融合膜中PSⅡ激发的电子推动嵴膜的电子传递和磷酸化

利用毛地黄苷从菠菜叶绿体类囊体膜制备了PSⅡ颗粒,氧化还原差示光谱及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明其具备PSⅡ的典型特征,它具有从水氧化到质醌还原的酶活性。从大豆磷脂用超声法制备了脂质体。从鼠肝线粒体分离了嵴膜。将制备的PSⅡ颗粒预组装于脂质体,然后将此预组装物(PSⅡ—PL)再与嵴膜组合,此膜系于光下获得了相当量的ATP合成,证明了融合膜中PSⅡ电子传递可推动嵴膜的电子传递和磷酸化机构合成ATP。     

解联剂促进BBY膜颗粒电子传递机理的研究

透射电镜结果表明,具有ＰＳⅡ理化特征的ＢＢＹ膜颗粒在结构上不具备完整的类囊体膜特征．９－ＡＡ荧光猝灭与毫秒级Ｃｈｌα延迟发光的测定表明,ＢＢＹ膜颗粒在功能上难以形成．光致跨膜质子浓度差．在ＢＢＹ膜颗粒中,解联剂ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎＤ（短杆菌肽〕和ＮＨ４Ｃｌ仅在低ｐＨ值时对ＰＳⅡ电子传递有所促进,ｐＨ６．０时促进尤为显著。两种解联剂促进的数值和对ｐＨ值的依赖特征基本一致,表明两者促进机制相同．综上所述,我们推测,解联剂在ＢＢＹ膜颗粒中并不促进跨越类囊体模的质子运转,而只是加速膜上微区内的质子转移,从而促进相关的电子传递。     

干旱胁迫对黄瓜PSⅡ颗粒铁组分Mossbauer谱的影响

黄瓜（Ｇｃｕｍｉｓ ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ）叶片ＰＳⅡ颗粒的Ｍｏｓｓｂａｕｅｒ谱呈现４套双峰,依它们的化学位移相四敬矩劈塑数值,分别属于氧化态Ｃｙｔ－ｂ５５９,还原态Ｃｙｌ－ｂ５５９、Ｆｅ＾３＋－Ｑ画物和Ｆｅ＾２＋－Ｑ复合物。干埋胁迫旱影响ＱＡ／ＱＢ中铁（Ｆｅ）参与电子传递的速率,使ＰＳⅡ颗粒的ｏｓｓｂａｕｅｔ谱中Ｆｅ＾２＋的吸收双峰消失,即还原态Ｇ７ｙｔ－Ｂ５５９转变为氧化态Ｃｙｔ－ｂ５５９Ｆｅ＾２     

杜氏盐藻细胞质膜氧化还原系统

杜氏盐藻细胞质膜具有氧化ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ、还原Ｆｅ（ＣＮ）和Ｏ２的氧化还原系统。当Ｆｅ（ＣＮ）浓度为０．６ｍｍｏｌ／Ｌ时,氧化ＮＡＤＨ的Ｋｍ为９６μｍｏｌ／Ｌ,Ｔｍａｘ为１５９ｎｍｏｌ１０－８ｃｅｌｌｓｍｉｎ－１,最适ｐＨ为８．５。ＴｒｉｔｏｎＸ－１００可促进ＮＡＤＨ和Ｆｅ（ＣＮ）的氧化还原活性。ＮＡＤＨ能促进藻细胞的氧吸收,最适ＰＨ为８．５。在无外源电子供体存在时,细胞质电子供体提供的电子使Ｆｅ（ＣＮ）还原。培养液ＰＨ影响正常呼吸链、交替氧化酶途径和质膜电子传递链的耗氧比例;当有外源ＮＡＤＨ存在时,ＳＨＡＭ明显促进细胞的氧吸收,并且质膜电子传递链的耗氧比例增加。     

膜表面质子可能是ATP合成的主要驱动力

利用细胞压破碎仪破碎鼠肝线粒体,得到了具有良好生物活性的ＳＭＰ,其呼吸控制率为１．４。分别采用荧光探针ｏｘｏｎｏｌＶＩ和ａｃｒｉｄｉｎｅｏｒａｎｇｅ,利用荧光淬灭法测定了丙二酸滴定过程中,ＳＭＰΔΨ和ΔｐＨ的变化趋势,结果表明：当丙二酸浓度达到０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ时,ΔΨ的建立完全被抑制,而ΔｐＨ仍然保持了８３．９％。当丙二酸浓度达到１．００ｍｍｏｌ／Ｌ时,ΔｐＨ的建立才完全被抑制。ＳＭＰＡＴＰ合成活性的测定显示,当ΔΨ的建立被完全抑制,而ΔｐＨ仍然存在时,仍有部分ＡＴＰ合成活性（３４．１％）。上述现象为膜表面高能质子是ＡＴＰ合成的主要驱动力的观点提供了又一佐证。此外,当丙二酸浓度从０ｍｍｏｌ／Ｌ增加到０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ时,尽管ΔΨ与ΔｐＨ的变化不很大,但ＳＭＰＡＴＰ合成活性却出现明显降低,与氧化呼吸链活性的变化类似,二者呈对数关系,也表明ＡＴＰ合成很可能与ΔμＨ＋并不直接相关,而与膜表面质子流量呈更为紧密的关系     

