高血压大鼠心肌2型小电导-Ca2+-激活-K+通道蛋白(SK2)表达的变化*

目的:观察高血压大鼠心肌细胞2型小电导-Ca²⁺-激活-K⁺(SK2)通道蛋白表达情况。方法:12只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组(5只)和实验组(7只),实验组采用N’-硝基-L-精氨酸(L-NNA 15 mg/(kg·d))腹腔注射制备高血压模型,对照组以等体积生理盐水腹腔注射,每天称量大鼠体重,每周测量血压及心电图变化,4周后处死大鼠取心脏;采用Western blot的方法检测心肌SK2通道蛋白表达水平。结果:给药4周后,与对照组相比,实验组大鼠血压明显升高(P＜0.05),心电图QRS时长和R-R间期延长,实验组大鼠心房组织和心室组织SK2通道的表达均明显升高(1.12±0.18 vs 0.52±0.99,1.64±0.26 vs 0.99±0.22, P＜0.05)。结论:高血压模型大鼠心房和心室SK2通道表达增加,其可能是导致高血压模型大鼠出现心律失常的机制之一,为高血压疾病的治疗和预后提供新的思路和策略。     

诱导型一氧化氮合酶的激活与血压的关系

本实验旨在探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS)的激活与血压之间的关系,三组SD大鼠分别静脉输注不同浓度（0．3％,4％及8％）NaCl溶液以使其处于不同的血压水平,运用同位素标记的L－精氨酸转换成L－Citrulline 的转换率变化及Greiss反应,分别测定不同血压时iNOS的活性及NO的生成量,另四组大鼠包括正常Wistar,正常SD,高盐诱导的高血压（NaHR)及自发性高血压大鼠（SHR）,经测定血压后,取主动脉血管并以Western印迹印交法测定其iNOS蛋白水平,结果表明,血压较低时,SD大鼠iNOS活基本没有改变,而在输入4％和8％NaCl并处于较高血压水平的SD大鼠,其iNOS活性及NO生存均明显升高,。此外Western 印迹表明,两种高血压大鼠主动脉组织iNOS蛋白水平均较正常Wistar及正常SD大鼠高,密度扫描表明,NaHR及SHR主动脉组织iNOS蛋白分别较正常SD大鼠及正常Wistar大鼠升高149％及261％,这一结果提示,诱导型一氧化氮合酶是血液动力学调控的重要组成部分,尤其是在血压处于较高水平时,iNOS具有重要的代偿调节作用,除细胞因子,细菌产物等之外,血压也是调节iNOS表达及活性的重要因素之一。     

罗格列酮对胰岛素抵抗高血压大鼠主动脉功能的影响

为探讨罗格列酮(rosiglitazone,ROSI)对胰岛素抵抗高血压大鼠(insulin resistant-hypertensive rats,IRHR)主动脉功能的影响及其可能机制,用高果糖饲养Sprague-Dawley大鼠8周,制备IRHR模型,并通过相关指标的检测判断造模是否成功。随后采用血管环灌流方法,观察各实验组动物离体胸主动脉环对新福林(L-phenylephrine,PE)、氯化钾(KCl)的收缩反应和对乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)、硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)的舒张反应：以及用一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(N^ω-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)预孵育血管30min后,主动脉环对ACh的舒张反应：同时对各实验组血清一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量进行测定。结果显示：(1)罗格列酮能降低IRHR的收缩压、血清胰岛素水平,改善胰岛素抵抗。(2)高果糖组动物主动脉对PE、KCl的收缩反应明显增强,对ACh的舒张反应明显减弱,ROSI可逆转上述作用。(3)用L-NAME预处理后,高果糖组动物主动脉对ACh的舒张反应进一步减弱,ROSI可部分对抗上述作用。(4)各组大鼠离体主动脉对SNP的舒张反应无显著性差异。(5)ROSI对对照组大鼠主动脉功能的影响不明显。(6)与对照组相比,高果糖组动物血清NO含量显著降低,用ROSI处理后,血清NO含量显著增加。上述结果表明,ROSI能改善IRHR主动脉的舒张功能,其作用的机制可能是部分通过NOS途径促进内皮NO释放,或是通过降低血压、血清胰岛素水平,以及改善胰岛素抵抗等作用,导致血管舒张。     

