激素和活性多肽

89飞石02人降钙素基因的化学合成与表达[英〕八、:、1飞。、,,工,…、2 Ce,le一xs87,59 (昌一3)一223一23。巨译自DB八,1988, 7(18),88一08890] 降钙素(C‘即被川一卜治疗严吸的高钙血症或骨吸收的疾病。而长期使川动物CT会导致反应性降低。合成的人CT基因 口ICT)含有双股DN入,各有106个核昔酸。构建J’贡组质粒p,!尸1尺。一hCT,井用之转化大肠杆菌K一12(LE392)。细菌产泣址的hCT在N末端多一个甲硫氨酸残基,{盯C末端无酷胺化作用。贡纵大肠杆菌细胞直接在止入/1酉普酸,}J破碎,真空冷冻干燥酸性j二清液收取hC尸f丫l衫大鼠禁食后,”…     

激素和活性多肽

863316使用热千的细菌细胞改进留体一1-脱氢作用〔英〕/Wolf,H.J.…了Ann.N.Y.Aead.Sei一2954,434一106一209[译自DBA,1985,4(18)85一08910〕 本文叙述了使用热干的简单节杆菌(A-rf八roba“er:‘仇pl。)细胞改进留体一i一脱氢作用生物转化的方法。该细菌培育于发酵罐内进行踏体一1一脱氢作用的诱导,细胞生长良好。离心收获细胞,并在减压的55℃烤箱中千燥。再水化的细胞在有人工电子接受器存在时,接触幽体底物。该混合物在摇动充气中培育,直至1一脱氢作用结束。用标准方法收获幽类产物。热千的细胞保留了良好的活性。加入2一甲蔡醒或1,4…     

植物组织培养简报摘编

植物材料、外植{本山浩((‘阴加咧、)培养爷《,,:gL)l乍三吝《叮t{、毛)(1)MT+BA(2)MS+BAI)(:飞)MS+BA亡)(}.5十LH 11川:十〔;、1) .5;2+IB入t).5j]五珠接种至I]少音养钱(})七.峨玉珠内的幼弓砂挂宁李牡性生}之.少汗养只【,;,,;么勺IJE长J奄达一(、;1:n:将长大的弓〔转至培养毯(:考)l几.培荞阴‘}长出i午乞自色的叨训弋体.将弓〔状f本转至IJ士合养从(3)L.少音养山‘!),‘开始长出仃恨和类的小掖株咭泛桂琴妇1用’l三卓韦德袋‘河南耳只峨}:宇芝冲之.,炸i范学院园艺一卜.辉具!5:飞八(以l)t}父搞一冬川二巴(){几‘12知母(1lt,、117…     

pH改变对心肌细胞内Ca~(2 )浓度和细胞长度的影响

目的 :探讨细胞内 pH(pHi)改变对心肌细胞内Ca2 浓度 ([Ca2 ]i)和细胞长度的影响。方法 :心肌细胞内分别灌注 2 0mmol/L丙酸钠和 15mmol/LNH4Cl,建立细胞内酸碱中毒模型。荧光指示剂indo 1和SNARF 1载入大鼠心肌细胞内 ,用荧光显微镜同时测定心肌 [Ca2 ]i、pHi 和细胞长度。结果 :细胞内酸中毒早期 ,收缩期和舒张期[Ca2 ]i 轻度增加 ,细胞缩短 (CS)降低 ,细胞长度增加 ,心肌纤维对Ca2 的敏感性和CS/ [Ca2 ]i 降低 (P <0 .0 1) ;碱中毒时 ,收缩期和舒张期 [Ca2 ]i 均较对照组降低 ,CS增加 ,细胞长度变短 ,心肌纤维对Ca2 的敏感性和CS/[Ca2 ]i 增加 (P <0 .0 1)。结论 :酸中毒早期 [Ca2 ]i 和细胞长度增加 ,碱中毒时 [Ca2 ]i和细胞长度降低。酸、碱中毒对Ca2 敏感性的影响并非线性关系 ,即单位 pHi变化时酸中毒对敏感性的影响较碱中毒小     

