干旱对小麦幼苗诱导蛋白表达与某些生理特性的初步探讨

试验以－１．２ＭＰａＰＥＧ６０００处理动小麦种子（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｌｉｖｕｍＬ．）．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱分析表明,水分胁迫诱导幼芽及整株均产生４８．４ｋＤ、４１．５ｋＤ二个蛋白质亚基。在幼根中未出现以上二个蛋白亚基。胁迫４８ｈ后,根干重／芽干重比呈上升趋势,幼芽细胞膜楔对透性增大和相对含水量降幅度均大于幼根。     

水分胁迫对小麦捕光色素蛋白复合物的影响

棉农４号春小麦幼苗（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｕｖｕｍ Ｌ．ｅｖ ．Ｍｉａｎｎｏｎｇ Ｎｏ．４）经一０．５ＭＰａ ＰＥＧ溶液渗透胁迫２４、４８和７２ｈ,使叶片分别受到轻蔗、中度和重度的水分胁迫。在渐进水分腔迫条件下,叶绿体类囊体膜中光系统Ⅱ捕光色素蛋白得合物（ＬＣＨ Ⅱ）的各组分含量发生了不同变化。对类囊体纱蛋白复合物进行的温和电泳结果显示,在轻度水分胁迫（２４ｈ）时,明轻度水分胁迫对其有诱导作     

小麦幼芽水分胁迫诱导蛋白的特征

水分胁迫（－1．2MPaPEG-6000）处理萌动的小麦种子,24h后诱导小麦幼芽产生41．5kD蛋白,其含量随着胁迫时间延长明显增加,48h时含量最高,到72h后不再变化。复水后,该蛋白消失;再胁迫48h时则又出现,其含量与处理24h时相当。41．5kD诱导蛋白主要位于细胞器膜上,细胞质中几乎不存在。41．5kD蛋白主要溶于10％NaCl提取液中,其等电点为pl5．65。该蛋白的氨基酸组成中,脯氨酸含量最高,其次为丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸,没有发现半胱氨酸和组氨酸。     

百草枯和苯甲酸钠对渗透胁迫下抗旱性不同玉米品种愈伤组织的影响

两个品种玉米愈伤组织经０．５和５ｍｍｏｌ／Ｌ的百草枯处理３ｈ后,在渗透胁迫下处理２４ｈ电解质泄漏率增加;Ｈ２Ｏ２和ＭＤＡ积累;ＡｓＡ和ＣＡＲ含量的减少加剧。０．５和５ｍｍｏｌ／Ｌ的苯甲酸钠减轻渗透胁迫诱导的氧化伤害,促进ＣＡＴ活性的增加;使ＳＯＤ、ＧＲ、ＡＰ和ＰＯＤ能维持较高的活性;ＡｓＡ和ＣＡＲ含量降低的幅度减小。     

小球藻RubisCO的纯化及其在异养向自养转变过程中的含量变化

经硫酸铵分部沉淀、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－３００和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析纯化了小球藻ＲｕｂｉｓＣＯ,得率为１５％,比活力达１．２３２μｍｏｌＣＯ２ｍｓ－１ｍｉｎ－１,分子量是５００ｋＤ,它和菠菜叶片ＲｕｂｉｓＣＯ在分子量、亚基组成和免疫特性等方面相似,反映ＲｕｂｉｓＣＯ在高等和低等植物中有较高的同源性。自养小球藻ＲｕｂｉｓＣＯ占细胞可溶性蛋白质的２４％。而异养转变后的小球藻细胞内不含ＲｕｂｉｓＣＯ。异养小球藻向自养生长转变过程中,２０ｈ后细胞内叶绿素含量逐渐增加,２４ｈ时细胞内出现ＲｕｂｉｓＣＯ,２４ｈ后大量增加,至４１ｈ时含量达最高峰;标志着小球藻细胞光合作用能力的恢复和加强。     

复水对玉米光系统Ⅱ捕光叶绿素a／b—蛋白复合体的影响

研究了水分胁迫再复水后玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）叶片中光系统Ⅱ捕光叶绿素ａ／ｂ蛋白复合体（ＬＨＣⅡ）的构象和其含量的变化。培养１０ｄ的玉米幼苗在停止灌水４８ｈ或７２ｈ后,恢复灌水并继续培养２４ｈ。此时叶片水分均能恢复到对照水平。７２ｈ的水分胁迫使得ＬＨＣⅡ的叶绿素和辅基蛋白的含量以及编码ＬＨＣⅡ的基因的转录本水平严重下降,而在复水２４ｈ后这些含量都没有恢复到对照水平。ＬＨＣⅡ在类囊体膜上的构象在７２ｈ水分胁迫处理时也受到严重影响,２４ｈ复水后构象对水分的响应较敏感,而其组分的代谢和基因表达是一个较长期的响应。     

