以蛋白为基础的新型肺炎球菌疫苗的安全性、反应原性和免疫原性:Ⅰ/Ⅱ期随机临床研究

正背景:含有高度保守的肺炎球菌蛋白,例如肺炎链球菌溶血素类毒素(d Ply)和三联组氨酸蛋白D(Pht D)都正被开发出来以期提供抗肺炎球菌病的保护。这项研究评价了不同的含肺炎球菌蛋白的疫苗配方制剂的安全性、反应原性和免疫原性。试验在成人中进行。方法:在Ⅰ期双盲临床试验中,健康成人(18~40岁)被随机(1∶2∶2∶2∶2∶2∶2)分组,按2个     

两种基于肺炎球菌蛋白质的观察性疫苗的安全性、反应原性和免疫原性:来自婴儿Ⅱ期临床随机研究的结果

正接种含有肺炎球菌蛋白抗原诸如肺炎球菌溶血素类毒素(d Ply)和组氨酸-三联体蛋白D(Pht D)的配方制剂,可扩大抗肺炎链球菌的肺炎球菌结合疫苗(PCVs)血清型相关的保护作用。在欧洲进行的这项多中心、观察者盲的Ⅱ期临床试验(NCT01204658),评估了两种含10种血清型特异性多糖结合物的观察性疫苗PHi D-CV,其分别含有10μg或30μg的d Ply和Pht D。按1∶1∶1∶     

肺炎球菌表面蛋白A不影响小鼠对百白破疫苗的免疫应答

<正>肺炎球菌表面蛋白A(PspA)是一种抗肺炎链球菌的构成蛋白疫苗的很有希望的候选物。之前我们已经表明,全细胞百日咳疫苗(wP)对于PspA是一种很好的佐剂,在小鼠中诱导抗肺炎球菌感染的保护性应答。在巴西,wP与白喉、破伤风类毒素(DTPw)及氢氧化铝(明矾)佐剂一起施用于儿童。在小鼠中PspA5-DTP.的单一皮下注射剂量(配方包含得自进化支5的PspA和新一代DTPw,并含有低剂量的百日咳杆菌脂多糖和明矾)诱导高水平的全身PspA5抗体,并针对两种不同的呼吸道致命性肺     

用融合鞭毛蛋白的重组PspA鼻腔接种增强抗肺炎交叉保护免疫

<正>肺炎链球菌是一重要的呼吸道病原体,这种病原体在婴儿及老年人中引起较高的发病率和死亡率,尽管应用了抗生素和疫苗,但致死性肺炎球菌性疾病仍在流行。肺炎球菌表面蛋白A(PspA)是由所有肺炎链球菌产生的具有高度免疫原性的表面蛋白,能够激发抗致死性肺炎链球菌感染的保护性免     

靶向鼻腔树突细胞的Flt3配体作佐剂激发抗致死性肺炎球菌性肺炎保护

<正>作者以往的研究证明以肺炎球菌表面蛋白A(PspA)为基础的疫苗含有编码Flt3配体(FL)基因的DNA质粒(pFL),这种DNA质粒可作为一种鼻腔佐剂,该疫苗能够预防肺炎链球菌在鼻腔的定植。在本项研究中,作者进一步研究了这种鼻腔投递疫     

肺炎链球菌疫苗研制进展

肺炎链球菌导致的疾病已成为全球一个重要的公共卫生问题。疫苗开发及使用成为重要的预防策略,目前肺炎球菌疫苗主要有多糖疫苗和多糖蛋白结合疫苗二类。对肺炎链球菌病原学、流行病学、所致疾病、疫苗研发进展及疫苗使用情况进行了综述。     

肺炎球菌毒力因子Tu的免疫增强了抗肺炎链球菌感染的血清型非依赖性保护

疫苗接种是预防肺炎球菌疾病的一种有效方法。目前,肺炎链球菌上市疫苗包括多糖疫苗(PPSV)和结合疫苗(PCV),它们靶向以荚膜构成为基础的94种肺炎链球菌血清型中最常见的血清型。然而,据报道,PPSV对2岁以下儿童无效,并且PCV诱导了血清型替代,这意味着在广泛接种疫苗后肺炎链球菌菌群发生了变化,非疫苗血清型引起的侵袭性肺炎球菌病的案例增加。因此,开发新型肺炎球菌疫苗以替代或补充目前的基于多糖的疫苗十分必要。     