植物细胞质膜氧化还原系统电子传递活性,组成及生理功能

植物细胞质膜氧化还原系统电子传递活性、组成及生理功能邱全胜梁厚果（兰州大学生物系,兰州７３０００１）ＴＨＥＥＬＥＣＴＲＯＮＴＲＡＮＳＰＯＲＴＡＣＴＩＶＩＴＹ,ＣＯＮＳＴＩＴＵＥＮＴＳＡＮＤＰＨＹＳＩＯＬＯＧＩＣＡＬＦＵＮＣＴＩＯＮＳＯＦＴＨＥＲＥＤ...     

小麦根液泡膜H~+-ATPase的解离和重组

ＫＩ诱导小麦根液泡膜Ｈ－ＡＴＰａｓｅ解离地温度敏感,在４℃时比在２０℃时解离更迅速;该过程为Ｍｇ＾２＋和ＡＴＰ的加强。其它阴离子诱导酶活性丧失的有效性依次为“ＳＣＮ〉Ｉ〉ＮＯ３〉Ｂｒ〉Ａｃ〉ＳＯ３＾２－〉ＳＯ４＾２－〉Ｃｌ〉ＨＣＯ３。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的结果显示酶活性的丧失伴随着Ｖ。与Ｖ１的解离。通过透析去除解离剂可部分恢复泵质子活性和ＡＴＰ水解活性,这表明Ｖ０与Ｖ１进行重新组装。这种解离和重组的能     

PSⅡ膜脂肪酸的脱饱和与黄瓜低温光抑制关系的研究

低温适应（１２℃,１２０μｍｏｌ／Ｌ·ｍ－２·ｓ－１ＰＰＦＤ）引起黄瓜子叶ＰＳⅡ膜碎片（ＰＳⅡｍｅｍｂｒａｎｅ,下同）饱和脂肪酸分子百分含量的减少,膜脂不饱和度提高。其中,十六碳脂肪酸的脱饱和较为明显,Ｃ１６３脂肪酸的分子百分含量经低温适应后上升。分段测定类囊体膜的电子传递活力发现,低温适应使电子传递Ｈ２Ｏ→ＭＶ和ＤＰＣ→ＭＶ呈现先降后恢复的趋势,其中ＰＳⅡ的电子传递活力在低温适应７２ｈ内受影响较小;而ＰＳⅠ的活力受到明显抑制。经叶绿素ａ荧光测定也证实,低温适应后ＰＳⅡ的荧光化学效率仍较高,同时,黄瓜子叶对低温光抑制的抗性提高。本文认为,ＰＳⅡ膜碎片中饱和脂肪酸含量的降低有可能提高膜的流动性,从而增强黄瓜幼苗对低温光抑制的抗性。     

小麦根液泡膜H~ -ATPase的解离和重组

ＫＩ诱导的小麦根液泡膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ解离对温度敏感,在４℃时比在２０℃时解离更迅速;该过程为Ｍｇ２＋和ＡＴＰ所加强。其它阴离子诱导酶活性丧失的有效性依次为：ＳＣＮ－＞Ｉ－＞ＮＯ３－＞Ｂｒ－＞Ａｃ－＞ＳＯ３２－＞ＳＯ４２－＞Ｃｌ－＞ＨＣＯ３－。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的结果显示酶活性的丧失伴随着Ｖｏ与Ｖ１的解离。通过透析去除解离剂,可部分恢复泵质子活性和ＡＴＰ水解活性,这表明Ｖｏ与Ｖ１进行重新组装。这种解离和重组的能力在体内Ｖ型Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ的调控和装配上可能有重要意义。     

人血小板生成素受体c—MPL膜内部分的聚合作用

血小板生成素（ＴＰＯ）是调节血小板生成最主要的细胞因子,其生物学效应由其受体ｃ－ＭＰＬ介导。利用酵母双杂合系统研究ｃ－ＭＰＬ膜内部分在ＴＰＯ信号转导途径中的功能。首先用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法从人红白血病ＨＥＬ细胞系总ＲＮＡ中扩增并克隆Ｐ型ｃ－ＭＰＬ（ＭＰＬＰ）膜内部分ｃＤＮＡ,经测序验证后克隆至双杂合载体ｐＡＳ２和ｐＧＡＤ４２４中,重组质粒命名为ｐＡＳＭＭ和ｐＧＡＤＭＭ。将ｐＡＳＭＭ与ｐ     

