山羊体外受精胚胎序贯培养的研究

目的：根据早期胚胎不同发育阶段的营养需求设计体外培养体系,以建立适于山羊早期胚胎体外发育的序贯培养方法。方法：对屠宰场来源山羊卵巢卵母细胞进行体外成熟和体外受精后移入添加不同胚胎发育影响因子的培养体系中进行体外培养,显微镜观察、统计各阶段胚胎发育情况,并对培养的胚胎进行移植。结果：BSA和EGF对山羊体外受精卵具有明显促卵裂作用,培养系统中添加EGS、EGF、HTAU或p—Me可有效支持8-细胞期山羊胚胎克服发育阻滞而提高桑葚胚发育率;在不同胚胎期添加各发育影响因子进行序贯培养的卵裂率、≥8-细胞率和桑葚胚发育率分别为45．2％、60．6％和23．4％,序贯培养的胚胎移植后产羔率为11．1％。结论：宜根据早期胚胎各时期代谢特点和营养需求对山羊胚胎进行序贯培养。     

不能手术Ш 期非小细胞肺癌同期与序贯放化疗对比研究

目的:回顾性分析同期放化疗与序贯放化治疗Ш期不能手术非小细胞肺癌的近期疗效、生存期及毒性反应,以指导临床治疗。方法:对生存资料完整的86例经组织学或细胞学证实的非小细胞肺癌病例进行回顾性分析,序贯放化组42例,同期化放组44例。同期放化疗组:治疗方式为放疗期间周期性化疗,三维适形调强放疗。治疗后不常规进行巩固化疗,随访如血液肿瘤标志物CEA数值动态观察增高,则进行全身化疗1～2周期。序贯化放疗组先化疗3～7周期后放疗,放疗方法与同期放化疗组相同。结果:同期化放组肿瘤完全缓解率显著高于序贯化放疗组的(P<0.05);中位生存期分别为24与18个月,1、2年生存率分别为88%、49%和84%、35%(P<0.05);急性期毒副反应经对症后均恢复而未影响治疗,两组病例中的毒副反应相似,差别无统计学意义。结论:同步放化疗较序贯放化疗治疗Ш期非小细胞肺癌能提高完全缓解率、中位生存时间、1、2年生存率,且未增加患者的毒性反应,为Ш期非小细胞肺癌提供一种安全有效的治疗方法 。     

应用两种方法诱导SH-SY5Y细胞分化的研究

目的：观察全反式维甲酸（ATRA）处理和ATRA与十四烷酰佛波醇乙酸酯（TPA）序贯处理（ATRA/TPA）对人类神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞增殖抑制和形态分化的影响。方法：应用10μM ATRA处理6天和10μM ATRA处理3天继以80 nMTPA处理3天这两种方法使SH-SY5Y细胞分化;用倒置光学显微镜动态观察SH-SY5Y细胞形态学变化;并用MTT比色法比较两种分化方法对SH-SY5Y细胞的体外抗增殖作用。结果：ATRA处理和ATRA与TPA序贯处理对SH-SY5Y细胞都有抗增值和诱导细胞分化作用,细胞形态发生明显的变化,分化成神经元表型,前者主要表现为两端带有长突起的纺锤体样细胞形态,而后者主要是由细胞体延伸出多个突起的多边形的细胞。ATRA分化6天的细胞的存活率下降为78.7%±2.0%。当去除ATRA后,继续培养1天的细胞存活率上升为89%±0.2%,而继续培养2天的细胞存活率为86.3%±1.4%;ATRA与TPA序贯分化6天细胞存活率下降为75.9±0.4%。当去除TPA后,继续培养一天的细胞存活率为75.5±0.7%,继续培养2天的细胞存活率为74.9±1.0%。结论：维甲酸（ATRA）处理和ATRA与十四烷酰佛波醇乙酸酯（TPA）序贯处理（ATRA/TPA）均能明显诱导SH-SY5Y细胞分化。这两种分化细胞为神经科学的研究提供了优良的体外培养模型细胞,尤其是ATRA与TPA序贯处理能获得分化完全而稳定的神经元样细胞。     

