利用RAPD技术分析实验用比格犬的遗传背景

目的　运用RAPD技术对实验用比格犬 (Beagle)进行遗传背景分析。方法　筛选的 16个RAPD引物对 4 0个样品的分析 ,共得到 93个扩增条带。结果　所有样品的相似系数 80 4 %到 10 0 %间变动 ,平均相似系数为93 2 8% ,聚类分析得到了这些个体的同源树资料。结论　本遗传背景资料可以为以后的比格犬繁育生产和生物医药学的研究应用提供技术指导     

一种比格犬雌二醇β受体剪切异构体的克隆和序列分析

目的分析比格犬下丘脑-垂体-性腺轴,雌二醇β受体剪切异构体的存在情况。方法根据NCBI数据库上的比格犬雌二醇受体的基因序列,设计两对特异性引物,以比格犬的卵巢、子宫、下丘脑和垂体的总RNA为模板进行反转录,并利用两对特异性引物扩增比格犬雌二醇受体的基因,对其中的主要条带进行克隆测序。结果获得了比格犬雌二醇受体的全长cDNA序列,对主要条带进行克隆测序的结果表明,该序列是一种比格犬雌二醇受体的剪切异构体。结论比格犬雌二醇β受体剪切异构体与小鼠和人的组成有较大的不同,需要进一步系统研究。     

实验动物呼吸系统主要器官比较组织学研究

目的比较实验动物呼吸系统主要器官的组织学特征,为制定实验动物病理检测标准、以及毒理学、新药安全性评价提供依据。方法选取实验动物质量国家检测标准检测合格的恒河猴30只、昆明小鼠20只、SD大鼠20只、日本大耳白兔18只、比格犬16只、树鼩20只。除昆明小鼠采用颈椎脱臼致死外,其余动物麻醉后放血处死和病理解剖,对气管、肺脏进行病理大体检查和取材,常规病理制片,进行HE染色、特殊染色和免疫组化染色,显微镜下观察气管、肺脏的组织结构和细胞结构异同。结果 （1）实验动物气管上皮杯状细胞有差异：恒河猴、比格犬、日本大耳白兔杯状细胞较多,大鼠、小鼠、树鼩则较少或无。上皮分泌的黏液类型以中性黏液为主,比格犬杯状细胞分泌的黏液类型有中性黏液和酸性黏液。（2）实验动物黏膜下腺泡分布有差异：比格犬黏膜下层的腺泡最多,恒河猴、大鼠、小鼠、树鼩腺泡数量偏少,日本大耳白兔黏膜下层的混合腺泡最少。（3）实验动物的肺内支气管分支有差异：比格犬、恒河猴、日本大耳白兔由叶支气管、段支气管、小支气管、细支气管、终末细支气管和呼吸性细支气管组成,树鼩、大鼠、小鼠只由细支气管、终末细支气管和呼吸性细支气管组成。（4）实验动物细支气管组织结构有差异：恒河猴、比格犬的细支气管平滑肌为完整环形平滑肌层,没有缺失,而大鼠、小鼠、树鼩及日本大耳白兔的细支气管平滑肌薄或缺失。恒河猴、树鼩、大鼠细支气管有少量杯状细胞,其余实验动物均无杯状细胞。（5）实验动物Clara细胞形态有差异：比格犬Clara细胞呈立方形,其余动物呈柱状。结论实验动物呼吸系统组织结构的质是相同的,差异在于量的不同。研究人员在制定病理学检测标准、实验研究、药物安全性评价时应予充分考虑。     

乙烯雌酚对间情期比格犬发情的诱导

目的实验分析口服乙烯雌酚诱导间情期比格犬发情的效果,研究适合可行的比格犬诱导发情的方案。方法根据比格犬由间情期到发情期血清内雌二醇浓度逐步升高的变化规律,设计逐渐给实验犬增加口服乙烯雌酚的剂量,诱导比格犬发情;同时对照组给以恒定剂量的乙烯雌酚诱导发情;空白对照组给以淀粉片。结果实验组比格犬的诱导发情率为50%,怀孕率为25%;对照组的发情率为31.25%,怀孕率为18.75%;空白对照组的发情数为零。结论隔天给药,逐渐加量乙烯雌酚组诱导发情的效果明显好于隔天给药,恒定剂量组乙烯雌酚组诱导发情的效果。     

