‘章姬’草莓茎段愈伤组织诱导及高频植株再生体系的建立

该研究以‘章姬’脱毒苗带节匍匐茎段为外植体,以MS为基本培养基,进行单因素预实验,选取适合‘章姬’草莓生长的植物激素种类和质量浓度范围,进而通过L_9(3~4)正交实验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果表明:采用的3种基本培养基中,B_5和1/2MS对抑制培养过程中的褐化现象明显优于MS,而附加20 g·L~(-1)Na_2S_2O_3在保证材料存活的前提下,大大降低了褐化率;去除褐化的材料在MS+0.1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)2,4-D+0.1 mg·L~(-1)NAA中可同步进行愈伤组织诱导和丛芽发生;丛芽增殖培养基为MS+0.1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,30 d后繁殖系数可达12.86;试管苗生根则在1/2MS+1.0 g·L~(-1)AC中进行,35 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率92.50%。再生苗移栽成活率在95%以上。该研究建立了‘章姬’草莓体外高效快速繁殖体系,对短期内为‘章姬’草莓栽培提供大量种性稳定、质量优良的种苗具有重要意义,同时为其他草莓品种的体外快繁提供了技术参考。     

‘宁杞8号’体细胞胚胎发生体系建立

以宁夏枸杞新品种‘宁杞8号’幼嫩叶片为外植体,探讨激素组合及添加物对‘宁杞8号’体细胞胚胎诱导、体胚增殖、萌发和植株再生的影响,并建立高效稳定的体细胞胚胎发生体系。结果表明:通过对6-BA、2,4-D和IAA进行正交分析,筛选出‘宁杞8号’体细胞胚诱导最优激素组合:6-BA 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D0.3 mg·L~(-1)+IAA 0.4 mg·L~(-1),体胚诱导率达88.67%。极差分析比较各激素间的影响,6-BA对体胚诱导影响最显著。当高浓度的生长素及低浓度细胞分裂素浓度适宜的配比时,才能诱导产生形态正常数量多的‘宁杞8号’体细胞胚。在体胚增殖培养中,6-BA的浓度过高易导致玻璃化,不利于‘宁杞8号’体胚增殖生长。随着激素浓度的增高,体胚增殖倍数增加,玻璃化率也越高,综合分析得到‘宁杞8号’最佳体胚增殖培养基为6-BA 0.4 mg·L~(-1)+NAA 0.6 mg·L~(-1)。当添加IBA 0.3 mg·L~(-1)+GA_30.4 mg·L~(-1)+蔗糖10 g·L~(-1)时,‘宁杞8号’体胚萌发率最高,萌发率达89.17%。添加GA_3及低浓度蔗糖能促进成熟的体胚萌发。对‘宁杞8号’体萌发的影响程度依次是IBA蔗糖GA_3。活性炭能有效提高‘宁杞8号’体胚再生植株率,同时对萌发体胚的根的发育也有促进作用,当IBA 0.1 mg·L~(-1)+KT 0.4 mg·L~(-1)+活性炭1 g·L~(-1)时,‘宁杞8号’体胚再生植株效果最佳,体胚再生率达91.67%。     

‘杨氏金红50号’猕猴桃的离体快繁研究

为建立‘杨氏金红50号’猕猴桃的离体快繁体系,该研究以其带腋芽茎段为外植体,采用组织培养的方法进行离体培养,并建立了两种离体再生途径:途径I为直接诱导茎段腋芽出芽;途径Ⅱ为茎段基部先产生愈伤组织,再分化不定芽。结果表明:‘杨氏金红50号’猕猴桃带腋芽茎段的最佳灭菌方式为75%酒精30 s+15%Ca(Cl O)_25 min+0.1%升汞8 min;在途径I中,诱导茎段腋芽出芽的最优培养基为MS+4.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA;在途径Ⅱ中,诱导茎段基部产生愈伤组织并产生不定芽的最优培养基为MS+3.0 mg·L~(-1)6-BA+0.3 mg·L~(-1)NAA;培养丛生芽的最佳植物生长调节剂组合为MS+4.0 mg·L~(-1)6-BA+0.4 mg·L~(-1)NAA;不定芽生根培养的最佳植物生长调节剂组合为1/2 MS+0.9 mg·L~(-1)IBA,20 d左右分化出不定根,40 d左右获得完整植株;生根后的组培苗在田园土∶细沙=1∶1的基质中能达到96%的移栽成活率。     

