感染根管的厌氧菌培养结果分析

从64只感染根管中的58只根管分离到144株无芽胞厌氧菌,其中类杆菌54株,厌氧性链球菌23株,韦荣氏球菌17株,真杆菌11株,梭杆菌10株,放线菌8株,双岐杆菌2株,消化链球菌和消化球菌19株。40只根管为厌氧菌和兼性厌氧菌或需氧菌混合感染,18只根管和6只根管分别为单独厌氧菌和兼性厌氧菌感染。33只根尖周炎根管分别采集牙髓和根尖渗出物样本进行培养,实验结果表明牙髓样本中革兰氏阳性厌氧杆菌检出率较高,根尖渗出物中以产黑素类杆菌属的细菌检出率较高。根尖周炎和牙槽脓肿患者的感染根管中产黑素类杆菌属的细菌检出率明显高于蜂窝组织炎患者。     

临床厌氧菌的分离和鉴定

我们从口腔、胸部、腹部和盆腔等处采集了110份临床感染标本,以自制的输送培养基立即送实验室,在厌氧手套箱(霍尔玛厌氧系统1029型)或Gas-pak罐中,行厌氧菌的分离和培养,其中64份标本检出厌氧菌,阳性率为58％。临床标本中牙周炎标本厌氧菌检出率高达100％,牙髓炎标本为85％,阑尾脓肿和腹膜炎标本为83％,胆道标本为39％,脓胸标本为57％,盆腔标本为33％,早期单纯性阑尾炎和甲状腺囊肿合并感染的标本各5份,都未检出厌氧菌。从64份阳性分离的标本中共分离到厌氧菌370株,经鉴定分别属于11个菌属32个菌种(未定种的有74株),其中类杆菌最多占45.9％(类杆菌属中脆弱类杆菌占37.6％),次为梭杆菌属和消化链球菌属,各占15.1％。革兰氏阳性无芽胞厌氧菌占8％左右,而梭菌属为8.9％,其余是二氧化碳噬纤维菌属(2.9％)、韦荣氏球菌属(1.3％)、链球菌属和纤毛菌属(1.5％)等。在厌氧菌鉴定中,我们使用了微量生化直接酶测定技术和代谢产物的气相色谱分析技术,这些方法在厌氧菌鉴定中比常规方法敏感且有较大的价值。     

艰难类梭菌芽胞形成和萌发相关调控的研究进展

艰难类梭菌(Clostridioides difficile)是一种革兰氏阳性、可产毒素的专性厌氧菌,是引起抗生素相关性腹泻的主要致病菌。芽胞是造成艰难类梭菌传播和感染复发的重要因素,其形成和萌发在感染的发展过程中起到重要作用。近年来,越来越多的艰难类梭菌芽胞形成和萌发的具体机制被阐明。本文就近年来艰难类梭菌芽胞形成和萌发的相关分子调控机制的研究进展进行综述,以期为开发针对芽胞的有效治疗手段提供思路。     

胆道手术患者胆汁的菌群分析

本文对59例胆道手术患者的胆汁标本进行了菌群分析。共检出各类细菌156株,其中厌氧菌70株,以类杆菌最为常见(44株);兼性需氧菌86株,以大肠杆菌最为常见(37株)。胆汁细菌培养阳性率为86.4％(51/59);64.4％(38/59)的标本为厌氧菌与兼性厌氧菌混合污染。22.0％(13/59)的标本中仅分离到兼性需氧菌。提示,胆汁中污染的类杆菌及大肠杆菌是胆道手术后感染的主要原因菌。     

青霉素V对牙周及根尖周感染的疗效观察

从临床分离获得口腔常见厌氧菌,除非脆弱类杆菌４株外,其余消化球菌及锭球菌１４株,革兰氏阳性无芽胞杆菌４株,以及需氧及瘘性厌氧菌α－溶血链球菌４株对青霉素Ｖ敏感,ＭＩＣ５０≤０．０６－０．１２５ｍｇ／Ｌ,ＭＩＣ５０为０．１２５０－０．２５ｍｇ／Ｌ,急性牙周及根尖周感染患者的临床症状,白细胞总数和中性粒细胞分类计数在服用青霉素Ｖ后３天明显改善和好转。实验结果表明除过敏性体质患者外,并且首次后经过观察地     

无芽胞厌氧菌败血症42例临床分析

无芽胞厌氧菌败血症为内源性感染,占败血症总数10—20％,多在患有某种原发性疾病的基础上,免疫功能低下的患者中,由于广谱抗生素、激素的广泛应用,诱发此病。本文对42例厌氧菌败血症的临     

