卫星灵芝液体发酵富集硒锌的研究

研究不同浓度的硒、锌对卫星灵芝菌丝体生长的影响,初步探讨卫星灵芝菌丝体生物富集硒、锌的效应。采用平板培养法及液体发酵法研究锌、硒对卫星灵芝菌丝体生长的影响及富集效应。培养基中不同浓度的亚硒酸钠对菌丝体生长均具有不同程度的抑制作用,但灵芝菌丝体的富硒量随着硒浓度的增加而提高,当亚硒酸钠浓度为40 mg/L时,菌丝体中的生物量、富硒量及富硒转化率最高,分别为1.54%、2 131.55 mg/kg、32.91%;培养基中硫酸锌浓度低于150 mg/L的范围内对卫星灵芝菌丝体生长有明显的促进作用,硫酸锌浓度为60 mg/L时菌丝体中的锌含量和富锌转化率最高,分别为1 142.91 mg/kg、1.76%。培养基中同时添加40 mg/L的亚硒酸钠和60 mg/L硫酸锌,菌丝体生长量1.60%,富硒量301.85 mg/kg,富硒率4.84%;富锌量为540.41 mg/kg,富锌率为5.72%。     

不同培养条件下杏鲍菇对硒的耐受性与硒形态分析

为了明确不同培养条件下杏鲍菇对外源硒的耐受性,分别在固体培养基、液体发酵培养基和栽培基质中添加不同量的亚硒酸钠,并检测杏鲍菇子实体中富集硒的存在形态。结果表明：固体培养条件下,硒浓度低于160 mg/L时,对菌丝的生长没有显著影响;液体培养条件下,4 mg/L的硒元素即可对杏鲍菇菌丝体的生长产生显著抑制;栽培模式下,基质中补充10~600 mg/kg的硒元素,不会影响杏鲍菇菌丝体的生长,且子实体中的硒含量会随基质中硒浓度的增加而增加。子实体硒形态分析表明,富集硒以硒代蛋氨酸、甲基硒代半胱氨酸、硒代胱氨酸和亚硒酸盐［Se（IV）］四种形式存在,其中硒代蛋氨酸是硒与氨基酸的主要结合形式。     

纳米硒对肉鸡肝细胞中细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响

以亚硒酸钠和蛋氨酸硒为对照,研究了纳米单质硒(纳米硒)对肉鸡肝细胞中细胞谷胱甘肽过氧化物酶(cGPx)活性的影响。每种硒源分别以0.01、0.05、0.10、0.30、0.50、1.0μmol/L6个硒添加浓度培养肉鸡肝细胞,测定培养后0、24、48、72、96h肉鸡肝细胞cGPx活性。结果显示:亚硒酸钠添加浓度(以硒计)在0.01￣0.10μmol/L、蛋氨酸硒和纳米硒添加浓度(以硒计)在0.01￣0.30μmol/L,cGPx活性随着硒添加浓度的增加而增加;亚硒酸钠添加浓度在0.10￣1.0μmol/L、蛋氨酸硒添加浓度在0.30￣1.0μmol/L,cGPx活性随着硒添加浓度的增加而下降,而纳米硒添加浓度在0.30￣1.0μmol/L,cGPx活性始终保持在高峰平台。结果表明,3种硒源的剂量-效应关系曲线中的最适剂量范围宽度依次为:纳米硒>蛋氨酸硒>亚硒酸钠。     

真姬菇液体发酵培养基筛选及硒富集条件优化

以真姬菇菌种为材料,采用液体摇瓶培养进行最适发酵培养基的优化,并探讨不同浓度亚硒酸钠和甘油的富硒效果。结果表明:真姬菇菌种最优液体发酵培养基为:马铃薯20%,麦麸滤液3%,可溶性淀粉3%,酵母粉0.15%,硫酸镁0.1%,磷酸二氢钾0.2%,最大生物量可达13.2 g/L;亚硒酸钠对菌丝生长有抑制作用,但可促进菌丝富硒,当其浓度为40μg/mL时,菌丝体的硒含量最大,达1.75μg/g,总体硒富集含量可达5.8μg/L发酵液;甘油对亚硒酸钠的总富硒含量有促进作用,当甘油浓度为50μg/mL时,菌丝总体硒富集含量最大,可达26.7μg/L发酵液。     