Wistar大鼠的自发肿瘤病变及其发生率

目的了解Wistar大鼠的各种自发性肿瘤病变及其发生率。方法致癌实验中的对照组,采用4周龄SPF级Wistar大鼠,雌、雄性大鼠各60只,实验前观察1周,常规饲料喂饲104周后处死,进行组织病理学检查。结果报告了Wistar大鼠的各种自发性肿瘤病变及其发生率。雄性大鼠中发生肿瘤的动物占49.12%,发生良性肿瘤的动物占38.60%、发生恶性肿瘤的动物占17.54%;良性肿瘤主要有垂体腺瘤(19.30%)、睾丸间质细胞瘤(5.26%)和皮下纤维瘤(5.26%);恶性肿瘤主要有鳞状细胞癌(7.02%)和淋巴造血系统肿瘤(3.51%)。雌性大鼠中发生肿瘤的动物占60.34%;发生良性肿瘤的动物占50.00%、发生恶性肿瘤的动物占15.52%;良性肿瘤主要有乳腺纤维腺瘤(25.86%)和垂体腺瘤(24.14%);恶性肿瘤主要有腺癌(5.17%)和乳腺癌(3.45%)。结论本文报告的Wistar大鼠自发肿瘤及其发生率进一步丰富了现有SPF级Wistar大鼠自发性肿瘤的数据资料,可为有关技术人员提供一定的参考和借鉴。     

比格犬一种新雌激素β受体可变剪切体的克隆及鉴定

目的对比格犬雌激素β受体的新剪切体进行克隆与鉴定。方法以比格犬垂体组织为模板,用RT-PCR方法从垂体组织中扩增雌激素β受体,电泳确定新剪切体的存在情况.并对其进行克隆和序列测定.结果利用设计的引物得到2条明显电泳条带,通过测序表明其中一种为新的可变剪切体,目前此可变剪切体尚未见报道。结论得到了雌激素β受体的一种新的可变剪切体,有助于研究雌激素β受体可变剪切体的功能及其在生殖调控过程中的作用。     

四氧嘧啶诱发糖尿病模型效果的性别差异

目的了解性别因素对四氧嘧啶诱发糖尿病动物模型的影响,为提高动物模型的复制效率提供实验依据。方法分别给雌、雄比格犬和昆明小鼠注射不同剂量的四氧嘧啶,药后3、7、14、21 d测定血糖值,同时统计实验期间动物的死亡情况。结果给予同等剂量的四氧嘧啶,雌性比雄性动物的血糖升高更快,浓度更高。雌性犬四氧嘧啶的最适造模剂量为40 mg/kg,而雄性犬在此剂量下的模型成功率只有40%,二者差异极显著（70%VS40%,P〈0.01）;雄性犬的最适使用剂量为50 mg/kg,但在此剂量下有高达30%的雌性犬因高血糖而死亡。四氧嘧啶对小鼠的影响与犬基本一致,雌雄鼠的最佳剂量分别为200 mg/kg和250 mg/kg。结论雌性动物对四氧嘧啶的敏感性较雄性动物高,雄性动物在使用四氧嘧啶复制糖尿病模型时,其剂量通常需要较雌性动物高20%左右。     

比格犬埃立克体病实验模型及治疗研究

目的研究了比格犬埃立克体病实验模型及盐酸强力酶素对犬埃立克体病的疗效。方法用犬埃立克体病病犬血白细胞静脉注射比格犬,对其临床症状、病原学、血液生理生化指标变化、病理学变化进行了观察,并应用盐酸多西环素进行疗效试验。结果与结论成功建立了比格犬埃立克体病实验模型,并证实了盐酸多西环素对犬埃立克体病的疗效是确定的。     

东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司

东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司（南方医科大学实验动物科技园）致力干建设覆盖整个实验动物领域、凸显非人灵长类、比格犬和小型猪资源优势与特色的实验动物繁育和动物实验研究一站式服务体系,已具备实验动物资源标准化建设、人类重大疾病模型研制、药物筛选及安全性评价、医疗器械安全和效能检测等领域的综合研究服务能力。     

东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司

东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司（南方医科大学实验动物科技园）致力于建设覆盖整个实验动物领域、凸显非人灵长类、比格犬和小型猪资源优势与特色的实验动物繁育和动物实验研究一站式服务体系,已具备实验动物资源标准化建设、人类重大疾病模型研制、药物筛选及安全性评价、医疗器械安全和效能检测等领域的综合研究服务能力。     