无芽胞厌氧菌、Fas蛋白表达与胃癌相关性的研究

目的探讨无芽胞厌氧菌、Fas蛋白在胃癌及癌旁组织的表达情况及其临床意义。方法无芽胞厌氧菌的检测采用微生物分类鉴定系统中API20A测定方法,Fas蛋白的检测采用免疫组化SP法,分别检测了57例胃癌组织,57例癌旁组织,20例正常胃黏膜组织中微生物的变化及Fas蛋白表达。结果胃癌组织与癌旁组织的无芽胞厌氧菌检出情况不同。胃癌组织检出的主要为革兰阳性无芽胞厌氧菌(优杆菌、丙酸杆菌和消化链球菌等),占检出菌株的6486%(48/74),其中硝酸盐还原试验阳性菌株为5946%(44/74)。癌旁组织检出的主要为革兰阴性无芽胞厌氧菌(类杆菌、梭杆菌、紫单胞菌和韦荣球菌),占检出细菌的5714%(24/42),硝酸盐还原试验阳性菌株为1667%(7/42)。胃癌组织中Fas蛋白表达的阳性率为3509%(20/57),癌旁组织为7018%(40/57),正常胃黏膜为8500%(17/20),胃癌组织与癌旁组织、正常胃黏膜组织Fas蛋白的表达比较,差异均有非常显著性(P<001)。结论胃癌组织与癌旁组织的无芽胞厌氧菌检出情况不同。胃癌组织检出的主要为革兰阳性无芽胞厌氧菌。胃癌组织Fas蛋白水平的表达与癌旁组织、正常胃黏膜组织Fas蛋白的表达比较,差异均有非常显著性(P<001),对阐明胃癌的发生机制、预后和转移均有重要意义。     

鸡肠源芽胞杆菌的分离、鉴定和抗菌活性

从人工饲养的健康三黄肉鸡的盲肠和大肠中分离出10株芽胞杆菌,对其进行菌落形态观察、革兰染色、芽胞染色和生理生化特性鉴定,确定为枯草芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、蜡状芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌。同时测定了它们对动物病原性大肠埃希菌和链球菌的抑菌活性。其中有9株芽胞杆菌对大肠埃希菌有抑制作用,8株芽胞杆菌对链球菌有抑制作用。结果表明芽胞杆菌分离株Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8具有作为益生菌开发的潜力。     

芽胞杆菌抗菌活性和纤维素酶活性的测定

目的筛选鸡用益生菌。方法通过牛津杯法、混菌法和DNS分光光度法对从鸡肠道分离的10株芽胞杆菌进行抑菌效果及纤维素酶活性测定。结果编号为Y1、Y5、Y7的3株芽胞杆菌对测试菌具有较好抑菌效果,编号为Y2、Y4、Y5的3株芽胞杆菌具有较高的产酶活性。结论从分离的10株芽胞杆菌中筛选出1株（编号为Y5）兼具较好抑菌效果和较高产酶活性的地衣芽胞杆菌,具有作为饲用益生菌开发的潜能。     

牙周炎患者龈下厌氧菌群的分离和鉴定

从34例成年人牙周炎和18例青少年牙周炎患者及24例正常人的龈下菌斑中分离并鉴定了26种共311株革兰氏阴性无芽胞厌氧菌,其中产黑素类杆菌、牙龈类杆菌、伴放线嗜血杆菌、具核梭杆菌、衣氏放线菌和梅氏放线菌是牙周炎患者龈下优热菌群,小韦荣氏球菌的检出率与正常人比较无显著性差异。实验结果提示牙周炎为非单一的病原体所引     

东北地区耐盐芽胞杆菌筛选统计及初步鉴定

采用温度筛选与表面定向培养相结合的方法对东北地区土壤中可培养耐盐芽胞杆菌进行分离和筛选,得到137株芽胞杆菌,其中耐盐芽胞杆菌74株,占总芽胞杆菌数量的54%,最适盐浓度均为1%,耐盐能力在4%-14%之间。通过扩增耐盐菌株的16S rRNA基因序列,对其进行分子鉴定和分类,获得东北地区土壤中可培养的耐盐芽胞杆菌的多样性信息。通过同源性比对和耐盐性差异,确定36株差异耐盐芽胞杆菌,分属于芽胞杆菌属中的7个种。其中多数菌株为苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)(14株,占总数38.9%,最高耐盐性在4%-9%NaCl之间)。其次依次为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)(7株,19.4%,4%-8%NaCl),枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)(7株,19.4%,8%-11%NaCl),炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)(4株,11.1%,5%-7%NaCl),弯曲芽胞杆菌(Bacillus flexus)(2株,5.6%,9%-14%NaCl),球形芽胞杆菌(Bacillus sphaericus)(1株,2.8%,5%NaCl)和阿氏芽胞杆菌(Bacillus aryabhattai)(1株,2.8%,6%NaCl)。弯曲芽胞杆菌和枯草芽胞杆菌的耐盐能力较好。从中选取3株代表菌株,明确了其培养特性、形态特征及生理生化特性,并对其分别进行了系统发育分析。     