食品上的应用

921561谷氮酸棒杆菌产赖氮酸报乙酸敏感突变株对葡萄箱的利用〔英〕/Costa一Ferreira,M.…/Appl.B ioehem.Bioteehnol一1992,27(3)一251~257〔译自DBA,1991,10(18),91一10571〕 在用亚硝基脏诱变后,由谷氨酸棒杆菌(C。-,梦介ebaete,‘”m 91”￡a仍‘c”仍)ATCC 21513分离出氟乙酸敏感突变株。突变株和亲株在含1009/I葡萄糖一水合物、0.了g/1 KH:PO‘、49/1 KZHP-O‘·3H:O、0 .39/1 MgSO‘·7H:O、连09/l (NH‘):50‘、209/l胰蛋白酶、209/l碳酸钙、smg/1硫胺素和60那g/l生物素的培养基中(PH7.0)于50℃摇瓶(220rpm)培养48hr…     

种群模型参数辨识的一种方法

1、M(。,m)模型的建立定理.对于微分方程 dnx,(t)dtn+口zd卜lx,(t) dtn一1+…+a。_:dx:(t) dt否,x,(‘)+box:(‘)+b3x;(‘)x:(‘)+…+”。·,x:(‘)‘二(‘)给定样本数据{x;(k)1,k二1,2,…,N,i=I,2,…,m,则该方程的参数向量a=〔a:aZ…a。一,ib:bZ…b二+:〕丁可通过〔(AIB)T(A{B)〕一’(A{B)TC辨识,其中,C=〔△,x;(2),△nx:(了),…,△。x,(N)〕T陈华豪等万卷s2/△,一‘x工(2)△“一‘x:(3)…△x:(2)△x:(3)A二一……△一’x,(N),△x,(、){,111\x,(z),x贯(1),x,(1)x:(1),…,x;(了).x二(I)B二‘1‘“’,‘飞‘”,‘1.:员.,‘2‘2’,”…     

环境保护上的应用

891032用白腐真菌裂褶菌使来自以蔗渣为基础的废粕磨碎机的废水脱色[英〕/Bolsa-1·:,D‘I又.…,了入ppl。入lierob三01.Bioteeh-“O王一1988,28(:飞)一3or一30盛〔i圣自DB八.1 988,下16、,88一08291口 在哎人处理中利用自腐真菌,山于j专降解术材木质索的能力而在例如造纸工业中11益显示共爪要性。来自以旅济为基础的废粕和废纸磨粉机的房水,可以用裂褶菌(Sc-11汁01,h。,112、,,:eo,,:,,7才,儿。)安生行脱色。在含有马铃薯淀粉和葡萄舫的液体培养基中培养生产的培养物样.异;,加人补充了碳源和氮源以刺激真菌,胜长和木质素降解的废水中。…     

谷氨酸、NMDA 和吗啡对培养大鼠星形胶质细胞内钙振荡的影响

目的:研究谷氨酸、NMDA、吗啡对原代培养的大鼠星形胶质细胞的胞内钙信号的影响及受体作用机制.方法:利用Leica AF6000活细胞工作站,检测谷氨酸、NMDA、吗啡分别灌流前后Fura-2/AM加载的星形胶质细胞内钙信号的动态变化,进一步观 察分别阻断代谢性谷氨酸受体5 (mGluR5)、NMDA受体(NMDA receptor,NMDAR)和阿片μ受体对诱导的胞内钙振荡的影响.结果:谷氨酸、NMDA、吗啡均可明显升高胞内游离钙的浓度([Ca2+]i),而将其相应受体拮抗后,星形胶质细胞[Ca2+]i升高的现象可以被显著抑制.结论:离体培养的星形胶质细胞膜上存在mGluR5、NMDAR和阿片μ受体,这些受体的激活可以升高星影胶质细胞的[Ca2+]i,且这些受体依赖的[Ca2+]i的调控机制可能是星形胶质细胞与神经元交互作用的重要途径之一.     