小麦根质膜原位膜微囊与翻转膜微囊的氧化还原特性比较

用二相法和不连续蔗糖梯度离心分别制得小麦根质膜的原位膜微囊和翻转膜微囊,两者比较可知,质膜内外两侧均表现出较高的氧化还原活性;膜内侧的ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ氧化和Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６还原速率高于外侧,质膜内外两侧都能还原ＥＤＴＡ－Ｆｅ＾３＋,但外侧的还原活性高于内则,质膜内外两侧均有Ｏ２吸收,同时都可被ＳＨＡＭ刺激,被ＫＣＮ抑制,质膜内侧和外侧都可产生Ｏ＾－２,最适ｐＨ值为６．０既可被ＳＨＡＭ刺激,也可被     

脂氧合酶对黄瓜叶片光合电子传递活性的影响

黄瓜（Ｃｕｃｕｍ ｉｓｓａｔｉｖｕｓＬ．）叶片的光合作用与电子传递活性随叶片衰老而降低,脂氧合酶（Ｌｏｘ）活性则相应增高。大豆Ｌｏｘ－１ 抑制黄瓜子叶分离的叶绿体ＰＳⅡ电子传递活性,没食子酸丙酯（ＰＧ）或槲皮酮（ＰＦ）能消除这种抑制作用。二氯苯二甲脲（ＤＣＭＵ）或２,３－二溴百里香醌（ＤＢＭＩＢ）存在时,大豆Ｌｏｘ－１ 对ＰＳⅡ电子传递活性有抑制作用,加入ＰＧ 使活性恢复到接近原有水平。二苯卡巴肼（ＤＰＣ）对经Ｌｏｘ－１ 处理的叶绿体ＰＳⅡ电子传递活性有明显恢复作用。Ｌｏｘ－１ 使Ｃｈｌａ室温荧光Ｆｍ 降低,ＤＰＣ则能轻微恢复Ｆｍ 。可见,ＰＳⅡ氧化侧、Ｑ与ＰＱ 位点都对Ｌｏｘ－１ 的作用敏感。Ｌｏｘ－１ 对叶绿体色素的漂白作用,以及活性氧对ＰＳⅡ电子传递活性的抑制,可能是Ｌｏｘ 影响光合膜功能的重要原因之一     

小麦根质膜原位膜微囊与翻转膜微囊的氧化还原特性比较

用二相法和不连续蔗糖梯度离心分别制得小麦根质膜的原位膜微囊和翻转膜微囊。两者比较可知：质膜内外两侧均表现出较高的氧化还原活性;膜内侧的ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ氧化和Ｆｅ（ＣＮ）还原速率高于外侧。质膜内外两侧都能还原ＥＤＴＡ－Ｆｅ３＋,但外侧的还原活性高于内侧。质膜内外两侧均有Ｏ２吸收,同时都可被ＳＨＡＭ刺激,被ＫＣＮ抑制。质膜内侧和外侧都可产生,最适ＰＨ值为６．０;既可被ＳＨＡＭ刺激,也可被ＳＯＤ、过氧化氢酶和ＫＣＮ抑制。     

神经肽AVP（4—8）激活大鼠海马突触膜上的G蛋白偶联受体

精氨酸加压素（ＡＶＰ）的Ｃ端内片段,ＡＶＰ（４－８）,具有增强记忆的功能,它在大鼠脑内引发一系列的生理和生化变化。ＧＴＰ－结合调节蛋白（Ｇ蛋白）介导多数神经肽和神经调质的细胞内生理生化反应,放射性受体结合实验显示,在海马突触膜上存在ＡＶＰ（４－８）的特异性结合位点。ＡＶＰ（４－８）在海马突触膜上的结合能够进一步刺激ＧＴＰγＳ结合并可被ＡＶＰ（４－８）的受体拮抗剂ＺＤＣ（Ｃ）ＰＲ所逆转。从以上实验结     

铝胁迫对小麦根系液泡膜ATP酶,焦磷酸酶活性和膜脂组成的效应

研究了铝胁迫下耐铝性不同的两个小麦品种根细胞液泡膜ＡＴＰ酶、焦磷酸酶活性和膜脂的变化。与对照相比,经２０和１００ｍｏｌ／Ｌ的ＡｌＣｌ３处理后,耐铝品种Ａｌｔａｓ６６的液泡膜Ｈ＾＋－ＡＴＰ和和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性迅速下降;铝敏感品种Ｓｃｏｕｔ６６液泡膜Ｈ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性则在２０μｍｏｌ／Ｌ时增加,１００μｍｏｌ／Ｌ时下降。焦磷酸酶活性在Ａｌ－ｔａｓ６６中下降,在Ｓｃｏｕｔ     