脂可平对实验性早期动脉粥样硬化内皮细胞凋亡及Bax、Bcl-2表达的影响

研究脂可平对大鼠血脂、早期动脉粥样硬化血管内皮细胞凋亡及Bax、Bcl-2表达的影响。应用高脂饲料复制SD大鼠早期动脉粥样硬化模型,分别给以脂可平、辛伐他汀片混悬液灌胃,实验10周后,全自动生化分析仪、流式细胞仪定量分别检测各组血脂、主动脉内皮细胞凋亡率及Bax、Bcl-2蛋白的表达;苏木素伊红(HE)染色观察主动脉组织形态学变化。两治疗组均可降低血脂,不同程度的改善了主动脉组织病理损伤,降低内皮细胞凋亡率,调控Bax、Bcl-2蛋白表达。本实验说明脂可平可降低血脂,干预动脉粥样硬化的始动环节及其发生并从蛋白水平调控早期动脉粥样硬化内皮细胞凋亡。     

EMT促进自发性高血压大鼠主动脉纤维化

目的:探讨内皮间充质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EMT)是否促进自发性高血压大鼠主动脉纤维化及降压治疗对其干预作用。方法:将24只雄性自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)随机分为SHR组(S组,蒸馏水灌胃)、哌唑嗪组(P组,哌唑嗪5 mg/(Kg×d)灌胃)和氯沙坦组(L组,氯沙坦10 mg/(Kg×d)灌胃),8只雄性WKY大鼠(W组,蒸馏水灌胃)作为对照组,各组分别干预8周后,通过Masson染色检测各组大鼠主动脉纤维化程度,免疫荧光染色及Western Blot检测各组大鼠主动脉I型胶原、CD31及FSP1蛋白表达变化。结果:Western blot及Masson染色显示从L组、P组到S组大鼠主动脉I型胶原含量依次增多,且主动脉壁厚度均显著大于W组(P0.05),但P组与L组大鼠主动脉管壁厚度无统计学差异(P=0.818);免疫荧光染色表明,各组高血压大鼠主动脉均存在FSP1及CD31共表达(FSP+CD31+)细胞,且从L组、P组到S组FSP+CD31+细胞依次增多;Western Blot检测表明,从W组、L组、P组到S组,CD31蛋白表达量逐渐降少,FSP1蛋白表达量依次增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论:EMT可能参与了自发性高血压大鼠的主动脉纤维化,氯沙坦和哌唑嗪可能通过抑制EMT减轻主动脉纤维化。     

低分子肝素对子痫前期大鼠炎症反应、肝功能及胎盘组织Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:研究低分子肝素对子痫前期大鼠炎症反应、肝功能及胎盘组织Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:将90只孕期大鼠以随机数表法分成正常孕组、子痫前期组、治疗组,每组30只。其中子痫前期组和治疗组大鼠于妊娠第13 d开始皮下注射左旋硝基精氨酸甲酯,建立子痫前期大鼠模型,注射剂量为200 mg/(kg·d),正常孕组予以等量生理盐水注射干预。治疗组予以低分子肝素皮下注射干预,注射剂量为40μL/(kg·d),子痫前期组以及正常孕组大鼠予以同等剂量的生理盐水注射处理。比较三组大鼠的血压、24 h蛋白尿,肝功能指标水平,血清炎症因子水平,胎盘组织中Bcl-2及Bax蛋白表达水平。结果:子痫前期组及治疗组大鼠妊娠第15 d、21 d时的血压水平均显著高于正常孕组,且妊娠第21 d时的24 h蛋白尿高于正常孕组,治疗组大鼠妊娠第21 d的血压及24 h蛋白尿均低于子痫前期组(均P<0.05)。妊娠第21 d时子痫前期组、治疗组大鼠的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、γ-干扰素(IFN-γ)水平均显著高于正常孕组,且治疗组低于子痫前期组(均P<0.05)。子痫前期组、治疗组大鼠胎盘组织中Bcl-2蛋白表达水平显著低于正常孕组,Bax蛋白表达水平显著高于正常孕组,且治疗组大鼠Bcl-2蛋白表达水平显著高于子痫前期组,Bax蛋白表达水平显著低于子痫前期组(均P<0.05)。结论:低分子肝素对子痫前期大鼠中具有明显的降血压效果,有利于改善大鼠肝功能,其主要作用机制可能与诱导Th1/Th2的平衡朝Th2方向发展,调节Bcl-2/Bax平衡有关。     