藏药山茛菪组织培养技术研究

以田间栽培两年生山莨菪幼芽(休眠芽)、带叶柄幼叶为外植体,通过器官培养分化芽的途径达到快速繁殖的目的。MS基本培养基附加NAA0～1.0mg·L~(-1)+6-BA2.0～3.0mg·L~(-1)+ZT0～3.0mg·L~(-1),适于丛生芽的诱导与增殖;附加2,4-D2.0mg·L~(-1)+NAA0.2mg·L~(-1)+6-BA0.2mg·L~(-1),适于愈伤组织的诱导与继代培养,诱导率高达93.2%;1/2MS培养基附加NAA1.0mg·L~(-1)+3.0%的蔗糖,适于生根诱导,生根率为100%。     

观赏凤梨高效离体快繁影响因素的研究

以侧芽为外植体材料,对其组织培养的各个阶段进行了研究。结果表明:品种对外植体的污染率、褐变率、芽诱导率及丛生芽增殖倍数均有显著影响;外源激素的种类和浓度在芽诱导分化、增殖、生根等各个阶段都是主要的影响因素;外植体在1/2MS+NAA0.2mg·L~(-1)+6-BA2mg·L~(-1)上,48d后芽开始分化,诱导率为40%,平均芽分化数为6个,诱导分化效果最好;芽增殖培养阶段,若培养基中仅含6-BA,且浓度在0~4mg·L~(-1)之间,芽增殖倍数随其浓度增大而增大;若培养基中仅含NAA,且其浓度为0.2mg·L-1时,增殖倍数最大;培养基中同时添加6-BA和NAA,比单独添加6-BA或NAA时,芽的增殖效果好,且在6-BA3mg·L~(-1)+NAA0.5mg·L~(-1)的MS培养基上,G.dissitisflora和G.‘Claret’增殖倍数最大,分别为5.24和3.84;在任何相同的培养基上,G.dissitisflora的增殖倍数显著高于G.‘Claret’;小苗在含有NAA0.5mg·L~(-1)+IBA0·5mg·L~(-1)的生根培养基上生长,生根率可达91.03%,平均根数为5.3条/株,生根效果较好。     

鸟巢蕨组培瓶苗培育技术

对鸟巢蕨Asplenium nidus优良株系孢子离体培养的初代培养、继代培养和生根培养以及移栽等方面进行研究。结果表明,初代培养的最佳培养基是MS+0.1%活性炭,原叶体形成率达80%;在1/3MS+6-BA 1.8mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)增殖培养基中培养,增殖倍数高达5.1;继代芽苗在1/2MS+NAA 0.5 mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)生根培养基中,生根率高达95%;移栽的最佳基质为红心土+腐殖土(1:1),移栽成活率达90%。     

盘龙参组织培养与快繁研究

以野生花卉植物盘龙参Spiranthes sinensis的芽、花序为外植体,探讨不同消毒处理及植物生长调节剂对盘龙参组织培养的影响,建立组织培养快繁体系。结果显示,以0.1%升汞消毒6 min处理效果较好;丛生芽形成、花序愈伤组织诱导最适合的培养基组合为1/2MS+6-BA 2.5 mg·L~(-1)+NAA 0.25 mg·L~(-1);最佳增殖培养基组合为1/2MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.75 mg·L~(-1);最佳生根培养基为1/2MS+NAA 1.25 mg·L~(-1)。     

褐纹报春苣苔组织培养与快速繁殖

褐纹报春苣苔(Primulina glandaceistriata)是一种极具观赏价值的喀斯特地区野生花卉,目前尚未有褐纹报春苣苔组培快繁的研究报道。该研究以褐纹报春苣苔的叶片为外植体,通过两种途径建立其组培快繁体系。结果表明:适宜的不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1),适宜的不定芽增殖培养基为MS+ZT 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1)+活性炭0.05 g·L~(-1),增殖系数为11.09;适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+TDZ 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.10 mg·L~(-1),适宜的愈伤组织分化培养基为MS+ZT 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.10mg·L~(-1),分化系数为12.46;适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 0.1 mg·L~(-1)+活性炭0.05 g·L~(-1)或1/2MS+IBA0.5 mg·L~(-1)+活性炭0.05 g·L~(-1),生根率为100%。该研究结果成功建立了褐纹报春苣苔的组培快繁体系,为今后褐纹报春苣苔的种苗繁殖和遗传转化提供了技术支持。     

