牛膝多糖的组分分析及抗衰老活性研究

牛膝多糖(Achyranthes bidentata polysaccharides, ABPS)是苋科植物牛膝(Achyranthes bidentata Bl.)根中的水溶性多糖,先后用DEAE-Sepharose fast-flow柱和Sephadex G-100柱将牛膝粗多糖分为4个组分,分别命名为:Con.1、Con.2、Con.3和Con.4.Micro-Kjeldahl试验表明,Con.1中含有氮元素3.95%,另3个小分子组分不含氮元素.以果蝇为动物模型研究了该4个牛膝多糖组分的抗衰老作用,结果表明,大分子组分Con.1对果蝇无抗衰老作用,而另3个小分子量组分在培养基中浓度为2和5 mg/g(多糖质量/培养基质量)时,都可显著或极显著地使果蝇平均体重增加3.85%-5.47%, 并使果蝇平均寿命延长2.61%-3.16%.     

天麻糖复合物抗衰老作用的实验研究

天麻糖复合物是从兰科植物天麻的根茎中提取的水溶性物质,经柱色谱将其分为两个组分,分别命名为：Con.1,Con.2;考察灌胃后两个组分对小鼠血清中超氧化物岐化酶活性和过氧化脂质含量的影响,同时探讨两个组分对小鼠和果蝇的抗衰老作用及其机制.结果Con.1 0.1g/kg.d能明显提高小鼠血清中T-SOD活性,降低血清中过氧化脂质降解产物（MDA）含量;Con.1可延长果蝇的平均寿命和最高寿命,因此Con.1具有明显的抗衰老作用。但Con.2影响结果不明量.     

云芝、灵芝和柱状田头菇胞外多糖对果蝇寿命的影响

研究了云芝、灵芝、柱状田头菇等3种食药用真菌胞外多糖及复合多糖对黑腹果蝇寿命的影响.分别将3种食药用真菌胞外多糖及复合多糖以1、5g/L的剂量加入果蝇培养基中,观察对黑腹果蝇寿命的影响.结果表明,3种食药用真菌的胞外多糖及复合多糖对果蝇寿命均有不同程度的延长,云芝5g/L、柱状田头菇5g/L、云芝2.5g/L＋柱状田头菇2.5g/L、灵芝2.5g/L＋柱状田头菇2.5g/L对果蝇平均寿命延长率分别达到了36.38%、46.60%、36.69%、47.08%.     

药用昆虫蜣螂对灵芝多糖生物合成的影响

采用液体深层发酵方式,研究了几种药用昆虫对灵芝多糖生物合成的影响。结果表明,药用昆虫蜣螂在添加量为5g/L时能显著促进灵芝胞内多糖(IPS)和胞外多糖(EPS)的形成(P<0.05)。胞内多糖和胞外多糖的产量分别由对照的(1.93±0.09)g/L和(520.3±20.2)mg/L提高到(2.41±0.12)g/L和(608.9±20.2)mg/L。灵芝胞内多糖和胞外多糖在DEAE纤维素柱上都可分离得到5种主要组分,其中IPS-1和EPS-1分别为2类多糖的主要组分。进一步用凝胶柱分离显示,IPS-1由3个单个的组分组成,EPS-1由2个单个的组分组成。添加蜣螂发酵后,灵芝胞内多糖和胞外多糖中没有出现新的组分,且各组分的相对含量也没有显著变化(P>0.05),提示添加蜣螂发酵后,灵芝胞内多糖和胞外多糖主要组分的合成途径并未改变。     

