团头鲂外周血细胞的显微结构及细胞化学特征

采用常规瑞氏染色和细胞化学染色方法对团头鲂(Megalobrama amblycephala)外周血细胞的显微结构及细胞化学特征进行了观察。在团头鲂外周血细胞中可区分出六类细胞: 红细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和血栓细胞。其中淋巴细胞是除红细胞外含量最多的细胞, 其次分别为血栓细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞。成熟红细胞多为卵圆形, 表面光滑, 胞核呈椭圆形或圆形, 染色质较为致密; 淋巴细胞多呈圆形, 胞质较少, 胞核常偏位; 单核细胞多为圆形, 胞核呈圆形或椭圆形, 胞质内可见空泡状结构; 嗜中性粒细胞近似圆形, 胞核常偏于细胞一侧, 呈分叶状、肾形或椭圆形, 核质界限清晰; 嗜酸性粒细胞一般为圆形, 胞核为肾形或椭圆形, 胞质中充满紫红色颗粒; 血栓细胞形态多样, 主要有椭圆形、纺锤形、长杆状和泪滴形, 核质比较大。淋巴细胞呈α-醋酸萘酚酯酶(ANAE)阳性, 呈过碘酸-雪夫(PAS)、氯乙酸AS-D萘酚酯酶(AS-DCE)弱阳性, 呈苏丹黑B(SBB)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)及过氧化物酶(POX)阴性; 单核细胞呈POX、ACP强阳性, PAS、SBB、AS-DCE和ANAE为阳性, 呈AKP阴性; 嗜中性粒细胞除PAS和ANAE为弱阳性外, 其他染色结果和单核细胞相同; 嗜酸性粒细胞呈POX、ANAE强阳性, SBB、ACP阳性, PAS及AS-DCE则为弱阳性, 呈AKP阴性; 血栓细胞呈PAS、AS-DCE及ANAE弱阳性, 呈SBB、ACP、AKP及POX阴性。团头鲂外周血细胞的显微结构及细胞化学特征与其他鱼类具有相似之处, 但亦有其明显的物种特异性。该研究结果可作为监测团头鲂健康状态的依据, 为其养殖及病理诊断提供基础资料。     

切尾拟鲿外周血细胞的显微结构

应用Wright-Giemsa染液联合染色方法,通过光镜对切尾拟鲿Pseudobagrus truncatus外周血细胞的形态进行观察。结果表明,切尾拟鲿外周血细胞可分为红细胞、单核细胞、淋巴细胞、血栓细胞和嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞两种类型的粒细胞。未发现嗜碱性粒细胞。白细胞中,血栓细胞数量最多,占白细胞总数的39.32%;嗜酸性粒细胞数量最少,仅占白细胞总数的2.30%;单核细胞体积最大,大小为(14.58±3.95)μm×(12.96±2.67)μm;血栓细胞体积最小,大小为(6.53±0.96)μm×(3.65±0.41)μm。此外,统计了红细胞密度为(1.68±0.39)×106/mm3,白细胞密度为(5.84±0.73)×103/mm3。     

乌龟外周血细胞的显微和超微结构

乌龟血细胞的显微和超微结构研究表明;在外周血细胞中,可分辨出红细胞、单核细胞、淋巴细胞、血栓细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞等7种细胞.红细胞核圆形,胞质均匀无细胞器.单核细胞的特征是核内异染色质多聚集于周边,胞质中含有许多囊泡.淋巴细胞的核质比例大.血栓细胞以具细长的指状突起,基本无细胞器为其特征.嗜酸性粒细胞仅含一种圆形颗粒,颗粒质地均匀,电子致密,大小不等.嗜碱性粒细胞颗粒环绕在胞核周围,有三种电子密度、颗粒大小不一的类型.嗜中性粒细胞含有两种电子密度、形态不一的颗粒.       

