乳酸杆菌及其免疫治疗作用研究进展

乳酸杆菌是人体肠道和阴道的正常菌群,可作为安全的疫苗载体.其本身可调节多种细胞因子的产生,在维持正常菌群中起免疫调节作用。作为辅助微生物制剂,乳酸杆菌可用于治疗消化道疾病、泌尿生殖道感染,以及抗肿瘤等,另外与传统的治疗药物相比,被认为是“天然”无副作用的,是一种有应用前途的微生物。     

乳酸杆菌的基因工程

乳酸杆菌是一类广泛用于食品工业的革兰阳性杆菌,利用基因工程技术可对其性状进行改造。近20年中,人们构建了多种载体,并在乳酸酐菌中表达了多种蛋白,作为人体的正常菌群,乳酸杆菌已被用于肠道,阴道的微生态治疗,表达抗原的乳酸杆菌工程菌可经黏膜免疫诱导保护性免疫或免疫耐受,因此,深入研究和利用乳酸杆菌基因工程技术有重要意义。     

肠道菌群调节免疫反应增强肿瘤治疗效果

人体健康与肠道茵群息息相关,越来越多的研究显示正常茵群不仅在消化、免疫等方面有诸多不可替代的作用,肠道茵群结构的改变与失衡更是与肥胖、糖尿病、心脑血管疾病、肿瘤等多种疾病密切相关.最新研究表明药物刺激免疫系统引起的抗肿瘤免疫反应以及自身免疫反应都离不开肠道茵群的参与,肠道茵群能够通过调节免疫反应增强肿瘤治疗效果.     

阴道炎患者乳酸杆菌数量变化与临床的研究

目的探讨阴道炎患者的阴道乳酸杆菌数量的变化,以指导临床治疗。方法用LBS培养基分离乳酸杆菌,观察阴道炎患者乳酸杆菌变化的情况。结果172例阴道炎病例中,乳酸杆菌数量平均数明显减少。结论乳酸杆菌数量的减少、阴道菌群的改变是阴道炎发病的重要原因,重新构建阴道正常菌群是阴道炎治疗的重点。     

乳酸杆菌的质粒及耐药性质粒

乳酸杆菌的质粒及耐药性质粒中国药品生物制品检定所北京１０００５０李健袁佩娜乳酸杆菌是人类等脊椎动物消化道和生殖道等的正常菌群之一,同时也存在于一些昆虫体内,在植物中也有发现。乳酸杆菌可以产生多种维生素、蛋白质等物质,还可以调节宿主免疫功能,具有重要的...     

女性阴道乳酸杆菌与各种阴道疾病的关系

目的了解本地区女性阴道乳酸杆菌变化与各种阴道疾病的关系。方法采用妇科白带涂片多功能染色液对阴道分泌物做外阴阴道假丝酵母菌病、滴虫、细菌性阴道病（BV）、老年性阴道炎中乳酸杆菌半定量检测。结果外阴阴道假丝酵母菌病、滴虫性阴道炎、细菌性阴道病、老年性阴道炎中乳酸杆菌检出率均低于正常对照组,且乳酸杆菌半定量大部分集中在＋-＋＋范围内,和正常对照组明显不同。其中细菌性阴道病病人的阴道乳酸杆菌检出率最低。结论阴道乳酸杆菌是维持阴道清洁、保持阴道处于酸性环境、预防阴道疾病的重要保障。     

不同生理阶段、避孕方式和感染状态对阴道乳酸杆菌影响的研究

目的调查不同生理阶段、避孕方式、感染因素对女性阴道乳酸杆菌数量的影响。方法收集南昌大学第二附院妇产科就诊的176例妇女的主要资料并采用qPCR方法定量分析阴道分泌物中乳酸杆菌数量,分泌物涂片和革兰染色后在显微镜下观察记录其感染状态。结果非绝经期组不同年龄段乳酸杆菌数量差异无统计学意义,绝经期组乳酸杆菌数量减少;不同避孕方式组的阴道乳酸杆菌数量差异无统计学意义;细菌性阴道病和假丝酵母菌感染组阴道乳酸杆菌数量较正常组差异均有统计学意义。结论生理阶段、细菌性阴道病和假丝酵母菌感染是影响女性阴道乳酸杆菌数量的主要因素。     