苏云金芽胞杆菌G03 spoIVF操纵子敲除对芽胞和晶体形成的影响

spoIVF是一个普遍存在于芽胞杆菌中的操纵子。在枯草芽胞杆菌中,它编码的两个蛋白是芽胞形成所必需的。采用基因重组技术敲除了苏云金芽胞杆菌G03菌株中的spoIVF操纵子,构建了spoIVF缺失株G03(spoIVF-)。研究表明:该突变株丧失了形成芽胞和晶体的能力。lacZ基因与cry1Aa基因的启动子融合表达分析发现:突变株中的cry1Aa基因的活性严重降低。利用载体pSTK携带spoIVF操纵子在突变株中的表达,使突变株部分恢复了产胞和形成杀虫晶体蛋白的能力。这说明spoIVF操纵子是所必需的,同时该操纵子还影响σE因子控制的cry1Aa基因表达。     

儿童牙齿表面的菌群分布与龋齿的关系

本实验从幼儿园和小学一年级的学生中选择５－８岁的无龋齿和有龋齿的儿童各４５例,进行牙齿表面的菌群分布与龋齿关系的研究,结果在有龋组中分离到变形链球菌８株,放线菌６株及拟杆菌２６株,而在无龋组中未分离到变形链球菌,分离到放线菌１株,拟杆菌１４株,两组比较,以上三种菌有显著差异（Ｘ２检验Ｐ＜０．０５）。说明除变形链球菌是主要的致龋菌外〔１,２〕,还应考虑放线菌和拟杆菌在龋齿发生上的作用。此外,我们还发现两组的兼性厌氧菌的分布也有所不同,无龋组中分离到棒状杆菌２９株,而有龋组中分离到棒状杆菌１１株,小肠结肠炎耶尔森氏菌７株,两组也有明显差异,故我们认为龋齿发生的原因可能是多方面的,就病原菌来说,也可能是多种细菌的混合作用,从两组兼性厌氧菌与无芽胞厌氧菌的分布不同来看,亦应考虑龋齿的发生与口腔内生态平衡有关     

苏云金芽胞杆菌cry26Aa和cry28Aa基因共表达可在芽胞外壁内侧形成伴胞晶体

苏云金芽胞杆菌幕虫亚种的伴胞晶体在预芽胞外壁内侧形成,呈现晶体芽胞粘连的现象。根据已发表的cry26Aa1和cry28Aa1基因序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌幕虫亚种T02中扩增得到cry26Aa和cry28Aa基因,通过穿梭载体将这两个基因分别和同时转化到苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171后,透射电镜下可在芽胞外壁内侧和外侧同时观察到伴胞晶体,而单独表达时可在芽胞外壁外侧观察到伴胞晶体。结果表明,伴胞晶体在芽胞外壁内侧表达不单独依赖于启动子的时空调控,可能还受到晶体蛋白相互作用的影响。     

农林生态区土壤中的可培养芽胞杆菌资源调查——以四川省和重庆市部分地区为例

调查了四川和重庆农林生态区土壤中的芽胞杆菌资源种群分布,为芽胞杆菌功能资源挖掘和菌剂开发提供基础。采用可培养法从农林生态区土壤中分离获得芽胞杆菌,利用细菌16S rRNA基因初步确定其分类地位,并通过多样性指数分析芽胞杆菌种群结构。结果表明,共分离获得芽胞杆菌95株,经16S rRNA基因鉴定,7个属38个种,其中芽胞杆菌属(Bacillus)22个种、赖氨酸芽胞杆菌属(Lysinbacillus)4个种、类芽胞杆菌属(Paenibacillus)7个种、短芽胞杆菌属(Brevibacillus)2个种、嗜冷芽胞杆菌属(Psychrobacillus)1个种、鲁梅尔芽胞杆菌属(Rummeliibacillus)1个种和虚构芽胞杆菌属(Fictibacillus)1个种。其中,6株芽胞杆菌与其最相近模式菌株的16S rRNA相似性低于98.65%,为潜在新种。农林生态区土壤芽胞杆菌多样性指数香农指数大小依次为乐山林地盐亭县农地重庆林地盐亭县林地。以芽胞杆菌种类为样本,含量为指标,当欧式距离λ=15时,芽胞杆菌种类可分为高含量分布广型和低含量分布不均匀型。综上所述,农林生态区土壤蕴藏着较丰富的芽胞杆菌种类,为芽胞杆菌资源开发和利用提供了资源保障。     

