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1.
目的研究正常和肝病患者血液中圆球体样微生物的生物学特性,初步确定纳米细菌与该种可滤过物的关系。方法将正常人和肝病患者培养阴性的血培养物进行细菌L型、穿菌和厌氧菌培养。同时取沉淀用透射电镜观察。L型培养液用0.45μm和0.22μm滤器过滤,接种RPMI 1640培养基,细胞培养条件下培养45d,用鼠抗纳米细菌单克隆抗体8D10免疫组化和钙盐染色进行纳米细菌鉴定。血浆纳米细菌培养阳性者12000×g离心后,进行普通和L型细菌培养。结果36/39患者和60/60健康对照血培养液中呈现类似于L型的巨型体、圆球体、原生小体的不明微生物。电镜观察圆球体内为电子致密样物质,周围未见细胞壁结构。电镜和光镜下可见其粘附在红细胞上或存在于红细胞内。滤过后培养物钙盐染色有5/39阳性,但纳米细菌免疫组化染色均阴性。纳米细菌阳性的培养物转种,未见一般细菌、细菌L型和上述血中“致密体”。结论血培养中致密体样微生物与纳米细菌无关,可能在维持机体正常免疫功能上具有一定意义。  相似文献   

2.
目的分离、培养与鉴定钙化胎盘中的纳米细菌,为进一步探讨纳米细菌致胎盘钙化的机制奠定基础。方法剖腹产手术收集25份钙化胎盘组织标本,通过脱矿、过滤、离心处理,用细胞培养的方法进行纳米细菌培养,观察其生长情况。运用透射电镜、扫描电镜观察培养物形态。结果 (1)培养3~4周后,对钙化组织培养标本进行观察,发现部分培养管底部出现紧贴管壁生长的白色沉淀物。(2)扫描电镜见纳米细菌为大颗粒成簇分布。(3)透射电镜可见纳米细菌为针状物的聚集体,大小不一。结论首次从钙化胎盘组织中分离培养鉴定出纳米细菌,表明其感染与胎盘钙化有关,需进一步研究其矿化机制以及所致钙化对后代的影响。  相似文献   

3.
结核分枝杆菌滤过型的初步研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的研究结核分枝杆菌滤过型的生物学特性与检测方法。方法菌阴肺结核患者的结核分枝杆菌及其L型的液体培养物经0.45μm滤膜过滤后,涂片观察细菌形态,滤液分别进行分枝杆菌及其L型培养,并采用荧光基因定量法进行结核菌DNA检测。培养物用免疫组化染色鉴定,并采用透射电镜观察。结果30例痰、血滤前、滤后FQ-PCR检测同时阳性为53%,同时阴性为13%,滤前、滤后FQ-PCR结果符合率为67%。滤过后液体培养9例涂片见少许抗酸颗粒或椭圆性球菌。透射电镜见细胞壁缺失的"致密体"样细菌和细胞壁缺如菌。结论菌阴肺结核痰及血培养物中存在结核菌滤过型,滤过型携带遗传信息并可自我复制,采用生物学方法可以对其进行检测。  相似文献   

4.
猪流行性腹泻病毒地方株LJB/03分离及培养特性   总被引:2,自引:0,他引:2  
从黑龙江省某猪场疑为病毒性腹泻的发病猪采集腹泻粪便样品,以RT-PCR法扩增出猪流行性腹泻病毒M基因后,采用细胞培养法进行病毒分离。对细胞培养分离物进行间接免疫荧光、免疫电镜观察、RT-PCR及ELISA法检验,其中间接免疫荧光试验可见培养细胞中存在明显的特异性绿色荧光;免疫电镜下可见大小符合预期、有囊膜、花瓣状的典型冠状病毒结构特征;RT-PCR检测证实存在PEDVM基因;间接ELISA检测中平均P/N比值为7.6;从而确认为分离到一株猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),命名为PEDVLJB/03株。随后,对该分离毒株的培养特性及如何提高病毒滴度进行探索。通过摸索该分离毒株的蚀斑形成条件,建立了PEDV蚀斑形成方法,并采用该方法进行病毒的蚀斑纯化,纯化得到PEDV大蚀斑克隆株和小蚀斑克隆株。对大、小两种蚀斑克隆株的病毒滴度测定结果表明,大小蚀斑克隆株细胞感染滴度相差明显。  相似文献   