不同品种花生种子蛋白质的电泳分析

对中国花生（ＡｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａＬ．）５种不同类型的４６个栽培品种的种子蛋白质进行电泳分析。ＳＤＳＰＡＧＥ和ＩＥＦＳＤＳＰＡＧＥ（双向电泳）的结果显示,不同品种的花生种子蛋白多肽组成存在４种类型。与初步纯化的花生球蛋白及伴花生球蛋白的ＳＤＳＰＡＧＥ结果比较,花生种子蛋白组成的主要差异在于花生球蛋白亚基组成的不同,其中类型Ⅰ花生球蛋白主要含有４１ｋＤ、３８５ｋＤ和２个１８ｋＤ亚基,类型Ⅱ主要含４１ｋＤ、３８５ｋＤ、３７５ｋＤ和３个１８ｋＤ亚基,类型Ⅲ主要含４１ｋＤ、３８．５ｋＤ、３６．５ｋＤ和３个１８ｋＤ亚基,类型Ⅳ主要含４１ｋＤ、３８．５ｋＤ、３７５ｋＤ、３６．５ｋＤ和３个１８ｋＤ亚基。不同品种的伴花生球蛋白多肽组成基本一致。对不同类型８个品种种子蛋白的氨基酸组成进行测定,发现类型Ⅰ的含硫氨基酸含量较高。     

水分胁迫对小麦幼苗及悬浮培养细胞中诱导蛋白表达的影响

丰抗8号小麦幼苗及成熟胚诱导的悬浮培养细胞在水分胁迫（－1．0MPa PEG6000）下,可溶性蛋白含量与蛋白组分变化有差异,幼苗可溶性蛋白含量高于对照,并随生长的延长呈降低趋势;悬浮培养细胞可溶性蛋白含量低于对照,且略有上升;复水后均可恢复对照水平,SDS－PAGE电泳及薄层扫描分析结果表明,幼苗受水分胁迫诱导,出现44．2kD蛋白亚基,该蛋白亚基含量可随胁迫时间延长上升,复水后消失,在正常条件下悬浮培养细胞中含有44．2kD蛋白亚基表达,轻度胁迫处理时,该蛋白亚基含量上升,对悬浮培养细胞进行水分胁迫,该蛋白则表现下降趋势,复水后又可上升。     

草菇低温诱导蛋白研究初探

对低温处理的草菇Ｖｏｌｖａｒｉｅｌｌａ ｖｏｌｖａｃｅａ菌丝体的可溶性蛋白进行分析,发现草菇菌丝在低温协迫中有新的可溶性蛋白产生,应用电泳技术分离纯化了草菇菌丝体中的一个低温诱导蛋白,经等电聚焦分析,该蛋白质的等电点６．７９,ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析该蛋白质是由分子量为７０ｋＤ和４８ｋＤ的两条多肽所组成。     

高等植物Rubisco的组装及其中间产物的鉴定

将新鲜制备的不含Ｒｕｂｉｓｃｏ的水稻叶片低分子量蛋白组分在离体条件下于室温保温４８ｈ,ＮＤ－ＰＡＧＥ分析发现在ＡＴＰ ５ｍｍｏｌ／Ｌ和Ｍｇ＾２＋ ５ｍｍｏｌ／Ｌ的作用条件下,在分子量为５６０ｋＤ位置上有一蛋白带生成。高浓度的Ｋ拓一定程度上抑制它的形成,在保温介质中没有ＡＴＰ存在时,不能产生５６０ｋＤ分子量的条带,但有一更高分子量（约６００ｋＤ）蛋白条带的产生,这一条带能在ＡＴＰ和Ｍｇ＾２＋作用下发     

球形芽孢杆菌LP1-G的发酵特性及杀蚊活性

球形芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ）ＬＰ１－Ｇ菌株在ＭＢＳ培养基上能正常生长、发育,产生位于芽孢孢外膜外的伴孢晶体。其产生的４１．９和５１．２ｋＤ二元毒素蛋白合成于芽孢形成期,另一分子量约为４９ｋＤ蛋白和二元毒素同期合成,并随着芽孢的释放而被降解。生物测定结果表明该菌株在营养体生长阶段对致倦库蚊幼虫无毒,孢子囊初期毒力较高,并在整个芽孢形成期都维持较高的毒力水平。其全发酵液对敏感和抗性库蚊幼虫都具有中等的毒杀作用,对３～４龄幼虫４８ｈ的ＬＣ_５０。值分别为０．１１３和０．１３７ｍｇ／ｍＬ。该菌株对敏感和抗性致倦库蚊幼虫的毒杀作用可能同其产生４９ｋＤ蛋白相关。     

