糯米香茶中角鲨烯含量的RP-HPLC测定

建立测定糯米香茶中角鲨烯含量的RP-HPLC分析方法。采用DiamonsilTMC18色谱柱,流动相为甲醇/乙腈(60/40,v/v),流速1.2 mL/min,柱温40℃,检测波长203 nm。在该条件下角鲨烯标准品和糯米香茶中角鲨烯分离效果均良好,在0.4144～2.0720 ug范围内呈良好线性关系(R2=0.9999)。该方法精密度试验结果RSD为1.146%,角鲨烯平均回收率为100.97%,RSD为2.32%,供试液稳定性良好,符合2005版《中国药典》要求。     

GC-MS测定藻油中DHA、DPA及其他微量成分

目的：采用GC-MS法测定市售藻油中主要成分DHA、DPA及其他微量成分的含量。结果：3种市售藻油的甲酯化产物中,主要成分二十二碳六烯酸（DHA）甲酯含量为24.77～41.20%、二十二碳五烯酸（DPA）甲酯含量为4.00%～5.60%;此外,藻油的甲酯化产物中还含有19种饱和脂肪酸酯、24种不饱和脂肪酸酯,除了脂肪酸外,藻油中还含有少量的烃类、醇类和酮类物质。结论：市售复合型藻油为藻油与亚麻籽油等植物油按一定比例调和而成,且其DHA含量不满足国家标准GB 26400—2011的要求;角鲨烯和亚麻醇这两种微量成分的存在,使藻油比其他市售植物油更具保鲜和保健功能。     

HPLC法测定宁夏枸杞中法荜枝苷的含量

本文采用高效液相色谱法,建立宁夏枸杞中法荜枝苷的含量测定方法。色谱条件:Diamonsil C8柱(150mm×4.6 mm,5μm);流动相为A:乙腈-水-醋酸(5∶94.5∶0.5),B:乙腈-水-醋酸(72∶27.5∶0.5),梯度洗脱。流速:1 mL/min;柱温:30℃;检测波长:346 nm。结果表明,在0.1～10μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.9998(n=8)。法荜枝苷的平均回收率为99.1%,RSD为1.55%。该方法准确可靠,可用于测定宁夏枸杞中法荜枝苷的含量,为宁夏枸杞开发利用提供理论依据。     

西藏产两种岩白菜中岩白菜素的HPLC测定

建立测定了岩白菜中岩白菜素含量的方法.色谱柱:WatersC18柱 5μm×3.9mm×150mm ,流动相:甲醇∶水∶磷酸=20∶80∶0.1,流速为1.0mL/min,检测波长275nm,AUFS0.01,柱温为室温.结果表明,岩白菜素在0.16～0.08μg有良好线性关系,r=0.9992,平均回收率为98.14%,RSD为1.12%.本方法是测定岩白菜中岩白菜素含量的快速、简便、准确可靠的定量方法.     

反相高效液相色谱法测定升麻药材中升麻苷H-1的含量

建立升麻药材中升麻苷H-1含量测定的反相高效液相色谱分析方法。使用H&E XP ODS-A色谱柱(4.6 mm×250 mm5,μm),流动相为乙腈-水-磷酸(35∶65∶0.4),流速为1 mL/min,柱温为26℃,检测波长203nm。测得升麻苷H-1线性范围为0.95～28.5μg/mL(r=0.9999),平均回收率(n=6)为99.35%(RSD=2.79%),不同来源批次升麻药材含量测定结果表明,升麻药材中升麻苷H-1含量为0.53%～1.09%,综合分析批样品含量测定结果,建议升麻药材中含升麻苷H-1应不低于0.4%。本方法简便、准确、重复性好、专属性强,可作为升麻药材质量控制方法。     

HPLC测定姬松茸中谷胱甘肽的含量

本实验建立了HPLC法测定姬松茸中谷胱甘肽的方法,在水提条件下,用Waters RP18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),以0.1%三氟乙酸水溶液-甲醇(98∶2,v/v)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长200 nm,进样量10μL,谷胱甘肽在8 min内出峰。该方法中谷胱甘肽标准品在8~160μg/mL范围内线性良好,R2=0.9997,检出限为0.125μg/mL,加标回收率在94.18%~95.80%之间,RSD2%。本方法快速、简便、准确,灵敏度高,适合批量样品的检测与分析。     