5.
咽部活组织中细菌L型的检出及意义   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用病原微生物培养、电镜、组织切片细菌学检查及L型抗体免疫组化染色等方法,检测64例慢性咽炎组织的细菌L型。结果有42例培养出细菌L型,其阳性率为65.6%;它与切片革兰氏染色L型检出阳性率(67.2%)无显著性差异,P>0.05。透射电镜在慢性咽炎组织的间质及上皮细胞、巨噬细胞等细胞内见皮细菌L型;且L型抗体免疫组化染色亦证实组织中有细菌L型抗原。提示,细菌L型感染与慢性咽炎关系密切,L型侵入组织并在宿主细胞内生长的特征,可能是慢性咽炎反复发作,迁延不愈的重要原因。  相似文献   

6.
目的 以钙化的胎盘组织为例,寻求在钙化组织中分离纳米细菌的最佳方法,以便更多疑似与纳米细菌感染有关的疾病得以准确分离出纳米细菌菌株,并探讨培养和保存纳米细菌的最适宜的条件.方法 (Ⅰ)胎盘钙化组织标本分别用盐酸脱矿与超声振荡脱矿的方法分离纳米细菌,计算其分离阳性率.(2)分离出的纳米细菌分别用细胞培养箱与细菌培养箱培养1个月,利用分光光度计记录两种条件下纳米细菌浓度的变化,并描绘生长曲线.(3)分别用4、- 20与- 80℃冰箱保存钙化组织和纳米细菌,记录纳米细菌分离和复苏的生长状况并绘制生长曲线.结果 (1)钙化组织用盐酸脱矿更易分离得到纳米细菌.(2)细胞与细菌培养环境下纳米细菌的生长速度并无明显差别.(3)4℃保存钙化组织和纳米细菌对于其分离和复苏都要优于- 20℃和- 80℃.结论 对钙化组织进行盐酸脱矿可以更好的分离出纳米细菌,并且可以在细菌培养箱内培养纳米细菌,新鲜钙化组织标本和纳米细菌可以短时间保存在4℃.  相似文献   

7.
目的 对低渗条件下竹叶状灰岩内部特有的微生物进行培养,了解竹叶状灰岩内部独特的微生态环境.方法 本研究采用低渗稀释培养法、透射电镜、16S rDNA序列分析方法以及培养基改造,对竹叶状灰岩中的微生物进行了初步研究.结果 在竹叶状灰岩的培养物中发现了两段未培养细菌16S rDNA的存在;在电镜中观察到两种特殊形态的微生物;采用稀释培养法成功的培养了未培养细菌,且能传代,但经过多种培养基的分离培养,未获得未培养细菌的纯培养.结论 竹叶状灰岩内部有特殊形态的未培养细菌存在,本文为进一步研究未培养细菌特有的生存机制和代谢途径奠定了基础.  相似文献   

8.
目的探讨真菌免疫荧光染色检测支气管肺泡灌洗液(brondioalveolar lavage fluid,BALF)在肺部真菌感染诊断中的意义。方法对2019年1月至12月送检至本所的142例BALF标本进行G/GM试验及真菌免疫荧光染色检测。结果142例BALF中免疫荧光染色检测阳性为52例(占36.62%),G试验同时阳性者为49例,GM试验同时阳性者为11例。免疫荧光染色检测阳性例数与KOH湿片镜检阳性27例(占19.01%)比较检出率明显提高。结论真菌免疫荧光染色检测作为一种快速方便高效直观的真菌常规检测方法,是BALF标本中真菌检测的1个重要补充,为临床肺部真菌感染的诊断提供了1种快速检测方法。  相似文献   