雷诺嗪缓释片在比格犬体内的药代动力学

目的:研究雷诺嗪缓释片在比格犬体内的药物代谢动力学,并与参照制剂比较,为其是否具有缓释特征提供依据。方法:首先建立血浆中雷诺嗪浓度的液相色谱-串联质谱联用检测方法,并考察方法的专属性、准确度、日内日间精密度、回收率、线性范围等。采用随机对照试验设计,将12只比格犬随机分为A、B组,每组6只,分别服用1片雷诺嗪缓释片(500 mg/片)和1片参比制剂雷诺嗪片(500 mg/片),均于给药前和给药后不同时间点采集血样,用已建立的液质联用方法检测血样中雷诺嗪的血药浓度,计算2组比格犬的药代动力学参数。结果:受试组和参照组半衰期t1/2分别为13.3±8.3和2.36±0.92 h,峰浓度Cmax分别为923.9±340.5和3205±1314 ng/mL,达峰时间Tmax分别为1.6±0.38和0.88±0.14 h,曲线下面积AUC0~∞分别为6252.1±2860.3和9916±4305(ng·h)/mL,清除率Cl分别为11.3±9.8和6.39±3.95 L/(kg·h)。受试制剂雷诺嗪缓释片和参比制剂雷诺嗪片的药代特征和血药浓度-时间变化趋势明显不同,受试组血药浓度缓慢上升和下降,峰值较低;而参照组血药浓度峰值显著高于受试组,有明显的突释效应。结论:液质联用检测方法准确可靠,适合体内药代动力学研究;与参比制剂雷诺嗪片相比,受试制剂雷诺嗪缓释片符合缓释片的基本药代动力学特点。     

无创遥测技术观察运输应激对Beagle犬部分生理指标的影响

目的应用无创遥测技术观察运输应激对Beagle犬部分生理指标的影响。方法 16只Beagle犬随机分成两组（每组8只）,即对照组和运输应激组,并利用大动物无创生理信号遥测技术,分别监测清醒自由活动状态下对照组和运输应激组应激4 h后Beagle犬的心电图、活动、皮肤温度和呼吸参数的变化。结果 Beagle犬心率、RR间期、QT间期、活动、皮肤温度、呼吸均具有明显的昼夜节律变化（P〈0.01）;与对照组比,运输应激后Beagle犬心率、活动度、呼吸频率、每分钟通气量和潮气量均显著增加（P〈0.01）,RR间期、PR间期、皮肤温度均显著降低（P〈0.01）,相关分析表明运输应激对Beagle犬心率、活动、皮肤温度和呼吸频率具有显著的相关性（P〈0.05,P〈0.01）。结论运输应激可引起Beagle犬生理学指标的明显改变,但除皮肤温度外,运输应激（4 h）对Beagle犬昼夜节律变化破坏不明显;利用无创遥测技术平台可建立理想的Beagle犬生物模型,可用于动物福利和药理毒理学评价研究。     

巴氯芬注射液Beagle犬腰椎穿刺置管多次鞘内注射局部刺激性研究

目的模拟临床给药途径,Beagle犬腰椎穿刺置管多次鞘内注射巴氯芬注射液,观察其局部刺激性,同时进行犬行为学观察,为巴氯芬注射液安全性评价提供依据。方法12只Beagle犬分为假手术组,生理盐水对照组,巴氯芬给药组。行腰椎穿刺置管,使用单通道微量注射泵泵入给药,给药剂量为1000μg/d,生理盐水对照组给予生理盐水0.5mL,连续给药7d,恢复期7d。每日进行行为学观察,给药结束及恢复期结束时每组麻醉2只动物,取给药部位脊髓进行组织病理学检查。结果给药及恢复期期间动物行为未见异常,给药结束时各组均有部分动物观察到置管处表皮感染现象,进行局部消毒处理后在恢复期第3天恢复正常。组织病理学检查发现给药及恢复期结束时各组动物脊髓均可见血管周围炎细胞浸润或脊髓内钙盐沉积,各组无差别。给药结束时巴氯芬组1例动物脊膜处有肉芽组织形成,判定与置管操作有关。结论巴氯芬注射液Beagle犬腰椎穿刺置管连续7d鞘内注射,给药剂量为1000μg/d对脊髓无局部刺激性作用,动物行为也未见异常。     

高海拔地区内毒素致绵羊多脏器功能障碍综合征的病理学改变

目的研究高海拔地区内毒素致绵羊多脏器功能障碍综合征（MODS）的病理学变化特征。方法将16只绵羊随机分为2组,中度海拔组和高海拔组,按相同的剂量静脉给予内毒素（6μg/kg）制作MODS模型,24h后麻醉处死绵羊,观察主要脏器的病理学变化。结果中度海拔和高海拔MODS组绵羊肺脏、肝脏、脾脏、肠粘膜均出现明显炎性改变,高海拔MODS组绵羊肺脏、肝脏病理学评分明显高于中度海拔MODS组。结论高海拔地区MODS的病理损伤较中度海拔明显加重。     