裂殖壶藻藻油DHA对高脂饮食诱导肥胖小鼠的影响

【目的】肥胖症是一种慢性代谢类疾病,具有较高的发病率和高危后果。研究表明,n-3多不饱和脂肪酸(n-3 Polyunsaturated fatty acids,n-3 PUFAs),特别是二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)对与肥胖症相关疾病有较好的防治效果,对体内脂质代谢有重要的调节作用。探讨裂殖壶藻(Schizochytrium sp.)藻油DHA对高脂饮食诱导肥胖小鼠体重、脂肪组织重量、血脂、肝和脂肪组织病理形态和脂质代谢相关基因表达的影响。【方法】通过高脂饮食建立小鼠肥胖模型,以体重增幅15%为标准分出肥胖小鼠。试验共分五组:(1)低脂对照组;(2)高脂模型组;(3)高脂+低剂量藻油组(50 mg DHA/kg);(4)高脂+中剂量藻油组(100 mg DHA/kg);(5)高脂+高剂量藻油组(200 mg DHA/kg)。其中,藻油处理组灌服相应剂量藻油,低脂对照组和高脂模型组灌胃同等体积玉米油。处理9周后,腹腔麻醉,摘眼球取血并分离血清,测血清中甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白含量;之后处死小鼠,分离附睾、肾周和肠系膜脂肪组织及肝脏,称湿重;附睾脂肪和肝组织切片进行HE染色,观察病理变化情况;利用RT-PCR检测附睾脂肪组织中激素敏感脂酶(Hormone sensitive lipase,HSL)基因的m RNA表达情况。【结果】藻油处理组小鼠体重没有显著下降,但是腹部脂肪重量显著降低、脂肪细胞体积明显小于高脂模型组;同时血清中甘油三酯、胆固醇含量显著降低,肝组织异位脂肪堆积明显减少;脂肪组织中HSL基因的表达水平显著提高。【结论】裂殖壶藻藻油DHA处理能显著降低高脂饮食导致的小鼠腹部脂肪积累并改善血脂,可能有利于肥胖症的防治。     

高效液相色谱法测定氟伐他汀钠缓释片的含量

建立高效液相色谱法测定含量和含量均匀度的方法。采用SHIMADZU CLC-ODS色谱柱,以乙睛-水-冰醋酸(380∶120∶0.2)为流动相,234nm波长处检测。氟伐他汀钠在41μg/mL~328μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为100.5%,相对标准偏差(relative standaral deviation,RSD)0.5%(n=9)。本方法具有简单,柱效高,经济等优点。     

HPLC测定海风藤药材中海风藤酮的含量

建立了HPLC法测定海风藤药材中海风藤酮含量的方法,采用Hypersil ODS2柱(4.6×250mm,5μm),甲醇-水(70∶30)为流动相,流速为1.0mL/min;检测波长280nm;海风藤酮在116~1160μg/mL范围内线性关系良好,回归方程为Y=4561.1X-10927(r=0.9994),平均回收率为99.83%,RSD=1.08%(n=6)。用本方法测得海风藤酮在风藤、石南藤和山蒟中的含量分别为0.25%,0.0057%和0.0014%。     

海南黄灯笼椒与不同品种辣椒的辣椒素含量测定

目的:建立HPLC法测定海南黄灯笼椒等辣椒的辣椒素含量。方法:采用Diamonsil C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比70∶30),流速为1.0 mL/min,检测波长为230 nm,柱温:30℃,外标法定量。结果:辣椒素的线性关系良好,线性范围2.0μg/mL～20.0μg/mL,r=0.9990;精密度、稳定性实验的RSD均低于2%;平均回收率100.8%(n=9),RSD=1.87%。对海南黄灯笼椒等7个品种辣椒的辣椒素含量进行测定,海南黄灯笼椒的辣椒素含量最高。结论:该方法简便快捷,可用于辣椒中辣椒素含量的测定;海南黄灯笼椒辣椒素含量最高,这些信息可为海南黄灯笼辣椒的研究开发提供参考。     

发酵法生产紫杉醇的检测分析

目的:采用高效液相色谱法对发酵液中的紫杉醇进行测定。方法:将紫杉醇产生菌发酵产物经乙酸乙酯萃取得测定样品,高效液相色谱分析方法为苯基柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-甲醇-水(36∶4∶60),流速1mL/min,检测波长227nm,进样体积20μL,柱温室温。结果:紫杉醇与干扰物可达到基线分离,在2.2～110μg/mL范围内,紫杉醇的峰面积与浓度线性关系良好,相关系数0.9996,平均回收率为99.55%,RSD为0.60%。结论:与使用C18柱色谱条件相比,该分析方法灵敏度高,不需要复杂的样品前处理过程,仪器配置不复杂、操作方便、准确性高,可有效地检测发酵液中紫杉醇的含量。     

川楝子中香草酸含量测定研究

本实验采用薄层色谱法对川楝子中香草酸、异香草酸进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对川楝子中香草酸进行含量测定。色谱柱:Hypersil BDS C18(250 mm×4.60 mm,5μm),柱温:30℃,流动相:甲醇∶水∶冰乙酸=25∶75∶0.5,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:260 nm。最终,定性鉴别斑点清晰。结果表明香草酸含量在1.022～16.352μg范围内,进样量与峰面积呈良好线性关系,相关系数r=0.9998;香草酸的平均回收率为102.45%,RSD=1.22%(n=6)。     