史氏鲟外周血细胞的显微及超微结构

采用血细胞计数、光学显微及电子显微技术对二龄史氏鲟外周血细胞的数目、形态及结构进行了研究。二龄史氏鲟红细胞的数目为47.75×104个/mm3,白细胞数目为2.9万个/mm3,其中淋巴细胞所占比率最高。史氏鲟的外周血中除正常红细胞外,还有处于分裂状态及未成熟的红细胞。史氏鲟外周血中的白细胞有四种类型,分别为淋巴细胞、粒细胞、血栓细胞和单核细胞。其中粒细胞有两种,即嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞。嗜中性粒细胞含有多种形状的核,其中分叶的核数目较多,粒细胞及淋巴细胞均类似于哺乳动物。对史氏鲟外周血细胞细微结构的观察显示:红细胞中具有少量的细胞器;淋巴细胞结构典型;单核细胞较粒细胞稍小且具有较多线粒体;血栓细胞具有梭形和圆形两种,胞质较少,其中梭形的血栓细胞胞质几乎透明;对粒细胞的颗粒按照形状和电子密度进行了分类。     

牛蛙外周血细胞的形态学特点

本研究对雌雄牛蛙(Rana catesbeiana)外周血细胞的组成、形态、大小和数量进行了观察和统计。牛蛙外周血细胞由红细胞、白细胞以及血栓细胞组成,其中红细胞体积最大,平均大小(长径×短径)为(25.68±1.88)μm×(16.49±1.53)μm,扫描电镜下发现红细胞表面光滑;血栓细胞呈卵圆形或纺锤形,其体积最小,平均大小为(8.62±1.04)μm×(7.47±1.11)μm;白细胞由淋巴细胞、单核细胞、浆细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞组成,扫描电镜下白细胞表面粗糙不平,有许多不规则的凸起。白细胞中淋巴细胞最多,其中小淋巴细胞约占白细胞的32.66%±4.29%,大淋巴细胞约占6.03%±1.54%;嗜碱性粒细胞最少,只占4.78%±0.83%;浆细胞胞体大小不一,常呈椭圆形,平均大小为(23.51±0.59)μm×(22.86±0.67)μm;此外,牛蛙外周血细胞中单核细胞、淋巴细胞和嗜碱性粒细胞的数量比例以及淋巴细胞和嗜碱性粒细胞的大小均有性别的差异(P0.05)。     

淡水石斑外周血细胞显微结构观察

淡水石斑(Cichlasoma managuense)外周血细胞可区分出红血细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和血栓细胞,未发现嗜碱性粒细胞。外周血液中还存在少量未成熟的和正在分裂的红血细胞。白细胞中,血栓细胞体积最小,嗜中性粒细胞体积最大;数量上,血栓细胞最多,而嗜酸性粒细胞则最少。     

玳瑁和绿海龟幼体外周血细胞的观察与比较

对玳瑁(Eretmochelys imbricata)和绿海龟(Chelonia mydas)外周血细胞形态特征及其数量进行了观察、测定与比较.结果表明,在2种海龟外周血都观察到7种血细胞:红细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和血栓细胞,除了绿海龟观察到大、小2种嗜酸性粒细胞外,另外几种血细胞的形态结构与其他爬行动物相似.白细胞分类计数表明,2种海龟白细胞中以嗜中性粒细胞数量最多,其次是淋巴细胞和单核细胞,嗜酸性粒细胞仅有少数,嗜碱性粒细胞极少,并且此类细胞在玳瑁的白细胞分类计数中为零.玳瑁红细胞数量为(346.7±68.4)×10~3个/μl,比绿海龟红细胞含量少,绿海龟为(403.3±170.6)×10~3/μl;玳瑁白细胞及血栓细胞数分别为(7.7±1.9)×10~3个/μl和(9.6±2.2)×10~3个/μl,绿海龟分别为(7.3±2.8)×10~3个/μl和(7.5±3.7) ×10~3个/μl.     

假单胞菌对鳜鱼血液指标的影响

用假单胞菌接种健康鳜鱼引起发病,然后对发病鳜鱼进行红细胞、白细胞、血栓细胞计数;血涂片染色鉴别淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞并分类计数;测定血红蛋白值及红细胞渗透脆性值并与对照组相应指标进行比较。结果表明:假单胞菌可引起鳜鱼的红细胞总数、小淋巴细胞和血红蛋白值下降,且与对照组相比,前两者存在极显著差异(p<0.01),后者存在显著差异(p<0.05);而白细胞总数显著增加(p<0.05);嗜中性粒细胞、单核细胞极显著增加(p<0.01);血栓细胞、大淋巴细胞和红细胞渗透脆性值变化不大。     

斑鳢血细胞初步研究

对斑鳢的外周血细胞用常规Wright’s法染色并进行显微观察。结果显示,斑鳢外周血中具有红细胞、幼稚红细胞、小淋巴细胞、大淋巴细胞、血栓细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞,未发现嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。分别对各种血细胞的显微结构进行了描述。     