肝癌患者合并小肠细菌过渡生长的临床分析

目的：探讨肝癌患者并发小肠细菌过渡生长的发生率及对临床症状的影响。方法：通过对50例肝癌患者呼气氢浓度的检测,来了解小肠细菌过渡生长（Small Intestinal Bacteria Overgrowth,SIBO）在肝癌患者中的发生率及其对肝癌患者的影响。结果：50例患者中并发SIBO36例,感染率为72%,显著高于健康人群20%,自发性腹膜炎（Spontaneous bacterial peritonitis,SBP）发生率61%。结论：肝癌患者SIBO发生率明显增高,发生SIBO者SBP的发生率明显增高。     

2010—2012年度季节性流行性感冒疫苗对6～59月龄儿童保护效果的病例对照研究

目的评价2010—2012年度季节性流行性感冒疫苗(流感疫苗)对儿童的上市后保护效果。方法选择2010—2012年度6~59月龄的实验室诊断流感病例为病例组,在儿童预防接种信息系统中随机选择健康儿童为对照组,进行1∶2匹配的病例对照研究,采用条件Logistic回归计算保护效果。结果研究中共纳入1 255组研究对象。2010—2011和2011—2012年度,流感疫苗对6~59月龄儿童完全免疫的保护效果分别为73.2%(95%可信限(CI):52.2~85.0)和52.9%(95%CI:42.1~61.7),对6~35月龄儿童的保护效果优于36~59月龄儿童,完全免疫的保护效果优于部分免疫。流感疫苗的保护效果从1~3月的68.9%(95%CI:57.5~77.2)衰减至4~6月的48.4%(95%CI,33.8~59.7)。结论流感疫苗对6~59月龄儿童具有一定的保护效果,儿童接种疫苗后可以减少52.9%~73.2%的流感病例,建议儿童每年及时进行全程免疫。     

微卫星不稳定性与脊柱裂发生的关联性研究

目的：通过对脊柱裂（spina bifida）胚胎脑组织中微卫星不稳定性（microsatellite instability,MSI）的分析,探讨遗传不稳定性是否为此疾病的特征之一,进而研究错配修复系统（mismatch repair,MMR）与脊柱裂发病的分子机制。方法：19例脊柱裂和19例非神经管畸形对照脑组织中提取DNA;尿素变性凝胶电泳法检测标本中MSI发生情况。结果：在19例脊柱裂脑组织中9例MSI阳性,阳性率47.4%。其中2例为高度微卫星不稳定（high frequency microsatellite instability,MSI-H）,7例为低度微卫星不稳定（lowfrequency microsatellite instability,MSI-L）,其余10例为微卫星稳定（microsatellite stable,MSS）,对照组中未出现MSI。选择的5个微卫星位点MSI的阳性率分别为Bat34C4（10.5%）、Bat26（26.5%）、D2S123（10.5%）、D3S1611（5.3%）,D2S119（5.3%）。结论：脊柱裂中存在MSI现象,提示MSI、错配修复系统可能与脊柱裂的发生有一定关系。     

广州白云区儿童多次罹患手足口病的流行病学特征

目的分析2009年1月—2011年9月广州白云区儿童多次罹患手足口病的流行病学特征。方法采用描述性流行病学分析方法,对2009年1月—2011年9月白云区社区儿童多次罹患手足口病案例进行流行病学分析。结果 2009年1月—2011年9月,共监测到手足口病个案18665例,其中再次罹患手足口病个案542人,发生率为2.95%,以城中村较为密集的西南部病例居多。多次罹患手足口病按月分布的变化规律与总发病水平相关(r=0.84p,<0.0 001),再患手足口病的时间与初次患病感染病原体型别无关。4岁以下儿童易发,占85.24%;男孩发病是女孩的1.75倍;散居儿童与集体儿童发病的比例为1.70∶1,与初次患病比,托幼机构儿童比例显著上升。病原学检测以其他肠道病毒感染为主。结论儿童多次罹患手足口病存在明显季节、地区、性别年龄差异。病原型别多、分布广泛,可能是儿童再患手足口病发生较频繁的主要原因,应加强儿童监护人健康教育和托幼机构卫生管理。