高效液相色谱测定发酵液中1，3－二羟基丙酮（DHA）方法的建立

摘要：本文建立了简单且准确的测定1,3-二羟基丙酮（DHA）的高效液相色谱（HPLC）方法。以Alltima C18（5μm,250×4.6mm）为分离柱,5％甲醇水溶液（0.05％H3PO4调pH至3.0）,流速为1mL/min,用紫外检测器在200nm处检测DHA。结果测得DHA标准样品的保留时间为6.2min,并测得DHA的线性范围为0.1～10.0 g/L。用HPLC法测得以甘油为底物发酵产DHA发酵液中DHA含量为6.2 g/L。并证明高效液相色谱法可有效应用于产DHA发酵过程中产物的检测。     

高效液相色谱法测定黄瓜皮中绿原酸含量

目的:建立高效液相色谱法测定黄瓜皮中绿原酸含量的方法.方法:采用Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(150 ×4.6 nm,5 μm);流动相:甲醇- 0.4%磷酸溶液(25∶75);流速:1.0 ml·min-1;检测波长:326nm;柱温:30℃.结果:绿原酸的线性范围为0.0111～0.1332 ...     

高速逆流色谱分离制备川西獐牙菜中两种苷类化合物

采用高速逆流色谱从川西獐牙菜中分离制备了两种高纯度苷类化合物.以正丁醇-氯仿-甲醇-水(3.4∶8∶5∶6,v/v)为溶剂系统,主机转速为800 rpm,流速:O～210 min,1.5mL/min;210 ～360m in,2.5 mL/min,检测波长254 nm的条件下进行分离制备,在360 min内从100 mg样品中一步分离制备得到1-O-樱草糖-3,7,8-三甲氧基(口山)酮(Ⅰ,11 mg)和异荭草苷(Ⅱ,24 mg).经HPLC检测,两个化合物的纯度均在99％以上,结构由UV、1H和13C NMR鉴定.     

Effects of essential fatty acids and N and P-limited algae on the growth rate of tropical cladocerans

SUMMARY 1. In this study, the effects of nutrient (N and P) deficiency and the importance of essential polyunsaturated fatty acids (PUFA) [eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA)] to tropical cladocerans, growth and reproduction were determined in a growth bioassay.
2. The animals were fed N/P-sufficient, N-deficient and P-deficient algae, and also N and P-deficient algae supplemented with fish oil emulsions rich in EPA and DHA.
3. Cladocerans showed different responses to nutrient-deficient algae and also to supplements of fish oil emulsions. Moina micrura was most sensitive to P-deficient alga and, surprisingly, grew better and produced more eggs in N-deficient alga than in N/P sufficient alga. Ceriodaphnia cornuta was less sensitive, growing well in both N and P-deficient algae. This species, however, had a lower clutch size in N-deficient alga. On the other hand, Daphnia gessneri was the most sensitive to mineral limitation, showing decreased growth and clutch size in both nutrient-deficient algae.
4. The PUFA supplements to nutrient-deficient algae increased growth rates only for M. micrura and C. cornuta , suggesting that these fatty acids are important food requirements for these species.     

HPLC-ELSD法测定家桑野桑植株中1-脱氧野尻霉素的含量

采用HPLC-ELSD法对桑植株各部位所含的1-脱氧野尻霉素(DNJ)进行了含量测定,使用TSKgel Am-ide-80(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为:乙腈-水(84∶16,6.5 mM醋酸铵),流速为1.00 mL/min,柱温:30℃,线性范围为0.505μg～20.2μg(r=0.9991,n=6),平均回收率为94.95%(n=5),RSD=1.98。测定结果表明,野桑叶、嫩枝和根皮部位的DNJ含量较高,而家桑的叶、枝皮和根皮中含量较高。本方法准确度高、重现性好,能快速检测桑树资源及类似植物和相关产品中1-脱氧野尻霉素的含量。     