应用两种方法诱导SH-SY5Y 细胞分化的研究

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)处理和ATRA与十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)序贯处理(ATRA/TPA)对人类神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞增殖抑制和形态分化的影响。方法:应用10μM ATRA处理6天和10μM ATRA处理3天继以80 nMTPA处理3天这两种方法使SH-SY5Y细胞分化;用倒置光学显微镜动态观察SH-SY5Y细胞形态学变化;并用MTT比色法比较两种分化方法对SH-SY5Y细胞的体外抗增殖作用。结果:ATRA处理和ATRA与TPA序贯处理对SH-SY5Y细胞都有抗增值和诱导细胞分化作用,细胞形态发生明显的变化,分化成神经元表型,前者主要表现为两端带有长突起的纺锤体样细胞形态,而后者主要是由细胞体延伸出多个突起的多边形的细胞。ATRA分化6天的细胞的存活率下降为78.7%±2.0%。当去除ATRA后,继续培养1天的细胞存活率上升为89%±0.2%,而继续培养2天的细胞存活率为86.3%±1.4%;ATRA与TPA序贯分化6天细胞存活率下降为75.9±0.4%。当去除TPA后,继续培养一天的细胞存活率为75.5±0.7%,继续培养2天的细胞存活率为74.9±1.0%。结论:维甲酸(ATRA)处理和ATRA与十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)序贯处理(ATRA/TPA)均能明显诱导SH-SY5Y细胞分化。这两种分化细胞为神经科学的研究提供了优良的体外培养模型细胞,尤其是ATRA与TPA序贯处理能获得分化完全而稳定的神经元样细胞。     

拉米夫定与IFNα-1b 序贯治疗HBeAg 阳性慢性乙肝患者临床疗效观察

目的:观察比较拉米夫定联合IFNα-1b的序贯疗法与拉米夫定、IFNα-1b的单药疗法在治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎方面的疗效差异。方法:将98例HBeAg阳性慢乙肝患者随机分为序贯治疗组、拉米夫定治疗组和IFNα-1b治疗组。序贯治疗组33例,年龄37.85±7.70岁,男/女:18/15,首先使用拉米夫定(100mg一日一次口服疗程24周),序贯使用IFNα-1b(60ug隔日一次皮下注射疗程28周),在第20周至24周同时使用拉米夫定和IFNα-1b,总疗程48周;拉米夫定治疗组34例,年龄39.42±6.88岁,男/女:20/14,仅口服拉米夫定,100mg一日一次口服,疗程48周;IFNα-1b治疗组31例,年龄35.71±6.14岁,男/女:14/17,仅皮下注射IFNα-lb,60ug隔日一次,疗程48周。治疗12周、24周、48周时检测肝功能、乙肝两对半、HBV-DNA等指标变化。结果:在治疗12周、24周时三组间肝功复常率、HBeAg阴转率无差异,序贯治疗组、拉米夫定组HBV-DNA阴转率优于IFNα-1b治疗组;实验疗程结束时序贯治疗组HBeAg阴转率、抗-HBe转换率及HBV-DNA阴转率显著高于其他两组,P<0.05,但在HBV-DNA阴转率方面序贯治疗组与拉米夫定治疗组差异不显著。结论:拉米夫定和IFNα-lb序贯疗法在HBV-DNA阴转率、HBeAg阴转率和抗HBe转换率三方面的疗效优于拉米夫定、IFNα-lb单一用药。     

拉米夫定与IFNα-1b序贯治疗HBeAg阳性慢性乙肝患者临床疗效观察

目的：观察比较拉米夫定联合IFNα-1b的序贯疗法与拉米夫定,IFNα-1b的单药疗法在治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎方面的疗效差异。方法：将98例HBeAg阳性慢乙肝患者随机分为序贯治疗组、拉米夫定治疗组和IFNα-1b治疗组。序贯治疗组33例,年龄37．85±7．70岁,男／女：18／15,首先使用拉米夫定（100mg—El一次口服疗程24周）,序贯使用IFNα-1b（60ug隔日一次皮下注射疗程28用1,在第20周至24同同时使用拉米夫定和IFNα-1b,总疗程48周;拉米夫定治疗组34例,年龄39．42＋6．88岁．男／女：20／14,仅口服拉米夫定,100mg一日一次口服,疗程48周;IFNα-1b治疗组31例,年龄35．71±6．14岁,男／女：14／17,仅皮下注射IFNα-1b,60ug隔日一次,疗程48周。治疗12周、24周、48周时检测肝功能、乙肝两对半、HBV—DNA等指标变化。结果：在治疗12周、24周时三组间肝功复常率、HBeAg阴转率无差异,序贯治疗组、拉米夫定组HBV·DNA阴转率优于IFNα-1b治疗组;实验疗程结束时序贯治疗组HBeAg阴转率、抗-HBe转换率及HBV—DNA阴转率显著高于其他两组,P〈0．05,但在HBV-DNA阴转率方面序贯治疗组与拉米夫定治疗组差异不显著。结论：拉米夫定和IFNα-1b序贯疗法在HBV—DNA阴转率、HBeAg阴转率和抗HBe转换率三方面的疗效优于拉米夫定、IFNα-1b单一用药。     

