天然和氧化修饰型LDL、VLDL及HDL对培养人动脉平滑肌细胞原癌基因fos及myc表达的影响

动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）是动脉粥样硬化（ＡＳ）斑块中的主要细胞,它的增殖在ＡＳ形成过程中极其重要。脂蛋白和氧化修饰型脂蛋白对ＳＭＣ增殖的影响以及ＳＭＣ增殖与原癌基因异常表达的关系是当前ＡＳ发病机制研究的热点之一。我们在建立人主动脉ＳＭＣ体外培养方法的基础上,观察了ＬＤＬ,ＶＬＤＬ及ＨＤＬ和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人ＳＭＣｆｏｓ,ｍｙｃ,ｅｒｂ－Ｂ原癌基因转录表达的影响。结果表明：①ＨＤＬ对ＳＭＣｆｏｓ,ｍｙｃ基因表达无影响;②ＬＤＬ和ＶＬＤＬ有使这些基因表达增加的趋势,但与对照比较差异不显著（Ｐ＞０．０５）;③ＯＸ－ＶＬＤＬ,ＯＸ－ＶＬＤＬ和ＯＸ－ＨＤＬ有使ＳＭＣｆｏｓ,ｍｙｃ基因表达显著增强的作用（Ｐ＜０．０１）,且其作用较相应的天然脂蛋白大（Ｐ＜０．０１）．上述结果说明：ＬＤＬ,ＶＬＤＬ,ＯＸ－ＬＤＬ,ＯＸ－ＶＬＤＬ和０Ｘ－ＨＤＬ的致ＡＳ作用可能与刺激ＳＭＣｆｏｓ和ｍｙｃ癌基因表达增加有关。     

天然及氧化修饰脂蛋白对人动脉平滑肌细胞原癌基因表达的影响

动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）的增殖在动脉粥样硬化（ＡＳ）的形成过程中极其重要。我们在建立人主动脉ＳＭＣ体外培养方法的基础上,观察了ＬＤＬ,ＶＬＤＬ及ＨＤＬ和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人ＳＭＣｓｉｓ,ｊｕｎ,Ｈ－ｒａｓ原癌基因及Ｒｂ抗癌基因转录表达的影响。结果表明：（１）ＨＤＬ对ＳＭＣｓｉｓ,ｊｕｎ,ｒａｓ基因表达无影响;（２）ＬＤＬ和ＶＬＤＬ有使这些基因表达增加的趋势;（３）ｏｘ－ＬＤＬ,ｏｘ－ＶＬＤＬ和ｏｘ－ＨＤＬ具有使ＳＭＣｓｉｓ,ｊｕｎ,和ｒａｓ基因表达显著增强的作用（Ｐ＜０．０１）,且其作用较相应的天然脂蛋白大（Ｐ＜０．０１）;（４）天然和氧化修饰型脂蛋白对Ｒｂ基因表达均无影响。据上述结果推测：ＬＤＬ,ＶＬＤＬ,ｏｘ－ＬＤＬ,ｏｘ－ＶＬＤＬ和ｏｘ－ＨＤＬ的致ＡＳ作用可能与刺激ＳＭＣｓｉｓ,ｊｕｎ和ｒａｓ原癌基因表达增加有关。     

南方鲇碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质的研究

用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ－纤维素和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００柱层析,从南方鲇（Ｓｉｌｕｒｕｓ　ｍｅｒｉｄｉｏｎａｌｉｓ　Ｃｈｅｎ）肠粘膜中提取出碱性磷酸酶（ＡＫＰ）。提纯倍数为３９．５０倍,比活为６８．３５μ／ｍｇ蛋白,提取酶液经ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ只呈现一条区带。该酶的分子量为１３２１４０,Ｎ末端氨基酸为门冬氨酸,最适ｐＨ为１０．１０,７．５＞ｐＨ＞１１．５时不稳定,最适温度为４０℃左右,对热不很稳定,以磷酸苯二钠为底物其Ｋ_ｍ值为１．７２×１０~（－３）ｍｏｌ／Ｌ。Ｍｇ~（２＋）、Ｍｎ~（２＋）为该酶的激活剂,ＫＨ_２ＰＯ_４、Ｌ－ＣｙＳ、ＭＥ、ＤＦＰ、ＥＤＴＡ－Ｎａ_２为抑制剂。选用ＫＨ_２ＰＯ_４和ＤＦＰ作抑制类型的判断,结果表明,ＫＨ_２ＰＯ_４属竞争性掏剂,其抑制常数为２．３ｍｍｏｌ／Ｌ;ＤＦＰ为非竞争性抑制剂,抑制常数为１．０５ｍｍｏｌ／Ｌ。     

氧化修饰HDL刺激培养人主动脉平滑肌细胞增殖

平滑肌细胞（ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＳＭＣ）增殖在动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ）形成中起着重要作用。氧化修饰ＨＤＬ（ｏｘｉｄｉｘｅｄ ＨＤＬ,ＯＸ－ＨＤＬ）可刺激＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入培养人动脉ＳＭＣ的ＤＮＡ,促进ＳＭＣ增殖。以四甲工偶氮唑盐９ＭＴＴ）法直接观察ＯＸ－ＨＤＬ对培养人动脉ＳＭＣ增殖细胞数的影响。结果显示,天然ＨＤＬ（ｎａｔｉｖｅ ＨＤＬ Ｎ－ＨＤＬ）对     