培养方式对富硒产朊假丝酵母性能的影响

在摇瓶和5 L发酵罐水平上分别考察亚硒酸钠浓度及其添加方式对高性能(高有机硒含量和高谷胱甘肽含量)富硒产朊假丝酵母制备的影响.结果表明:亚硒酸钠添加质量浓度为15 mg/L时,产朊假丝酵母具有较好的富硒效果,但一次性添加对酵母细胞有较大的毒害作用.采用分批次添加亚硒酸钠的方法获得了较好的制备高性能富硒产朊假丝酵母的培养方式:发酵起始添加L-蛋氨酸10 mmol/L,并在发酵过程的12和15 h分别添加亚硒酸钠10和5 mg/L.在此培养方式下,产朊假丝酵母胞内谷胱甘肽和有机硒含量分别达到172.3 mg/L和1194 μg/g.     

亚硒酸钠对脑胶质瘤干细胞生长抑制效应及细胞内活性氧的影响

目的:研究亚硒酸钠对人脑胶质瘤干细胞的生长抑制效应及细胞内活性氧的影响。方法:使用不同浓度的亚硒酸钠(0.5μmol/L、1.5μmol/L、3.0μmol/L)对人脑胶质瘤干细胞进行侵染,分别通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及荧光检测仪检测亚硒酸钠对人脑胶质瘤干细胞的增殖及活性氧(ROS)含量的影响。结果:亚硒酸钠对人脑胶质瘤干细胞具有明显的抑制作用,且随亚硒酸钠浓度的增加对人脑胶质瘤干细胞细胞生长抑制作用逐渐加强。结论:亚硒酸钠能抑制人脑胶质瘤干细胞的生长,并可增加其细胞内ROS的含量。     

亚硒酸钠对肝细胞L-02端粒酶活性和端粒长度的作用

通过研究硒对端粒酶活性和端粒长度的作用 ,探讨硒抗衰老的生物学机制。实验以人肝细胞株L 0 2为研究对象 ,分别补充 0 .5和 2 .5 μmol L亚硒酸钠 ,采用端粒重复序列扩增 焦磷酸根酶联发光法、逆转录聚合酶链式反应法及流式荧光原位杂交法 ,分别检测细胞的端粒酶活性、人端粒酶逆转录酶催化亚基基因 (hTERT)的表达及端粒长度的变化。结果表明 :常规培养的肝细胞株L 0 2的端粒酶活性和hTERT基因表达水平均较低。补充 0 .5和2 .5 μmol L亚硒酸钠三周后细胞生长状况良好、端粒酶活性和hTERT基因表达水平显著性增高 ,且呈一定的剂量 效应关系。细胞补充亚硒酸钠四周后端粒长度显著增长。说明营养浓度的亚硒酸钠可通过提高端粒酶活性和增长端粒长度来减缓L 0 2肝细胞衰老、延长细胞寿命。     

硒元素对平菇菌丝体GSH-Px、SOD及MDA的影响

于培养基中加入一定量的亚硒酸钠溶液 ,分别测定了 2个品种平菇菌丝体内GSH Px、SOD活性及MDA含量。结果表明 :3 0、60mg/L组菌丝体内GSH Px、SOD活性极显著升高 (P <0 .0 1 )而MDA含量明显降低 (P <0 .0 5 ) ,随着硒水平的升高 ,GSH Px、SOD活性呈下降趋势而MDA含量则显著升高 (P <0 .0 5 )。因此 ,在培养富硒平菇菌丝体时应适当考虑培养基的硒浓度。     