妊娠期高血压疾病对早产大鼠甲状腺形态及功能的影响

目的 建立妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy, HDCP)孕鼠模型,观察HDCP对不同胎龄早产大鼠甲状腺形态及功能的影响。方法 SD孕鼠随机分为对照组和HDCP组,HDCP组自妊娠期(gestational day, GD)第13天起注射左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME;250 mg/(kg·d)),对照组注射等量生理盐水。早产大鼠于GD18～21行剖宫产术获得,记录两组仔鼠体重及身长;分离肝及甲状腺,肝组织匀浆用于检测甲状腺激素水平,甲状腺组织用于观察甲状腺形态及超微结构。结果 与对照组相比,HDCP组孕鼠血压及尿蛋白明显升高(P<0.05);HDCP组早产大鼠体重及身长明显低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,HDCP组19～21 d早产大鼠TSH水平明显升高(P<0.01),T3、T4水平差异无显著性;HE染色显示,对照组仔鼠滤泡腔于GD18出现,而HDCP组于GD19出现,且数量明显减少;透射电镜下,HDCP组粗面内质网明显肿胀、脱颗粒,伴储积物。结论 成功建立HDCP孕鼠模型;与对照...     

菊藤胶囊对应激性高血压大鼠血压及血液ET、NO含量的影响

目的:探讨了菊藤胶囊对应激性高血压(SIH)大鼠血压影响的可能机制。方法:采用电击足底应激刺激的方法制备应激性高血压大鼠模型,观察每天应激刺激前灌服菊藤胶囊对应激大鼠血压的影响,检测血清一氧化氮(NO)、血浆内皮素(ET)水平。结果:模型组血压显著升高,模型组与其它各组血压比较差异均有统计学意义(P<0.01)。正常组、卡托组、菊高组之间进行比较,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,菊藤胶囊高中剂量组、西药组可使SIH血清NO水平显著升高(P<0.01),高中剂量组、西药组可使血浆ET水平显著下降(P<0.01);正常组、西药组、中药高剂量组之间进行比较并无显著性差异。结论:SIH形成与血清NO水平下降、血浆ET水平升高有关,菊藤胶囊能有效降低血压,其降压机制可能与调整血清NO、血浆ET水平有关。     

自发性高血压大鼠血管对α_1肾上腺素受体自身抗体的血管收缩作用敏感性增强

自身免疫学机制在高血压的发生发展中具有不可忽视的作用.本研究组的前期研究表明,高血压患者血清中存在高水平的α1肾上腺素受体自身抗体(α1-AA),并对正常大鼠具有α1-AR激动剂样缩血管效应.本研究利用血管环张力测定技术观察并比较该抗体对自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠胸主动脉的收缩作用,分别采用酶联免疫吸附测定、免疫组化和免疫印迹技术观察主动脉中硝基酪氨酸和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况.结果表明,自发性高血压大鼠胸主动脉对去氧肾上腺素(α1-AR特异性激动剂)与α1-AA(1 nmol/L~10μmol/L)的缩血管作用明显增强(P0.05);去除内皮或利用非特异性一氧化氮合酶阻断剂(L-NAME)后,α1-AA的缩血管作用明显增强(P0.05).iNOS特异性阻断剂1400W(10μmol/L)可以削弱上述WKY大鼠胸主动脉收缩的增强作用,而在SHR未观察到.SHR胸主动脉组织中硝基酪氨酸和iNOS的蛋白表达水平明显高于WKY大鼠.本研究结果表明,SHR对α1-AA的缩血管反应明显增强,这一变化与血管内皮功能障碍以及NO生物利用率降低有关,提示α1-AR自身免疫在高血压的发病机制和控制中,尤其是对α1-AA阳性的高血压患者发挥重要作用.     