‘东红''猕猴桃高效再生体系的建立

为有力推动猕猴桃产业化种苗生产及推广,快速高效地繁育猕猴桃新种质资源,同时为猕猴桃多倍体育种、转基因育种等新兴育种技术创造新种质资源奠定基础,该研究以‘东红’猕猴桃叶片、叶柄为外植体,探讨了不同植物生长调节剂种类及质量浓度组合对不定芽诱导过程中不定芽形成的影响,并研究了不同植物生长调节剂对‘东红’组培苗不定根诱导的影响。结果表明:‘东红’再生最佳外植体为叶柄,叶柄不定芽再生最佳培养基为MS+0.5μg·mL~(-1)6-BA+0.2μg·mL~(-1)NAA,不定芽平均再生率为91.2%;不定芽经过壮苗培养(MS+0.2μg·mL~(-1)6-BA+0.05μg·mL~(-1)NAA),取2～3 cm高幼苗进行生根诱导,不定根再生率为93%,平均根数为6条;生根后,种苗移栽成活率在80%以上。初步建立了‘东红’叶柄高效再生体系,为猕猴桃快速的产业化种苗生产及推广提供了有力保证,也为后期猕猴桃育种研究提供理论依据。     

独脚金离体培养与快速繁殖

采用茎段作为外植体,建立独脚金Striga asiatica的组织培养快速繁殖方法。结果显示,0.1%升汞溶液处理7~9 min是较有效的消毒方法;诱导不定芽增殖培养基适宜配方为MS+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+IBA 0.1mg·L~(-1);生根培养基配方为MS+NAA 0.1 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1),培育周期为3个月。     

新塔花的组织培养与快速繁殖

以新疆特有药用植物新塔花(Ziziphora bungeana Juz.)幼嫩茎段为外植体材料,筛选初代培养、继代增殖与生根培养的条件,建立了新塔花组织培养与快速繁殖体系。结果表明:新塔花种子最适萌发培养基为MS+0.25 mg·L~(-1) NAA,萌发率达57.78%;茎段诱导腋芽最适培养基为MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA,诱导率为90.47%;适宜芽增殖培养基为MS+0.5 mg·L~(-1 )6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA+0.3 mg·L~(-1) GA_3+35 g·L~(-1)蔗糖,20 d增殖系数达1.95;最佳诱导根生长培养基为1/2MS+0.5 mg·L~(-1) NAA+0.2%AC,生根率达60%,平均生根数为3.5,20 d株高达4.5 cm。移栽至混合基质(营养土:珍珠岩:蛭石=1:1:1)中,组培苗成活率为80.45%。     

叶下珠组培快繁体系研究

以叶下珠Phyllanthus urinaria带节茎段为外植体,研究生长调节剂浓度、培养基对茎段诱导芽的影响,再以叶下珠无菌芽为材料,开展丛生芽增殖培养、生根培养和炼苗移栽技术研究。结果表明,适合叶下珠茎段诱导芽的培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+琼脂7.5 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+活性炭0.5 g·L~(-1)(pH 5.8~6.0),诱导率达100%;适合叶下珠芽增殖的培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+琼脂7.5 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)(pH 5.8~6.0),平均增殖倍数为3.8;生根适宜培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L~(-1)+琼脂7.5 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)(pH 5.8~6.0),生根率达100%;最佳炼苗时间为闭盖2 d后开盖3 d,移栽成活率86.6%。     