介绍两种自制的简易细胞电泳装置

细胞电泳技术,是通过测定细胞表面电荷的性质和密度,来研究细胞表面的结构和功能变化的一种精细的和灵敏的生物物理学方法。在医学范围内曾应用于研究癌细胞表面特性和表面分子结构的改变;抗原-抗体反应过程中细胞表面电荷密度的变化;抗菌素、消毒剂等对细菌表面的组成、结构和功能的影响;病毒与感染细胞的表面结构和功能变化的关系,病毒与感染细胞上特异受体的结合;电离辐射所引起的细胞表面的微结构的破坏、细胞表面酶系统的失活等等。此外,在研究细胞免疫方面,巨噬细胞电泳和淋巴细胞电泳亦能反应出“巨噬细胞电泳缓慢因子”和T淋巴细胞与B淋巴细胞的百分率。总之,细胞电泳是值得重视的一项     

层粘连蛋白与膜受体结合下膜受体构象与膜脂有序性的研究

配体蛋白与细胞膜受体蛋白结合后,可引起膜受体的构象与膜脂的有序性变化.本文研究外源性层粘连蛋白与腹水肝癌细胞膜受体结合后膜热量变化,膜序参数改变和膜电荷及细胞迁移率的变更.就膜蛋白构象与膜脂有序性以及膜电荷等方面改变的生理意义与层粘连蛋白抗癌细胞脱落转移寻找理论关系.本文应用微量量热法、顺磁共振和细胞电泳等技术,得知层粘连蛋白与癌细胞膜作用后细胞膜有放热效应,膜流动性增大,细胞电泳动变慢.癌细胞膜的这些变化对于限制癌的恶性生长与脱落均起重要作用.     

温热合并吐温80对BGC-823细胞EPM的影响

温热化学疗法在临床肿瘤治疗中取得了较好疗效,但目前采用的温热与抗癌药物合并疗法,治疗较复杂,副作用较多。需进一步探索疗效好、副作用小的合并药物。本实验用临床上常用、安全、低毒的吐温80作合并药物,测定BGC-823细胞经温热合并吐温80作用后的细胞电泳率的变化,以观察其共同作用效果,并探讨其作用机理。     

唾液酸对正常造血细胞及白血病细胞增殖分化的影响

本实验以测定细胞电泳率(EPM)反映细胞表面唾液酸相对含量。发现胎肝细胞电泳率明显高于成年骨髓细胞,经神经氨酸酶(NA)处理胎肝细胞、骨髓细胞、L_(801)急性白血病细胞和KCL-22慢性白血病细胞后,细胞EPM均明显下降。细胞集落数及细胞形态学检测表明,NA处理后,多向造血干细胞(CFU-S)增殖能力减弱,向粒系的分化增强;KCL-22细胞生成的集落数明显减少,成熟细胞的比例明显增加。     

小鼠网织红细胞微观流变学特性的研究

按Bishop方法,在小鼠血液里诱导生成大量网织红细胞,然后提取网织红细胞,对其电泳率、渗透脆性、膜的流动性、细胞的变形能力和取向性进行了系统研究。研究结果表明网织红细胞在转变为成熟红细胞的短短时间内,其微观流变学特性发生了明显的变化：电泳率变小、渗透脆性变好、膜的流动性变大、细胞的变形能力变强、取向性变好,最终发育成具有全面功能的成熟红细胞。     

大隐静脉顺行序贯式吻合技术在冠心病患者中的应用

目的:探讨大隐静脉(SVG)顺行序贯式吻合技术在冠心病患者中的应用价值。方法:收集我院2011年1月至2014年6月收治的78例冠心病患者,回顾性分析患者非体外循环下行SVG顺行序贯式冠状动脉旁路移植术患者的临床资料,术后随访1~3.5年,平均(2.1±1.5)年,密切观察患者治疗效果以及相应的并发症的发生情况。结果:SVG双支桥48例,三支桥20例,四支桥10例,吻合口共196个。术后测定近段血流流速(37.14±11.78)m L/min,搏动指数(PI)值(3.00±1.25)。术后出现2例低心排血量综合征,2例迟发性心脏压塞,除1例因序贯出现多脏器功能衰竭而死亡外,其余均痊愈。术后复查,SVG桥的通畅率为100%。结论:SVG顺行序贯吻合能尽快恢复心脏供血,术后通畅率高,在医生严格掌握手术技巧的前提下,可安全用于冠心病的治疗。     