溴氰菊酯对鸡脑突触膜蛋白磷酸化和Ca-ATP酶活力的影响

研究了神经毒性杀虫剂———溴氰菊酯对体内源性蛋白质磷酸化作用的影响。结果表明,浓度为１０－５ｍｏｌ／Ｌ溴氰菊酯明显抑制正常鸡和经三甲基苯基磷酸酯处理的鸡脑突触膜中５５ｋＤ和６０ｋＤ两种蛋白的磷酸化。而０２５ｍｍｏｌ／ＬＣａ２＋加０２５ｍｍｏｌ／Ｌ的钙调蛋白则明显地促进这两种蛋白质的磷酸化,但较低浓度（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）时,溴氰菊酯明显抑制４８ｋＤ蛋白的磷酸化。而００３ｍｍｏｌ／ＬＣａ２＋加００３ｍｍｏｌ／Ｌ的钙调蛋白则明显地增强４８ｋＤ和４５ｋＤ两种蛋白的磷酸化。此外,还发现溴氰菊酯可抑制鸡脑突触膜中ＣａＡＴＰ酶活力。     

重组人骨形成蛋白—3羧基端肽在大肠杆菌中表达及其诱骨活性

以双顺反子表达载体,在大肠杆菌中经ＩＰＴＧ诱导表达了人骨形成蛋白－３羧基端肽段（ｈＢＭＰ－３Ｃ）,表达量占菌体总蛋白量的１８．５％。目的蛋白为２５ｋＤ、含ｈＢＭＰ－３Ｃ端２１５个氨基酸残基组成的肽段,包括ｈＢＭＰ－３成熟肽和一部分前肽。表达产物以包涵体的形式存在,用含ＴｒｉｔｏｎＸ－１００的洗涤液和５ｍｏｌ／Ｌ以下脲溶液连续涤,可获得较高纯度的重组人骨形成蛋白－３Ｃ端肽,经复性处理成可溶性蛋白,植     

球形芽孢杆菌LP1-G的发酵特性及杀蚊活性*

球形芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ）ＬＰ１－Ｇ菌株在ＭＢＳ培养基上能正常生长、发育,产生位于芽孢孢外膜外的伴孢晶体。其产生的４１．９和５１．２ｋＤ二元毒素蛋白合成于芽孢形成期,另一分子量约为４９ｋＤ蛋白和二元毒素同期合成,并随着芽孢的释放而被降解。生物测定结果表明该菌株在营养体生长阶段对致倦库蚊幼虫无毒,孢子囊初期毒力较高,并在整个芽孢形成期都维持较高的毒力水平。其全发酵液对敏感和抗性库蚊幼虫都具有中等的毒杀作用,对３～４龄幼虫４８ｈ的ＬＣ_５０。值分别为０．１１３和０．１     

BA对花生叶片腺苷酸含量和能荷的影响

去顶去根花生幼苗库叶（上位叶）经１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ ＢＡ涂抹处理１２ｈ和４８ｈ时,库叶ＡＴＰ含量增加,分别高于对照１９．４％和３３．１％。ＡＤＰ含量在处理后１２－３６ｈ,不断增加,以后逐渐降低,接近对照水平,ＢＡ处理库叶减少ＡＭＰ含理。ＢＡ促进库叶能荷值增加,调节总腺苷酸含量的动态变化。ＢＡ处理库叶１２ｈ,叶片组织和线粒体呼吸速率增加,加强了线粒体氧化磷酸化和能量传递的过程。     

甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的高效表达

将甜菜坏死黄脉病毒内蒙古分离物的外壳蛋白基因亚克隆到ｐＪＷ２上构建成在大肠杆菌中表达的载体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测的结果表明,该表达载体在大肠杆菌ＤＨ５α中经温度诱导后特异地表达２１ｋＤ的甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白。经光密度扫描估测,其表达量占大肠杆菌总蛋白的１９．５％。     