水族馆养殖中华鲟血细胞指标的变化

血细胞是临床健康的重要指标。本文对北京海洋馆养殖的40尾中华鲟（Acipenser sinensis）外周血细胞组成进行研究,研究对象包括超过30龄、18龄、16龄、15龄、11龄、7龄和4龄共7个龄组,并分析比较不同年龄、性腺快速发育前后以及处于疾病前后血细胞指标变化,希望应用于健康评价。结果表明,1）外周血红细胞总数（RBC）平均为（5.56 ± 1.19）× 1011/L,18龄和11龄与其他龄组之间存在显著性差异（P < 0.05）,超过30龄组血细胞比积（HCT）和血红蛋白（HB）值显著高于其他龄组（P < 0.05）;2）白细胞总数（WBC）平均为（16.53 ± 4.94）× 109/L,18龄与4龄间存在显著差异,且分别与其他龄组间存在显著性差异（P < 0.05）。3）白细胞分类计数（DLC）中各类型白细胞平均所占百分比分别为,大淋巴细胞（LLYM）5.26% ± 3.95%、小淋巴细胞（SLYM）77.74% ± 11.73%、嗜中性粒细胞（NEU）9.40% ± 7.98%、嗜酸性粒细胞（EOS）1.90% ± 2.06%和单核细胞（MON）5.50% ± 4.00%,超过30龄和4龄间显著差异,且分别与其他龄组间存在显著性差异（P < 0.05）。4）性腺进入快速发育阶段后,红细胞总数、血细胞比积和白细胞总数较发育前均显著增加（P < 0.05）,血红蛋白值有增加但差异不显著。5）疾病中华鲟白细胞总数显著增高（P < 0.05）并伴随红细胞各指标降低,白细胞数增加幅度达90%,分类计数中中性粒细胞和单核细胞比例显著变化（P < 0.05）。中华鲟快速发育阶段及疾病状态的血细胞组成不同,血细胞密度的变化以及分类计数的差异可及时判断中华鲟健康状况,结果对中华鲟的健康评价与保育研究有重要的参考意义。     

海淡水养殖中华鲟免疫特性的比较

实验以淡水养殖的4龄中华鲟(Acipenser sinensis)为研究对象, 经海水驯化后实施全海水养殖, 探究中华鲟在海水养殖条件下血液理化指标和免疫组织结构变化。结果显示: 与淡水养殖个体相比, 海水养殖后中华鲟的血红蛋白(HB)、红细胞比容(HCT)和白细胞数(WBC)均显著升高(P<0.05), 红细胞数(RBC)与各类白细胞占比无显著变化(P>0.05); 超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、溶菌酶(LZM)、免疫球蛋白M(IgM)、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)等6种免疫生化指标与淡水个体无显著差异(P>0.05)。对免疫组织的观察发现, 海水养殖中华鲟头肾组织中细胞聚集, 形态分布更整齐, 黑色素巨噬细胞中心增多; 脾脏组织的淋巴细胞和红细胞分布更加密集。研究结果表明, 海水养殖会在一定程度上增强中华鲟的免疫和造血功能, 保持较好的生理状态。     

鲟鳇鱼网箱养殖环境微生物菌群结构及潜在病原菌分析

为探究鲟鳇鱼网箱养殖环境中的细菌群落结构组成和潜在致病菌的种类与数量, 文章用高通量测序对中华鲟Acipenser sinensis、施氏鲟Acipenser schrenckii、达氏鳇Huso dauricus、大杂交鲟A. schrenckii♂×H. dauricus♀等网箱养殖水体的细菌群落结构特征和潜在病原菌属进行分析, 同时应用实时荧光定量PCR方法对鲟鳇鱼养殖水体中的典型病原菌种进行定量检测。研究结果表明, 在同一水域同一管理条件下, 不同品种鲟鳇鱼网箱养殖水体中细菌群落结构组成相似度高, 优势菌门由Proteobacteria、Actinobacteria、Bacteroidetes、Verrucomicrobia和Planctomycetes组成, 占到所有样品序列总数的88.81%—93.94%; 在属水平上, 各样品未分类的细菌(unclassified)占比较大, 共发现鲟鳇鱼潜在致病细菌菌属7个: Aeromonas、Acinetobacter、Chryseobacterium、Edwardsiella、Flavobacterium、Pseudomonas和Vibrio。实时荧光定量PCR结果显示, 养殖水体中鲟鳇鱼病害常见的病原菌种Aeromonas hydrophila的丰度最高, 丰度值为(7406±1892) copies/mL; 其次为Flavobacterium columnar[(4889±1649) copies/mL]和Pseudomonas fluorescens[(3259±1117) copies/mL]。研究结果为该区域的鲟鳇鱼集约化养殖及疾病防控提供科学依据。     

