予金双歧治疗。比较两组患儿治疗后胃肠功能恢复指标、治疗前后血清炎症因子水平、治疗前后肠道微生态结构及复杂度、药物不良反应及并发症情况。结果治疗后观察组患儿肠鸣音恢复时间及肛门排气时间均显著短于对照组(均P<0.05);治疗前两组患儿的血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平相近(均P>0.05),治疗后两组患儿的血清TNF-α、IL-8、hs-CRP水平较治疗前均显著降低(均P<0.05),且观察组显著低于对照组(均P<0.05);治疗后两组患儿肠道微生物属水平相对丰度均较治疗前改善(均P<0.05),且治疗后观察组双歧杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、拟杆菌属相对丰度高于对照组(均P<0.05),链球菌属、葡萄球菌属、梭菌属、沙门菌、鲍曼不动杆菌、瓦氏菌属、其他属相对丰度均低于对照组(均P<0.05),治疗后两组肠道微生态Chao1指数及Shannon指数均升高(均P<0.05),且观察组均高于对照组(均P<0.05);两组治疗期间的药物不良反应发生率及并发症发生率均相近(均P>0.05)。结论先天性巨结肠患儿术后服用金双歧有助于胃肠功能恢复,减轻炎症反应,改善肠道微生态结构及复杂度,安全性好。     

SEMA3C/SEMA3D基因错义突变对蛋白稳定性和受体亲合力的影响

目的:明确先天性巨结肠患者携带的5个SEMA3C/SEMA3D基因错义突变对Semaphorin 3(Sema3)蛋白自身稳定性和受体亲合力的影响作用。方法:构建Sema3-Neuropilin-Plexin配体-受体复合物蛋白质模型,对全部5个错义突变进行定位,通过计算标准能量功能赋值(△△G)和复合物界面值(△I_sc)预测突变对Sema3的影响作用。将野生型和突变型AP-tagged Sema3质粒分别转染HEK293T细胞,72 h后收集含有融合蛋白的细胞培养液上清并与分别表达Neuropilin 1(Nrp-1)或Neuropilin 2(Nrp-2)的COS-7细胞孵育,洗脱未结合的蛋白后加入碱性磷酸酶底物显色拍片,或提取细胞总蛋白,利用融合蛋白N-末端含有的碱性磷酸酶在底物PNPP存在时可以发生颜色变化的特性,对与受体结合的野生型和突变型AP-Sema3蛋白进行定量。结果:5个错义突变中的4个都会不同程度地影响相应Semaphorin 3蛋白与其受体Neuropilin的结合(与Nrp-1的结合:SEMA3C S329G,V337M,SEMA3D H424Q,V457I,P615T分别与野生型相比:1.12±0.15,0.37±0.03,0.56±0.07,0.51±0.05,0.66±0.05;与Nrp-2的结合:SEMA3C S329G,V337M,SEMA3D H424Q,V457I,P615T分别与野生型相比:1.18±0.09,0.37±0.03,0.76±0.01,0.65±0.06,0.85±0.03,n=3,单因素方差分析,差异有统计学意义),说明它们可能通过严重影响分子通路的信号转导而妨碍蛋白功能的正常行使。结论:先天性巨结肠患者携带的SEMA3C/SEMA3D基因错义突变可不同程度影响蛋白与其受体的结合,提示Semaphorin 3这类经典的神经元轴突导向因子在功能失常的情况下可能参与先天性巨结肠的发生。     

腹腔镜辅助下经肛门先天巨结肠根治术的护理

介绍腹腔镜巨结肠术后的基本护理方法及术后护理经验;探讨并发症的防治。     

小鼠EDNRB基因启动子生物信息学分析

EDNRB/EDN3/ECE-1信号传导通路在胚胎发育期神经嵴细胞分化、迁移、发育为神经节细胞的过程中起到关键作用。采用进化足迹法,利用生物信息学在线软件分析先天性巨结肠相关EDNRB基因启动子序列,结果显示:小鼠EDNRB基因定位于14号染色体,编码442个氨基酸,分子量为:49430Da,转录起始点300bp左右可能为启动子区域,启动子区域包含长度为1473bp的CpG岛,存在两段保守序列,人类和小鼠保守区域内含有33个共同的转录因子结合位点。     

先天性小耳畸形手术治疗的研究进展

先天性小耳畸形是发病率较高的头面部畸形之一,常为耳廓及中耳腔同时存在,内耳发育不良相对少见,这一疾病所致的缺陷不仅影响到患者的容貌,更重要的是导致患者听觉功能的障碍,严重影响到患者的日常工作学习和生活。部分患者还伴有或多或少的心理影响,这在双侧小耳畸形的患者中更多见。手术是其主要的治疗方法,要求不仅重建外形正常的耳廓,同时还拥有正常或接近正常的听力。外耳廓再造和听力重建手术不仅使先天性小耳畸形患者的耳部外观明显改善,还能使其听觉功能进一步提高。本文主要综述了先天性小耳畸形的病因和流行病学、分类、手术时机和方式的选择、听力重建、耳廓再造的方法及组织工程学耳再造技术,重点介绍了耳廓再造材料的选择及手术注意点,以期为先天性小耳畸形的临床治疗提供更多理论依据。