棘胸蛙人工授精试验

1988—1989年利用雄蛙活体取精、雌蛙活体挤卵的试验,对棘胸蛙卵子实行人工授精37次,成功率达100％。卵子受精率和孵化率达90％以上。不仅改变了传统的杀蛙取精方法,而且探索了棘胸蛙人工授精及受卵的孵化技术。通过试验得知,秋后对棘胸蛙注射蛙脑垂体液进行人工催产和授精的效果是极差的,不宜采用。     

棘胸蛙繁殖期间输卵管变化的组织学研究

2005年4～6月研究了棘胸蛙Rana spinosa David输卵管繁殖期间组织结构变化的规律.结果表明,棘胸蛙输卵管结构町分为粘膜上皮层、固有层、浆膜层.产卵前,输卵管管壁最厚,固有层中的单管状腺充满胶质;产卵后,输卵管管壁变薄,固有层腺体细胞缩小,粘膜层在产卵时比产卵前明显增厚;产卵前和产卵后浆膜层无明显变化,产卵时厚度明显变薄.本研究为探讨棘胸蛙的分类学地位和棘胸蛙的人工繁殖性能等提供了理论依据.     

人工驯养棘胸蛙的繁殖研究

在历时三年人工驯养棘胸蛙的繁殖研究中发现,静水或水势平缓的水域内,棘胸蛙不能繁殖;营养不良、环境噪杂对棘胸蛙的繁殖行为也有很大抑制作用。促进棘胸蝗在人工驯养条件下繁殖,必须提供流水及流水直接冲击到的浅水层产卵附着物;保证繁殖亲蛙充足的营养及足够的活动空间;保持繁殖场所安静荫凉和隐蔽。     

刘氏棘蛙的分类修订

采集了云南宁蒗和四川盐源县交界泸沽湖的刘氏棘蛙Paa liui地模标本进行形态学研究,并与形态上相似的双团棘胸蛙P. yunnanensis、多疣棘蛙P.verrucospinosa、察隅棘蛙P. chayuensis开展分子生物学研究,结果表明:刘氏棘蛙作为一个独立物种不存在,分布于泸沽湖的刘氏棘蛙为双团棘胸蛙的一个地理居群,应作为双团棘胸蛙的同物异名进行归并.     

人工养殖棘胸蛙的初步研究

全面认识棘胸蛙的生态习性,如生境、食性、繁殖、越冬和天敌等内容,有助于创造适宜的养殖环境和采取有效的管理措施。人工养殖棘胸蛙获得成功的关键是要做好三方面工作:1.确定养殖方式和建设饲料基地;2.提高蝌蚪及幼蛙的成活率,加快生长发育速度;3.促进成蛙在人工环境中繁殖和提高蛙卵孵化率。     

宁波地区黑斑蛙的繁殖生态和产卵地选择

黑斑蛙是我国分布最广的两栖动物之一,但目前有关其繁殖生态和产卵地选择还所知甚少,而且多局限于定性描述。2004—2006年在宁波地区黑斑蛙的繁殖期,对黑斑蛙的繁殖生态研究分析表明,该蛙在繁殖期的种群密度为0.0903±0.0029只/m(n=11);该蛙是雌雄二形性的蛙类,雌性蛙类的体重和体长都显著大于雄性;该蛙窝卵数的变化幅度较大(1546—7897个),平均窝卵数为4643.04±235.96个(n=50);卵径范围为1.50—1.74mm,平均卵径大小为1.6050±0.0046mm(n=226)。对黑斑蛙产卵地选择的研究结果表明,产卵地在水域比率、裸地比率、植被盖度、水深、水温和水的透明度等方面与随机样方不同;该蛙偏爱在水域比率和植被盖度较高的生境产卵,而避免在水体较深的生境产卵。为了更好地保护黑斑蛙的产卵栖息地,今后应优先保护水域比率和植被盖度较高而水体不深的生境。     