矮晚柚的组织培养与快速繁殖

以矮晚柚种子萌发的无菌苗为实验材料,利用茎尖和上胚轴诱导丛生芽的发生,利用丛生芽获得再生植株。实验表明:矮晚柚成熟和未成熟种子在1/2MS、MS上均能萌发,萌发率最高可达96%,成熟种子萌发的无菌苗更利于后期的分化。最适外植体为无菌苗的上胚轴,筛选出丛生芽最佳增殖培养方案为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+蔗糖40 g·L~(-1)+靠近茎尖上胚轴,最高增殖系数达8.4,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+活性炭0.2 g·L~(-1),生根率达90%以上。移栽至蛭石+珍珠岩+营养土(1:1:2)的营养砵上,成活率可达80%。     

白花泡桐优树组织培养及产业化快繁技术

以自选育的白花泡桐优树茎段为外植体,进行种苗组培快繁技术研究。结果表明:其最佳的外植体灭菌方法是以0.1%升汞处理7 min;合适的初代诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1)(pH 5.8),培养30 d,芽诱导率70%;合适的继代增殖方法为在高浓度植物生长物质培养基MS+6-BA 4.0 mg·L~(-1)+IBA 0.4 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1)(pH 5.8)和低浓度植物生长物质培养基MS+6-BA 0.4 mg·L~(-1)+IBA 0.04 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1)(pH 5.8)中交替培养,获得的丛生芽长势良好,玻璃化率低于5%,增殖系数大于6.0/25 d;最适的生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+卡拉胶3.4 g·L~(-1)(pH 5.8),培养14 d,得到白花泡桐生根苗,每株长根5~10条,根长3~5 cm,生根率98%,根系洁白、根毛少而短,易于清洗。将生根苗按照常规方法炼苗后移栽于温室大棚中,50 d后即可出圃,此时平均苗高1.0 m、地径1.0~2.0 cm,成活率在90%以上。     

牛角瓜离体快繁技术

该文选用牛角瓜茎段为外植体,通过组织培养方法探索牛角瓜组织培养和种苗快繁技术。结果表明:最佳外植体表面消毒方法是以0.1%HgCl_2处理7 min,外植体存活率为32.3%;初代培养基为MS+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),培养20 d后形成3～4 cm高的再生芽。增殖培养前期筛选的较为适宜的增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),增殖系数4.6。但在后续的培养过程中发现,牛角瓜组培苗易玻璃化,且随着世代更迭,玻璃化程度加重,到了第四代几乎全部玻璃化。因此在上述增殖培养的基础上,以AgNO_3作为玻璃化抑制剂,筛选出最终的增殖培养基为MS+6-BA1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1)+AgNO_31.0 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1)。用此增殖培养基,培养25 d,苗高5～8 cm,增殖系数5.8,玻璃化率低于10%,且连续培养多代,玻璃化率维持在10%以下。生根壮苗培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂3.6 g·L~(-1),培养14 d,生根率98%;将生根苗移栽于70%遮阴度的大棚中,30 d后,苗高20 cm左右,成活率85%。利用该方法可对牛角瓜优良种苗进行规模化生产。     

芦竹的组培快繁技术研究

该研究以从匈牙利引进的良种芦竹带腋芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过设计不同的生长调节剂配比,对芦竹腋芽诱导、继代增殖及生根培养基进行了研究。结果表明:良种芦竹初代诱导最佳培养基为MS+6-BA 4.0 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),萌发率为90.0%;继代增殖最佳培养基为MS+6-BA 8.0 mg·L~(-1)+IBA 0.8 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),芽健壮均匀,增殖系数为4.3/30 d,基部保留3~5个芽作为继代培养物增殖效果最佳;选择高度5.0 cm以上的植株进行生根,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg·L~(-1)+蔗糖20.0 g·L~(-1)+活性碳1.0 g·L~(-1),不添加琼脂,培养1周生根率为100.0%,平均生根4条,根长2.0~4.0 cm;将所得生根苗炼苗1周,以河沙、黄泥或腐质土作为栽培基质,移栽于阴蔽度70的大棚中,1个月后移栽成活率≥98.0%;移栽于实验田中,按常规方式进行管理,当年亩产量约为5 500.0 kg。该研究结果为良种芦竹的大规模产业化应用提供了技术支撑。     