乳酸杆菌基因表达系统的研究进展

乳酸杆菌是人及动物肠道中重要的益生菌,被公认为安全级(generally recognized as safe,GRAS)微生物。乳酸杆菌表达系统是近几年发展起来的一种表达系统,随着乳酸杆菌分子生物学的发展、各类表达调控元件的分离,相继发展了乳酸杆菌的克隆载体、表达载体和整合载体。乳酸杆菌具有免疫佐剂、吸附黏膜、抗胆汁酸能力,以乳酸杆菌为载体,作为外源基因的传递和表达系统,研制口服疫苗,刺激黏膜免疫系统产生有效的免疫应答,具有重要开发前景。     

超微铁皮石斛对脾虚便秘小鼠肠道乳酸杆菌多样性的影响

【目的】探讨超微铁皮石斛对脾虚便秘小鼠肠道乳酸杆菌多样性的影响,为疗效提供依据。【方法】制备小鼠脾虚便秘模型,灌胃铁皮石斛传统汤剂、超微50%量汤剂治疗,采集肠道内容物提取肠道微生物宏基因组DNA,用乳酸杆菌特异引物PCR后进行ARDRA分析。【结果】结果显示,正常组、铁皮石斛传统汤剂组和超微50%量汤剂组的OTUs、Shannon指数和Brillouin指数相同,且均大于模型组;铁皮石斛超微50%量汤剂组与正常组乳酸杆菌群落结构的相似性系数最大,为0.333 3,其次是模型组为0.181 8,传统汤剂组最小,为0.166 7;聚类分析和主成分分析结果显示,小鼠肠道乳酸杆菌多样性受脾虚便秘造模影响,发生改变,铁皮石斛两种汤剂通过不同的途径对其进行调控作用。【结论】铁皮石斛对脾虚便秘小鼠肠道乳酸杆菌多样性的调整作用明显,且超微50%量汤剂组小鼠肠道乳酸杆菌多样性更接近正常组,疗效更优。     

阴道乳酸杆菌生物拮抗作用的研究进展

乳酸杆菌作为阴道微生态的一部分,控制并拮抗着阴道内其它细菌的生长。阴道内占优势的乳酸杆菌可通过竞争黏附、抑制病原体的生长、刺激免疫系统等机制拮抗大肠埃希菌、淋球菌、加德纳菌、白色念珠菌、阴道毛滴虫等多种致病微生物的感染。目前我们关于益生菌乳酸杆菌生物拮抗作用的知识仍不完整,需要更多的研究来揭示其中的矛盾现象,为新型微生态制剂的开发提供可靠依据。     

乳酸杆菌发酵滤液对人宫颈癌细胞株Hela细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响

目的观察乳酸杆菌DM9811发酵滤液对宫颈癌细胞株Hela细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响,探索乳酸杆菌发酵滤液对宫颈癌细胞作用的可能机制。方法用光镜、电镜和流式细胞仪分析不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液对Hela细胞凋亡的诱导效果;用流式细胞仪分析不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液对Hela细胞细胞周期的影响。结果（1）乳酸杆菌DM9811发酵滤液可诱导宫颈癌Hela细胞凋亡。形态学观察处理后的Hela细胞,可见细胞变形,细胞皱缩,体积变小,细胞间隙增大,细胞核固缩。流式细胞仪分析,1%、2%的乳酸杆菌DM9811发酵滤液在48、72h可诱导Hela细胞凋亡;5%的乳酸杆菌发酵滤液在24、48和72h均可诱导Hela细胞凋亡。（2）乳酸杆菌DM9811发酵滤液阻滞宫颈癌Hela细胞于S期,不同浓度的乳酸杆菌发酵滤液作用24、48和72h均可使S期细胞比阴性对照组增多。结论乳酸杆菌DM9811发酵滤液可诱导部分Hela细胞凋亡,其对Hela细胞的生长抑制作用可能通过S期阻滞实现。     