海带多糖对实验性动脉粥样硬化大鼠血脂和NO及NOS的影响

探讨海带多糖(LJP)对实验性动脉粥样硬化(AS)大鼠血脂和NO及NOS的影响。采用高脂饲料+维生素D3(VD3)饲养方法建立大鼠动脉粥样硬化模型,12周造模成功后,将大鼠随机分为6组,每组10只,分别为正常组、模型组、辛伐他汀对照组及海带多糖低剂量(250 mg·kg-1·d-1)、中剂量(500 mg·kg-1·d-1)、高剂量(1 000 mg·kg-1·d-1)治疗组。海带多糖治疗组在给药8周后,制备主动脉冰冻切片,HE染色观察主动脉病理组织学变化。颈动脉取血测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量;分别测定血清与主动脉中的一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)水平。结果显示,与模型组比较,HE染色观察发现LJP治疗组能抑制内膜与中膜平滑肌增生,减少主动脉内皮脂质沉积与胆固醇的结晶;与模型组比较,高剂量LJP可明显降低大鼠血清中TC、TG、LDL-C水平,同时LJP也会明显提高HDL-C水平(p0.05),中剂量LJP能够降低大鼠血清中TG水平,同时LJP也会明显提高HDL-C水平(p0.05),高、中剂量的LJP均可提高模型大鼠血清和主动脉中NO和NOS水平(p0.05)。LJP可改善动脉粥样硬化(AS)大鼠血脂水平,对AS形成以及发展具有一定的治疗效果,其可能是机制是通过调节血脂水平,提高NO和NOS的水平,稳定AS斑块,从而有效地抑制AS疾病的发生和发展。     

MAPK信号途径在一氧化氮抑制大鼠心肌肥大中的作用

实验观察了一氧化氮（NO）前体L－精氨酸对肾性高血压大鼠心肌组织eNOS蛋白表达及亚硝酸盐／硝酸盐含量、MKP－1蛋白表达及MAPK活性的影响,以及与心肌肥厚的关系,采用两肾一夹Goldblatt肾性高血压模型,随机分为5组：L－精氨酸高、中、低剂量组,分别于术后第5周给予L－精氨酸50、150及450mg/kg;L－NAME组,腹腔注射L－NAME 10mg/kg,同时给予L－精氨酸150mg/kg;高血压对照组,正常饮水,以及另设的一假手术对照组。用药8周后,用插管法测量大鼠动脉血压、左心室重与体重比值,用胶内原位磷酸化法测MFAPK活性、免疫印迹法检测心肌组织eNOS及MKP－1蛋白表达、酶还原法测定心肌组织亚硝酸盐／硝酸盐－硝酸盐含量。结果表明：（1）L－精氨酸可明显抑制肾动脉狭窄术后的血压升高、左心室重与体重比增加,增加心肌组织eNOS、MKP-1蛋白表达及亚硝酸盐－硝酸盐含量,降低心肌组织MAPK活性,其中以150mg/kg组作用最为明显;（2）NOS抑制剂L－NAME可明显抑制－精氨酸的以上作用,肾性高血压大鼠心肌组织eNOS蛋白表达下降。NO生成减少及MKP－1蛋白表达下降以及MAPK活性增强可能与高血压及心肌厚形成有关,L－精氨酸通过促进心肌组织eNOS蛋白表达、增加NO产生和MKP－1表达、减弱MAPK活性而发挥抗高血压及心肌肥厚的作用。     

SURZB/Kir6.1通道开放剂纳他卡林对低氧致大鼠主动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨纳他卡林对低氧引起大鼠主动脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法:选取大鼠主动脉内皮细胞作为体外低氧损伤的细胞模型,分为正常对照组、低氧模型组、纳他卡林低、中、高剂量组,利用MTT法测定细胞生存率,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)释放,RT-PCR法检测细胞间粘附因子-1(ICAM-1)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平。结果:纳他卡林三个剂量组均可逆转低氧所致的血管内皮细胞功能改变,包括提高内皮细胞生存活力和NO的释放水平,显著抑制低氧引发的内皮细胞ICAM-1,ET-1,VEGF mRNA表达量的上调。结论:纳他卡林对低氧诱发的血管内皮细胞分泌功能改变、细胞通透性增加及炎性因子的分泌均具有保护作用。     