虎掌菌菌丝富硒培养的研究

为生产合适的硒源提供一种思路,以菌丝体生物量、含硒量、还原糖、氨态氮和蛋白质为指标,采用四因素三水平正交设计法优化虎掌菌的富硒发酵条件,探讨不同浓度的硒对虎掌菌固体培养菌丝生长和液体培养产生的生物组分的影响。结果表明,高浓度的硒抑制虎掌菌菌丝体生长;正交试验选择不同的衡量指标,由极差分析得出各因素的影响程度大小,结合证实试验得到以还原糖为指标的最优组合为葡萄糖6%(质量分数)、酵母浸膏3%(质量分数)、KH_2PO_4 0.1%(质量分数)、Na_2SeO_3 0.6 mmol/L,其菌丝体生物量和氨态氮含量较高。与对照相比,加硒后虎掌菌发酵液中氨态氮、还原糖和总糖含量显著增加(P0.05);当硒浓度为0.5 mmol/L时,氨态氮、还原糖和总糖含量均达到最高值。菌丝体生物量和可溶性蛋白质分别在硒浓度为0.2 mmol/L和0.4 mmol/L时达到最大值。虎掌菌富硒培养后,发酵液的营养成分含量会发生变化。     

酵母同化无机硒作用的研究

本文报道了酵母在同化无机硒为有机硒的过程中，培养基的种类、亚硒酸钠浓度以及蛋氨酸浓度与生成的硒酵母中的硒蛋氨酸量的某些规律。实验结果表明：硒酵母中硒蛋氨酸的量与培养基的种类有关，随培养基中亚硒酸钠浓度的增加而增加，而随蛋氨酸浓度的增加而减少。提出了一个准确测定生物物质中硒代氰基酸的分析方法。     

啤酒酵母菌对无机硒的有机转化

利用啤酒酵母菌对无机硒(亚硒酸钠)进行有机转化。通过在培养基中加入不同浓度的无机硒溶液和不同时间加入无机硒溶液,于28℃、220 r/min摇床条件下培养5 d,离心得菌细胞,测定前样品预处理:破碎菌细胞,显微镜下计数,计算破碎率,破碎后的菌体装入透析袋于蒸馏水中透析除去无机硒。准确测定无机硒,用浓硫酸-高氯酸的消化体系消化样品后,紫外分光光度法于335 nm处测量吸光度,在标准曲线上查出硒含量,计算无机硒的转化率。啤酒酵母菌的最佳加硒时间为24 h,亚硒酸钠浓度大于12μg/mL对啤酒酵母菌转化无机硒有明显抑制作用,啤酒酵母菌对无机硒的摄入率约为62%,转化率约为53%;超生波细胞粉碎仪破碎细胞的破碎率为55%左右。结果表明,啤酒酵母菌可以转化无机硒。     

不同亚硒酸钠浓度对党参生长、生理特性和品质的影响

为综合了解党参的施硒效应，该研究基于水培试验探究不同亚硒酸钠浓度处理条件下党参幼苗的硒积累、生长、生理和品质的变化规律。结果表明：(1)适宜硒浓度(0.2 mg·L^-1)可以促进党参的叶片面积、株高、生物量的增长，而高硒浓度(10 mg·L^-1)则抑制党参生长。(2)增加亚硒酸钠浓度和硒暴露时间均可提高党参幼苗在根和叶中的硒含量，不同器官硒积累表现为根>叶>茎。(3)适宜硒浓度(0.2 mg·L^-1)处理可提高光合色素含量和根系活力，并减少丙二醛、脯氨酸和过氧化氢的积累，而高硒浓度(10 mg·L^-1)则与之相反。(4)适宜硒浓度(0.2 mg·L^-1)有利于党参炔苷、多糖、可溶性蛋白的积累，而高硒浓度(10 mg·L^-1)可以对多糖和可溶性蛋白的积累产生不利影响。综上认为，亚硒酸钠对党参具有双重效应，施加适量浓度对党参的生长、生理和品质有益，并以0.2 mg·L^-1硒浓度处理的效果最佳。该研究结果有助于了解亚硒酸钠浓度对...     