苏云金芽胞杆菌cry26Aa和cry28Aa基因共表达可在芽胞外壁内侧形成伴胞晶体

苏云金芽胞杆菌幕虫亚种的伴胞晶体在预芽胞外壁内侧形成,呈现晶体芽胞粘连的现象。根据已发表的cry26Aa1和cry28Aa1基因序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌幕虫亚种T02中扩增得到cry26Aa和cry28Aa基因,通过穿梭载体将这两个基因分别和同时转化到苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171后,透射电镜下可在芽胞外壁内侧和外侧同时观察到伴胞晶体,而单独表达时可在芽胞外壁外侧观察到伴胞晶体。结果表明,伴胞晶体在芽胞外壁内侧表达不单独依赖于启动子的时空调控,可能还受到晶体蛋白相互作用的影响。     

长白山地区不同采集土样方式筛菌效率比较

目的对随机采样和田字格定点采样两种取样方式筛菌效率进行比较分析。方法利用随机采样和定点采样两种不同方式,采集了长白山地区的土样,取来自不同植物根际的土样,制成菌悬液后煮沸,涂布无氮平板以分离固氮芽胞杆菌。对分离的菌株进行菌落16S rDNA PCR,从中筛选鉴别巨大芽胞杆菌。结果定点采集土样分离出无晶体芽胞菌和有晶体芽胞菌分别是261株和76株,随机采集土样分离出无晶体芽胞菌和有晶体芽胞菌分别是279株和94株。经16S rDNA法鉴定分离巨大芽胞杆菌共19株。结论随机采样的取土方式与定点采样的取土方式差异度小,两种采集土样的方式在筛菌效率上并未表现出明显差异。     

PCR法快速鉴定眼源性蜡样芽胞杆菌

目的建立一种快速、灵敏、特异的眼源性蜡样芽胞杆菌PCR检测方法,为蜡样芽胞杆菌性眼内炎患者的快速诊断提供依据。方法选择编码蜡样芽胞杆菌细胞毒素的cytK为靶基因设计引物,建立检测眼源性蜡样芽胞杆菌PCR;PCR产物用琼脂糖凝胶电泳鉴定,基因序列与GenBank比对验证扩增产物;将计数过的5株蜡样芽胞杆菌菌悬液,梯度稀释后分别提取DNA进行PCR扩增,确定检测方法的灵敏度;分别用眼部常见感染菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、化脓性链球菌、藤黄微球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌和白假丝酵母菌以及枯草芽胞杆菌DNA进行特异性试验;进一步将该方法应用到人工污染致病蜡样芽胞杆菌的房水标本中,并分析其灵敏度。结果5株分离自眼内炎患者标本中的蜡样芽胞杆菌均扩增出360bp左右的DNA片段,测序结果与GenBank比对一致;该法检测在5h内完成,方法灵敏度达7．5～15．0CFU／mL;其他菌株检测未出现非特异性扩增;对模拟感染房水标本的PCR鉴定结果与分离培养对比,二者符合率为100％,模拟标本的检测灵敏度与纯菌结果一致。结论cytK基因为靶基因的PCR用于眼源性蜡样芽胞杆菌的快速检测,具有简便、快速、敏感、特异等特点,为眼内炎患者的快速诊断提供依据,在实际检验工作中有良好的应用前景。     

过表达CodY蛋白的苏云金芽胞杆菌基因工程菌YBT-881-L1的构建及特性鉴定

为研究革兰氏阳性菌中的全局性转录调控因子CodY在苏云金芽胞杆菌中的作用机制,利用苏云金芽胞杆菌野生株YBT-881,构建了过表达CodY蛋白的基因工程菌YBT-88 1-L1,并对此工程菌的特性进行了研究.结果表明,YBT-881-L1和野生株的生长曲线以及伴胞晶体形态无明显差异.SDS-PAGE及质谱分析发现,野生株中沉默的cy2Ac4基因在工程菌中被激活,并产生大量的Cry2Ac4蛋白.生物测定结果表明,重组菌株YBT-881 -Ll较野生株对鳞翅目害虫棉铃虫的杀虫活性明显增强.     

厌氧菌和需氧菌性阴道混合感染发病调查

目的对妇女厌氧菌和需氧菌性阴道混合感染发病进行调查分析。方法分别采用Donders高倍镜湿片镜检法和细菌预成酶快速检测法对257例患者进行联合检测。结果257例患者中共检出单纯的需氧菌性阴道感染患者52例,占总人数的20．2％,检出单纯的厌氧菌阴道感染患者125例,占总人数的48．6％,检出厌氧菌和需氧菌性阴道混合感染患者67例,占总人数的26．1％,检出其他感染患者13例,占总人数的5％,经统计学分析,患者的厌氧菌和需氧菌性阴道混合感染的检出率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论厌氧菌和需氧菌性阴道混合感染,可以给临床医生应采取合理有效的措施进行及时治疗,防止阴道上行感染的发生。