贝母提取物对异丙肾上腺素诱导心肌H9c2细胞肥大的干预作用

目的: 研究贝母提取物(FE)对异丙肾上腺素(Iso)诱导H9c2 心肌细胞肥大(CH)的干预作用。方法: 采用体外培养心肌H9c2 细胞,MTT法测定心肌H9c2细胞存活率; 细胞分4组(n=10):对照组、2 μmol/L Iso (模型)组、2 μmol/L Iso+FE 400 μg/L 组、2 μmol/LIso+FE 1 000 μg/L 组;相差显微镜观察细胞形态及测定心肌细胞直径;二辛可酸法检测细胞总蛋白;钙-4 试剂检测细胞内钙离子浓度。结果: Iso 组心肌H9c2细胞直径、总蛋白量及[Ca²⁺]i均显著高于对照组(P＜0.01);400 μg/ml 和1 000 μg/ml FE各组心肌H9c2细胞直径、总蛋白量及细胞[Ca²⁺]i均显著低于Iso组 (P＜0.05 或P＜0.01)。结论: FE对Iso诱导H9c2 CH有干预作用,可能与抑制钙信号通路激活有关。     

糖皮质激素快速抑制高钾离子诱导嗜铬细胞瘤细胞内游离钙浓度升高的作用及其特征

本研究应用钙离子特异荧光指示剂Fura-2/AM,使用Miracal影像系统(Miracal Image System)检测了糖皮质激素对高钾离子升高嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)内游离钙浓度([Ca2+]i)作用的影响.结果表明:(1)皮质酮抑制高钾离子诱导PC12细胞[Ca2+]i升高与其预处理细胞时间的长短有关,预处理3 min时,皮质酮开始产生抑制作用;预处理5 min时,其呈现的抑制作用最强;预处理25 min时,抑制作用基本消失.(2)皮质酮在10-8～10-5 mol/L范围内时可呈剂量-效应关系,抑制高钾离子诱导的PC12细胞[Ca2+]i升高,皮质酮浓度为10-5 mol/L时,其产生的抑制作用最大;在10-9mol/L时抑制作用不明显.(3)其它甾体激素如皮质醇、地塞米松、孕酮、雌二醇、睾酮、醛固酮在浓度为10-5 mol/L时,也能抑制高钾离子引起的PC12细胞[Ca2+]i升高,但在同一浓度时作用强度有所不同.胆固醇浓度为10-5 mol/L时,对高钾离子诱导PC12细胞钙浓度升高没有抑制作用.在同一浓度时它们的作用强度顺序大致为:孕酮=皮质醇＞地塞米松＞睾酮＞醛固酮=雌二醇＞＞胆固醇.(4)在皮质酮浓度为10-5mol/L时不能抑制由细胞外无钙到有钙过程引起的PC12细胞[Ca2+]i升高.     

动物细胞培养及单克隆抗体

921346开发新的无蛋白无激紊培养基培养杂交容〔英叮Toyoda一K。…了Agrie.Biol.C丘em一1991,55(6)一1631~1633[译自DBA,1091,10Qs),91一10670二 配制一种新型不含蛋白和激素的培养基PHF,用以大规模培养小鼠和人杂交瘤。杂交瘤有IgGI小鼠一小鼠杂交瘤AZ(融合配偶体:x63.653,专性抗原:a一胎蛋白)、C7(NS~1,癌胚抗原)17(NS一i,IgE),以及IgM人一人杂交瘤HB4C6 (NAT一30,肺癌)。最佳培养基是在E一RDF(Kyokuto Seiyaku Kogyo,日本)基本组分中添加50声M柠檬酸铁、0.5产M亚油酸、10产M牛磺酸、10。井M乙醇胺和25nM亚硒酸盐。用P…     

鸡培养细胞γ-干扰素诱生条件的优化

目的:探讨鸡γ-干扰素(IFN-γ)的最佳诱生条件.方法:采用夹心ELISA对培养的不同种类细胞在不同诱生剂作用下珏IFN-γ的分泌水平进行了检测,并对影响IFN-γ产量的条件进行了优化.结果:在ConA、PHA、ARV三种诱生剂中,ARV诱生能力最强,ConA其次,PHA最弱;其最佳诱生剂量分别为:ARV 105TCID50/mL,ConA 30μmL,PHA 1.5μg/mL.鸡脾淋巴细胞、外周血自细胞(PBL)和鸡胚成纤维细胞(CEF)在同种诱生剂作用下,脾淋巴细胞IFN-γ分泌量最高,为47.65±3.26pg/mL.各种细胞最佳浓度均为3.0×106/mL.脾淋巴细胞在ConA和PHA刺激下,培养60h时产生的IFN-γ最高;而ARV诱导48h IFN-γ即可达峰值.同种IFN-γ具有启动效应.结论:确定了鸡IFN-γ的最佳诱生条件,为鸡IFN-γ定量检测奠定了基础.     