ω-3多不饱和脂肪酸抗肿瘤新途径——抑制具核梭杆菌黏附宿主细胞

【背景】大量文献报道ω-3多不饱和脂肪酸尤其是二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)与二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA)具有抗肿瘤作用,但是其抗肿瘤机制还不够完善。【目的】探究ω-3多不饱和脂肪酸、具核梭杆菌以及结直肠癌三者之间的关联。【方法】在检测二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、α-亚麻酸(α-Linolenic Acid,ALA)等ω-3多不饱和脂肪酸对人结直肠腺癌细胞Caco-2、正常结肠上皮细胞NCM460生长影响的基础上,检测DHA等3种多不饱和脂肪酸对具核梭杆菌黏附人体细胞以及Fap2、FadA、RadD等具核梭杆菌毒力关键基因表达的影响。【结果】30μg/mL的DHA、EPA、ALA对Caco-2生长抑制分别为9.09%、4.95%、7.52%,而对NCM460生长抑制达31.15%、25.48%、29.11%,而且相关抑制作用仅具有浓度依赖性而无时间依赖性。经30μg/mL的DHA、EPA、ALA预处理的具核梭杆菌黏附Caco-2细胞的能力分别下降81.04%(P=0)、93.63%(P=0)和68.63%(P=0);而共培养时加入DHA、EPA、ALA对具核梭杆菌黏附Caco-2细胞的能力没有显著影响。同时,30μg/mLDHA处理导致F.nucleatum的Fap2基因显著下降10.22%(P=0.027);30μg/mL EPA处理导致FadA、Fap2基因分别显著下降23.49%(P=0)、15.09%(P=0.003);30μg/mL ALA处理导致FadA基因显著下降26.75%(P=0.012)。【结论】综合上述实验结果以及DHA、EPA、ALA仅能短时间抑制具核梭杆菌生长等文献报道,我们认为,DHA、EPA等ω-3多不饱和脂肪酸并非简单地直接杀伤或抑制肿瘤细胞和F.nucleatum;抑制FadA、Fap2等黏附相关基因表达,降低F.nucleatum黏附宿主细胞能力是其抗肿瘤作用的关键组成部分。ω-3多不饱和脂肪酸等活性物质对F.nucleatum等在结直肠肿瘤发生、发展中发挥重要作用的肠道细菌的影响与机制应深入开展研究。     

Development and validation of a high-performance liquid chromatography-mass spectroscopy assay for determination of artesunate and dihydroartemisinin in human plasma

A sensitive method has been developed and validated for the determination of artesunate and its active metabolite dihydroartemisinin (DHA) in human plasma using artemisinin as an internal standard. Solid phase extraction (SPE) using Oasis HLB extraction cartridges was used for sample preparation and analysis was performed on a Shimadzu LCMS-2010 in single ion monitoring positive mode using atmospheric pressure chemical ionization (APCI) as an interface. Positive ions were measured using extracted ion chromatogram mode. The extracted ion for artesunate, alpha- and beta-DHA was m/z 221 and for artemisinin was m/z 283. Chromatography was carried out using a Synergi Max-RP, 4 mu, 75 mm x 4.6 mm column using glacial acetic acid 0.1%, acetonitrile and methanol mixture (38:46.5:15.5) as a mobile phase delivered at a flow rate of 0.5 mL/min. The retention times of artesunate, alpha- and beta-DHA and artemisinin were 17.4, 11.8, 18.7 and 13.4 min, respectively, with a total run time of 21 min. The assay was linear over the range 1-3000 ng/mL for artesunate and DHA. The analysis of quality control samples for artesunate 50, 300, 1300 and 2600 ng/mL demonstrated excellent precision with relative standard deviation of 14.3, 11.3, 7.5 and 12.1%, respectively (n=5). Recoveries at concentration of 50, 300, 1300 and 2600 ng/mL were 75, 94.5, 74.3 and 75.5%, respectively; similar results were obtained for precision and recovery of DHA. This liquid chromatography-mass spectroscopy (LC-MS) method for the determination of artesunate and DHA in human plasma has superior specification for sensitivity, sample throughput and robustness than previous methods and can reliably quantitate concentrations of both (artesunate and DHA) compounds as low as 1 ng/mL.     

α-亚麻酸对高脂模型大鼠组织脂肪酸代谢的影响

研究不同ALA含量油脂对高脂模型大鼠组织脂肪酸代谢的影响.60只雄性Wistar大鼠分为正常组、高脂组、花生油组、13％、27％和55％ ALA含量油脂组,除正常组和高脂组外,其余各组在饲喂高脂饲料的同时采用灌胃方式连续给予2 mL/kg.bw剂量的受试油.试验6周后分别测定大鼠各组织脂肪酸组成.结果表明,高脂饮食能够降低大鼠各组织n-3脂肪酸含量,但摄入不同ALA油脂可显著增加组织n-3脂肪酸含量,并具有一定的剂量效应关系;但ALA及其代谢产物EPA、DPA和DHA的累积具有组织特异性,其中肾和心组织中ALA累积高于血浆、脑及肝组织,肝和脑组织中EPA和DPA含量增加较显著,而肾和心组织中EPA含量不变,各组织DHA含量增加不显著.不同ALA油脂组C18:3(n-6)和C20:3 (n-6)差异不显著,但与花生油组相比,其血浆、脑和肾组织C20:4含量显著降低.因此,富含ALA含量的油脂能够增加组织中ALA及其代谢产物在组织中的含量,提高其在脑组织中的分布比例,这可能是ALA具有心血管保护作用和促进脑生长发育的作用机制之一.