双歧杆菌及其WPG对S180荷瘤小鼠免疫调节和抑瘤的作用研究

目的 通过观察双歧杆菌及其细胞壁肽多糖（Cell Wall Preparation,whole peptidoglycon,WPG)对S180荷瘤小鼠抑瘤作用及在体内外对IL－6和TNF－α生态的影响,探讨双歧杆菌及其WOG的免疫调节和抑瘤作用机制。方法 采用经驯化而具有一定耐氧能力的两歧双歧杆菌C149株及其WPG腹腔免疫S180荷瘤小鼠,应用放射免疫检测小鼠外周血中的IL－6和TNF－α的含量,同时在体外观察小鼠腹腔巨噬细胞产生IL－6和TNF－α的影响。结果 双歧杆菌及其WPG在体内外对IL－6和TNF－α的生成有明显的促进作用,对S180荷瘤小鼠均有明显抑瘤作用。结论 双歧杆菌及其WPG可能通过刺激小鼠的巨噬细胞产生一些免疫活性因子而间接发挥抑瘤作用。     

丙酸杆菌细胞壁骨架(P—CWS)对小鼠肺癌抗瘤效应及其机制初步研究

本文研究了P—CWS对小鼠肺腺癌的抗瘤效应,并通过Winn试验及一系列Mφ细胞毒功能的检测,对P—CWS的抗癌机制进行了初步研究。结果表明,P—CWS对小鼠肺腺癌的发生、发展及肺部转移均具有明显的抑制效应;经P—CWS激活的小鼠腹腔渗出细胞能抑制肿瘤的发生,且杀瘤活性明显增强,体外研究发现,P—CWS为一有效的Mφ活化因子,可使Mφ的吞噬、Mφ介导的抗体依赖性细胞毒功能及增殖抑制功能明显增强。     

益气补肾方药对化疗荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的　探讨益气补肾方药 (由金匮肾气方加味人参、黄芪组成 ,以下均称方药 ,TS)对环磷酰胺 (CY)处理的荷H2 2 瘤小鼠非特异免疫功能的影响。方法　用CY处理荷H2 2 瘤小鼠 ,建立免疫力低下动物模型。用乳酸脱氢酶 (LDH)释放法分别检测NK细胞、巨噬细胞 (M)的活性 ,用RT PCR法检测白细胞介素 12 (IL 12 )mRNA在脾脏细胞中的表达。结果　TS CY组小鼠吸光度A值为 1 332± 0 5 10 ,明显高于CY组小鼠 (P <0 0 1)。TS CY组小鼠A值为 1 12 9± 0 2 80 ,明显高于CY组小鼠 (P <0 0 1)。此方药能明显提高CY所致免疫力低下小鼠NK细胞、M的活性 ,增加IL 12在脾细胞中的表达。结论　该方药可以明显提高环磷酰胺所致免疫力低下荷瘤小鼠的非特异免疫功能。     

假单胞菌菌苗免疫调节和抑瘤活性的实验研究

应用假单胞菌菌苗(DLPV)皮下注射来调节荷瘤小鼠的免疫功能.结果发现DLPV能解除小鼠荷瘤状态所抑制的自然杀伤细胞的细胞毒活性以及脾脏单个核细胞的增殖活力;同时发现,DLPV能够显著提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的细胞毒活性.其结果,经DLPV治疗的荷瘤小鼠,其体内的移植瘤的生长受到明显抑制(肿瘤生长抑制率达到41.35%).通过测定血清和瘤体中谷胱甘肽-硫转移酶(GST)和γ-谷氨酰转移酶(γGT)的活性,也证实了DLPV的抑制作用.     

