常用小鼠、大鼠肠道菌群比较研究

目的 对6种常用品系小鼠和大鼠肠道菌群进行比较研究.方法 采集3家实验动物生产单位150只SPF级小鼠和大鼠的210份粪便或肠道内容物样本,依据细菌16S rDNA V3-V4区域通用引物对样本进行PCR扩增,并采用Illumina Hiseq 2500高通量测序平台进行测序.基于动物来源、品种品系、性别、年龄和肠道分...     

曲氏传药中乌头碱的薄层色谱测定

在硅胶Ｇ薄层板上用氯仿：１,２－二氯乙烷：甲醇：氨水为展开剂分离中草药复方曲氏传药中生物碱,并有和改良碘化铋试剂显色后对其中的乌头碱进行直接扫描测定。此法简便、快速、准确、灵敏且稳定。     

草鱼自噬相关基因Beclin1的克隆及其在MC-LR胁迫下的表达特征

为评估微囊藻毒素-LR (MC-LR)对鱼类自噬的影响, 根据转录组测序结果得到的EST序列, 采用RACE技术获得了草鱼(Ctenopharygodon idella)自噬基因Beclin1 (CiBeclin1)的cDNA全长序列。该基因序列全长1590 bp, 包括1344 bp的开放阅读框, 编码447个氨基酸, 分子量为51.2 kD, 理论等电点为4.88。CiBeclin1包含1个BH3和1个ECD结构域。CiBeclin1氨基酸序列与其他物种的相似性为88%—98%, 构建的进化树显示CiBeclin1与稀有鲫(Gobiocypris rarus)的Beclin1亲缘关系最近。实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测结果表明, CiBeclin1在肝、肾、脾等10种不同组织中均广泛表达, 但在肝脏组织中的相对表达量最丰富, 显著高于相对表达量最低的头肾组织(P<0.05)。在不同剂量(25和100 μg MC-LR/kg BW) MC-LR胁迫24h、48h、72h和96h后, 草鱼肝脏中CiBeclin1表达量均显著低于对照组的表达水平, 研究结果表明, MC-LR能抑制草鱼CiBeclin1的表达, 但MC-LR是否在该剂量下诱导了草鱼的自噬还有待于进一步研究。     

阴离子交换色谱纯化甲型肝炎病毒(YN5株)的研究

对阴离子交换色谱纯化HAV的合适条件进行了探索。先使用“试管法”研究DEAE Sepharose Fast Flow凝胶结合HAV及病毒解离的条件,然后分别使用线性阶段洗脱和阶段梯度洗脱在柱色谱上进行了HAV的纯化。结果表明经过阴离子交换色谱纯化得到的病毒保持有抗原性和免疫原性,HAV抗原回收率大于85％,杂蛋白去除率大于80％,纯化的病毒样品中的内毒素与宿主DNA的含量也大大降低,证明阴离子交换色谱可用于HAV疫苗的纯化。     

宫颈癌放疗患者生活质量的影响因素及与应对方式的关系研究

目的:探讨宫颈癌放疗患者生活质量的影响因素及与应对方式的关系.方法:选取2018年7月～2019年11月期间我院收治的宫颈癌放疗患者139例,收集患者临床资料,采用癌症治疗功能评价系统中的宫颈癌量表(FACT-Cx)对宫颈癌患者的生活质量进行评分,采用Jalowiec的应对量表(JCS)记录并评估所有患者的应对方式,并...     

南瓜种子超氧化物歧化酶某些性质的研究

采用NBT光化还原法,分别研究了不同缓冲溶液、pH值、温度及抑制剂等因素对南瓜种子SOD活性的影响,并对其类型进行了鉴定,结果表明:南瓜种子萌芽过程中SOD的合成以Mn-SOD为主,其热稳定性很高,在酸性条件下活性完全丧失,在pH8.0 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液下酶活性最高;酶活性容易被β-巯基乙醇抑制,对脲及DMSO有一定的耐受性。     

不同品种南瓜POD及PPO同工酶的比较研究

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对美洲南瓜（Cucurbita pepo L.）和中国南瓜（C.moschata Duch.）共10个不同栽培品种的过氧化物酶（POD）及多酚氧化酶（PPO）同工酶进行了分析研究,并采用聚类分析法对其亲缘关系进行了比较和分类。结果表明,10个不同品种的南瓜根POD共分离出10条酶带,其中el、e4、e5、e6和e9为2个栽培种所共有;e4、e5、e6分离清晰,可作为2个栽培种的特征酶带;PPO同工酶分离出6条酶带,其中e′1和e′4分离清晰,为2个栽培种所共有。     

台湾海峡沉积物放线菌多样性及抗菌活性研究

探究台湾海峡海洋沉积物中放线菌的多样性并进行抗菌活性筛选,为发现新的药物先导化合物提供新菌源。采用7种选择性培养基分离10份来自台湾海峡沉积物样品中的海洋放线菌,并对分离菌株的16S rRNA基因序列进行系统进化分析。采用滤纸片法对部分代表放线菌菌株发酵液进行生物活性筛选,共分离到532株放线菌,挑选其中170株代表菌株进行鉴定,分属于8个目10个科14个属。有2株菌的16S rRNA基因序列显示属于潜在的新种,170株菌中有68.8%的菌株显示出至少对一种指示菌有抑菌活性。结果表明台湾海峡海洋沉积物中蕴藏着丰富的放线菌资源,是发现新药的有效途径。     

MYH9在肾脏纤维化中表达及作用研究

目的:探讨MYH9(非肌性肌球蛋白重链9)在肾脏纤维化过程中的表达变化以及这种异常表达在疾病发展过程所发挥的作用。方法:通过免疫组化染色,Western blot以及实时PCR检测了MYH9在肾脏纤维化组织中表达水平的变化。同时在慢病毒介导下构建稳定过表达MYH9的肾脏纤维化HK-2细胞,并通过MTT实验、流式细胞仪检测MYH9对HK-2细胞增殖和细胞周期的影响。结果:在小鼠肾脏纤维化组织中MYH9表达水平明显高于正常小鼠肾脏组织(P0.05)。上调MYH9对肾脏纤维化细胞HK-2的增殖水平和细胞周期都呈现出明显的促进(P0.05)。结论:MYH9在肾脏纤维化过程中发挥了重要的促进作用,针对MYH9为靶点的研究为肾脏纤维化的治疗提供新的思路。     

向日葵AGO和DCL基因家族的鉴定和表达分析

为了解向日葵(Helianthus annuus)的Argonaute (AGO)和Dicer-like (DCL)的功能,利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)的AGO和DCL基因序列在向日葵基因组数据库中进行同源比对,对向日葵AGO和DCL家族成员进行生物信息学分析。结果表明,从向日葵中鉴定到15个Ha AGOs和5个HaDCLs家族成员;这2类基因在染色体上的分布均不均匀。系统发育分析表明,与拟南芥相似,HaAGO家族成员可分为3个分支,HaDCL可分为4个分支;所有的HaAGO都具有保守的N domain、DUF1785、PAZ和PIWI结构域,Ha DCL家族成员都含有PAZ和RIBOc结构域。表达分析表明,Ha DCL3a和Ha DCL3b在茎和花序中高度表达;亚细胞定位表明Ha AGO多定位于细胞核。这表明向日葵中可能存在典型的RNAi干扰机制,并可能参与了协调向日葵的生长发育过程。