用PCR-DGGE对岩原鲤×锦鲤杂交F1代进行分子鉴定

运用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,选用核基因光间受体视黄类物质结合蛋白(IRBP)作为分子标记,成功鉴定了岩原鲤Procypris rabaudi×锦鲤Cyprinus carpio的杂交F1代.DGGE胶图显示,杂交个体IRBP基因的等位基因条带分别与岩原鲤和锦鲤的IRBP基因条带相对应.对各条带切胶回收后的测序表明,岩原鲤等位基因的相似性为99.8％,锦鲤等位基因的相似性为98.8％,而杂交个体等位基因的相似性为95.8％ ～96.7％,与岩原鲤和锦鲤间基因的相似性(95.5％～96.9％)接近.这一方法将有助于鱼类的杂种鉴定和种质研究.     

中和炭疽毒素的化合物

人吸入炭疽菌Ｂａｃｉｌｌｕｓａｎｔｈｒａｃｉｓ的孢子时 ,炭疽菌便释放 3种蛋白质 ,这 3种蛋白质结合起来形成炭疽毒素 .这 3种蛋白质的组合使血压骤降 ,引起出血 ,并导致昏迷与死亡 .其中 1个蛋白质称为保护性抗原(ＰＡ) ,它与细胞表面的 1个受体相结合 ,并由酶将它粘着在结合处 .ＰＡ与受体的粘着部分称为ＰＡ6 3,它为其他 2个炭疽毒素蛋白提供停靠于细胞的位置 .这 2个炭疽毒素称为致死因子和水肿因子 .炭疽毒素一旦装配好 ,致死因子便得以进入细胞 .在致死因子进入细胞的入口处 ,其割断蛋白质而引起一连串事件的起动 ,这导致产生炭疽…     

光间受体视黄类物质结合蛋白基因(IRBP)在棉鼠亚科物种中的序列变异及其系统发育意义

以光间受体视黄类物质结合蛋白基因(IRBP)为研究对象,从GenBank中下载了棉鼠亚科66个种的IRBP序列,分析IRBP的结构及其在棉鼠亚科的进化关系.G+C含量高于A+T,密码子第3位点的G+C含量高达61.2%,并且呈现出较低的核苷酸多样性(3.786%).IRBP在棉鼠亚科没有经历正向达尔文选择.以IRBP构建的系统发育树和以往研究的结果总体上是一致的,但由于本文样本数量的增加,发现Oryzomyini还存在第3个分支,不同于以往研究只划分了2个分支.同时系统发育树的结构表明Ichthyomyini和Sigmodontini很可能不是两个独立的族.另外和前人以细胞色素b基因构建的系统发育树相比较,树的结构总体上也是一致的.这些都表明IRBP在棉鼠亚科中有较好的应用效果,但要更好地解决此亚科存在的系统发育问题,重点在于增加用于分析的物种数量.     

胰岛素受体底物家族中的两个新成员

胰岛素受体底物蛋白参与多种激素,细胞因子的信号转导,可联系下游含ＳＨ２结构域的蛋白,它是一种极为重要的信号传递中介分子,胰岛素受体底物家族有４个成员。本文从基因结构,蛋白质结构介绍新发现的两个成员（ＩＲＳ－３,ＩＲＳ－４）的一些基本特征。     

p53的两种结合蛋白：53BP1和53BP2

ｐ５３基因是一种广谱的肿瘤抑制基因,其产物ｐ５３为一多功能的转录调节因子,可以发挥调节细胞生长、细胞凋亡和ＤＮＡ修复的作用。在人类肿瘤已发现多种ｐ５３基因的点突变,但突变不是ｐ５３蛋白质丧失功能的唯一途径。胞内蛋白可能影响其活性和功能。５３ＢＰ１和５３ＢＰ２是ｐ５３在胞浆中的两种结合蛋白。本文阐述了有关这两种蛋白质的研究进展。     

过量表达的hTR75可独立介导hTNFα的细胞毒性

利用细小ＲＮＡ 病毒属脑炎和心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）的内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）元件构建了人肿瘤坏死因子受体７５ 基因（ｈＴＲ７５） 和新霉素抗性基因（ｎｅｏＲ）的双顺反子表达载体, 通过电脉冲转染ＢＨＫ２１ 细胞, 筛选出分别和同时稳定过量表达两种ｈＴＮＦ受体的细胞株。这些细胞在ｍＲＮＡ 和蛋白质水平均可检测到ｈＴＲ７５ 的表达。利用野生型和具有两种受体选择性结合活性的ｈＴＮＦα突变体对这些细胞株进行测定, 发现过量表达的ｈＴＲ７５ 可以独立地介导ｈＴＮＦα对ＢＨＫ２１ 细胞的细胞毒性, 而ｈＴＲ５５ 的存在并不能显著增强这种作用。上述结果为进一步阐明ＴＲ７５ 的功能以及两种受体间的相互作用提供了一条新的途径。     