青春型双歧杆菌生态制品对小鼠肝癌抑制作用的初步研究

本文观察了青春型双歧杆菌(Bif.a)对小鼠肝癌移植瘤的抑制作用。结果发现,青春型双歧杆菌在瘤细胞移植前或移植后应用均显示了抑制肿瘤生长的作用。将青春型双歧杆菌注入肤腔可激活肤腔巨噬细胞,提高其吞噬功能和非特异性酯酶活性,而加入体外培养的小鼠肝癌细胞未显示有杀伤瘤细胞作用。认为青春型双歧杆菌的抑瘤作用可能是该菌刺激了宿主的免疫活性细胞杀伤了瘤细胞,而非直接杀伤作用。     

发酵灵芝菌粉抑制小鼠肿瘤及对正常小鼠免疫功能影响的研究

研究了发酵灵芝菌粉对接种S-180瘤细胞后的实验小鼠肿瘤的抑制作用、发酵灵芝菌粉对正常的实验小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力以及脾脏自然杀伤细胞活性的影响,结果表明发酵灵芝菌粉对小鼠移植性肿瘤的生长有明显的抑制作用,但对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力以及脾脏自然杀伤细胞的活性无明显的免疫促进作用。     

双歧杆菌和乳杆菌在诱发抗肿瘤免疫中的作用

双歧杆菌和乳杆菌给封闭群昆明小鼠腹腔注射,在体内激活后,胸腺细胞和脾细胞对ＣｏｎＡ刺激的增殖反应,脾贴附性细胞对ＹＡＣ－１,Ｌ９２９的细胞毒作用,以及脾贴附性细胞产生对上述二株瘤细胞的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的活性都比对照动物明显增强。结果提示短双歧杆菌和嗜酸性乳杆菌给小鼠腹腔注射后,通过激活脾脏淋巴细胞和贴附性细胞（巨噬细胞）所介导的免疫功能而明显地增强宿主的抗肿瘤活性。     

益气补肾方药对肾虚小鼠细胞因子IL-1、IL-2及IL-12基因表达的影响

目的　探讨益气补肾中药对醋酸可的松致肾虚小鼠腹腔巨噬细胞IL 1及脾脏细胞因子IL 2、IL 12活性及脾脏IL 1、IL 2、IL 12mRNA表达的影响。方法　用醋酸可的松制备肾虚动物模型 ,经益气补肾方药灌胃给药 6周后 ,生物学方法观察腹腔巨噬细胞IL 1、脾脏淋巴细胞IL 2、IL 12的活性水平 ,RT PCR方法观察脾脏IL 1、IL 2及IL 12mRNA的表达。结果　模型动物IL 1、IL 2及IL 12的活性水平较正常小鼠下降 ,其mRNA表达均受到抑制 ,与正常对照组比差异显著 (P <0 0 5 ) ;经益气补肾方药治疗后 ,三种细胞因子活性水平及其mRNA表达均有不同程度的提高。结论　益气补肾方药可能是改善外源糖皮质激素所致肾虚及由此而导致的免疫衰老较理想的方法     

植物乳杆菌P-8对小鼠免疫功能的调节作用研究

摘要 目的：不同类型的益生菌株免疫调节功能各异。本文旨在评价植物乳杆菌P-8（Lactobacillus plantarum P-8）对小鼠免疫功能的调控作用及机制。方法：C57BL/6J小鼠每日灌胃给予不同剂量的植物乳杆菌P-8（0. 25 mg/kg、0.5 mg/kg、1.5 mg/kg）,连续30天,记录小鼠一般情况。给药结束后处死动物,测定小鼠脏器/体重比;小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验评价各组小鼠的单核-巨噬细胞功能;血清溶血素测定、抗体生成细胞实验评价各组小鼠的体液免疫功能;脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验评价各组小鼠的细胞免疫功能;NK细胞的活性测定实验评价小鼠的NK细胞活性。结果：与对照组相比,低、中、高剂量组植物乳杆菌P-8对小鼠脏器/体重比值差异无统计学意义（P>0.05）;且植物乳杆菌P-8可显著提高小鼠的碳廓清能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、半数溶血值、二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应及NK细胞活力（P均<0.05）。结论：植物乳杆菌P-8可通过提高单核-巨噬细胞功能、体液免疫功能、细胞免疫功能及NK细胞活力增强小鼠的免疫功能。     