GENUS ANTROPHYUM KAULF.FROM CHINA AND NEIGHBORING REGIONS

ＧＥＮＵＳＡＮＴＲＯＰＨＹＵＭＫＡＵＬＦ．ＦＲＯＭＣＨＩＮＡＡＮＤＮＥＩＧＨＢＯＲＩＮＧＲＥＧＩＯＮＳＸ．Ｃ．ＺＨＡＮＧ（Ｔｈｅｈｅｒｂａｒｉｕｍ（ＰＥ）,ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ,Ｂｅｉ...     

东北鼢鼠种群生长指标的主分量分析

东北鼢鼠种群生长指标的主分量分析ＰＲＩＮＣＩＰＡＬＣＯＭＰＯＮＥＮＴＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＧＲＯＷＴＨＩＮＤＥＸＯＦＰＯＰＵＬＡＴＩＯＮＦＯＲＭＡＮＣＨＵＲＩＡＮＺＯＫＯＲ（ＭＹＯＰＡＬＡＸＰＳＩＬＵＲＡＳ）东北鼢鼠（Ｍｙｏｐａｌａｘｐｓｉｌｕｒａｓ...     

兰科植物传粉生物学研究概述

兰科植物传粉生物学研究概述赵运林（湘潭师范学院,湘潭４１１２０１）ＡＳＵＲＶＥＹＯＮＴＨＥＳＴＵＤＹＯＦＰＯＬＬＩＮＡＴＩＯＮＢＩＯＬＯＧＹＯＦＯＲＣＨＩＤＡＣＥＯＵＳＰＬＡＮＴＳ￥ＺｈａｏＹｕｎ－ｌｉｎ（ＸｉａｘｇｔａｎＴｅａｃｈｅｒ＇ｓＣｏｌｌｅ...     

CLONING AND CHARACTERIZATION OF A NOVEL NITRIC OXIDE SYNTHASE(NOS) FROM MOLLUSCAN CENTRAL GANGLIA

ＣＬＯＮＩＮＧＡＮＤＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＡＴＩＯＮＯＦＡＮＯＶＥＬＮＩＴＲＩＣＯＸＩＤＥＳＹＮＴＨＡＳＥ（ＮＯＳ）ＦＲＯＭＭＯＬＬＵＳＣＡＮＣＥＮＴＲＡＬＧＡＮＧＬＩＡＨｕａｎｇＳｈｉｌｅ１ＨｕｂｅｒｔＨ．Ｋｅｒｓｃｈｂａｕｍ２ＥｄｗｉｎＥｎｇｅｌ...     

一种新的微量蛋白电泳及超敏感染色技术(英文)

ＡＮｅｗＴｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆＭｉｃｒｏｐｒｏｔｅｉｎｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｎｄＵｌｔｒａｓｅｎｓｉｔｉｖｅＳｔａｉｎｉｎｇ１ＰＡＮＧＧｕａｎｇｃｈａｎｇ２,ＺＨＡＯＤｏｎｇｘｕ３,ＹＡＮＧＸｉｎｌｉｎＣＨＥＮＧｕａｎｇｗｅｎ...     

刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中作用的探讨

目的探讨大鼠实验性肝癌发病中刺五加对肌体免疫功能和抗氧化酶活性的影响。方法４６只ＳＤ雄性大鼠被随机分成对照组（喂普通饲料）、３－甲基４－双甲氨基偶氮苯（３－Ｍｅ－ＤＡＢ）组（喂含０．０６％３Ｍｅ－ＤＡＢ饲料 １０周）和刺五加组（饲喂同 ３－Ｍｅ－ＤＡＢ外、另加入刺五加 ４．５ｇ／ｋｇ饲料,用常规方法检测全血谷光甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量,用微量化学发光造检测吞噬细胞活性（ＰＭＮ－ＣＬ）。结果１．ＰＭＮ－ＣＬ检测峰值、积分值和吞噬细胞指数,３－ＭｅＤＡＢ组较正常组和刺五加组均有显著升高（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）２．全血ＧＳＨ－ＰＸ活性、ＳＯＤ活性,刺五加组较３－ＭｅＤＡＢ组均有显著升高（Ｐ＜０．０５）。ＭＤＡ含量刺五加组和３－ＭｅＤＡＢ组均较正常组升高（均Ｐ＜０．０５）。结论刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中有提高抗氧化酶活性和对抗致癌剂引起的机体中性粒细胞吞噬功能代偿性增高的作用。     