乳酶生治疗畜禽消化不良

乳酶生是一种常用的消化系统用药,由活的干燥乳酸杆菌制成,属于微生物制品。既然乳酶生是活的乳酸杆菌,为了说明其药理作用,就首先从乳酸杆菌的性质谈起。乳酸杆菌是一种固紫染色阳性的细菌,在自然界中分部很广,不仅在乳类、乳制品和动植物分解产物中生长繁殖,也是生活在动物体胃肠道中的一种寄生菌,从粪便中可以分离出来。乳酸杆菌最主要的特点是把糖类分解并产生大量乳酸,对于酸性环境的耐受性很强,例如在pH3～4.5的酸性条件下仍可生存,而大多数细菌生长的最适宜环境是pH7.3～7.6,在偏酸的条件下生长就受到抑制。所以有大量乳酸杆菌存在…     

乳酸杆菌的分离、鉴定及对肠上皮细胞分泌IL-8调节作用的研究

目的探讨分离益生菌及对益生菌进行鉴定的方法,将益生菌与肠上皮细胞共培养,进一步探讨益生菌对炎症状态时肠上皮细胞分泌促炎细胞因子的调节作用。方法对自正常儿童大便分离出的乳酸杆菌进行表型特征鉴定,并进行培养。将乳酸杆菌(1×108CFU/ml)与HT29细胞共培养,1h后加入TNFα(10ng/ml)。3h后,收集上清,ELISA法测IL8;提取细胞RNA,经RTPCR检测IL8的表达。结果经表型特征鉴定,分离出的乳酸杆菌为保加利亚乳酸杆菌。与保加利亚乳酸杆共培养后,HT29细胞IL8mRNA表达降低,培养液IL8浓度也明显降低。结论自正常儿童大便分离益生菌是获得益生菌有效的方法;保加利亚乳酸杆菌能明显抑制炎症状态时肠上皮细胞分泌IL8。     

34例胎膜早破孕妇妊娠晚期阴道微生态及免疫因子变化状况分析

目的：胎膜早破是一种常见但发生机制十分复杂的妊娠并发症。在所有的早产儿中,孕妇胎膜早破的比例高达33％。本研究针对胎膜早破产妇妊娠晚期阴道微生态及免疫因子的变化情况,分析阴道内茵群失调或局部免疫反应与胎膜早破的关系,为临床研究提供实验数据。方法：回顾性分析我院于2010年7月-2013年3月收治的34例胎膜早破孕妇的临床资料,同时选取于我院进行健康体检的妇女及产前检查的健康孕妇各34例作为对照。采集所有研究对象的阴道分泌物,对比分析各组样本中病原微生物的分布及免疫因子的浓度。结果：胎膜早破组乳酸杆菌的检出率要明显低于健康妇女组与健康孕妇组（79．4％VS70．6％VS34．1,X2=8．438,P〈0．05）,三组研究对象其他茵属分布的差异比较无统计学意义（P〉0．05）;胎膜早破组阴道分泌物IL-6浓度与TNF．仪浓度要显著高于健康妇女组与健康孕妇组（P〈0．05）。结论：胎膜早破产妇阴道内的菌群分布与健康女性及孕妇有所不同,阴道内茵群失调及局部的免疫反应可能会导致胎膜旱破的发生。     

人胃粘膜乳酸杆菌与幽门螺杆菌感染的相关性

目的:探讨胃内正常菌群乳酸杆菌对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)的影响。方法:51例胃粘膜活检标本均取自于行胃镜检查的胃炎患者,分离培养乳酸杆菌,通过扩增其16S rRNA基因并测序来鉴定乳酸杆菌的种类;胃炎程度及活动度的分类依据悉尼分类系统,运用改良Gimesa染色鉴定HP感染。结果:胃粘膜中共分离出9种乳酸杆菌,分离阳性率为49.0%;乳酸杆菌阳性病人与阴性病人的HP感染率、胃炎程度的差异及胃炎活动度的差异均无统计学意义(P>0.05);HP阳性病人的胃炎程度较HP阴性病人更严重(P<0.05);有益生菌作用的乳酸杆菌与非益生菌类乳酸杆菌的HP感染率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胃内乳酸杆菌的存在对HP感染无影响。     