9.
目的:建立一种简便、经济、高产的同步分离培养肝细胞以及肝星状细胞的方法。方法:在参照国内外方法的基础上加以改良,首先采用肝脏原位胶原酶灌注消化的方法,获得总细胞悬液,经多次低速离心分离肝细胞;再用Nycodenz作为分离介质,通过密度梯度离心法从非实质细胞中得到肝星状细胞。通过台盼蓝染色方法鉴定细胞的活力,用倒置相差显微镜、立体显微镜、CK-18、白蛋白免疫荧光细胞化学染色对培养的肝细胞形态以及功能进行检测。使用Desmin、α-SMA免疫荧光细胞化学对肝星状细胞进行鉴定。结果:成功的在体外同步分离、培养肝细胞及肝星状细胞,肝细胞产率为5-6×107/只小鼠,两只小鼠肝星状细胞产率达1×106个。细胞存活率及纯度均可达90%。肝细胞在培养24h后呈不规则铺路石样形态,此为典型的肝细胞形态,其标志分子CK-18以及白蛋白免疫荧光染色阳性。倒置相差显微镜下可见贴壁后的肝星状细胞呈典型的星形细胞形态,且其标志分子Desmin、α-SMA免疫荧光染色阳性。结论:改良的原位灌注以及分离方法可以同时分离并且培养具有高活性和功能的肝细胞和肝星状细胞。  相似文献   

10.
无血清无饲养层条件下培养小鼠胚胎干细胞   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的研究在无血清无饲养层条件下小鼠胚胎干细胞的培养方法,为最终建立无血清无饲养层培养系统打下基础。方法比较小鼠胚胎干细胞ES-S8株在无血清培养体系和有血清培养体系中的生长情况,分析ES-S8细胞克隆形成效率,测定其生长速度;然后在撤去血清和饲养层的条件下培养ES-S8细胞,进行AKP染色和表面标记物SSEA-1免疫荧光检测。结果ES-S8细胞在无血清培养条件下细胞生长速度减缓,克隆形成率降低,但AKP染色、SSEA-1免疫荧光均显阳性;在无血清无饲养层条件下ES-S8细胞培养仍能形成克隆,且AKP染色、SSEA-1免疫荧光均显阳性。结论研究表明ES-S8细胞能够在无血清无饲养层的培养条件下生长,保持其良好的未分化特性。  相似文献   

11.

Introduction

Dental calculus is a mineralized microbial dental plaque biofilm that forms throughout life by precipitation of salivary calcium salts. Successive cycles of dental plaque growth and calcification make it an unusually well-preserved, long-term record of host-microbial interaction in the archaeological record. Recent studies have confirmed the survival of authentic ancient DNA and proteins within historic and prehistoric dental calculus, making it a promising substrate for investigating oral microbiome evolution via direct measurement and comparison of modern and ancient specimens.

Objective

We present the first comprehensive characterization of the human dental calculus metabolome using a multi-platform approach.

Methods

Ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC–MS/MS) quantified 285 metabolites in modern and historic (200 years old) dental calculus, including metabolites of drug and dietary origin. A subset of historic samples was additionally analyzed by high-resolution gas chromatography–MS (GC–MS) and UPLC–MS/MS for further characterization of metabolites and lipids. Metabolite profiles of modern and historic calculus were compared to identify patterns of persistence and loss.

Results

Dipeptides, free amino acids, free nucleotides, and carbohydrates substantially decrease in abundance and ubiquity in archaeological samples, with some exceptions. Lipids generally persist, and saturated and mono-unsaturated medium and long chain fatty acids appear to be well-preserved, while metabolic derivatives related to oxidation and chemical degradation are found at higher levels in archaeological dental calculus than fresh samples.