一种用^14C—阿特拉津测定QB蛋白的方法

Q_B蛋白是叶绿体光系统Ⅱ次级电子受体Q_B的蛋白质载体。最近的研究工作表明,光系统在Ⅱ反应中心也结合在Q_B蛋白与另一34kD蛋白质交叉形成的二聚体上。Q_B蛋白还参与电子传递的光调节。阿特拉津(atrazine)及其结构类似的一类除草剂也都可与之结合,从而抑制叶绿体电子传递     

视黄醇类结合蛋白的分类、结构及功能

视黄醇类结合蛋白(retinoids binding protein)是体内负责结合并转运维生素A的各种活性代谢物(视黄醇类)的一类蛋白质,主要包括血浆视黄醇结合蛋白(RBP)、胞内视黄醇结合蛋白(CRBP)、胞内视黄酸结合蛋白(CRABP)、胞内视黄醛结合蛋白(CRALBP)和光受体视黄醇类结合蛋白(IRBP)五大类。它们空间结构高度保守,分布广泛,功能多样,与多种疾病的发生发展关系密切。     

过量表达的hTR75可独立介绍hTNFα的细胞毒性

利用细小ＲＮＡ病毒属脑炎和心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）的内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）元件构建了人肿瘤坏死因子受体－７５基因（ｈＴＲ７５）和新霉素抗性基因（ｎｅｏ＾Ｒ）的双顺反子表达载体,通过电脉冲转染ＢＨＫ－２１细胞,筛选出分别和同时稳定过量表达两种ｈＴＮＦ受体的细胞株。这些细胞在ｍＲＮＡ和蛋白质水平均可检测到ｈＴＲ７５的表达。利用野生型和具有两种受体选择性结合活性的ｈＴＮＦα突变体对这些细胞株进行测定     

小地老虎UV视蛋白基因的克隆及序列分析

视蛋白是感光物质的重要组成成分,是动物感知周围光环境的重要途径之一。本文以小地老虎(Agrotis ypsilon)3日龄成虫为材料,利用RT-PCR和RACE末端扩增技术克隆得到小地老虎UV视蛋白基因的cDNA序列。序列分析表明,小地老虎视蛋白基因的cDNA序列1 632 bp,包括一个1 140 bp的完整开放阅读框架,编码379个氨基酸,理论蛋白分子量(Mw)41.50 ku,等电点(pI)7.56。GenBank登录号为JN185654。UV视蛋白包括7个跨膜拓扑结构和一个G蛋白偶联受体家族,第107位赖氨酸与UV视蛋白的紫外敏感性有重要关系。同源性分析显示,小地老虎UV视蛋白基因与其他昆虫的UV视蛋白基因具有较高同源性。本研究对深入探究UV视蛋白在动物夜行生活中的作用具有重要意义。     

HBVX蛋白与基因调控和肿瘤形成的关系

乙型肝炎病毒Ｘ蛋白是乙型肝炎病毒基因组的四个开读框架之一,Ｘ－ＯＲＦ编码一分子量约为１７ｋＤ,约含有１５４个氨基酸的蛋白质。实验证实ＰＸ是一种反式作用因子,能与细胞内多种与转录、基因调节有关的因子结合,广泛激活病毒和细胞的启动子,参与基因调控,与ＨＢＶ慢性感染后所形成的肝细胞肿瘤密切相关。ＰＸ本身不具有直接结合双链ＤＮＡ的能力,它主要是通过蛋白与蛋白间的相互作用来行使功能,其中包括直接与一般转录因     

螺旋-环区-螺旋蛋白质—DNA 结合蛋白的新类型

最近发现了一种特殊的蛋白质结构域,它广泛地存在于动、植物体的 DNA 结合蛋白(DBP)中.此结构称为螺旋-环区-螺旋(helix-loop-helix,HLH)结构.c-myc 基因和 MyoD 基因的蛋白质产物有此结构.在增强子结合蛋白(EBP)中也发现了 HLH 结构,如 E2A 基因的产物——E12/E47.已报道的20多种 HLH蛋白质几乎全与转录的调节和肿瘤的发生有关.     

胰岛素样生长因子结构蛋白功能及其调节机制

胰岛素样生长因子结合蛋白 (ＩＧＦＢＰ)是ＩＧＦ家族的重要成员 ,ＩＧＦ及其生物活性的调节与ＩＧＦＢＰ密切相关。ＩＧＦＢＰ还具有独立于ＩＧＦ的生物活性 ,并拥有自己的调节机制。1 .ＩＧＦＢＰ简介目前 ,已确定了 6种与ＩＧＦ有高亲和力的ＩＧＦＢＰ(ＩＧＦＢＰ1～ 6 ) ,另有 4种与ＩＧＦ有较低亲和力的ＩＧＦＢＰ(ＩＧＦＢＰ相关肽 )也有报道[1] 。ＩＧＦＢＰ1～ 6有 35%的氨基酸序列同源 ,它们都有相同的Ｎ端和Ｃ端模式 ,只是中间区不同。其中 ,前 5种与ＩＧＦ Ｉ的结合优先于与ＩＧＦ ＩＩ的结合 ,而ＩＧＦＢＰ 6与ＩＧＦ ＩＩ的亲…     