氧化修饰HDL剌激培养人主动脉平滑肌细胞增殖

平滑肌细胞（smooth muscle cell, SMC）增殖在动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS）形成中起着重要作用.氧化修饰HDL（oxidized HDL, OX-HDL）可刺激 ³H-TdR掺入培养人动脉SMC的DNA,促进SMC增殖.以四甲基偶氮唑盐(MTT)法直接观察OX-HDL对培养人动脉SMC增殖细胞数的影响.结果显示,天然HDL（native HDL N-HDL）对SMC增殖没有影响,而OX-HDL则显著刺激SMC增殖（P＜0.01）,N-HDL显著抑制OX-LDL刺激SMC增殖作用（P＜0.01）,而OX-HDL则显著增加OX-LDL刺激SMC增殖作用（P＜0.01）     

氧化修饰HDL对培养人主动脉平滑肌细胞胆固醇流出的影响

大量研究显示,高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein,HDL)具有抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用.这是由于HDL能够促进外周组织如血管壁内皮细胞、平滑肌细胞(smoothmusclecell,SMC)及巨噬细胞储集的胆固醇流出,并将其转移到肝脏通过胆汁分泌而排出体外[1],这一过程...     

G6PD通过细胞周期蛋白D1/D2调控人黑色素瘤细胞周期的进程

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在人皮肤黑色素瘤A375细胞中处于高表达与高活性状态, 但G6PD在黑色素瘤发生发展过程中的作用及其具体机制尚不明确.本文在前期运用 siRNA方法构建G6PD敲减的黑色素瘤A375稳转细胞(A375-G6PDΔ)基础上,构建表达载体pBabe-puro-G6PDWT在A375-G6PDΔ细胞中过表达野生型的G6PD基因,从而构建G6PD表达恢复的稳转细胞(A375-G6PDΔ-G6PDWT).3株细胞A375-WT、A375-G6PDΔ和 A375-G6PDΔ-G6PDWT经G6PD酶活性测定、MTT测定、克隆形成实验、流式细胞仪分析细胞周期和Western 印迹检测.结果显示,A375-G6PDΔ-G6PDWT细胞的G6PD蛋白表达量 (0.847 ± 0.080)及其活性(0.394 ± 0.029)分别是A375-G6PDΔ的3.28倍(P＜0.01) 和7.34倍(P＜0.01),分别是A375-WT细胞的91-57%和2.12倍(P＜0.05).与A375-WT细 胞相比,A375-G6PDΔ细胞G0/G1期细胞数增加,S期细胞数减少,增殖指数PI降低了25-70%（P＜0.05）,细胞周期蛋白D1/D2、细胞周期蛋白E表达分别下降37.4%、54.3% (P＜0.01)和17.3%;而A375-G6PDΔ-G6PDWT细胞呈现G1/S期阻滞解除,细胞周期蛋白D1/D2蛋白分别恢复到A375-WT细胞的89.5%和87.6%,细胞周期蛋白E表达未见 恢复,呈现生长增殖和克隆形成率的恢复并接近于A375-WT细胞. 结果提示,G6PD通 过细胞周期蛋白D1/D2调控人皮肤黑色素瘤A375细胞G1期向S期转换的进程,这为黑色 素瘤发病机制的研究提供了新的思路.     

氧化修饰脂蛋白刺激人动脉平滑肌细胞DNA合成

动脉平滑肌细胞(SMC)是动脉粥样硬化(As)斑块中的主要细胞, 它的增殖在As的形成过程中极为重要. 在建立人主动脉SMC体外培养法的基础上, 通过 ³H-TdR掺入实验观察了人低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)及高密度脂蛋白(HDL)和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人SMC DMA合成的影响.结果发现,HDL对 ³H-TdR掺入SMC DNA无影响(P>0.05); LDL和VLDL ³H-TdR掺入量明显增加(P<0.05);OX-LDL, OX-VLDL及OX-HDL均使 ³H-TdR掺入DNA显著增加(P<0.01).结果表明,LDL和OX-LDL, OX-VLDL及OX-HDL均能刺激SMC DNA合成,促进SMC增殖.     

Synchronization of Cultured Vascular Smooth Muscle Cells Following Reversal of Quiescence Induced by Treatment with the AntioxidantN-Acetylcysteine

Smooth muscle cell (SMC) proliferation plays an important role in the pathogenesis of vascular diseases such as atherosclerosis and postangioplasty restenosis. Recently we demonstrated the thiol antioxidantN-acetylcysteine (NAC) inhibits constitutive NF-κB/Rel activity and growth of vascular SMCs. Here we show that treatment of human and bovine aortic SMC with the thiol antioxidant NAC causes cells to exit the cell cycle and remain quiescent as determined by a greatly reduced incorporation of [³H]thymidine and G₀/G₁DNA content. Removal of NAC from the culture medium stimulates SMCs to synchronously reenter the cell cycle as judged by induction of cyclin D1 and B-mybgene expression during mid and late G₁phase, respectively, and induction of histone gene expression and [³H]thymidine incorporation during S phase. The time course of cyclin D1, B-myb,and histone gene expression after NAC removal was similar to that of serum-deprived cells induced to resume cell cycle progression by the addition of fetal bovine serum to the culture medium. Taken together, these results indicate that NAC treatment causes SMCs to enter a reversible G₀quiescent, growth-arrested state. Thus, NAC provides an important new method for synchronizing SMCs in culture.