中华芦荟多肽提取物的抑菌活性研究

利用硫酸铵梯度盐析法提取中华芦荟在不同饱和度硫酸铵下沉淀的蛋白质组分,采用抑菌圈法测其抑菌活性,其中60%硫酸铵浓度下沉淀的蛋白组分对细菌良好的抑菌活性。进一步通过SephadexG-25凝胶柱层析初步分离该蛋白溶液,对分离得到的4组多肽进行抑菌活性分析,结果显示峰2对多种细菌均有明显的抑菌效果。     

面包树果实凝集素的提取纯化及理化性质分析

建立面包树果实凝集素(frutalin,FTL)的提取纯化方案,并对FTL纯品进行部分理化性质分析。本试验以新鲜的面包树果实籽为材料,经Tris-HCl缓冲液浸提、过滤、硫酸铵沉淀和阳离子交换层析后超滤浓缩得FTL纯品,最后用纯品开展了糖抑制,热稳定性,pH稳定性和金属离子耐受性等试验。提取优化得到的最佳条件为:料液比1∶2(g:m L),浸提时间2 h,浸提温度50℃,硫酸铵饱和度70%,沉淀时间4 h。经阳离子交换层析后FTL回收率为22%。研究结果表明,FTL是一种热稳定性凝集素,在温度不超过60℃时,其凝血活性不受影响,并且不依赖于金属离子来发挥其凝血活性。本研究建立了一个简单高效的FTL分离纯化方案,并对FTL纯品做了部分理化性质研究,为FTL可能的生物医学应用提供研究基础。     

骆驼蓬(Peganum harmala)蛋白质的分布、提取及活性研究

采用不同溶剂分级提取骆驼蓬（Peganum harmala L．）根、茎、叶及种子中的蛋白质,结果表明总蛋白以种子中的蛋白含量最高,而营养器官以叶中的蛋白含量较高。当年种子总蛋白含量显著高于贮藏种子。不同溶剂分级提取的当年生种子、根、茎和叶中各组分,以碱提组分蛋白含量最高。用含不同盐离子浓度的缓冲液和不同pH值的广泛缓冲液提取骆驼蓬种子的蛋白质,结果表明优化后的缓冲液条件为含0．2mol／LNaCl,pH：7．0～8．0的5mmol／LPBS缓冲液。硫酸铵沉淀法获得的骆驼蓬种子中的蛋白粗提物（1．2mg／mL）对供试真菌交格链孢菌（Alternaria alternata）、指状青霉菌（Penicillium degitatum）、灰霉病菌（Botrytis cinerea）、稻瘟病菌（Magnaporthe grisea）和意大利青霉菌（Penicillium italicum）等5种植物病原真菌均有抑菌作用,其中对意大利青霉菌和交格链孢菌表现出较好的抑菌活性,抑菌环直径分别为19．50和18．50mm。对供试细菌表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、臭鼻克雷伯菌（Klebsiella penumoniae）、福氏志贺氏菌（Shigella flexneri）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureua）和鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）等6种病原细菌也有抑菌作用,其中对臭鼻克雷伯菌、福氏志贺氏菌、表皮葡萄球菌等病原细菌等有较好的抑制作用,抑菌圈直径分别10．20、10．10和9．30mm。     

东亚飞蝗谷胱甘肽S-转移酶分离纯化

通过硫酸铵沉淀技术和GSH-agarose亲和层析对东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis(Meyen)5龄若虫谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)进行了分离纯化。结果表明GSTs活性在硫酸铵各沉淀段均有分布,但在55%～100%沉淀段活性较高,在硫酸铵饱和度为85%时比活力最高,达到420.33μmol/min/mg protein,纯化倍数为18.86。根据硫酸铵粗沉淀谷胱甘肽S-转移酶结果,选择硫酸铵浓度为60%～90%沉淀段进行GSH-agarose亲和层析,纯化后比活力最高达到1365.29μmol/min/mg protein,纯化倍数达到61.25。经SDS-PAGE鉴定,得到的GST为1条带,亚基的分子量约为24kDa。     

江蓠内生真菌NSS1蛋白活性的初步研究

为促进江蓠内生真菌NSS1抗菌蛋白的应用研究,利用硫酸铵沉淀法制备抗菌蛋白,最佳硫酸铵饱和度为65%。采用滤纸片法检测其对细菌指示菌的抑菌活性,抗菌粗蛋白均能抑制五种细菌指示菌的生长,当浓度达到750 μg/mL时,抑制效果最好。采用邻苯三酚自氧化法测定蛋白对超氧阴离子自由基(O-2)的清除作用,MTT法检测蛋白对肿瘤细胞的影响。抗菌蛋白在100℃以下,pH中性时抑菌活性稳定,对紫外线照射不敏感,丙三醇、甲醇和胰蛋白酶对抗菌蛋白的抑菌活性没有影响。不同浓度的蛋白液对超氧阴离子均有清除效果。当蛋白浓度达到360 μg/mL时对肿瘤细胞的抑瘤作用最强。上述结果显示抗菌蛋白具有较强的抑菌活性、抗氧化活性和抗肿瘤活性。     