miR-506与PI3K/AKT通路在自发性高血压大鼠心脏重构中的作用

目的:探讨mi R-506和PI3K/AKT信号通路在自发性高血压大鼠心脏重构中的作用。方法:将12只雄性自发性高血压大鼠(Spontaneous Hypertension Rat, SHR)随机分为2组,每组6只。分别为SHR模型组和治疗组(卡托普利,30 mg·kg~(-1)),6只健康WKY大鼠作为空白对照组。SHR模型组和空白对照组灌胃等体积生理盐水,连续给药8周,采用尾动脉测压法测定给药前后各组大鼠血压,采用qRT-PCR法检测各组大鼠心肌miR-506表达量,并检测大鼠心肌组织中SOD和GPx mRNA表达水平,免疫印迹检测大鼠心肌中p-PI3K和p-AKT的蛋白表达量。结果:SHR模型组血压为(184.79±3.35)mmHg,与空白对照组比较显著升高(P0.05),治疗组血压为(133.57±1.43)mm Hg,与SHR模型组相比均显著降低(P0.05)。SHR模型组大鼠心肌中mi R-506、SOD、GPx的RNA相对表达量分别为(0.36±0.05)、(0.27±0.04)和(0.32±0.02),与空白对照组比较显著降低(P0.05),而p-PI3K、p-AKT蛋白水平显著降低(P0.05),与SHR模型组比较,治疗组大鼠心肌中mi R-506以及SOD、GPx的RNA水平显著升高(P0.05),p-PI3K、p-AKT蛋白水平显著升高(P0.05)。结论:在卡托普利治疗高血压的过程中,mi R-506可能通过抑制PI3K/AKT信号通路提高机体的抗氧化能力促进SHR心脏重塑。     

大黄素对膳食诱导的高脂血症大鼠的血脂调节作用及其分子机制

本研究主要对大黄素膳食诱导的高脂血症大鼠的血脂调节作用和其分子机制进行探索。SD雄性大鼠随机分为4组(每组8只):正常组、高脂血症组、辛伐他汀组和大黄素组。正常组给予正常饲料,其它组给予高脂饲料,辛伐他汀组(10 mg/kg)和大黄素组(10 mg/kg)连续灌胃给药38 d,试验结束采血测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),比较各组的动脉粥样硬化指数(AI);肝脏做组织病理学分析;胸主动脉做体外孵育测总一氧化氮(NO),实时荧光定量PCR和免疫印迹分别测血管的内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)的mRNA转录和蛋白表达水平。结果表明:大黄素组能够显著降低TC、TG、LDL-C(P0.05,P0.05,P0.001)和AI(P0.001)。病理学结果显示大黄素能够降低肝细胞的脂肪变性程度。胸主动脉体外培养结果显示大黄素能够显著提高总NO(P0.05);PCR和免疫印迹结果显示大黄素能够上调eNOS的基因和蛋白水平(P0.05,P0.001)。因此,大黄素能够降低血清TC、TG和LDL-C,保护肝细胞,减低动脉粥样硬化发生危险;其作用的分子机制可能与上调内皮细胞eNOS/NO系统、保护血管内皮有关。     

有氧运动辅助常规药物对原发性高血压患者血压和血管内皮功能影响

为了探讨有氧运动辅助常规药物对治疗原发性高血压患者血压和血管内皮功能影响,本研究选取2010年4月至2013年12月本院收治的140例原发性高血压患者,采用抛掷硬币的方法随机分为对照组和治疗组各70例,两组患者均采用硝苯地平联合厄贝沙坦治疗、饮食控制等措施,治疗组患者在医生指导下进行有氧运动,比较两组患者的血压控制情况以及反映高血压患者血管内皮功能的指标血清中一氧化氮(nitric oxide,NO)、内皮素-1 (endothelin-1, ET-1)、基质金属蛋白酶28 (matrixmetalloproteinase-28, MMP-28)、超敏C反应蛋白(high-sensitive C-reactive protein, hs-CRP)水平,通过血流介导的血管扩张(flow mediateddilation, FMD)和硝酸甘油介导的血管扩张反应(nitroglycerin-mediateddilation, NMD)检测血管内皮功能。治疗前,比较两组患者的收缩压(systolic blood pressure, SBP)和舒张压(diastolic blood pressure, DBP)测定值无显著性差异(p0.05);治疗后,治疗组患者的SBP和DBP测定值均明显低于对照组(p0.05);治疗前,比较两组患者的ET-1、NO、hs-CRP、MMP-28的水平均无明显差异(p0.05);治疗后,治疗组患者的ET-1、hs-CRP、MMP-28的水平均明显低于对照组(p0.05),治疗组患者NO水平明显高于对照组(p0.05);治疗前,两组患者的FMD、NMD无明显差异(p0.05);治疗后,治疗组患者的FMD、NMD明显高于对照组(p0.05);治疗后,治疗组患者显效88.57%、有效11.43%,对照组显效74.29%、有效25.71%,两组患者比较具有明显差异(p0.05)。有氧运动辅助常规药物治疗原发性高血压患者有助于进一步降低血压、减轻高血压状态对患者血管内皮功能的损伤。     