中国西南地区儿童肺炎链球菌的分子特征及潜在蛋白疫苗rPfbA的评价

<正>生活在中国西南地区的儿童很少接种肺炎链球菌(S. pneumoniae)疫苗,肺炎链球菌是导致高发病率和高死亡率的重要病原体。此研究旨在分析儿童肺炎链球菌菌株的分子特征,以及基于潜在蛋白质抗原的新疫苗策略。使用PCR进行分子表征、包括血清型、毒力基因和菌毛分析。对7个管家基因进行测序以鉴定序列类型(ST),并使用微量稀释肉汤法分析抗生素抗性。此外,作者通过攻击和被动转移分析评估了重组纤溶酶和纤连蛋白结合蛋白A(rPfbA)在小鼠肺炎     

靶向鼻腔树突细胞的F1t3配体作佐剂激发抗致死性肺炎球菌性肺炎保护

作者以往的研究证明以肺炎球菌表面蛋白A（PspA）为基础的疫苗含有编码Flt3配体（FL）基因的DNA质粒（pFL）,这种DNA质粒可作为一种鼻腔佐剂,该疫苗能够预防肺炎链球菌在鼻腔的定植。在本项研究中,作者进一步研究了这种鼻腔投递疫苗在小鼠模型中诱导抗肺炎链球菌肺部感染的PspA特异性抗体应答的有效性及安全性,C57BL／6小鼠鼻腔免疫重组PspA／Rxl（rPspA）加pFL,免疫3次,间隔1周。     

肺炎链球菌血红素结合脂蛋白PiuA的表达、纯化和表征

【背景】肺炎链球菌是社区获得性肺炎最常见的致病菌之一,它也会引起脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎、菌血症等一系列疾病,对人类(特别是儿童、老人、免疫缺陷患者)健康造成重大威胁。铁是肺炎链球菌生存和感染所必需的元素之一,其中血红素转运系统PiuABCD是肺炎链球菌最重要的铁转运系统。【目的】克隆、表达和纯化肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA,并在体外表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【方法】将肺炎链球菌D39菌株中的piuA(spd_1652)基因连接到载体pBAD-HisA上,在大肠杆菌Top10菌株中进行异源表达,然后运用Ni-NTA亲和层析纯化PiuA-His蛋白,并用肠激酶切掉His标签获得不含标签的PiuA蛋白,最后运用圆二色谱、紫外光谱和荧光光谱表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【结果】构建了pBAD/HisA-PiuA重组表达载体,获得了纯度大于95%的PiuA蛋白,圆二色谱显示PiuA蛋白与Hemin结合后,其二级结构不发生改变;紫外光谱结果显示PiuA蛋白具有血红素结合能力;荧光光谱结果显示apo-PiuA蛋白与Hemin结合常数K=3.4×10~5 L/mol。【结论】肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA能够特异地结合血红素,为肺炎链球菌的生存和感染提供必需的铁源,PiuA蛋白的体外表征结果为针对PiuABCD血红素转运系统设计抗菌药物奠定了基础。     