灵芝菌丝体富硒条件优化及其硒多糖抗氧化活性研究

利用正交试验对灵芝菌丝体液体发酵富硒条件进行优化,研究培养基中不同碳源、氮源和亚硒酸钠浓度对菌丝体生物量、硒含量、富硒率以及胞外酶活性的影响,此外还对硒多糖的抗氧化活性进行了初步研究。结果表明:当培养基中碳源为20%马铃薯、氮源为2%麸皮、Na_2SeO_3浓度为5 mg/L时,培养基中菌丝生物量最高达到3.86 g/L,硒含量最高为0.576 mg/g,富硒率也达到最高为44.47%。Na_2SeO_3对菌丝生长的影响大于碳源和氮源;同样的Na_2SeO_3对胞外酶活性的影响最大,最优组的POD和PPO酶活性都较其他组高,且随着Na_2SeO_3浓度的升高,其酶活性逐渐降低。富硒灵芝菌丝体粗多糖都具有较强的体外抗氧化活性,通过相关性分析发现,其粗多糖的抗氧化活性与硒含量、富硒率具有显著的正相关。显示硒多糖在食品和药品等领域具有良好的开发利用前景。     

亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏Nephrin表达的影响与意义

探讨亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏Nephrin表达的影响及二者间的关系,从而研究亚硒酸钠和Nephrin在糖尿病肾病中的作用机制.通过链脲佐菌素法及给予高脂饮食诱导模拟大鼠糖尿病肾病模型,实验设空白对照组、糖尿病肾病对照组、亚硒酸钠干预组,亚硒酸钠干预组每日给予亚硒酸钠溶液灌胃,其它组给予等量生理盐水灌胃.灌胃10周后处死大鼠,取血、尿标本测相关生化指标.取肾脏组织戊二醛固定制作切片电镜下观察超微结构改变,取肾脏组织多聚甲醛固定制石蜡切片光镜下观察病理改变和免疫组化定位蛋白表达.取肾脏组织RT-PCR检测Nephrin的mRNA表达、Western Blotting检测nephrin的蛋白表达,分析各组数据的统计差异.结果发现亚硒酸钠干预组大鼠基本状况和生化指标较糖尿病肾病对照组明显改善,光镜和电镜下观察病理改变和超微结构病变较糖尿病肾病对照组明显减轻.免疫组化nephrin蛋白表达着色糖尿病肾病对照组较空白对照组减少,亚硒酸钠干预组较糖尿病肾病对照组着色明显增多.Nephrin mRNA和蛋白表达糖尿病肾病对照组较空白对照组明显降低,而亚硒酸钠干预组较糖尿病肾病对照组升高,但低于空白对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）．亚硒酸钠明显促进肾脏Nephrin表达,改善了糖尿病肾病,表明亚硒酸钠和Nephrin在防治和延缓糖尿病肾病的发生发展中可能起重要作用．     

秦巴山区富硒蛹虫草有效成分及硒存在形态分析

为探究秦巴山区富硒蛹虫草有效成分及硒存在形态,以秦巴山区蛹虫草CM-1518为研究对象,研究不同质量分数亚硒酸钠(0～500 mg/kg)对蛹虫草生长发育的影响,并对其有效成分及硒存在形态进行分析。试验结果表明当亚硒酸钠质量分数为100 mg/kg时,蛹虫草鲜质量最高,为293.41 g/盒。当亚硒酸钠质量分数为200 mg/kg时,虫草素、虫草酸含量最高,分别为1.06 mg/g和2.10 mg/g,表明硒与虫草素和虫草酸可协同增效,但虫草多糖含量变化规律不明显,亚硒酸钠的添加不利于腺苷的合成积累。经计算,富硒蛹虫草中有机硒所占百分比均高达99.9%,低浓度的亚硒酸钠可促进可溶性蛋白和可溶性多糖中硒的合成,但高浓度的硒却降低其合成,且富硒蛹虫草中可溶性多糖中硒含量高于可溶性蛋白硒含量。试验表明适宜浓度的亚硒酸钠可促进蛹虫草生长发育及有效成分合成积累。     

亚硒酸钠对小麦幼苗中谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽转硫酶活性以及谷胱甘肽含量的影响

用1.0 mg·L-1的亚硒酸钠根施小麦幼苗,测定亚硒酸钠对谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽转硫酶活性以及还原性谷胱甘肽含量的结果表明,外源亚硒酸钠对麦苗地上部的谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽转硫酶活性均有诱导作用,使麦苗体内的谷胱甘肽含量水平增加.     