广东省侵染摇蚊的库蚊虫霉研究

在中国首次报道了侵染摇蚊的库蚊虫霉(Entomophtora culichs)的形态特征、侵染症状以及发生动态等。库蚊虫霉初生分生孢子,钟罩形,顶部有一明显小尖突,(14.6±1.5)μm×(10.8±1.2)μm。次生分生孢子形似初生分生孢子,但略小,(11.0±1.1)μm×(8.0±0.5)μm。休眠孢子,球形至亚球形,直径(29.3±1.9)μm。被侵染摇蚊尸体以假根附着于基物上,通体覆盖着绿色的真菌子实层。库蚊虫霉侵染率在不同植物上明显不同。库蚊虫霉侵染率随季节不同波动很大,春季最高达90.2%,其次为秋季和冬季,夏季最低为0。2006—2009年库蚊虫霉侵染率为93.5%～95.7%,年际之间变动不大。     

Developmental stages of Hepatozoon hemprichii sp. nov. infecting the skink Scincus hemprichii and the tick Hyalomma impeltatum from Saudi Arabia

The life cycle of Hepatozoon hemprichi n. sp. is described; the vertebrate host is Scincus hemprichii and it is vectored by Hyalomma impeltatum. Erythrocytic stages of 18 ± 1.8 × 4 ± 0.8 μm developed in the hemocoel of ticks to sporozoites within 16-18 days. Schizogony occurred in the liver parenchyma and the endothelial cells of blood capillaries in lung and spleen. Mature schizonts measuring 27 ± 3.11 × 20.13 ± 3.0 μm produced 28 merozoites (on average). The merozoites were 13 ± 1.21 × 1.21 ± 0.72 μm with nuclei 5 ± 0.65 × 2.1 ± 0.51 μm. Syzygy and differentiation of gamonts took place in tick's hemocoel up to the third day post-infection (PI). The microgamont (16 ± 0.31 × 18 ± 0.42 μm) produced 4, uniflagellated microgametes at 4-5 days PI. The microgamete measured 15.2 ± 0.31 μm while the flagellum was always at least 26 μm. The macrogamete was very large in size (31 ± 3.11 μm) with a central nucleus. After fertilization, (5-6 days PI) zygotes developed into oocysts (55 ± 3.41 × 52 ± 4.11 μm) in which repeated mitotic divisions with centripetal invaginations occurred; each contained 18 banana-shaped sporozoites, 13.61 ± 0.8 × 1.2 ± 0.31 μm in size. Experimental transmission was successfully carried out by oral administration or by intra-peritoneal inoculation of the infective stages (sporozoites) to uninfected skinks and led to the appearance of blood stages after 5 wk and 4 wk, respectively.     

尼氏单极虫(粘体门,双壳目)重描述及基于18S rDNA系统地位分析

采用常规细胞学方法与18S rDNA序列比较的方法,对采自于重庆市嘉陵江段的粘孢子虫,尼氏单极虫Thelohanellus nikolskii进行了形态学和分子生物学的研究,此为首次在我国长江流域检获尼氏单极虫。本文在补充了尼氏单极虫中国种群18S rDNA序列信息的分析、比较基础上,探讨了该虫与相邻种属的系统关系,佐证了其分类学位置。     

倒刺鲃两极虫的宿主新记录及其分子系统学研究

为弄清倒刺鲃两极虫(Myxidium spinibarba)的宿主多样性和胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)寄生黏孢子虫的种类组成, 研究基于形态和分子数据, 比较分析了寄生于不同宿主的倒刺鲃两极虫的形态学和形态计量学特征及分子系统发育关系。结果显示: 寄生于胭脂鱼和中华倒刺鲃的倒刺鲃两极虫株系在形态学和形态计量学上未出现显著性差异, 18S rDNA序列相似度为99.9%—100.0%, 遗传距离为0.000—0.001, 符合种内变异; 寄生于不同宿主倒刺鲃两极虫的株系在系统发育树中嵌合聚支, 且寄生于胭脂鱼的倒刺鲃两极虫株系先分化。以上结果表明: 研究中两株系与倒刺鲃两极虫为同一物种, 但在分子水平已经出现分化; 这是首次在胭脂鱼中检获到黏孢子虫, 胭脂鱼是倒刺鲃两极虫的新宿主。     