儿童链球菌性肺炎的季节特点及病原菌的耐药性分析

目的:回顾性分析因肺炎就诊我院的儿童其感染肺炎链球菌对青霉素等临床常用抗生素的耐药性.方法:调阅2008年一月-2012年1月间,所有因肺炎入住我院并在我院治愈的患儿病历及呼吸道标本中的细菌分离、培养、耐药性报告单,剔除其他病原菌所致的儿童肺炎,仅针对分离出的388株肺炎链球菌药敏结果进行回顾性分析.结果:选定的研究期间内,肺炎链球菌所致的儿童肺炎有鲜明的季节特点,以冬春,秋冬交替时段高发.肺炎链球菌对青霉素的耐药率呈逐年上升趋势,分别为48.9％、53.8％、52.6％和55.7％.另外,统计还发现SP对临床常用的抗生素如头孢呋辛(77.8％)、阿奇霉素(82.0％)、红霉素(86.9％)、四环素(79.9％)、克林霉素(80.9％)、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑(69.1％)等的耐药性也较以往的报道为高.尽管SP的耐药性较为严峻,但SP对临床部分抗生素尚具有较高的敏感性,这其中比较敏感的包括头孢噻肟、头孢曲松、美罗培南、万古霉素、氧氟沙星以及利奈唑胺,这给临床使用抗生素治疗SP所致的感染性肺炎提供了很好的取舍参考.结论:链球菌所致的儿童肺炎具有鲜明的季节特点,经典的治疗药物青霉素的耐药逐年升高,本地区儿童肺炎链球菌的耐药情况较为严峻,使用抗生素治疗SP感染时应注意参考药敏试验结果.     

肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对荚膜多糖的调控作用

摘要:【目的】研究肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对肺炎链球菌荚膜多糖(CPS)的调控作用。【方法】利用大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)工程菌原核表达CcpA蛋白,使用Ni2+亲和层析的方法纯化蛋白。利用纯化后的CcpA蛋白免疫昆明小鼠并制备多克隆抗体;采用ELISA法测定抗CcpA抗体效价。随后,利用Westertn blot方法分析CcpA蛋白在肺炎链球菌中的保守性。另外,利用EMSA方法分析CcpA与cps基因座启动子区域片段的结合。最后,构建ccpA基因缺失株和ccpA基因回复株;利用ELISA法测定野生D39菌 株、ccpA基因缺失株和ccpA基因回复株的荚膜多糖含量。【结果】Western blot结果显示CcpA蛋白在多种血清型的肺炎链球菌均有表达,CcpA蛋白可与cps基因座启动子区域结合,且呈剂量依赖性;ccpA基因缺失时,细菌CPS含量升高,回复表达CcpA蛋白后,CPS含量显著降低。【结论】CcpA是肺炎链球菌中一种保守表达的蛋白,可通过调节cps基因座启动子负性调控肺炎链球菌荚膜多糖的表达。     

新型肺炎链球菌疫苗研究进展

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是引发人类肺炎、中耳炎、脑膜炎的主要病原体。为了预防肺炎链球菌感染,人类已研制出了多种相关的疫苗。目前,常用23价肺炎球菌多糖疫苗(23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine,PPV23)预防成人和2岁以上儿童肺炎链球菌的感染,用7价、10价、13价肺炎球菌结合疫苗来预防婴幼儿肺炎链球菌的感染。虽然荚膜多糖类疫苗能预防其所包含的肺炎链球菌血清型的感染,但非疫苗血清型的菌株还是可以在鼻咽部定植,并引起感染,而且结合疫苗研制工艺复杂、价格昂贵,在发展中国家使用还不普及。鉴于上述原因许多疫苗公司开始研发具有保护力强、价格低廉的新型疫苗。近年来,肺炎链球菌全细胞疫苗和肺炎链球菌纯化蛋白疫苗由于其血清非依赖性和较低的生产成本已成为人们关注的焦点。现对肺炎链球菌新型疫苗的研制及临床应用作一概述。     

三价肺炎链球菌蛋白疫苗保护乳鼠抵抗肺炎链球菌引起的试验性急性中耳炎

<正>现有的获批肺炎疫苗,它们基于荚膜多糖的血清分型,能有效预防肺炎链球菌引起的侵入性疾病,但对于非细菌性肺炎和急性中耳炎(AOM)效果不佳。此前我们报道过,一种三价肺炎链球菌蛋白重组疫苗(PPrV)能够让小鼠模型抵御肺炎。在此,作者使用乳鼠模型,评估了肺炎链球菌蛋白重组疫苗     