CDX2基因修饰的脐带间充质干细胞向杯状细胞分化的可行性研究

目的:研究尾型同源盒2(CDX2)在脐带间充质干细胞(UC-MSC)中过表达后粘蛋白2(MUC2)的表达情况,探寻利用基因修饰使UC-MSC大量表达MUC2的实验方法,了解诱导UC-MSC向内胚层分化对UC-MSC大量表达MUC2的必要性,为研究诱导UC-MSC向杯状细胞分化奠定基础。方法:实验分为5个组,分别为单转组(CDX2转染UC-MSC)、单诱组(仅诱导UC-MSC向内胚层细胞分化)、诱转组(诱导UC-MSC向内胚层细胞分化后,再将CDX2转染诱导后细胞)、空转组(不进行任何诱导但转染空质粒)和对照组(UC-MSC不做任何处理);为排除转染试剂本身的影响,单诱组在诱导分化后仍须转染试剂处理,但不加质粒;各组最后检测CDX2、MUC2的mRNA表达情况;内胚层细胞诱导利用重组人Activin A、重组人Wnt3a实现。结果:单转组、诱转组和空转组细胞在转染48 h后在荧光显微镜下能看到绿色荧光;单诱组和诱转组经诱导培养5 d后,内胚层标志物GATA4的表达增加27倍,Sox17的表达增加54倍。对5组细胞行RT-PCR检测MUC2与CDX2的mRNA表达情况,结果单转组CDX2升高113倍,MUC2升高30倍;诱转组CDX2升高196倍,MUC2升高98倍;空转组、单诱组中CDX2与MUC2的表达无明显变化。结论:在UC-MSC中过表达CDX2能够增加杯状细胞标志物MUC2的表达,而事先诱导UC-MSC向内胚层细胞分化,能进一步增加MUC2的表达。利用CDX2的过表达有使UC-MSC向杯状细胞分化的可能性,而Activin A、Wnt3a的诱导处理能促进其分化能力。     

微生物产生的生物碱目录(续完)

。~c卜i。心n As户。rgill,‘,a,ns,eloda,i(Gazz·Chi,,1·[tal·,103:141,1973)二i‘r‘‘i珑ne才,户。心121,‘了户人。。。icis(phar,l,·Aeta Helv.,44:676,196,)ni盯ifacti.strop:o,ycos,igrilac,。n:var·I‘FD一101(Agr·Biol·CI,e,,,·,32:783,1968;34:7斗7,753,1970     

肿瘤坏死因子-α诱导心肌肥大中CaN信号通路的作用

目的:研究钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法:Lowry法测心肌细胞蛋白含量;计算机图象分析系统测心肌细胞体积;[3H]-亮氨酸掺入法测心肌细胞蛋白合成;Till阳离子测定系统观察胞内[Ca2+]i瞬变;Western blot法测定CaN的表达。结果:①CaN特异性抑制剂CsA(0.2μmol/L)明显抑制TNF-α(100μg/L)诱导的心肌细胞蛋白含量、蛋白合成和细胞体积增大,但对正常心肌细胞生长无影响。②CaN特异性抑制剂CsA(0.2μmol/L)明显降低TNF-α诱导的心肌细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)瞬变幅度增高。③TNF-α明显增强心肌细胞内CaN的表达。结论:TNF-α可能通过引起心肌细胞[Ca2+]i升高,促进CaN表达诱导心肌细胞肥大。     

微生物学通报1974年总目录

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牛磺酸对血管紧张素Ⅱ改变培养心肌细胞内游离Ca2+浓度作用的影响