复合诱变选育高效转化DHEA为7α,15α-diOH-DHEA的菌株及其转化工艺优化

结合酮康唑抗性筛选法,采用亚硝基胍和低能氮离子注入复合诱变方法筛选得到一株高效生物转化去氢表雄酮(D H E A)为3β,7α,1 5α-三羟基雄甾-5-烯-1 7-酮(7α,1 5α-d i O H-D H E A)的菌株亚麻刺盘孢C o l l e t o t r i c h u m l i n i S T-1,该突变株在底物D H E A投料浓度为1 0 g/L时产物摩尔得率达到3 4.2%,较出发菌株提高了4 6.2%。在此基础上进行培养基组分的优化,采用P l a c k e t t-B u r m a n实验设计考察转化培养基中各组分对产物摩尔得率的影响,有效筛选出葡萄糖、酵母粉和M g S O4·7 H2O浓度对产物摩尔得率影响显著,继而采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,并利用中心组合响应面设计实验对3个显著性因素的最佳水平进行研究,得到最适转化培养基组分为(g/L):葡萄糖2 6.3 4;酵母粉1 2.1 5;玉米浆3.0 0;F e S O4·7 H2O 0.0 1 5;M g S O4·7 H2O0.1 4;K H2P O40.9 0。采用该优化培养基,菌株C.l i n i S T-1的产物摩尔得率达到4 9.3%,较优化前提高了4 4.2%。     

不同分子量菊芋多糖的生物活性研究

研究不同醇沉组份的菊芋多糖分子量和其抑制α-葡萄糖苷酶活性与抗氧化活性差异。菊芋水提物分级醇沉获得粗多糖,过Sephadex G-50凝胶柱进行纯化,得到重均分子量为1959、2180、2746、2011 Da的多糖组分:JAP-1、JAP-2、JAP-3和JAP-4。测定这些组分体外抑制α-葡萄糖苷酶活性和对DPPH与羟基自由基清除能力。结果表明,JAP-4具有较明显的抑制α-葡萄糖苷酶活性,在5 mg/mL时抑制率为20.32%。JAP-1、JAP-2、JAP-3和JAP-4均有显著的抗氧化活性,其中JAP-2对DPPH自由基和羟基自由基的清除活性优于其他组分。JAP-2在2 mg/mL时对DPPH自由基和羟基自由基清除率分别达到84.50%和89.74%,接近于Vc的抗氧化活性。不同分子量菊芋多糖的活性存在差异,可能是由于分子量的不同所导致。     

米酒乳杆菌胞外多糖BXR-5-3生物合成条件的研究

主要针对来源于内蒙古锡林郭勒牧区马奶酒中的米酒乳杆菌BXR-5-3进行胞外多糖生物合成能力进行研究,分别改变基础培养基的碳源、氮源以及发酵温度、时间、pH等条件,探讨其对BXR-5-3胞外多糖生物合成能力的影响.优化的培养基MRSB的组成为蛋白胨1.0%,胰蛋白胨1.0%,葡萄糖1.5%,乳糖1.5%,K2HPO4 0.2%,MnSO4*4H2O 0.02%,MgSO4*7H2O 0.02%,醋酸钠0.5%,酵母粉0.5%,Tween80 1 mL/L,确定其胞外多糖的最佳生物合成条件为初始pH 6.5,发酵温度 35 ℃,发酵时间 26 h.优化的条件显著提高了EPS的合成量.     

球根秋海棠的快速繁殖

1　植物名称　球根秋海棠 (Ｂｅｇｏｎｉａｔｕｂｅｒｈｙｂｒｉｄａ)。2　材料类别　种子、茎段、茎尖。3　培养条件　 ( 1 )种子萌发培养基 :ＭＳ 2 %蔗糖 ;( 2 )茎段、茎尖初始培养基 :1 /3ＭＳ 6 ＢＡ 0 .2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＩＢＡ 0 .0 2 2 %蔗糖 ;( 3)增殖培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ 0 .5～ 1 .0 ＩＢＡ 0 .2 2 .5 %蔗糖 ;( 4 )生根培养基 :1 /2ＭＳ ＩＢＡ 0 .5 3%蔗糖。上述培养基中均加入ＰｏｌｙＧｕｍ 4.5 ｇ·Ｌ- 1(ＰｏｌｙＧｕｍ是河北省林业科学院和河北省科技大学轻工系联合研制的微生物多糖培养基固化剂 )…     