亚硒酸钠对矮脚黄白菜农药残留和重金属积累的影响

采用盆栽试验考察了不同浓度和pH的亚硒酸钠溶液对矮脚黄白菜啶虫脒残留和重金属积累的影响。结果表明,亚硒酸钠溶液在浓度为1 mg/L且pH 7.0时对矮脚黄白菜促生效果显著优于对照和其它处理,叶绿素含量最高;在5 mg/L且pH 6.5时,啶虫脒和重金属Cd、Pb含量均显著下降;浓度为10 mg/L时对降低重金属含量的效果不明显。本研究表明,亚硒酸钠在降低植物农药残留和重金属积累方面具有一定的应用潜力。     

硒对荷叶离褶伞菌丝体胞外粗多糖的影响及发酵条件优化

以亚硒酸钠为无机硒源,研究硒的加入对荷叶离褶伞菌丝体胞外粗多糖的影响并优化其发酵条件,选择培养基灭菌条件、添加硒浓度、发酵时间和初始pH值作为优化因素,研究硒在各因素不同水平下对荷叶离褶伞胞外粗多糖含量的影响。通过单因素试验和响应曲面法得到最佳发酵条件:在121℃,20 min对培养基进行灭菌,发酵液中添加2μg/m L Na_2SeO_3,发酵244 h,培养基初始pH值为7.0的条件下,发酵产生的胞外粗多糖含量为0.760 g/100 m L,较未加入硒(0.218 g/100 m L)和加硒未优化前的含量(0.755 g/100 m L)有所提高。研究结果表明,响应曲面法优化富硒荷叶离褶伞发酵条件可使胞外粗多糖含量大幅度提高。     

硒对三裂叶野葛毛状根生长及抗氧化酶活性的影响

本文研究硒(Se)对三裂叶野葛毛状根生长及抗氧化酶活性的影响。结果表明,低浓度亚硒酸钠(0~0.5 mg/L)可促进毛状根生长及异黄酮的生物合成,而高浓度亚硒酸钠抑制其生长和异黄酮的积累,且浓度愈高抑制作用愈强。此外,硒可促进可溶性蛋白的生物合成,亚硒酸钠浓度愈高促进作用愈明显;硒还可降低毛状根中SOD活性,提高POD活性,降低MDA含量。说明硒对三裂叶野葛毛状根生长和抗氧化酶活性有重要的调节作用。     

一株假单胞菌(Pseudomonas alcaliphila MBR)好氧还原亚硒酸钠为红色单质硒

【目的】本实验室保藏的一株异化硝酸盐还原菌(Pseudomonas alcaliphila MBR),其能够在好氧环境下以有机碳源为电子供体,把易溶解、高毒性亚硒酸钠还原成为红色单质硒,本文对该菌株还原亚硒酸盐的特征进行了研究。【结果】结果表明该菌株可以在pH为6-11环境中生长,对亚硒酸钠有较强抗性,其MIC(minimal inhibitory concentration)可高达50 mmol/L。在5天时间内,菌体以柠檬酸钠为电子供体,把2 mmol/L亚硒酸钠完全还原为红色单质硒并主要积累于胞外。硝酸盐和还原型谷胱甘肽对菌体还原亚硒酸钠具有促进作用,初步确定菌体对亚硒酸钠的还原是细胞膜或细胞质中的某些物质催化的结果。【结论】本项研究为应用Pseudomonas alcaliphila MBR于生物反应器提供了重要基础。