有氧运动抑制自发性高血压大鼠心肌中HMGB1/TLR4炎症通路

目的:探讨有氧运动对自发性高血压大鼠心肌中高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein, HMGB1)/Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)炎症通路的影响。方法:成年雄性大鼠分为三组:同源正常血压大鼠(Wistar-Kyoto rats,WKY),自发性高血压大鼠(spontaneoully hypertensive rat, SHR),自发性高血压大鼠运动组(SHR+exercise,SHR+EX)。运动为中等强度跑台运动,自制跑台,倾斜角设置为10度,运动强度逐步增强,持续12周。尾动脉检测血压,收集左心室,Masson染色检测心肌组织纤维化水平,RT-PCR法检测心肌中纤维化相关基因的m RNA水平,ELISA法检测炎症因子白介素6(Interleukin 6, IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)的蛋白水平,Western blot法检测HMGB1和TLR4的蛋白表达。结果:有氧运动可以明显降低SHR大鼠心肌中HMGB1(P0.05)和TLR4(P0.05)的蛋白表达以及炎症因子IL-6(P0.05)和TNF-α(P0.05)的蛋白水平。经过的有氧运动之后,SHR大鼠的体重(P0.05)、收缩压(P0.05)、舒张压明显降低(P0.05);心肌纤维化水平和心肌中I型胶原(P0.05)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β,P0.05)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA,P0.05)的m RNA水平出现显著下降。结论:有氧运动可抑制自发性高血压大鼠心肌中HMGB1/TLR4炎症通路。     

NKCC1在慢性肾脏病大鼠主动脉纤维化中的作用研究

该文探讨了Na-K-2Cl协同转运蛋白1(Na-K-2Cl cotransporter 1,NKCC1)在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)大鼠主动脉纤维化中的作用。采用5/6肾切除方法建立CKD大鼠模型,尾套法测定大鼠血压,脲酶法测定血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐(serum creatinine,Scr);利用苏木素–伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察组织形态,Masson染色观察组织纤维化情况;利用Real-time PCR、Western blot和免疫组织化学染色法检测大鼠肾脏和主动脉组织中NKCC1的表达;体外培养大鼠主动脉内皮细胞(endothelial cell,EC),通过免疫荧光实验观察细胞中Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅲ,Col-Ⅲ)的表达,利用Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、血小板–内皮细胞黏附分子(CD31)、钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达。结果显示,CKD大鼠的平均收缩压(systolic blood pressure,SBP)较术前和假手术组(sham)均明显升高(P0.05),BUN和Scr显著高于sham组(P0.05);CKD大鼠肾脏和主动脉组织损伤严重且纤维化明显,NKCC1的表达较sham组明显增加;醛固酮(aldosterone)使EC中NKCC1、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ增多,间质细胞标志物α-SMA和vimentin上调,内皮细胞标志物CD31和E-cadherin下调,在此基础上用布美他尼(bumetanide)使NKCC1、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ减少,α-SMA和vimentin表达下降,CD31和E-cadherin升高。该研究表明,NKCC1可能通过增强内皮–间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndoMT)促进CKD主动脉纤维化。     

11-羰基-β-乙酰乳香酸抑制自发性高血压大鼠血管重构研究

目的:观察11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)对高血压血管重构的抑制作用。方法:自发性高血压大鼠(SHR)随机分为模型组(SHR),20 mg/kg AKBA低剂量组(AKBA-L),40 mg/kg AKBA高剂量组(AKBA-H)和20 mg/kg替米沙坦组(Telmi),另设Wistar-Kyoto(WKY)空白对照组。各组大鼠分别灌胃给予8周相应药物和蒸馏水。每周监测大鼠收缩压;检测大鼠血液一氧化氮(NO)和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平;评估整体炎性反应和氧化应激水平;苏木精-伊红染色观察血管重构情况;马森染色观察血管胶原沉积情况。结果:8周给药期间,SHR血压持续升高,替米沙坦显著降低血压,但AKBA未显示出明显的血压调节作用。与SHR组相比,AKBA和替米沙坦都有效地减少了血管压力,减少Ang Ⅱ分泌,增加NO的产生(P0.05);其次有效地降低炎性反应和氧化应激,显著改善机体肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和丙二醛(MDA)的表达水平(P0.05)。除此之外,相比SHR组,AKBA显著抑制血管重构,降低血管厚度,横切面积和血管厚度/血管内径比值(P0.05),减少血管胶原沉积(P0.05)。结论:AKBA能有效缓解血管压力和氧化应激,减少胶原沉积,从而有效改善血管重构。     