目的和方法 :用Fura 2 /AM .荧光显示测定细胞内游离Ca2 浓度 ([Ca2 ]i)的方法 ,我们研究了牛磺酸 (Tau)对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )引起的培养心肌细胞 [Ca2 ]i变化的影响。结果 :在有Ca2 和无Ca2 的缓冲液中 ,AngⅡ (1 ,1 0 ,1 0 0 ,1 0 0 0nmol/L)能浓度依赖性地引起 [Ca2 ]i升高。在含Ca2 的缓冲液中 ,Tau(1 0 ,2 0mol/L)可依浓度地抑制AngⅡ (1 0 0nmol/L)引起的 [Ca2 ]i升高 ;但在无Ca2 的缓冲液中 ,牛磺酸无此作用。用ryanodine(Rya ,1 μmol/L)预先耗竭细胞内贮存的Ca2 后 ,AngⅡ (1 0 0nmol/L)仍能引起 [Ca2 ]i进一步升高 :AngⅡ的这一作用能被Tau(2 0mmol/L)显著抑制。结论 :在培养的乳鼠心肌细胞 ,Tau能够通过抑制AngⅡ引起的Ca2 内流而拮抗AngⅡ升高 [Ca2 ]i的作用。     

疫苗

890948培养条件对铜绿假单胞杆菌产生外毒素A的影响〔会,英〕/Blumentals,1.1.…厂1\ 110.N.丫’.八ead.Sei一1987,506一663一668〔译自DBA,1988,7(26),88一07947二 测定了影响铜绿假单胞杆菌(尸:eudo-,:o:。:。e::夕i。05。)(PA一103)产生外毒素入(一利‘可能的类毒素疫苗)1’肉因子。将细胞培养于含lmM人侄g十一升和1.l‘Mf,’。的限定培养基中直至达静止期为止。收集和水洗细JJIs后重忿于含o.11llMMg一丫肉些助倪培养甚中,]]l一l入jlnMMn;十和C。一J青外毒素产量比不加金属的降低50%。加25即MC扩语’使外毒素产量降低66%。s00lt…     

DZNep诱导HL-60细胞凋亡和生长抑制

[目的]研究S-腺苷同型半胱氨酸水解酶抑制剂DZNep(3-Deazaneplanocin A)对人早幼粒白血病细胞HL-60增殖的影响。[方法]细胞计数法分析DZNep(10~500 nmol/L)处理对HL-60细胞增殖的影响;以DNA片段化、Annexin-V/PI法和线粒体膜电位法检测DZNep处理对HL-60细胞凋亡的影响。Western Blot检测细胞凋亡相关基因Bax和细胞色素C的表达。[结果]50 nmol/L DZNep对HL-60细胞的24、48、72h增殖抑制率达18%、44.5%、81.7%。Annexin-V/PI法显示DZNep能诱导HL-60细胞发生剂量依赖性的细胞凋亡。进一步研究发现,DZNep(50nmol/L)处理24 h诱导23.8%的HL-60细胞发生线粒体途径介导的细胞凋亡,表现为细胞DNA片段化、线粒体膜电位下降和Bax基因表达上调,同时伴有细胞浆内细胞色素C增加。[结论]DZNep能在较低浓度下抑制HL-60细胞增殖并通过激发线粒体凋亡途径诱导HL-60细胞凋亡,具有抗人早幼粒细胞白血病治疗的潜在应用前景。     

三七总皂甙诱导MSCs分化为神经元样细胞时胞内钙离子浓度变化的研究

目的探讨三七总皂甙(tPNS)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞过程中细胞内钙离子浓度[Ca2 ]i的变化.方法 L-DMEM冲洗SD大鼠股骨骨髓腔,培养大鼠MSCs.选用第5代MSCs进行诱导分化,用含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的L-DMEM培养液预诱导24h,加入含10μmol/L Fluo-3/AM的L-DMEM培养液负载30min,最后更换成含三七总皂甙0.25g/L的无血清培养液,同时在波长为488nm激光下扫描观测细胞形态和荧光强度的变化.结果更换三七总皂甙诱导液后,细胞内荧光强度逐渐增加,到100s达高峰值,其后逐渐减弱,但20min时细胞荧光强度仍高于诱导前,此时可见MSCs开始向神经元样细胞分化.结论三七总皂甙在体外诱导MSCs分化为神经元样细胞过程中胞内游离钙离子[Ca2 ]i浓度升高.