向光色素Phototropin1的细胞和亚细胞定位

向光色素 1 (ｐｈｏｔ1 )是在蓝光 (ＢＬ)下进行自我磷酸化的Ｓｅｒ/Ｔｈｒ型光受体激酶 ,它的两个保守的ｄｏｍａｉｎ分别结合着作为发色团的两个ＦＭＮ分子。它是与原生质膜 (ＰＭ)结合的 1 2 0ｋＤ的蛋白。ｐｈｏｔ 1和ｐｈｏｔ 2蛋白都是植物向光性反应的光受体 ,它们也是调节叶绿体运动、开闭气孔和快速抑制黄化芽延长生长的蓝光受体。为了解ｐｈｏｔ 1和ｐｈｏｔ 2调节这 4个反应的机理 ,有必要了解其细胞和亚细胞定位。将编码融合的ｐｈｏｔ 1和ＧＦＰ(绿色荧光蛋白 )的结构 (在内源ＰＨＯＴ1启动子控制下 )转化无ｐｈｏｔ1的拟南芥…     

腺苷转运体亲和层析分离

本文合成了一种腺苷亲和层析凝胶,并采用亲和层析法从牛脑细胞膜上分离出了几种膜上结合的腺苷结合蛋白质。这些蛋白质在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳凝胶上为单一或主要的蛋白带,分子量分别为６４ｋｄ,４５ｋｄ,３５ｋｄ。腺苷转运体抑制剂潘生丁和ＮＢＭＰＲ对６４ｋｄ蛋白与＾３ｈ－腺苷的结合抑制作用远强于腺苷受体的激动剂ＮＥＣＡ和Ｒ－ＰＩＡ;这表明６４ｋｄ蛋白为牛脑细胞膜上结合的腺苷转运体。     

脂肪酸结合蛋白的研究进展

脂脉酸结合蛋白（ＦＡＢＰ）是一族小分子细胞内蛋白质,对长链脂肪酸有很高的亲和力,能把脂肪酸从细胞膜转运到细胞内利用位点,在长链脂肪酸的代谢中起重要作用。本文就脂肪酸结合蛋白的结构、功能及其对脂肪酸代谢调节方面的研究进行了综述,并阐述了猪脂肪酸结合蛋白基因地对肌内脂肪合成的影响。     

维甲酸结合蛋白的分子可及性与该蛋白和配体相互作用的关系的研究

从蛋白质可及性分析的角度研究了ＥＲＡＢＰ与ＲＡ的相互作用模式,在原子水平和残基水平上计算了四个与维甲酸结合蛋白（ＥＲＡＢＰ）有关的分子的可及性,这四个分子是ＥＰＡ（无配体结晶生成的ＥＲＡＢＰ）,ＥＰＢ—ＲＡ（ＥＲＡＢ和配体雏甲酸ＲＡ,并对其进行分析比较。分析结果表明,ＲＡ在结合蛋白中采取β－芷香酮环向里,羧基端向外的构象形式;围绕结合部位有２４个残基;在结合配体ＲＡ时,在结合配体ＲＡ时,结合蛋白将发生构象变化,变化的结果是结合部位空穴的暴露程度增大。     

Decode公司在基因研究方面获得新突破

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 1页报道 :目前 ,Ｄｅｃｏｄｅ公司 (雷克雅未克 ,冰岛 )的遗传学家们以主要药物的研发为目标共发现了 35 0个基因 ,公司计划将这些基因同该公司已有的药物开发项目结合起来进行研究。这些基因编码Ｇ蛋白偶联受体、激酶、蛋白酶、离子通道蛋白、核受体和谷胺酰氨转移酶等多种蛋白 ,公司计划利用它们的临床遗传研究优势结合 4 0多种常见疾病的数据定位这些基因的功能。Ｄｅｃｏｄｅ公司最近另外一个重大突破是作图并定位了一个与后发性帕金森氏病 (帕金森氏病的最普遍的发病形式 …     

棉铃虫触角气味物质结合蛋白的鉴别

昆虫触角内的气味物质结合蛋白ｏｄｏｒａｎｔ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ（简称ＯＢＰ）是触角嗅觉感受器淋巴液中的一类水溶性蛋白质,能和气味物质结合。ＯＢＰ的发现可追溯到１９７０年,美国科学家Ｒｕｄｄｉｆｏａｄ根据实验,推断触角中有某种蛋白质,和嗅觉有关~（［１］）。１９８１年Ｖｏｇｔ和Ｒｉｄｄｉｆｏａｌ用标记激素证明了上述推论的正确性,把它称为外激素结合蛋白（ｐｈｅｒｏｍｏｎｅ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,缩写为ＰＢＰ）~（［２］）。１９９０年Ｂｒｅｅｒ报道了另一类ＯＢＰ──普通气味物质结合蛋白…     

Nogo与Nogo受体研究

nogo是新近发现的一种基因,编码3种蛋白质：Nogo-A、Nogo-B和Nogo-C.迄今为止,已证明它有抑制成熟中枢神经系统(CNS)神经元轴突再生及诱导细胞凋亡的作用.Nogo受体是一种糖基醇磷脂结合蛋白.对Nogo和Nogo受体的研究,对于CNS再生障碍及肿瘤的认识和治疗有重要意义.