海城碘泡虫(黏体动物门，黏孢子纲)补充描述及基于18S rDNA系统发育分析

海城碘泡虫原始描述中形态数据较为简单,且存在多个宿主及寄生部位,其有效性有待确定。利用现行主流的黏孢子虫形态特征和基因标记系统分析相结合的分类学方法,对采自太湖棒花鱼鳃丝的海城碘泡虫进行了补充描述。该碘泡虫孢囊呈白色,圆形,大小为(0.6—1.1) mm。成熟孢子正面观近似椭圆形,上端稍尖,侧面观呈纺锤型,孢子长(10.8±0.7) μm (10.1—11.5 μm),孢子宽:(8.1±0.5) μm (7.5—9.0 μm),孢子厚:(5.7±0.4) μm (5.2—9.0 μm);两极囊呈梨形,大小存在细微差别,极囊顶端存在突起,大极囊长:(4.7±0.5) μm (4.8—6.7 μm),宽:(2.5±0.2) μm (3.2—4.3 μm),小极囊长:(4.4±0.2) μm (4.1—4.8 μm),宽:(2.2±0.1) μm (2.0—2.5 μm);极丝盘绕4—5圈。基于18S rDNA序列(GenBank登录号:KY965936)比对分析,该碘泡虫与放射孢子虫Hexactinomyxon type 2相似率最高,为97%。系统发育分析表明,该碘泡虫与Hexactinomyxon type 2、Hexactinomyxon type 1、Hexactinomyxon type SH-2006、Myxobolus pfeifferi、Myxobolus caudatus和Myxobolus squamae聚为独立分支,和其他已报道的黏孢子虫亲缘关系较远。研究在补充了海城碘泡虫形态学、基因标记序列信息基础上,推断了该虫生活史。     

中华绒螯蟹神经细胞和胶质细胞的光镜及电镜观察

中华绒螯蟹神经节存在神经细胞和胶质细胞两类细胞。神经细胞膜为３层,细胞质由内质网和核蛋白体的聚合体的所构成的尼氏体,高尔基体,线粒体,液泡等细胞器组成,核膜双层,核仁明显,胶质细胞内含有似神经细胞的细胞器结构,根据细胞核的形态及核内染色质的分布情况,可把胶质细胞分成３类：星形胶质细胞核最大,卵圆形,少突胶质细胞核较小,圆形;小胶质细胞核最小,呈三角形或卵圆形,神经细胞的数量与附肢的生理活动强弱有一     

尖形碘泡虫(黏体门: 碘泡虫科)的重描述及其分子系统学研究

研究基于形态和分子信息重描述了寄生于嘉陵江重庆段鲫(Carassius auratus Linnaeus)鳃部和胆囊的尖形碘泡虫(Myxobolus acutus Wu and Chen, 1987), 并获得了该虫体的18S rDNA和ITS1 rDNA序列。尖形碘泡虫成熟孢子壳面观呈梨形, 前端稍尖, 后端钝圆, 缝面观呈宽纺锤形。孢子长(13.6±0.9) μm [(11.4—15.3) μm], 宽(10.2±0.9) μm [(7.5—12.8) μm], 厚(7.6±0.6) μm [(6.9—8.3) μm]。两梨形极囊开口处紧靠并位于孢子前端, 极囊大小不等, 大极囊长(6.2±0.4) μm [(5.1—7.5) μm], 宽(3.8±0.4) μm [(2.8—4.7) μm], 极丝盘绕5—8圈, 小极囊长(2.7±0.4) μm [(1.7—3.7) μm], 宽(1.4±0.2) μm [(0.9—1.9) μm], 极丝盘绕2—3圈。基于18S rDNA为分子标记的系统发育分析显示: 尖形碘泡虫与中华单极虫(Thelohanellus sinensis)有最近的亲缘关系, 两物种形成的进化支与贝壳碘泡虫(M. musseliusae)、苍梧碘泡虫(M. tsangwuensis)和鳃基碘泡虫(M. basilamellaris)形成的进化支呈姐妹群关系。通过系统发育与寄生部位关系的分析结果推测, 尖形碘泡虫的初始寄生部位可能为鳃, 而胆囊则是该物种后来适应的新的寄生部位。