睡莲和菠菜光合膜光化学活性及多肽组分的比较

比较分析了水生植物睡莲及陆生植物波菜类囊体膜ＰＳＩ,ＰＳⅡ电子传递活性,吸收光谱,室温荧光发射光谱等光化学特性及类囊体膜的多肽组分。结果显示：睡莲类囊体膜ＰＳＩ,ＰＳⅡ电子传递活性相对较弱,分别对菠菜的６０．２１％和７０．８２％,其室温吸收光谱蓝紫光区域吸收较弱,没有明显的吸收峰,红光区域的吸收光谱和菠菜相似;     

Mg~（2＋）促进线粒体H~＋－ATP酶的重建机理──H~＋－ATP酶复合体亚基水平的研究

用专一性标记蛋白质巯基（－ＳＨ）的荧光探剂ａｃｒｙｌｏｄａｎ测定含Ｍｇ２＋的Ｆ０－ＡＴＰ酶或Ｆ０－ＯＳＣＰ－Ｆ１－ＡＴＰ酶的脂酶体的构象与无Ｍｇ２＋者明显不同,前者的蛋白质的－ＳＨ基团处于疏水性更强的微环境中;在有Ｍｇ２＋和ＯＳＣＰ同时存在下重建的Ｆ０－Ｆ１－ＡＴＰ酶脂酶体较无ＯＳＣＰ者表现更高的水解活力或膜电位,表明ＯＳＣＰ增强Ｍｇ２＋的促进作用,这进一步提示Ｍｇ２＋通过改变膜脂的物理状态促进线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶重建的间接作用。这些实验结果,从线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶复合体的亚基水平的相关性上,对于我们提出的Ｍｇ２＋通过改变膜脂的物理状态使之具有合适的流动性,诱导嵌入脂双层的Ｈ＋－ＡＴＰ酶复合体的Ｆ０的构象发生变化并传递至复合体的催化中心Ｆ１,从而使重建Ｆ１－Ｆ０－ＡＴＰ酶具有较适合的蛋白构象,表现较高的重建酶活性的假设提供了直接的实验证据,精确地阐明了Ｍｇ２＋促进线粒体Ｆ０－Ｆ１－ＡＴＰ酶重建作用的分子机理。     

扬麦5号旗叶光合功能衰退进程中光合膜特性的变化

旗叶自然衰退过程中光合膜特性变化的结果表明,光合功能高值持续期类囊体膜电子传递活性均维持较高水平,多肽组分也维持相对稳定;进入光合功能的速降期后,活性呈快速下降趋势,类囊体膜小分子多肽等组分均出现不同降解。旗叶全展后叶绿体ＡＴＰ含量在高值持续期维持一定水平;进入速降期后,对应于光合膜电子传递活性及Ｐ／Ｏ值,叶绿体ＡＴＰ含量变化存在“滞后”的现象;强光逆境下,速降期类囊体电子传递活性受抑制程度比高值     

人颈淋巴结淋巴细胞酶超微结构定位与活性研究

应用电镜酶细胞化学方法研究了人颈淋巴结淋巴细胞ＡＴＰ酶、Ｇ－６－Ｐ酶、５’－Ｎａｓｅ的定位与活性。结果：ＡＴＰ酶主要定位在淋巴细胞膜及内质网、线粒体等膜相结构。Ｇ－６－Ｐ酶主要定位在内质网、线粒体等膜相结构。５’－Ｎａｓｅ主要定位在细胞膜外表面,在内质网与线粒体股外表面也可见此酶反应颗粒。３种酶定位准确、颗粒清晰,酶反应特异性强。结果提示应用此法可以检测以上酶活性,对判定机体免疫状态、对临床诊断与治疗具有一定意义。     

Mg~（2＋）促进线粒体H~＋－ATP酶的重建机理──H~＋－ATP酶复合体亚基水平的研究

用专一性标记蛋白质巯基的荧光探剂ａｃｒｙｌｏｄａｎ测定含Ｍｇ＾２＋的Ｆ０－ＡＴＰ酶或Ｆ０－ＯＳＣＰ－Ｆ１－ＡＴＰ酶的脂酶体的构象与无Ｍｇ＾２＋者明显不同,前者的蛋白质的－ＳＨ基团处于疏水性更强的微环境中;在有Ｍｇ＾２＋和ＯＳＣＰ同时存在下重建的Ｆ０－Ｆ１－ＡＴＰ酶脂酶体较无ＯＳＣＰ者表现更高的水解活力或膜电位,表明ＯＳＣＰ增强Ｍｇ＾２＋的促进作用,这进一步提示Ｍｇ＾２＋通过改变膜脂的物理状态促进线