肺炎链球菌结合疫苗的发展和评估

由于肺炎链球菌对青霉素等多种抗生素的高水平耐药性以及对万古霉素耐受性的出现,强调了采用其他方法预防肺炎链球菌感染的重要性,即进行免疫接种。应用与在b型流感嗜血杆菌疫苗中所用相同载体蛋白偶联的肺炎链球菌偶联疫苗,与多糖疫苗作比较能较好地增强婴儿和儿童的免疫应答,并且能在世界范围内增强预防肺炎链球菌疾病的能力。本文综述了有关多价肺炎链球菌偶联疫苗临床试验结果,包括对疫苗的评估、为了疫苗的进一步发展而对有效载体蛋白的鉴定、有关临床试用新型疫苗和质量控制,以及预防肺炎链球菌的其他疫苗。     

1317株儿童呼吸道感染肺炎链球菌耐药性分析

目的分析致儿童呼吸道感染的肺炎链球菌的耐药情况,为临床合理抗感染治疗提供依据。方法对2012年1月至2014年12月来厦门市妇幼保健院就诊的10 525例呼吸道感染的儿童患者,取痰标本接种哥伦比亚血平板及嗜血杆菌巧克力平板,置36℃、5.5%二氧化碳培养箱过夜孵育,采用Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统及API NH鉴定卡对病原菌进行细菌鉴定及药敏试验。结果 10 525例儿童呼吸道标本检出1 317株肺炎链球菌,阳性率为12.5%,对红霉素、克林霉素耐药率最高,分别为98.2%和95.4%。口服青霉素耐药率为64.2%,不敏感率为79.3%。注射青霉素耐药率为4.5%,不敏感率为42.2%。美罗培南耐药率为47.0%,阿莫西林、头孢噻肟和头孢吡肟耐药率较低,分别为10.7%、14.7%和15.9%。结论大环内酯类、林可霉素类耐药率高,不可作为经验性用药。碳青霉烯类对于肺炎链球菌疗效不佳。口服青霉素耐药率高,注射剂青霉素耐药率较低,因此后者仍可作为首选药物,青霉素中介推荐用大剂量青霉素或阿莫西林治疗。实验室向临床报告结果时应注明青霉素的剂型,以免误导临床。     

肺炎链球菌性肺炎诊断方法研究进展

肺炎链球菌是一种常见的细菌性肺炎的病原体,快速、准确的确定病原体是控制疾病的关键。本文就目前诊断肺炎链球菌性肺炎的免疫层析法、酶联免疫吸附法、胶乳颗粒凝集试验等研究进展作以简要综述。     

肺炎链球菌与宿主炎症小体的相互作用机制

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是一种定植于上呼吸道的革兰阳性胞外菌,是导致侵袭性肺炎的主要原因,所致疾病具有较高的发病率和死亡率。炎症小体(inflammasome)是胞浆内重要的蛋白复合体,在先天免疫应答过程中起着重要作用。大量研究表明,肺炎链球菌感染可诱导宿主炎症小体的激活、半胱天冬酶1的活化和促炎性细胞因子的分泌。在长期选择压力的作用下,肺炎链球菌的部分突变菌株可以逃避炎症小体的识别。本文就肺炎链球菌感染过程中炎症小体的激活、炎症小体在抗肺炎链球菌过程中的作用以及肺炎链球菌逃避宿主炎症小体识别的机制三方面对肺炎链球菌与炎症小体之间相互作用的研究进展进行综述。     

肺炎链球菌分型方法的研究进展

肺炎链球菌疫苗仍是全球最急需的前3位疫苗之一,为保证一个最佳的肺炎链球菌多糖菌苗和(或)蛋白多糖结合菌苗复合物,很有必要对肺炎链球菌进行菌型监测.近年来,WHO及许多国家开展了肺炎链球菌的菌型监测,取得了较好的进展,其分型方法也在不断改进.     

中国科技大学有关肺炎链球菌的新发现

<正>中国科技大学的研究人员讨论了得自肺炎链球菌的Spr1345的黏蛋白结合结构域的晶体结构,来源于肺炎链球菌R6的Spr1345表面蛋白是一种22 kD黏蛋白结合蛋白(MucBP),这种蛋白涉及到在人肺和呼吸道的黏附和定植。它是由黏蛋白结合结构域(MucBD)和富含嘌呤结构域(PRD)所构成,其