两种虫草相关真菌分级醇沉胞外多糖对果蝇寿命及SOD和MDA的影响

目的研究多糖对果蝇寿命及超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响。方法通过将不同浓度乙醇分级沉淀得到的两种虫草相关真菌蝙蝠蛾拟青霉和地生枝顶孢霉胞外多糖分别添加到果蝇饲料中,研究不同多糖组分对果蝇寿命及其体内SOD和MDA含量的影响。结果蝙蝠蛾拟青霉胞外多糖组分P60能显著延长雌雄果蝇的平均寿命,分别达17.04%和18.36%,显著提高雌雄果蝇体内SOD活力(28.02%和26.85%),MDA含量分别降低了50.67%和54.30%;地生枝顶孢霉胞外多糖组分G50显著延长雌雄果蝇的平均寿命,分别达到15.62%和15.96%,显著提高雌雄果蝇体内SOD活力,分别为42.55%和26.74%,明显降低MDA含量,分别为47.30%和49.00%。结论多糖组分P60和G50能显著延长果蝇寿命,提高其SOD活力和降低MDA含量。     

甜瓜的组织培养与植株再生

1　植物名称　甜瓜 (Ｃｕｃｕｍｉｓｍｅｌｏ)品种“伽师瓜”。2　材料类别　成熟甜瓜种子无菌苗的子叶。3　培养条件　种子萌发培养基 :(1 ) 1 / 2ＭＳ(大量元素减半 ) 2 %蔗糖。愈伤组织诱导培养基 :(2 )Ｍｉｌｌｅｒ 6 ＢＡ 5 .0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＺＴ 0 .0 1 3 %蔗糖。丛生芽诱导培养基 :(3 )Ｍｉｌｌｅｒ 6 ＢＡ 2 .0 3 %蔗糖 ;(4)Ｍｉｌｌｅｒ 6 ＢＡ 0 .5 3 %蔗糖。芽伸长培养基 :(5 )Ｍｉｌｌｅｒ 6 ＢＡ 0 .1 3 %蔗糖 ;(6 )Ｍｉｌｌｅｒ 6 ＢＡ 0 .0 1 3 %蔗糖。生根培养基 :(7) 1 /2ＭＳ(大 ) ＮＡＡ 0 .0…     

牛膝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的细胞毒作用影响及机制

研究牛膝多糖(ABPS)对巨噬细胞细胞毒作用的影响及机制。以200 mg/L浓度的ABPS体外刺激小鼠腹腔来源巨噬细胞,采用MTT法检测细胞毒作用,Griess试剂盒检测NO的生成,Real-Time PCR和Western blot分别检测i NOS mRNA和蛋白的表达。结果显示,浓度为200 mg/L的ABPS对巨噬细胞细胞毒作用和NO表达有显著的促进作用,对i NOS mRNA和蛋白表达均有明显的促进作用。研究结果提示ABPS可能通过增强细胞内i NOS表达,促进NO生成和释放,从而促进巨噬细胞细胞毒作用。     

牛膝不同密度群体光合速率与干物质积累和品质的关系

在大田条件下,探讨不同种植密度(A,500 000;B,330 000;C,250 000;D 200 000株/hm2)与牛膝的群体光合速率、干物质积累、产量及多糖含量之间的关系.结果表明:群体光合速率B处理较高,各群体日变化在开花期均呈双峰型,籽盛期均为单峰型;单株根干重和单位面积根产量的拟合均呈Logistic曲线变化;不同密度处理单株根干重增加速率为D>C>B>A,而单位面积根产量增加速率为B>C>D>A;密度与产量呈负相关,与多糖呈正相关;各处理群体光合速率与产量呈显著正相关,与多糖含量在开花和籽末期呈负相关.综合分析显示,330 000株/hm2为牛膝最佳种植密度;密度对牛膝产量和多糖含量影响较大,适当地提高籽粒期群体光合速率有利于提高牛膝产量和质量.     

牛膝多糖衍生物的几种取代度测定方法的探讨

在研究多糖的结构与功能关系时 ,多糖经化学修饰后 ,其取代基的多少和取代位置均对活性有重要的影响 ,因此对于离子型牛膝多糖衍生物和非离子型牛膝多糖衍生物 ,如何准确测定其取代度非常重要。通过运用酸碱滴定法 (ABT)、原子吸收光谱法 (AAS)、傅立叶变换红外光谱法 (FTIR)和高效液相色谱法(HPLC)相对照分别对羧甲基牛膝多糖 (CM Abps)和羟乙基牛膝多糖 (HE Abps)的取代度进行测定 ,实验结果发现在DS <1.0范围内 ,测得CM Abps的几组数值均比较接近 ,且线性关系较好 ;在DS <2 .0范围内 ,测得HE Abps的几组数值均比较接近 ,线性关系也较好。研究表明 ,运用ABT、AAS、FTIR和FTIR相对照测定CM Abps和HE Abps的取代度是切实可行的 ,而且方法快速简捷 ,精确度和重现性较好。     