乳酸杆菌制剂对应用抗生素大鼠体内TLR2 mRNA转录水平及相关因素影响的研究

目的动态观察乳酸杆菌制剂对应用抗生素大鼠肠道菌群结构和TLR2 mRNA转录水平的影响。方法采用细菌培养法定量检测肠道双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌和肠球菌;利用反转录聚合酶链反应技术测定大鼠肠黏膜组织、肠系膜淋巴结、肝脏和脾脏细胞TLR2 mRNA转录水平。结果应用抗生素可致肠道菌群失调和TLR2 mRNA转录水平的早期受抑制。乳酸杆菌制剂干预可迅速提高肠道乳酸杆菌数量,及早扶正肠道菌群结构,减轻由于应用抗生素引起的Toll样受体mRNA转录受抑程度。结论乳酸杆菌制剂早期干预可及早扶正肠道菌群结构,减轻TLR2 mRNA转录水平受抑制程度,为临床合理应用抗生素,早期益生菌干预提供理论依据。     

中药91—4对抗生素相关性腹泻小鼠肠道膜菌群及腔菌群的影响

本实验以肠道菌检测与电镜观察法,初步研究了中药９１－４对抗生素相关性腹泻小鼠肠道菌群的影响。结果表明,盐酸林可霉素对小鼠肠道膜菌群、腔菌群干扰显著、乳酸杆菌、双歧杆菌及肠杆菌等比正常对照组明显减少,致小鼠腹泻或肠炎;中药９１－４能够促进肠道乳酸杆菌、双歧杆菌等生长繁殖,对肠道膜菌群、腔菌群均具有调整作用,加速肠粘膜病变的愈合及修复,可有效地控制ＡＡＤ模型小鼠的腹泻症状。     

壳寡糖对乳酸杆菌体外生长的影响

目的:研究壳寡糖对乳酸杆菌体外生长的影响。方法:将乳酸杆菌MRS培养基中的葡萄糖替换为壳寡糖及向原培养基中加入适量的壳寡糖,通过测定OD值比较乳酸杆菌的生长状况。结果:以壳寡糖完全代替葡萄糖的培养基中乳酸杆菌的生长状况不如MRS培养基,而少量壳寡糖与葡萄糖协同的培养条件使乳酸杆菌的生长适应期明显减短,促进其生长。结论:乳酸杆菌对壳寡糖的利用不如对葡萄糖的利用,1g/l壳寡糖与葡萄糖协同作用时可明显缩短乳酸杆菌的生长适应期,促进细菌生长。     

中药91－4对抗生素相关性腹泻小鼠肠道膜菌群及腔菌群的影响

本实验以肠道菌群检测与电镜观察法,初步研究了中药９１－４对抗生素相关性腹泻（ＡＡＤ）小鼠肠道菌群的影响。结果表明,盐酸林可霉素对小鼠肠道膜菌群、腔菌群干扰显著,乳酸杆菌、双歧杆菌及肠杆菌等比正常对照组明显减少,致小鼠腹泻或肠炎;中药９１－４能够促进肠道乳酸杆菌、双歧杆菌等生长繁殖,对肠道膜菌群、腔菌群均具有调整作用,加速肠粘膜病变的愈合及修复,可有效地控制ＡＡＤ模型小鼠的腹泻症状。     

用细菌16S rRNA荧光定量PCR法检测肠道菌群的变化

目的应用细菌的16SrRNA序列设计双歧杆菌、大肠埃希菌及乳酸杆菌的引物并对肠道的3种细菌进行定量测定。方法收集轮状病毒肠炎患儿及正常对照组的粪便标本提取DNA。取准确定量的3种细菌经系列稀释后抽提细菌的DNA做荧光定量PCR,制作出标准曲线。待测样品同时进行PCR反应并和标准曲线进行比较,获得各样品中3种细菌的量。结果患儿肠道中双歧杆菌和乳酸杆菌的数量较正常儿童明显减低,而大肠埃希菌的数量差异无显著性。与其他文献报道的用细菌培养的方法所得结果一致。结论荧光定量PCR是一种特异性高、敏感性强的定量方法。可正确定量肠道中的细菌数量。