‘易丰’女贞组培快繁技术体系的建立北大核心CSCD

以‘易丰’女贞(Ligustrum lucidum‘Yi Feng’)当年新发半木质化带腋芽茎段为外植体,以芽繁芽的方式,建立了较为完善的可用于大规模工厂化生产的组培快繁技术体系。研究表明,最佳诱芽(启动)培养基为WPM+0.3 mg/L Kinetin(KT)+0.1 mg/L 6-Benzylaminopurine(6-BA)+0.05 mg/L 1-Naphthylacetic acid(NAA),腋芽萌发率达到95.6%;最佳的增殖培养基为WPM+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,平均增殖系数达到5.63;最佳的生根培养基为1/2WPM+1.5 mg/L 3-Indolebutyric acid(IBA)+0.1 mg/L NAA,生根周期约为20 d,生根率约为95.4%,炼苗移栽后成活率达到95%以上。建立的组培技术体系能够满足产业化生产的需要,得到的组培苗后代能够稳定地遗传亲本的优良变异性状。     

鳄嘴花的组织培养和快速繁殖

以鳄嘴花[Clinacanthus nutans(Burm.f.)Lindau]幼嫩茎段为外植体,研究不同植物生长调节剂对鳄嘴花茎段腋芽诱导、丛生芽分化、增殖及生根培养的影响。结果表明:茎段在培养基MS+1.0 mg·L~(-1) BAP+0.1mg·L~(-1) NAA上诱导产生腋芽,将腋芽转入培养基MS+1.0 mg·L~(-1) BAP+0.1 mg·L~(-1) NAA诱导分化丛生芽,分化率高达93.3%;在培养基中分别加入30 g·L~(-1)椰汁、30 g·L~(-1)香蕉、0.5 g·L~(-1)蛋白胨,都有壮苗的效果;最佳的生根培养基为MS+0.5 mg·L~(-1) NAA+2.0 mg·L~(-1) IBA,生根率达90%,且根系发达,芽苗生长健壮。移栽至混合基质(泥炭:椰糠:珍珠岩:河沙=3:2:2:1)中,鳄嘴花的成活率达97%。     

‘易丰’女贞组培快繁技术体系的建立

以‘易丰’女贞(Ligustrum lucidum‘Yi Feng’)当年新发半木质化带腋芽茎段为外植体,以芽繁芽的方式,建立了较为完善的可用于大规模工厂化生产的组培快繁技术体系。研究表明,最佳诱芽(启动)培养基为WPM+0.3 mg/L Kinetin(KT)+0.1 mg/L 6-Benzylaminopurine(6-BA)+0.05 mg/L 1-Naphthylacetic acid(NAA),腋芽萌发率达到95.6%;最佳的增殖培养基为WPM+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,平均增殖系数达到5.63;最佳的生根培养基为1/2WPM+1.5 mg/L 3-Indolebutyric acid(IBA)+0.1 mg/L NAA,生根周期约为20 d,生根率约为95.4%,炼苗移栽后成活率达到95%以上。建立的组培技术体系能够满足产业化生产的需要,得到的组培苗后代能够稳定地遗传亲本的优良变异性状。     

青钱柳的快速繁殖技术

该文以青钱柳幼嫩茎段为外植体,研究其种苗快速繁殖技术。结果表明:青钱柳最佳采样时间为4月—6月,最佳外植体为轻微木质化茎段;最佳的外植体表面消毒方法为用0.1%HgCl_2浸泡5～7 min,消毒成功率54.1%,无菌外植体存活率88.7%;初代芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1),芽诱导率80.5%,培养21 d初代芽苗平均高度3.0 cm;最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+IBA 0.05 mg·L~(-1)+TIBA 0.02 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1),培养35 d,增殖系数7.0/35 d,平均苗高4.5cm,芽苗健壮且无玻璃化;生根前的壮苗培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+IBA 0.05 mg·L~(-1)+蔗糖30.0 g·L~(-1),培养35 d,长出的芽苗高大健壮,平均苗高6.0 cm;生根培养基为1/2WPM+IBA 1.5 mg·L~(-1)+5-NGS 4.5mg·L~(-1)+蔗糖20.0 g·L~(-1),培养40 d,最高生根率83.3%;生根苗较适合的移栽基质为泥碳土,较好的移栽季节为3月—5月和10月—11月,移栽后在遮光度70%的大棚中培养40 d,移栽成活率为54.3%～65.6%。该研究为其优良无性系的规模化繁育奠定基础。