微小RNA在自发性高血压大鼠主动脉的差异表达

微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是一类基因组编码、非蛋白质编码的小RNA,在转录后水平负性调节靶基因表达.本研究探讨miRNAs在自发性高血压大(spontaneously hypertensive rats,SHR)主动脉的表达特征及其与高血压的关系.取4、8、16和24周龄雄性SHR大鼠及同龄正常血压对照(Wistar-Kyoto,WKY)大鼠.MiRanda、TargetScan和PicTar用于候选miRNAs及靶基因预测分析.通过实时定量RT-PCR检测大鼠主动脉miR-1、miR-133a、miR-155及miR-208的表达,并进一步通过实时定量RT-PCR检测呈差异表达的miR-155和miR-208的预测靶基因mRNA表达.结果显示,SHR大鼠主动脉miR-155表达在4、8、24周时与同龄WKY大鼠无显著差异,但在16周时明显低于同龄WKY大鼠(P<0.05),且大鼠主动脉miR-155表达量与血压呈负相关(r=-0.525,P<0.05).MiR-208表达在4周龄时最高,随年龄增长明显下降(P<0.05),其表达水平与血压和年龄呈负相关(r=-0.400,P<0.05;r=-0.684,P<0.0001),但在SHR和WKY大鼠之间无显著差异.miR-1和miR-133a在各年龄组SHR和WKY大鼠间未呈现差异表达.MiR-155和miR-208表达与相应预测靶基因mRNA表达无显著负相关性.以上结果表明,miR-155表达在成年SHR大鼠主动脉明显低于WKY,并与血压呈负相关,提示miR-155可能参与高血压的发生发展,主动脉miR-155表达异常可能是SHR大鼠血压升高的原因之一.大鼠主动脉miR-208表达在幼年时最高,随年龄增长而明显下降,提示其可能与血管发育有关.     

17β-雌二醇对去卵巢胰岛素抵抗大鼠主动脉舒缩功能损伤的保护作用

为观察17β-雌二醇（17beta-estradiol,17β-E2）对去卵巢胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）大鼠主动脉结构和舒缩功能的影响及其可能机制,成年雌性Sprague-Dawley大鼠卵巢切除后,高果糖喂养8周诱导IR,同时给予生理剂量的17β-E2（30μg／kg）,每天皮下注射一次,并检测IR相关指标。大鼠胸主动脉石蜡切片,HE染色,图像分析系统测定其结构。采用血管环灌流法,观察各组大鼠胸主动脉环对新福林（L-phenylephrine,PE）的收缩反应和对ACh、硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）的舒张反应以及一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲脂（N-nitrl-L-arginine methylester,L-NAME）对卵巢切除＋果糖喂养＋17β-E2组大鼠胸主动脉ACh的舒张反应的影响;检测各组大鼠一氧化氮（nitric oxide,NO）含量。结果显示：（1）17β-E2能防止高果糖诱导的去卵巢IR人鼠收缩压升高、高胰岛素血症和胰岛素敏感性下降;（2）各组火鼠胸主动脉的结构无显著性差异;（3）卵巢切除＋果糖喂养组大鼠与卵巢切除组或果糖喂养组相比,血清NO显著降低,胸主动脉对PE的收缩反应显著增强,对ACh的舒张反应显著降低,17β-E2能逆转上述改变,L-NAME可部分阻断17β-E2的这种作用;（4）各组大鼠胸主动脉对SNP的舒张反应和去内皮后对PE的收缩反应均无显著差异。以上结果表明,17β-E2能抑制高果糖诱导的去卵巢IR大鼠血管舒缩功能的紊乱,其机制一方面可能是部分通过血管内皮细胞NOS途径促进NO的释放,保护内皮细胞;另一方面可能是通过降低血压,血清胰岛素水平,改善IR所致。