香螺血清、肌肉和唾液腺凝集素凝集性能的初步研究

研究香螺(Naptunea cumingi crosse)肌肉、血清和唾液腺凝集素对7 种脊椎动物红细胞、人的4 种红细胞、4 种单细胞藻类和11 种微生物细胞的凝集性能,同时进行pH敏感性、热稳定性、糖抑制性、EDTA、金属离子以及盐浓度影响试验.结果表明,3 种凝集素对各种细胞的凝集效应存在差异,以家兔红细胞的凝集效果最佳.肌肉和血清凝集素在pH<7.0时均失活,唾液腺凝集素的热稳定性最强,温度为90 ℃仍具有活性.此外,不同的糖溶液对3 种凝集素凝集效果的影响不同,在EDTA浓度为2.00～0.25 mmol/L范围内,3 种凝集素的凝集效价均受到不同程度的抑制.在金属离子影响试验中发现,Zn2+能明显提高肌肉和血清凝集素的凝集活力,而对唾液腺凝集素有抑制的作用.当盐浓度为12～18 g/L时,可增加香螺肌肉凝集素的凝集效价,而当浓度为24～60 g/L时却会抑制肌肉凝集素的凝集活性.     

尼泊尔酸模根中活性蛋白--凝集素特性初探

经实验得知尼泊酸模根中除含有其传统有效成分大黄素外,还具有活性蛋白--凝集素,能使3%兔红血球发生凝集反应;该活性蛋白在pH 8.0,0.05 mol/L Tris-HCl (1M NaCl)的缓冲液中血凝活性最强;经80%饱和度硫酸铵分级沉淀,沉淀中凝集素含量最高.     

湘西虎杖抑菌活性成分提取研究

对湘西虎杖抑菌活性物提取条件进行研究,通过抑菌实验得到最佳提取条件为90%乙醇、60℃、3 h,该条件下的提取物对细菌生长的抑制活性最强,但对酵母菌无明显的效果,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌的最小抑菌浓度（MIC）为0.25 g/mL～0.5 g/mL.提取物经85℃、100℃,15 min或pH 2～8处理后仍具有较强的抑菌活性.     

苦瓜提取物的抑菌活性研究

本文研究了苦瓜(MC)不同活性成分的抑菌活性.结果表明:苦瓜提取物对细菌的抑菌作用明显,但对霉菌、酵母菌的抑制效果不明显.苦瓜粗皂甙和苦瓜粗多糖的抑菌效果比纯品的好.苦瓜乙醇浸提物、苦瓜粗多糖、苦瓜多糖、苦瓜粗皂甙、苦瓜皂甙、苦瓜粗蛋白对藤黄八叠球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为50、100、5、100、2、20 mg/mL.苦瓜多糖、苦瓜皂甙和苦瓜蛋白是苦瓜抑菌活性功能成分.     

水稻稻瘟病拮抗菌L1鉴定及抑菌特性的初步研究

本研究对水稻稻瘟病菌的拮抗菌L1形态、生理生化特性等进行测定,结果发现其为杆状细胞、革兰氏阳性、菌落不规则有褶皱、好氧生长、颜色较深等,初步鉴定为枯草芽孢杆菌;拮抗菌L1培养5 d的发酵液抑菌活性最高,抑菌率为74.57%;拮抗菌L1对水稻稻瘟病菌的拮抗活性物质对温度不敏感;拮抗菌L1的发酵液用硫酸铵梯度沉淀法提取粗蛋白.在50%～60%硫酸铵饱和度下沉淀的粗蛋白质对水稻稻瘟病菌抑菌效果最好,平均抑菌半径达0.51 cm.     

Forms of the Word and the Mystery of the Objectified Nature of the Word

The time has come to proceed from forms of givenness of the word to forms of the word as such. They can, if you like, be called external and inner structures. Humboldt, however, preferred to speak of the external and inner forms of the language. Shpet adopted precisely this distinction. Why did this problem interest Shpet? Already in [Appearance and sense], he had set the task of returning to the source of pretheoretical, living science. Shpet wrote that the outer cover of words and logical expressions obscure the objectified meaning and that it was necessary to remove another cover from the objectified sign so as to grasp a certain genuine intimacy, and in it the fullness of being (Shpet, 1914. Pp. 5-6). We shall keep in mind this major undertaking posed by this scientist. The existence of the inner form of words should not come as a surprise. That same year (1914) Ortega y Gasset wrote that material objects have a third dimension. However, we cannot see or touch it: "For just as depth needs a surface beneath which to be concealed, the surface, or outer cover, in order to be so, needs something over which to spread, covering it" (Ortega y Gasset, 2000. Pp. 62-63).