Conclusions

The results of this study indicate that certain metabolite classes have higher potential for recovery over long time scales and may serve as appropriate targets for oral microbiome evolutionary studies.
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12.
Dental calculus has been often considered as a consequence of dietary habits, mainly related to the post Neolitic agricultural development. The presence of fossilized bacteria in the Kebara 2 teeth, aged 60.000 years BP, and the similarity of oral pathologies in pre and post Neolithic samples confirm the multifactorial etiology of oral diseases in general and dental calculus in particular.  相似文献   

13.
摘要 目的:探讨纤维桩、纳米复合树脂结合氧化锆烤瓷冠对根管治疗后后牙楔状缺损患者美学效果及牙周组织的影响。方法:选取2018年1月至2019年3月期间我院收治的103例患者作为研究对象,按修复材料的不同分为对照组(n=52,患牙62颗)和研究组(n=51,患牙63颗)。对照组给予金属桩核、金属烤瓷冠修复,研究组给予纤维桩、纳米复合树脂结合氧化锆烤瓷冠修复。修复1年后,评价两组的修复成功率和修复效果。比较两组修复前及修复后1年的牙龈指数、菌斑指数、牙周探诊深度、龈沟液量及龈沟液中碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸转氨酶(AST)水平。结果:研究组的修复成功率比对照组高(P<0.05)。研究组修复体的表面光滑率、边缘密合性、固定良好率及颜色匹配率均明显高于对照组(P<0.05)。两组治疗后牙龈指数、菌斑指数及牙周探诊深度均明显低于治疗前(P<0.05),龈沟液量及龈沟液中ALP、AST水平均明显低于治疗前(P<0.05),同时研究组治疗后牙龈指数、菌斑指数及牙周探诊深度均低于对照组(P<0.05),但两组治疗后龈沟液量及龈沟液中ALP、AST水平比较无差异(P>0.05)。结论:纤维桩、纳米复合树脂结合氧化锆烤瓷冠对根管治疗后后牙楔状缺损的修复成功率高,修复后美学效果佳,对牙周组织影响小。  相似文献   

14.
本研究通过对山东烟台市午台遗址人牙结石淀粉粒的分析,发现了来自禾本科的粟(Setaria italica L.)、小麦族(Triticeae)、壳斗科栎属(Quercus sp.)、豆科(Fabaceae)及块根块茎类植物的淀粉粒,数量较为丰富,种属来源较为多样,显示了午台遗址先民利用植物性食物资源的多样性。研究表明午台先民除了利用粟黍类农作物作为主要食物资源外,还广泛采集一些野生果类和块根块茎类作为食物的补充。本研究中发现了大遗存中没有发现的壳斗科栎属等,弥补了大遗存研究的不足。  相似文献   

15.
摘要 目的:探讨慢性牙周炎(CP)合并2型糖尿病(T2DM)患者龈沟液沉默信息调节因子-1(Sirtuin-1)、Sirtuin-6的变化和临床价值。方法:选择2020年3月至2023年3月中国人民解放军联勤保障部队第九七〇医院收治的147例CP合并T2DM患者(T2DM组),128例单纯CP患者(CP组)和121例健康体检者(对照组)。根据牙周检查结果将T2DM组患者分为轻度组(n=49)、中度组(n=67)、重度组(n=31)。检测受试者龈沟液中Sirtuin-1、Sirtuin-6水平以及外周血单核细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员3(NLRP3)信使核糖核酸(mRNA)、程序性细胞死亡相关斑点样蛋白(ASC)mRNA、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)mRNA表达,并评估牙周临床指标。Pearson分析CP合并T2DM患者龈沟液Sirtuin-1、Sirtuin-6水平与牙周临床指标、外周血单核细胞NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线分析龈沟液Sirtuin-1、Sirtuin-6诊断CP合并T2DM的价值。结果:T2DM组龈沟液Sirtuin-1、Sirtuin-6水平低于CP组和对照组(P<0.05),出血指数(SBI)、牙周袋探诊深度(PD)、牙龈指数(GI)、菌斑指数(PLI)、附着丧失(AL)、外周血单核细胞NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达高于CP组和对照组(P<0.05)。CP组龈沟液Sirtuin-1、Sirtuin-6水平低于和对照组(P<0.05),GI、SBI、PLI、PD、AL、外周血单核细胞NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达高于对照组(P<0.05)。重度组龈沟液Sirtuin-1、Sirtuin-6水平低于中度组和轻度组(P<0.05),GI、PLI、SBI、AL、PD、外周血单核细胞NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达高于中度组和轻度组(P<0.05)。中度组龈沟液Sirtuin-1、Sirtuin-6水平低于轻度组(P<0.05),GI、PLI、SBI、AL、PD、外周血单核细胞NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达高于轻度组(P<0.05)。CP合并T2DM患者龈沟液Sirtuin-1、 Sirtuin-6水平与GI、PLI、SBI、AL、PD、外周血单核细胞NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达均呈负相关(P<0.05)。龈沟液Sirtuin-1、 Sirtuin-6诊断CP合并T2DM的曲线下面积(AUC)为0.787、0.806,联合诊断AUC为0.912,高于单独诊断。结论:CP合并T2DM患者龈沟液中Sirtuin-1、Sirtuin-6水平降低,且与牙周组织破坏程度加重、NLRP3炎症小体激活有关。龈沟液Sirtuin-1联合Sirtuin-6在CP合并T2DM诊断中具有较高价值。  相似文献   