口服短小双歧杆菌活菌制剂对机体免疫功能的增强效应

探讨短小双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）对正常机体免疫功能的影响及对免疫低功机体的免疫功能调整作用。以环磷酰胺制备免疫低功模型,检测活菌制剂应用后,小鼠巨噬细胞吞噬功能,自然杀伤（NK）细胞杀伤活性,特异性抗体产生能力及IL—2诱生活性等指标的变化。结果表明短小双歧杆菌活菌制剂口服后可显著提高小鼠巨噬细胞吞噬功能,NK细胞杀伤活性,特异性抗体产生能力3项指标,IL—2诱生活性与对照组相比有一定提高,但差异无显著性。结果提示短小双歧杆菌对提高正常机体的免疫功能,对免疫低功机体有明显的调整作用。     

扇贝糖胺聚糖对感染HSV-I小鼠免疫功能的影响研究

目的：研究扇贝裙边糖胺聚糖（glycosaminoglycan from Scallop Skirt,SS—GAG）对感染单纯疱疹病毒I型（herpes simplex virustype,HSV-I）小鼠免疫功能的影响。方法：通过在无菌条件下给予小鼠注射扇贝糖胺聚糖SS．GAG,连续11天,并在给药第三天给小鼠腹腔注射HSV—I病毒悬液建立小鼠感染模型,用MTT等方法观察SS—GAG对HSV—I感染小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性的影响、对脾脏指数、胸腺指数的影响以及对脾淋巴细胞转化能力等免疫指标的影响。结果：与病毒对照组相比,扇贝糖胺聚糖SS-GAG低剂量组、中剂量组、高剂量组均能显著增强HSV．I感染小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬活性和HSV—I感染小鼠的脾脏指数和胸腺指数（P〈0．01）,并且能促进其脾淋巴细胞转化增殖能力（P〈0．01）。结论：扇贝糖胺聚糖在体内有一定的抗I型单纯疱疹病毒作用。其抗病毒作用可能与增强机体免疫功能有关。     

外源NF—IL6高表达增强巨噬细胞的细胞毒效应

白介素6核转录因子（NF－IL6）的功能非常广泛,它不仅参与炎症反应和急性期蛋白质基因、细胞因子基因的表达调控,还参与肿瘤的凋亡、抑制和维持巨噬细胞的免疫功能。为探讨NF－IL6基因的表达与巨噬细胞肿瘤杀伤活性的关系,我们用含重组NF－IL6基因编码区的表达质粒pCN,转染小鼠腹腔留居巨噬细胞,并用蛋白质印迹法证实了外源NF－IL6基因在巨噬细胞中的高表达;随后用碱性磷酸酯酶法检测高表达NF－IL6基因的巨噬细胞对肝癌细胞SMMC7721的细胞毒性。结果显示,外源NF－IL6基因的过量表达明显增强小鼠腹腔巨噬细胞对该肝癌细胞的细胞毒活性。这表明人工加强NF－IL6的表达能增强巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。     

双歧杆菌协同TIL细胞体内杀瘤活性的研究

本研究应用从小鼠Ｓ１８０癌性腹水分离诱导的ＴＩＬ癌内注射与活的双歧杆菌腹腔内注射共同治疗荷Ｓ１８０实体瘤小鼠,结果表明单用ＴＩＬ和ＴＩＬ合用ＩＬ－２早期抑瘤效果,能延缓肿瘤的发生和发展,而晚期抑瘤效果尚不及单用双歧杆菌组。ＴＩＬ与双歧杆菌、ＴＩＬ、双歧杆菌及低剂量ＩＬ－２,荷瘤早、晚期抑瘤效果均较好,且毒副作用低,表明双歧杆菌有可能通过刺激机产生内源性ＩＬ－２维持ＴＩＬ的生物学活性从而协同ＴＩＬ细     