吉西他滨联合顺铂序贯吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌

目的:观察吉西他滨联合顺铂序贯吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌的疗效与毒副反应。方法:71例经病理学诊断的晚期(Ⅲb-Ⅳ期)非小细胞肺癌患者,随机分成两组,观察组给予吉西他滨加顺铂化疗,序贯吉非替尼。对照组给予吉西他滨加顺铂化疗。结果:两组有效率(RR)为36.1%VS14.3%(P=0.0362);疾病控制率(DCR)比较x2=14.782,P<0.001;中位生存期(MST)为12.1月VS10.8月(P<0.05);有统计学差异;观察组除了皮疹、腹泻毒副反应较大外,其他与对照组相仿。结论:吉西他滨联合顺铂序贯吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌有较好的疗效和安全性,可以扩大样本继续观察。     

轮状病毒灭活疫苗和减毒活疫苗序贯免疫的体液免疫应答效果

目的:评价采用轮状病毒灭活疫苗进行初始免疫,减毒活疫苗进行加强免疫的序贯免疫方案的体液免疫应答效果。方法:将实验小鼠随机分为4组(口服疫苗组、序贯疫苗组、口服对照组及序贯对照组),按相应方案免疫后,ELISA检测血清轮状病毒特异性IgG和IgA、肠道轮状病毒特异性IgA;微量中和实验检测血清病毒特异性中和抗体;同时采用ELISA分析口服活疫苗后病毒排出情况。结果:与对照组相比,序贯疫苗组小鼠产生的轮状病毒特异性血清IgG、IgA、中和抗体及肠道IgA水平显著升高。与口服疫苗组相比,序贯疫苗组的免疫方案诱发的轮状病毒特异性血清IgG、IgA、中和抗体水平显著升高,肠道IgA水平两组间没有显著差异。同时,与口服疫苗组相比,序贯疫苗组中轮状病毒灭活疫苗进行的初始免疫未影响第一次口服活疫苗后病毒的排出量和排出时间,但序贯疫苗组第二次口服活疫苗后病毒的排出量迅速减少,排毒时间快速缩短,与口服疫苗组第三次服苗后病毒的排出量和排出时间相似。结论: 轮状病毒灭活疫苗和减毒活疫苗序贯免疫可有效诱发小鼠全身和黏膜局部的体液免疫应答,该方案将有可能成为轮状病毒疫苗临床应用的候选方案。     

吐温80合并温热(39°-43℃)对BGC-823人胃癌细胞膜流动性及EPM的影响

BGC-823人胃癌细胞经叶温80合并温热(39℃—43℃)处理后,用DPH作荧光分子探针观察细胞膜流动性的变化,并通过测定细胞电泳率(EPM)观察细胞膜表面电荷的改变,正常人红细胞及包皮成纤维细胞作为正常细胞对照。实验结果表明:常温下肿瘤细胞膜流动性及EPM明显高于正常细胞,吐温80和温热对肿瘤细胞及正常细胞均有促进膜流动性及降低细胞电泳率作用。吐温80合并温热时这种作用显著增加,合并作用41℃60分左右的效应已达到温热43℃100分作用水平,有明显时间效应。冷却后各组有不同程度恢复,但合并作用41℃100分以上各组恢复较慢。正常细胞对温热和吐温80作用的反应明显低于肿瘤细胞。     

序贯免疫策略用于结核疫苗研究的进展

序贯免疫策略目前是结核疫苗研究领域的又一新趋势,拓展了结核疫苗研究的思路和方法。序贯免疫策略的疫苗形式称为初免-加强疫苗,其用于预防结核病前景广阔。本文就近年来序贯免疫策略在结核疫苗研究中的组合方式及其优势等方面进行综述。     