16.
T R Greene  C L Kuba  J D Irish 《HOMO》2005,56(2):119-132
This paper describes a quantitative approach to the assessment of dental calculus in human archaeological skeletal samples. The approach combines the ranked calculus scoring method described by Buikstra and Ubelaker [1994. Arkansas Archeological Survey Research Series, Arkansas Archeological Survey, Fayetteville, Arkansas] and a modified Simplified Calculus Index, utilized by dental clinicians. We recorded amounts of calculus on the buccal, lingual, and interproximal surface of all extant teeth, and generated an index for the maxillary posterior dentition, maxillary anterior dentition, mandibular posterior dentition, and mandibular anterior dentition for three skeletal samples. They include 145 Egyptian Predynastic individuals from the site of Hierakonpolis, 104 Predynastic individuals from Naqada, Egypt, and 101 Meroitic Nubians from Semna South, present-day Sudan. Mann-Whitney U tests were used to analyze differences between the sexes and among age groups at each site. The results demonstrate that the calculus indices more effectively reveal trends and differences in calculus severity than frequency data can alone. For example, at Hierakonpolis, males (18-35 years) had significantly more calculus in the maxillary posterior dentition than females, while females (50+ years) had significantly more calculus in the maxillary posterior teeth. Frequency data merely showed that 94% of both males and females had calculus. The use of calculus indices can reveal how quickly calculus accumulates with age within the dental arcade and within a sample. Moreover, better understanding of the severity and location of calculus can improve a researcher's knowledge regarding the effect of calculus on dental pathologies, such as carious lesions and periodontal disease.  相似文献   

17.
本文对河南官庄遗址两周时期人牙结石开展了淀粉粒分析,发现了数量丰富的淀粉粒以及少量植硅体。可鉴定形态的淀粉粒主要来自粟、黍、小麦、小豆等农作物以及坚果、块茎植物;植硅体中则有来自水稻颖片的双峰型植硅体。此次研究表明官庄先民食物来源广泛,包括多种农作物和采集植物,其中粟黍类农作物在食物构成中占据主要地位,而小麦所占比例很可能已仅次于粟黍。结合包括官庄遗址和周边若干遗址的浮选结果,两周时期中原腹心地区仍是北方传统的粟作农业,但农作物种植已明显多样化;与此同时,小麦在农作物体系中的重要性增加,中原地区农作物种植体系由以粟黍为主转向以小麦为主的趋势已经出现。  相似文献   