肿瘤宿主的免疫状态 Ⅲ.带Ehrlich实体瘤小鼠脾脏细胞在体外对肿瘤细胞的细胞静止效应的动态观察

应用5-~(125)碘-2’-脱氧尿嘧啶核苷(~(125)IUdR)参入抑制试验,证明带Ehrlich实体瘤的C57BL 小鼠脾脏细胞可在体外对同一移植肿瘤细胞的DNA 合成产生显著的抑制。随着肿瘤的增长,带瘤小鼠的脾脏进行性增大,脾细胞对肿瘤细胞的抑制效应也随之增强。这种对肿瘤细胞DNA合成的抑制作用是非特异的。肿瘤切除后,抑制效应也随之下降,到术后21天,细胞静止效应已不能测得。本文还应用~(125)IUdR技术同时测定了带瘤小鼠脾脏的T 杀伤细胞,脾脏淋巴细胞对致分裂原Con A 与PWM 的转化反应的动态变化,实验表明带瘤小鼠脾脏T、B 淋巴细胞的功能是受抑制的。组织病理学观察提示,带瘤动物脾脏的网织细胞和巨噬细胞的增多可能与细胞静止效应的增强有关。     

小鼠腹腔巨噬细胞的抗肿瘤作用和免疫抑制效应的体外调变

巯基乙酸盐(Thioglycollate)诱发的小鼠腹腔激活巨噬细胞显示了天然的抑制活性,即对Con A,PHA,PWM和LPS致分裂原诱导的T,B淋巴细胞的增殖能产生显著的抑制效应,同时也能抑制脾脏NK细胞对YAC-1肿瘤靶细胞的杀伤功能。但是这些巨噬细胞却同时具有明显的抗肿瘤的细胞静止效应。在体外用脂多糖(LPS,10微克/毫升)处理粘附性激活巨噬细胞明显地降低了对NK活性和T,B淋巴细胞增殖功能的抑制,然而这些免疫调变巨噬细胞仍然保持了显著的抗肿瘤的细胞静止效应。实验还表明,这类激活巨噬细胞的抑制功能不为前列腺素合成酶的抑制剂In-dom所阻断,从而提示了它们的免疫抑制效应似乎不是前列腺素介导的。本实验结果提示,体外用脂多糖处理后的免疫调变巨噬细胞是一类具有抗肿瘤功能和低免疫抑制性的巨噬细胞亚群,这为进一步研究它们的产生以及作用机理准备了条件。     

复合益生菌粉对小鼠免疫机能的影响研究

目的：研究复合益生菌粉在增强免疫力功能方面的作用。方法：采用经口灌胃给予方式,设受试物组3组,分别为低、中、高剂量组,同时设阴性对照组（生理盐水）,从小鼠体重指标、细胞免疫、体液免疫、单核—吞噬细胞活性、NK细胞活性等方面综合评价复合益生菌对小鼠体内免疫机能的影响。结果：与空白对照组相比,中、高剂量下的益生菌粉组中的小鼠抗体生成细胞数显著增加（P<0.05）;低、中、高剂量益生菌组中的小鼠碳廓清功能显著提高（P<0.05）;高剂量组的NK细胞活性比对照组有显著性提高（P<0.01）。不同剂量的益生菌给予期间,均未见益生菌粉对小鼠体重、脾脏/体重比值、胸腺/体重比值、足趾肿胀度、淋巴细胞增殖能力、半数溶血、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力有影响。结论：该复合益生菌粉能够增强体液免疫、单核—吞噬细胞活性和NK细胞的活性,具有一定的免疫增强功能。     

嗜酸乳杆菌LA85对小鼠免疫机能的研究

目的：研究嗜酸乳杆菌LA85对小鼠免疫机能的影响。方法：将160只雄性小鼠随机分为4组,即对照组、低、中、高三个剂量组。采用灌胃的方式给予实验小鼠不同剂量的嗜酸乳杆菌LA85。通过对小鼠平均体重、脾脏和胸腺免疫指数、细胞免疫、体液免疫、单核-吞噬性细胞和自然杀伤细胞（NK细胞）活性的评价,探讨嗜酸乳杆菌LA85对小鼠免疫机能的影响机制。结果：与对照组相比,嗜酸乳杆菌LA85低、中、高剂量组能够显著提升小鼠的胸腺指数,嗜酸乳杆菌LA85高剂量组能够显著提升小鼠的脾脏指数。同时能够显著提高小鼠的淋巴细胞增殖分化能力、半数溶血值、巨噬细胞的吞噬能力、NK细胞的细胞活性;嗜酸乳杆菌对小鼠的体重没有影响。结论：给予小鼠口服嗜酸乳杆菌LA85可以通过改善细胞免疫和体液免疫功能,从而提高免疫力。     