不同健康状态的棘胸蛙肠道菌群结构分析

为探究不同健康状态下棘胸蛙(Paa spinosa, David)肠道菌群结构, 文章对13个健康(Health组)、19个患歪头病(WHD组)和18个患蓝眼病(BED组)的棘胸蛙肠道微生物总DNA进行16S rRNA V4—V5高变区测序。结果显示: 共获得3984个总操作分类单元(Operational taxonomic units, OTUs), 35个门, 80个纲, 155个目, 283个科, 501个属。α多样性结果表明, 健康组的菌群丰富度显著高于患病组(P<0.05), 患病组间的菌群丰富度差异不显著(Chao1指数: Health: 1232.92; WHD: 975.57; BED: 1048.76); 健康和患病组间微生物群落均匀度无显著差异(Shannon指数: 5.27; 5.20; 5.41)。门分类水平分析发现: 厚壁菌门(Firmicutes; 52.08%; 49.57%; 26.48%)、拟杆菌门(Bacteroidetes; 30.55%; 21.93%; 43.02%)和变形菌门(Proteobacteria; 15.55%;10.42%; 5.25%)是棘胸蛙肠道菌群的优势菌门。患病蛙肠道中的优势菌门及其丰度均发生变化, 特别是脱铁菌门(Deferribacteres)在歪头病组和蓝眼病组棘胸蛙肠道中丰度显著上升(0.18%; 14.05%; 22.16%; P<0.05)。属分类水平分析发现: 拟杆菌属(Bacteroides; 29.70%; 16.09%; 21.76%)、丹毒丝菌科中未定义的一个属(An unclassified Erysipelotrichaceae; 21.38%; 6.92%; 4.94%)、毛螺科中未定义的一个属(An unclassified Lachnospiraceae; 12.23%; 15.98%; 4.43%)、柠檬杆菌属(Citrobacter; 10.31%; 6.19%; 1.10%)和真杆菌属(Eubacterium; 9.09%; 4.88%; 0.54%) 是棘胸蛙肠道菌群优势菌属, 但各组间的丰度差异显著; 脱铁菌门的Mucispirillum在患病棘胸蛙肠道中丰度显著上升(0.17%; 13.89%; 21.94% ; P<0.05)。研究表明: 棘胸蛙肠道菌群结构与健康状态相关, 且健康与患病棘胸蛙肠道菌群结构差异显著。     

闽西北棘胸蛙生态调查及人工试养观察

棘胸蛙(Rana spinosa)在贵州、湖北、江苏、浙江、安徽、湖南、福建、广东、广西、江西等省均有分布,数量也多。棘胸蛙体大肉鲜,有较高的食用和药用价值。布尔恩格尔(Boulenger)曾于1892年、1899年先后曾记载在湖北、浙江、福建发现有棘腹蛙,1920年他又改定为棘胸蛙。丁汉波(1944—1956)在研究福建的两栖动物时曾对棘胸蛙有过报道,但目前国内对棘胸蛙系统的生态等方面的研究尚未很好地开展。刘承钊等(1961)曾建议设法在池塘中试养,而国内至今未见人工养殖棘胸蛙的报道。     

双团棘胸蛙与棘腹蛙酯酶同工酶的比较研究

采用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对六盘水境内的双团棘胸蛙Paa yunnanensis与棘腹蛙P.boulengeri的肝、肠、胃、肺等4种组织中的酯酶(EST)同工酶进行了研究.结果 显示:两种蛙酯酶同工酶共有10条带,其中双团棘胸蛙EST同工酶有9条带,棘腹蛙EST同工酶有7条带,两种蛙EST同工酶存在较大的种间差异,同种蛙不同组织的酯酶(EST)同工酶迁移率、表达强度也不同.双团棘胸蛙酯酶同工酶酶谱较棘腹蛙的复杂.     

云南省双团棘胸蛙的地理分布

对云南省84个县（市）双团棘胸蛙（Paa yunnanensis）地理分布进行了全面调查。基于历史记录与本次调查结果,采用地理信息系统,制作了云南双团棘胸蛙地理分布图。结果表明,双团棘胸蛙在云南广泛分布于迪庆州以外的15个州（市）71个县（市）,分布海拔为1 400～2 600 m,年平均气温为11.54～18.50℃。根据双团棘胸蛙分布受海拔和年平均气温限制的特点,采用DIVA-GIS 5.2软件,得到云南省双团棘胸蛙可能分布区图。该图可以预测双团棘胸蛙在云南的潜在地理分布,为在云南对该物种的深入研究和有效保护提供了基础数据。     

棘胸蛙求偶鸣声与温度有关但与体大小无关

鸣声被认为是鉴别蛙类物种最有效的特征之一,但受许多因素影响。为了研究环境因素和身体大小与雄性棘胸蛙鸣声特征的关系,在人工仿生态养殖条件下测量环境温度和体温以及蛙体的大小(体重、体长),并通过个体定位,录制繁殖期中雄性棘胸蛙的求偶鸣声,分析鸣叫参数。结果表明,棘胸蛙雄性鸣声特征测量参数与体重、体长无相关性,而鸣声特征中的鸣叫时长、音节时长与环境温度、水温、体温、泄殖腔温度存在负相关性。研究结果提示在开展棘胸蛙鸣声学研究时应注意温度对其的影响。     

人工环境下棘胸蛙(Paa spinosa)繁殖期的行为谱及活动节律

2007年4月,利用红外线摄像设备记录人工环境下的棘胸蛙行为活动,采用扫描取样法和目标动物取样法对录像资料进行分析,对人工环境下棘胸蛙的个体行为和活动节律进行了研究。结果表明：人工环境下的棘胸蛙行为主要包括静止行为（休息、对视）;社会行为（打斗、追逐）;运动行为（游泳、呜叫、跳跃）;捕食行为;繁殖行为（求偶呜唱、侵占、驱赶、撕咬,摔跤、抱对、错抱、拒绝行为、产卵）等。日变化规律变化表明：棘胸蛙的静止行为占了多数,其余多数行为集中在夜间,在凌晨03：00～05：00间出现一个最高峰,与此不同的是棘胸蛙的打斗行为在白天06：00～07：00、08：00～09：00、11：00～12：00多次出现高峰,而在夜间17：00～24：00打斗行为时间分配很少。呜叫行为在06：00—07：00,13：oo～14：00出现两个高峰,而在夜间17：00～01：00鸣叫行为时间分配很少。棘胸蛙的繁殖行为也主要发生在夜间,在凌晨02：30—04：30为高峰,其间抱对行为占到67％,其次为摔跤17％,撕咬15％,而其余所占很少。在行为描述的基础上,对棘胸蛙的有关行为机制进行了探讨。     