18.
目的:探讨龈沟液中骨硬化蛋白对慢性牙周炎疗效评价的临床价值。方法:选择2013年1月-2017年12月我院收治的81例慢性牙周炎患者作为观察组及同期79例牙周健康者为对照组,观察组患者给予基础治疗。观察和比较对照组和观察组治疗前及治疗后1个月、2个月的牙周临床指标、龈沟液中的骨硬化蛋白水平,并分析牙周临床指标与龈沟液骨硬化蛋白水平的相关性。结果:治疗前,观察组的菌斑指数、出血指数、牙周探诊深度、附着丧失水平及龈沟液中骨硬化蛋白水平明显高于对照组;治疗后1个月、2个月,观察组以上指标均明显低于治疗前,且治疗后2个月,观察组以上指标明显低于治疗后1个月,但附着丧失水平仍高于对照组(P均0.05),而两组的菌斑指数、出血指数、牙周探诊深度对比差异无统计学意义(P0.05)。龈沟液中骨硬化蛋白水平与菌斑指数、出血指数、牙周探诊深度、附着丧失水平呈高度正相关(r1=0.876,P10.001;r2=0.842,P10.00;r3=0.913,P10.001;r4=0.903,P10.001)。结论:慢性牙周炎患者龈沟液中骨硬化蛋白水平明显上调,并与与菌斑指数、出血指数、牙周探诊深度、附着丧失水平呈高度正相关,可作为慢性牙周炎疗效评价的参考指标。  相似文献   

19.
摘要 目的:探讨牙周炎患者正畸治疗前后龈沟液中弹性蛋白酶的变化价值,希望为早期预测患者预后提供参考。方法:2016年12月到2019年10月选择在本院就诊的牙周炎患者68例作为研究对象,所有患者都给予正畸治疗,检测正畸治疗前后弹性蛋白酶、探诊深度(probing depth,PD)、出血指数(bleeding on probing,BOP)、附着丧失(attachment loss,AL)的变化,记录患者的病情变化、判定预后并进行相关性分析、影响因素分析。结果:所有患者完成治疗,对于正畸治疗的美观、固位、稳定性均满意。治疗后1个月与治疗后3个月患者的PD、BOP、AL都低于治疗前(P<0.05),治疗后3个月也低于治疗后1个月(P<0.05)。治疗后1个月与治疗后3个月患者的龈沟液弹性蛋白酶值都低于治疗前(P<0.05),治疗后3个月也低于治疗后1个月(P<0.05)。Spearman分析显示治疗前与治疗后3个月的龈沟液弹性蛋白酶变化差值与PD、BOP、AL变化差值存在显著正相关性(P<0.05)。多因素Logistic回归显示PD、BOP、AL变化差值作为影响龈沟液弹性蛋白酶变化差值的主要因素(P<0.05)。结论:牙周炎患者正畸治疗前后龈沟液中弹性蛋白酶水平显著下降,与患者的病情变化显著相关,也是反映与预测患者预后的重要指标。  相似文献   

20.
Objective: The purpose of this study was to evaluate the prevalence and severity of periodontitis in men of 65+ years and identify demographic and lifestyle factors associated with its presence. Methods: Participants were recruited from the Osteoporotic Fractures in Men Study, a longitudinal study of risk factors for fractures in older men. Dental measures included clinical attachment loss (CAL), pocket depth (PD), calculus, plaque and bleeding on a random half‐mouth, plus a questionnaire regarding access to care, symptoms and previous diagnosis. Results: 1210 dentate men completed the dental visit. Average age was 75 years, 39% reported some graduate school education, 32% smoked 20 + pack years and 88% reported their overall health as excellent/good. In terms of periodontal health, 38% had sub‐gingival calculus, 53% gingival bleeding, 82% CAL ≥5 mm and 34% PD ≥6 mm. The prevalence of severe periodontitis was 38%. Significant demographic and lifestyle factors associated with severe periodontitis in multivariate analyses included age ≥75 (OR 1.4, 95% CI 1.1–1.7) non‐white race (OR 1.9, 95% CI 1.3–2.8), less than an annual dental visit (OR 1.5, 95% CI 1.1–2.0), and 20 + pack years (OR 2.1, 95% CI 1.6–2.7). Conclusion: A high proportion of healthy older men have evidence of periodontal destruction which could, given the growing ageing population, have a significant impact on the dental profession’s ability to provide preventive and therapeutic care. The population at highest risk of periodontitis in MrOS is older minority men who smoke and do not have annual dental visits.  相似文献   

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