ABPS诱导单核细胞HLA-DR表达

目的研究牛膝多糖(ABPS)在体外激活单核细胞的效应.方法采集健康成人抗凝血,用贴壁法分离单核细胞,调节细胞数接种到24孔板.在370 C,5%CO2条件下,以同一时间不同ABPS浓度或同一ABPS浓度不同时间培养,用流式细胞术和电镜检测单核细胞的激活.结果 ABPS诱导单核细胞超微结构和HLA-DR的改变.结论 ABPS上调HLA-DR表达并能激活单核细胞.     

蝎毒抗癌组分SVⅡ分离法的优化研究

目的比较三种柱径的分子筛G-50凝胶层析柱分离东亚钳蝎蝎毒的柱效;并对分离所得组分作MTT（酶反应比色法）抗肿瘤活性作用研究,为从中研制和开发出高效、低毒的新型抗癌特效药筛选出目标组分。方法（1）采用三种规格的分子筛层析柱分离蝎毒;（2）HPLC色谱分析比较各组分的指纹图谱;（3）MTT法观察不同浓度（1、10、100mg／L）的蝎毒及其组分对四种肿瘤细胞（HL-60、A549、K562／ADR、K562／S等）的毒性作用。结果经过分子筛柱层析,可从蝎毒（Scorpion venom,SV）获取三个组分SVⅠ、SVⅡ、SVⅢ;经HPLC色谱分析,各组分明显含有四种以上单体成分;MTT法研究表明,SVⅡ对四种肿瘤细胞的细胞毒性较原毒强,剂量-效应关系较好,而SVⅠ、SVⅢ对四种肿瘤细胞抑制作用不明显。结论（1）利用大柱径的层析柱分离蝎毒的柱效较高;（2）组分SVⅡ是蝎毒抗癌的目标组分,且其对耐药细胞株（K562／ADR）的抑制作用比阳性对照组强,有待进一步的分离纯化,筛选出色谱纯的抗癌活性成分（多肽单体）。     

Suppressive effect of polysaccharides from the edible and medicinal mushrooms,Lentinus edodes and Agaricus blazei,on the expression of cytochrome P450s in mice

To investigate the effects of lentinan from Lentinas edodes and polysaccharides from Agaricus blazei (ABPS) on the expression of cytochrome P450s (CYPs), lentinan (10 mg/kg/day) or ABPS (200 mg/kg/day) was administered to female BALB/c mice four times every other day by intraperitoneal injection. Lentinan and ABPS suppressed both the constitutive and 3-methylcholanthrene-induced CYP1A expression and ethoxyresorufin-O-deethylation activity in the liver.     

四种不同来源的超氧化物歧化酶（SOD）对黑腹果蝇寿命、 繁殖力和抗逆能力的影响

【目的】 评价不同来源的超氧化物歧化酶（SOD）对果蝇延长寿命, 增强繁殖力和抗逆能力的功效。【方法】以黑腹果蝇Drosophila melanogaster为实验材料, 比较研究从家蝇Musca domestica中提取的SOD、 在毕赤酵母Pichia pastoris中重组表达的人hEC SOD、 在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中重组表达的中国拟青霉Paecilomyces sinensis SOD (ps-SOD)以及商品SOD对果蝇寿命、 繁殖力和抗逆能力的影响。【结果】在饲料中添加4种SOD均能显著延长果蝇的平均寿命, 雌果蝇寿命延长8.09%~12.38%, 雄果蝇寿命延长12.01%~15.86%; F1代雌性子代数量增加25.94%~30.07%, 雄性增加21.75%~39.54%。果蝇的耐高温和抗紫外辐射能力与添加的SOD浓度有关。在饲料中添加较高剂量的SOD, 使热暴露雌性果蝇的寿命延长7.45%~9.88%, 雄性果蝇延长13.46%~15.12%; 受紫外线辐射的雌性果蝇的寿命延长13.47%~20.47%, 雄性果蝇延长16.49%~23.73%。【结论】综合评价认为, 4种SOD均能延长果蝇寿命, 增强其繁殖力和抗逆能力, 但这些功效在本研究供试的4种SOD间无显著差异, 为不同来源SOD的应用提供了重要数据。     