棘胸蛙、虎纹蛙、黑斑蛙血细胞的比较

应用Giemsa染色法对棘胸蛙、虎纹蛙和黑斑蛙的血细胞进行显微观察和各形态参数测定,并对各类细胞作了图示和描述。结果表明,红细胞和白细胞的形态和数量比例有一定属和种的特征,并与其生长环境和进化地位有一定联系。     

广东象头山国家级自然保护区两栖动物多样性及保护研究

2007年3月～2009年7月, 对广东象头山国家级自然保护区两栖动物现状进行了专项研究.结果表明,该保护区现已记录两栖动物有1目6科21种,占广东省两栖类物种数的34.4%,区系组成以东洋界华中区和华南区共有种为主,占57.1%.保护区有国家Ⅱ级重点保护野生动物虎纹蛙Hoplobatrachus rugulosa,以及广东省重点保护野生动物沼水蛙Hylarana guentheri和棘胸蛙Paa spinosa.根据保护区两栖类的受胁因素,提出了相应的保护建议.     

从12S rRNA基因序列研究中国蛙科24种的进化关系

测定了中国蛙科动物24种和蟾蜍科的中华大蟾蜍线粒体12S rRNA基因长约400bp片段的序列。采用邻接法,对其数据的系统发生分析表明24种可分成3个支系：第一个支系包括棘腹蛙、合江棘蛙、棘胸蛙、大头蛙、虎纹蛙、倭蛙、泽陆蛙共７种,其中３种棘蛙组成一个单系;第二个支系由３种湍蛙,即戴云湍蛙、华南湍蛙和武夷湍蛙组成,应属于湍蛙亚科;第三支系包含余下的１４种蛙,其中５种林蛙和４种臭蛙分别组成一个单系;２种侧褶蛙先聚合后,再与弹琴水蛙聚合,２种粗上先聚合在一起,再与由林蛙组成的单系群聚合。第三支系首先与第二支系相聚,然后它们与第一支系形成姐妹群,即由蛙亚科的７个物种组成的第一支系,不与蛙亚科另１４个物种组成的第三支系直接聚合,表明第一支系的物种可能不属于蛙亚科。此外,分子证据提示把陆蛙属、大头蛙属、虎纹蛙属、棘棘属、臭蛙属、粗皮蛙属和侧褶蛙属从原来的蛙属分出有其合理性。、     

Fifteen polymorphic microsatellite markers for the giant spiny frog, Paa spinosa

We characterized 15 polymorphic microsatellite loci for the giant spiny frog, Paa spinosa. These loci were highly polymorphic when screened in 38 individuals from two different populations, with nine to 23 alleles per locus. The range of observed and expected heterozygosities was 0.231-0.916 and 0.296-0.944, respectively. These polymorphic loci will be useful for assessing genetic diversity, population structure, gene flow, population assignment and determining paternity in the giant spiny frog.     

西藏蟾蜍线粒体COI和Cyt b基因序列的分析研究

采用聚合酶链式反应克隆西藏蟾蜍Bufo tibetanus线粒体COI和cyt b基因,首次报道该物种这两个基因的全序列,利用分子生物学软件结合比较与其他7种两栖动物的同源序列.结果显示:西藏蟾蜍两个基因序列中碱基G含量明显低于其它三种碱基,密码子第三位碱基G含量在4种蟾蜍中是最低的;碱基替换主要发生在第三位,属内转换率大于颠换率;相比核苷酸数据,氨基酸序列显示的遗传距离表明氨基酸序列更加保守,遗传距离显示西藏蟾蜍与中华大蟾蜍B.gargarizans的遗传距离最小;构建系统进化树,显示西藏蟾蜍和中华大蟾蜍的亲缘关系最近.     

凹耳蛙的分类地位及蛙亚科一新属

对凹耳蛙模式标本产地的蛙类及蝌蚪进行了调查,并对蝌蚪进行了人工饲养和生长发育到完成变态的观察,结果发现一种没有腹吸盘的小型蝌蚪是凹耳蛙的蝌蚪.由此证明凹耳蛙不具有湍蛙型蝌蚪,应不属于湍蛙属蛙类.对凹耳蛙成体和蝌蚪特征的分析表明其与蛙亚科其他属及所辖种不同,建议另立新属.