蛋白质粉对小鼠免疫功能的影响

目的探讨蛋白质粉对正常小鼠免疫调节作用。方法将BALB/c小鼠随机分为3批,每批分为4组,分别进行了小鼠免疫器官/体质量比值测定和小鼠碳廓清实验;绵羊红细胞诱导小鼠DTH、抗体生成细胞检测和血清凝血素测定（HC50）;ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和乳酸锂脱氢酶法（LDH）测定NK细胞活性;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。结果10.00 g/kg剂量的蛋白质粉可增强绵羊红细胞诱导小鼠DTH能力（P〈0.05）,促进抗体生成细胞数的生成（P〈0.01）。3.33 g/kg和10.00 g/kg剂量组能促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力（P〈0.05或P〈0.01）和血清凝血素的生成（P〈0.05）;三个剂量组均能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力（P〈0.05或P〈0.01）;3.33 g/kg和10.00 g/kg剂量组能提高NK细胞活性（P〈0.05）;但对小鼠碳廓清能力和免疫器官/体重比值无明显影响。结论蛋白质粉对正常小鼠的细胞、体液免疫和单核-巨噬细胞功能和NK功能有促进作用,即具有增强免疫力功能。     

扇贝糖胺聚糖对感染HSV-Ⅰ小鼠免疫功能的影响研究

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(glycosaminoglycan from Scallop Skirt,SS-GAG)对感染单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus type,HSV-Ⅰ)小鼠免疫功能的影响。方法:通过在无菌条件下给予小鼠注射扇贝糖胺聚糖SS-GAG,连续11天,并在给药第三天给小鼠腹腔注射HSV-Ⅰ病毒悬液建立小鼠感染模型,用MTT等方法观察SS-GAG对HSV-Ⅰ感染小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性的影响、对脾脏指数、胸腺指数的影响以及对脾淋巴细胞转化能力等免疫指标的影响。结果:与病毒对照组相比,扇贝糖胺聚糖SS-GAG低剂量组、中剂量组、高剂量组均能显著增强HSV-Ⅰ感染小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬活性和HSV-Ⅰ感染小鼠的脾脏指数和胸腺指数(P0.01),并且能促进其脾淋巴细胞转化增殖能力(P0.01)。结论:扇贝糖胺聚糖在体内有一定的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒作用。其抗病毒作用可能与增强机体免疫功能有关。     

鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1高表达抑制黑素瘤细胞在小鼠体内的生长

鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antienzyme inhibitor-1,OAZI-1)是细胞内调节多胺代谢的重要蛋白质因子。已有研究发现,OAZI-1高表达的黑素瘤细胞在体外能更有效地被抗原提呈细胞识别和吞噬,提示OAZI-1在肿瘤免疫治疗中具有潜在的应用价值。为进一步分析OAZI-1高表达对黑素瘤细胞在小鼠体内生长的影响,高表达OAZI-1的黑素瘤细胞(B16/OAZI-1)被接种到实验小鼠体内,结果发现,接种瘤出现先成瘤随后逐渐消退的现象,至第24 d时,接种瘤的平均体积为36±25 mm3~,而对照细胞接种瘤的平均体积为326±309 mm~3。为探索上述现象的机制,随后分析了B16/OAZI-1在小鼠体内诱导的抗肿瘤免疫效应,结果发现:1)B16/OAZI-1接种显著增加了小鼠脾脏细胞对B16-F1瘤细胞的杀伤活性;2)源于B16-F1的细胞抗原能更有效地促进B16/OAZI-1接种小鼠脾脏细胞的增殖;3)B16/OAZI-1接种小鼠的脾脏细胞具有更强的分泌IFN-γ的能力;4)当在预接种B16/OAZI-1 30 d后的小鼠体内再次接种B16-F1活细胞时,新接种瘤细胞的生长受到显著抑制,小鼠的存活率增加。上述研究结果提示,高表达OAZI-1的黑素瘤细胞在实验动物体内的生长受到显著抑制,其机制可能与OAZI-1能促进肿瘤抗原提呈和诱导抗肿瘤免疫效应相关。