克霉唑阴道片与乳杆菌制剂联合及序贯治疗重度外阴阴道假丝酵母菌病疗效

目的探讨克霉唑阴道片与阴道乳杆菌活菌制剂定君生联合及序贯应用治疗重度外阴阴道假丝酵母菌病(SVVC)的有效性及复发情况。方法选取中国人民解放军中部战区总医院2017年3月至2019年6月收治的240例SVVC患者,采用简单随机化分组方法(随机数字表法以及随机数余数分组法),分为序贯组(采用克霉唑阴道片先行治疗随后序贯应用乳杆菌制剂)、联合组(克霉唑阴道片与乳杆菌制剂同时联合用药)及单纯用药组(仅应用克霉唑阴道片治疗)各80例。3组患者均在治疗开始后第14~21天进行第1次复查,第28~35天进行第2次复查,观察2次复查后的乳杆菌分级、有效率及复发率。结果第1次复查时,序贯组及联合组患者阴道内乳杆菌数量较单纯用药组均显著增加(P=0.001);序贯组、联合组、单纯用药组有效率分别为78.8%、85.0%、63.8%,序贯组与联合组差异无统计学意义(P=0.305),该2组与单纯用药组比较差异均有统计学意义(P=0.036,P=0.002)。第2次复查时3组患者阴道内乳杆菌数量差异无统计学意义(P=0.895),序贯组、联合组、单纯用药组有效率分别为67.5%、66.3%、48.8%,序贯组与联合组差异无统计学意义(P=0.867),该2组与单纯用药组比较差异均有统计学意义(P=0.016,P=0.025)。序贯组、联合组、单纯用药组复发率分别为14.3%、22.1%、23.5%,序贯组明显低于联合组及单纯用药组(P=0.033)。结论克霉唑阴道片与乳杆菌制剂联合及序贯用药治疗SVVC均可达到更高的有效率,序贯用药在降低复发率方面效果更佳。     

四联疗法与序贯疗法根除幽门螺杆菌疗效观察

目的:探讨四联疗法和序贯疗法根除幽门螺杆菌的疗效和安全性。方法:将150例14C尿素呼气试验阳性的慢性胃炎患者随机分为A、B、C 3组各50例。A组(四联疗法)给予雷贝拉唑、枸橼酸铋钾、克拉霉素、阿莫西林治疗7 d;B组(序贯疗法)前5d给予雷贝拉唑、阿莫西林,后5d给予雷贝拉唑、克拉霉素、甲硝唑治疗;C组(标准三联疗法)给予雷贝拉唑、克拉霉素、阿莫西林治疗治疗7 d。疗程结束4周后行14C尿素呼气试验检测。结果:A组根除率为94%,B组根除率为90%,C组根除率68%。A组和B组优于C组(P<0.01);A组、B组无显著差异性(P>0.05)。三组均无严重不良反应。结论:四联疗法与序贯疗法H.pylori根除率优于标准三联疗法,四联疗法和序贯疗法疗效无明显差异性。     

不同放化疗模式治疗中晚期非小细胞肺癌的疗效分析

目的:探讨同步和序贯放疗联合不同化疗方案对治疗中晚期非小细胞肺癌近期疗效、远期生存及毒性反应的影响。方法:将45例III-IV期非小细胞肺癌患者随机归入两组,同步放化疗组22例;序贯放化疗组23例。全组病例依据病情分别选择艾素和顺铂、吉西他滨和顺铂、长春瑞滨和顺铂或培美曲塞和顺铂方案化疗。比较两组近期疗效、远期生存率及毒性反应。结果:同步组近期有效率为81.8%高于序贯组73.9%,但无统计学差异(P0.05);两组均有随放疗剂量增加有效率升高趋势。NP和TP方案两组近期疗效相近(P0.05)。同步组和序贯组1年生存率分别为90.9%和86.9%(P0.05);2年生存率分别为72.7%和52.2%(P0.05)。毒性反应主要为骨髓抑制、放射性食管炎和肺炎。同步组毒副反应发生率高于序贯组,但无统计学差异(P0.05)。结论:同步放化疗治疗中晚期非小细胞肺癌近期疗效及远期生存率有优于序贯放化疗的趋势,但毒副反应发生相对增多。联合治疗模式下,分期越早,患者远期生存时间越长。近期疗效有随放疗剂量增高而提高趋势,但放疗剂量、病理类型、化疗方案等对患者远期生存无明显统计学差异。     

害虫防治决策的复序贯分析方法及抽样技术研究

复序贯抽样决策技术实际应用的受限 ,原因在于截止限序贯抽样模型的缺乏。本文在检验昆虫种群空间格局回归模型的基础上 ,推导出了目前国内常用检验回归模型的截止限序贯抽样模型 ,并将其运用于复序贯分析决策过程中。实例分析表明 ,对于同一种生物种群 ,在一定的精度 (D)和置信水平(tα)要求下 ,复序贯抽样决策技术可以大幅度地节约抽样成本