体外培养大鼠星形细胞的缺糖缺氧性损伤及药物的保护

本实验用大鼠星形细胞体外培养模型,观察了细胞在不同条件下乳酸脱氨酶（ＬＤＨ）的漏出。发现当去掉葡萄糖后,细胞缺氧５和７ｈ后ＬＤＨ漏出明显增加,５ｂ为５９．７±２５．３Ｕ／ｍｇ蛋白（对照组２４．７±１６．３,Ｐ＜０．０５）,７ｈ为６８．３±８９Ｕ／ｍｇ蛋白（对照组３９．９±２１２,Ｐ＜０．０１）。用３－氧－甲基－［１－￣３Ｈ］－Ｄ－葡萄糖摄取法测量细胞体积,结果显示缺糖缺氧５ｈ后细胞明显肿胀,从对照组的４．１±１．２增加到８．１±３．２μｌ／ｍｇ蛋白（Ｐ＜０．０１）。丹参有效成分７６４－３在０．５至５０μｍｏｌ／Ｌ时能减少缺糖缺氧细胞ＬＤＨ漏出;在５０μｍｏｌ／Ｌ时能减小缺糖缺氧细胞的体积。谷氨酸受体拮抗剂ＤＮＱＸ（６,７－ｄｉｎｉｔｒｏｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ－２,３ｄｉｏｎｅ）５０μｍｏｌ／Ｌ能减轻星形细胞肿胀和ＬＤＨ漏出。     

与光系统Ⅱ颗粒结合的对DTT敏感的蛋白酶的纯化和性质

菠菜光系统Ⅱ颗粒的１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ抽提液经ｂｕｔｙｌ－Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ６５０Ｍ疏水层析和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析分离得一种对ＤＴＴ敏感的蛋白酶。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｓｕｐｅｒｏｓｅ１２凝胶过滤测得该酶的分子量为３７ｋＤ,其为单体酶。该酶可降解１８ｋＤ和２４ｋＤ水溶性蛋白质,分别产生１３．２ｋＤ、１２ｋＤ、１０．５ｋＤ和２３ｋＤ、２２ｋＤ、２０ｋＤ片段,最适ｐＨ为８．０,对ＮａＣｌ不敏感,对ＤＴＴ和β－Ｍｅ敏感。抑制实验表明该酶不属丝氨酸类蛋白酶。     

NaCl 胁迫对小麦抗盐突变体根液泡膜H+-ATP酶 和H+-PP酶活性的影响

随着盐胁迫强度（ ＮａＣｌ ０ ～１５０ｍ ｍｏｌ／Ｌ） 和时间（０ ～７２ ｈ） 的增加,小麦抗盐突变体根液泡膜Ｈ＋ＡＴＰ 酶和Ｈ＋ＰＰ 酶活性显著增加,虽然野生型酶活性在盐胁迫下也有增加,但其增加的幅度显著低于突变体,Ｈ＋ＰＰ酶活性的差异更为显著。Ｈ＋ＡＴＰ酶和Ｈ＋ＰＰ酶的最适ｐＨ 值在两者之间以及盐胁迫前后均无改变,分别为７ ．０ 和８ ．０ 。无盐胁迫下野生型液胞膜５８ ｋＤ 蛋白带缺失,盐胁迫下这一蛋白有微弱的表达。与此不同,突变体５８ ｋＤ 蛋白在盐胁迫前后均有明显的表达,但其２９ ｋＤ 蛋白带在无盐胁迫下明显减弱。     

低分子量硫酸葡聚糖对小鼠造血干细胞动员作用的研究

给小鼠静脉注射低分子量（＜１０￣４ｕ）硫酸葡聚糖（ＤＳ）１５ｍｇ／ｋｇ后外周血中白细胞、单个核细胞（ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｋ,ＭＮＣ）、ＣＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ产率等指标出现时相性变化。给药后１ｈ开始升高,２ｈ达到高峰、分别为药前值的２．２、２．６、３．８、４．４和３．０倍,７ｈ时趋向正常。给药后２ｈ上述各类细胞在外周血中的含量随着ＤＳ的剂量增加而增加。白细胞、ＭＮＣ计数在ＤＳ１８０ｍｇ／ｋｇ时达到峰值,均为对照组的４倍。２４０ｍｇ／ｋ８时未见明显增加。不同剂量ＤＳ对各系祖细胞均有不同程度的动员作用,ＤＳ剂量１５－３０ｍｇ／ｋｇ效果最好,每升血中ＣＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｍｉｘ的数量分别相当于对照组的５．０、１１．９和８．８倍。其峰值出现时间与白细胞、ＭＮＣ不同,表明ＤＳ对不同类型细胞的作用机制也不尽一致。经口给小鼠投以ＤＳ２４０和４８ｏｍｇ／ｋｇ后,未见外周血中白细胞、ＭＮＣ计数有显著性升高,提示对造血干细胞没有动员作用。