牛膝多糖对草鱼免疫和抗氧化功能的影响

为探讨在饲料中添加牛膝多糖(ABP)对草鱼免疫和抗氧化功能的影响, 选取平均体重(88.130.76) g的健康草鱼375尾, 随机分成5个处理, 即基础饲料组、0.05 %、0.10 %、0.20 %、0.40 % ABP添加组, 每个处理3个重复, 每个重复25尾鱼, 饲养65 d。结果表明, 在饲料中添加ABP对草鱼头肾体指数影响不显著(P0.05), 对脾体指数影响显著(P0.05), 与对照组相比, 0.05 %、0.10 %、0.20 %和0.40%添加组脾体指数分别增加6.29% (P0.05)、28.00% (P0.05)、9.14%(P0.05)和13.14% (P0.05); 血液中NBT阳性细胞数随着ABP添加量的增加呈增加的趋势, 但各组间差异不显著(P0.05); 在饲料中添加ABP对草鱼血清白蛋白、白介素-１(IL-1)、白介素-6(IL-6)含量和过氧化氢酶活影响不显著(P0.05), 显著影响草鱼血清总蛋白(TP)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、-肿瘤坏死因子(TNF-)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量(P0.05)。与对照组相比, 0.40%添加组的TP和AKP分别增加24.64% (P0.05)和33.56% (P0.05); 0.20 %、0.40 %添加组的LZM活力分别增加34.97% (P0.05)和31.21% (P0.05), SOD活力分别增加27.28% (P0.05)和22.41% (P0.05); 饲料中随着ABP添加剂量的增加, 各组血清ACP活性先增加后缓慢下降, MDA含量先下降后上升。与对照组相比, 0.20%、0.40 %添加组ACP活性分别增加15.33% (P0.05)和11.10% (P0.05), 0.05%、0.10 %、0.20 %及0.40%添加组MDA含量分别下降11.97% (P0.05)、21.33% (P0.05)、32.37% (P0.05)和2.53% (P0.05)。饲料中随着ABP添加量的增加, 各组草鱼血清TNF-含量变化规律不明显, 但与对照组相比, 0.20%添加组TNF-含量显著增加(P0.05)。综上所述, 在草鱼基础日粮中添加适量牛膝多糖可以提高草鱼的免疫和抗氧化能力, 建议添加量为0.20%。       

红托竹荪菌托多糖的提取及抗肿瘤活性的初步研究

红托竹荪菌托经热水提取、酒精沉淀、脱蛋白后的粗多糖,其得率远大于其菌丝体和子实体的其他部位及香菇子实体.菌托粗多糖进一步用DEAE纤维素柱和Sephadex G-75分离纯化,得到两个组分DRVP1与DRVP2,对分离得到的主要多糖通过高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)等进行结构分析.DRVP1的相对分子质量(Mr)为1.47×104,红外光谱数据显示为β-型甘露糖苷.体外试验表明,红托竹荪菌托多糖的组分DRVP1对小鼠S180肉瘤有一定的抑制作用.     

红托竹荪菌托多糖的提取及抗肿瘤活性的初步研究

红托竹荪菌托经热水提取、酒精沉淀、脱蛋白后的粗多糖,其得率远大于其菌丝体和子实体的其他部位及香菇子实体。菌托粗多糖进一步用DEAE纤维素柱和Sephadex G-75分离纯化,得到两个组分DRVP1与DRVP2,对分离得到的主要多糖通过高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（IR）等进行结构分析。DRVP1的相对分子质量（Mr）为1.47×104,红外光谱数据显示为β-型甘露糖苷。体外试验表明,红托竹荪菌托多糖的组分DRVP1对小鼠S180肉瘤有一定的抑制作用。