波纹巴非蛤(Paphia undufata)体液和肌肉凝集素的初步研究

目的:研究波纹巴非蛤体液和肌肉凝集素对细胞的凝集性能及其理化性质,为开发新的凝集素来源提供基础材料。方法:利用10种动物及人的4种红细胞1、5种藻类细胞测定波纹巴非蛤的体液和肌肉凝集素的凝集活力,同时进行热稳定性、pH敏感性、糖抑制及金属离子影响试验。结果:体液和肌肉凝集素分别对家鸽、家兔血红细胞最为敏感,凝集效价最高,均为25。对藻类的凝集则具有某些专一性。体液凝集素有较高的温度耐受性,90℃处理10min仍能凝集兔血红细胞。肌肉凝集素对碱性环境较敏感,当pH≥8.0时,凝集活力消失。体液及肌肉凝集素在糖抑制及金属离子影响试验中也存在着差异。结论:波纹巴非蛤的体液与肌肉提取液均含凝集素,但所含凝集素类型不同。     

从绿藻礁膜（Monostroma nitidum Wittr）分离半乳糖专一的凝集素

礁膜（Monostroma nitidum Wittr）经 25%～80%硫酸铵分级、DEAE-纤维素52离子交换层析和Sephadex G-200凝胶过滤层析,得到纯化礁膜凝集素（Monostroma nitidum lectin,MNL）,在SDS-PAGE上显示单一蛋白染色带. 用Sephadex G-200层析测得其分子质量为66.6 kD, 用SDS-PAGE测得其分子质量为66.2 kD．该凝集素可以凝集人A、B、AB、O型红细胞,且凝集活性相同. 在对人（A、B、AB、O）、兔、鲤、鲫、鼠、羊、鸡、狗的红细胞凝集作用中,兔凝集作用最强．该凝集素在pH 4.00～10.53范围内均有活性,但在pH 5.20～9.40范围内活性最大．经100 ℃热处理30 min后,该凝集素对兔红细胞血凝活性保留25%,活性最大的温度范围为25～55 ℃．MNL被EDTA抑制,最小抑制浓度为3.13 mmol/L,但对 Ca^２＋和Mg^２＋不敏感．该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D -果糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、γ-球蛋白、牛甲状腺球蛋白所抑制,但被D- 半乳糖和乳糖抑制,最小抑制浓度分别为5 mmol/L和2.5 mmol/L．     

四种蕈菌凝集素的筛选及活性检测

以长刺猴、白平菇、毛尖蘑、滑菇四种蕈菌为材料,经硫酸铵沉淀、透析,得到蛋白质提取液,用不同类型的红细胞检测凝集活性(人的A型、B型、AB型、O型血,兔血、鸡血、蛤蟆血)。结果表明,长刺猴、白平菇、滑菇3种蕈菌的提取物中均含有凝集素,桦树蘑对兔红细胞凝集性最强。凝集活性可分别被一种或多种类型糖所抑制。同时它们均表现出较好的热稳定性及pH耐受性,金属离子对凝集素的影响也相当大。     

骆驼蓬种子凝集素粗品活性的初步研究

采用硫酸铵分级沉淀法提取骆驼蓬种子凝集素粗品,并进行凝血活性和抗菌活性检测.凝血实验结果表明:(1)50%～60%硫酸铵饱和度下提取骆驼蓬种子的凝集素粗品对鸡红细胞的凝集活力最强,最低凝集浓度为0.6 mg/L,且其凝集素粗品的活力受温度、pH值、金属离子及糖溶液的影响.(2)不同硫酸铵饱和度沉淀获得的凝集素粗品对6种人体致病细菌及5种能引起水果腐烂和粮食霉变的真菌均有不同程度的抑制作用,其中50%～60%硫酸铵饱和度下提取的凝集素粗品抑菌活性最强,其浓度为1.071 mg/mL时对鲍曼不动杆菌和意大利青霉菌的抑菌环半径分别可达8.1 mm和4.9 mm.     

酪氨酸的不同化学修饰对黄精凝集素生物学活性的影响

凝集素作为一类非免疫原的糖结合蛋白,在与细胞的识别和结合中介导了一系列事件的发生,如促淋巴细胞有丝分裂、对肿瘤细胞的特异凝集、抑制病原微生物的生长等[1].凝集素的特性主要归因于其特异的糖结合活性,而特殊氨基酸对它保持这种结合活性是必需的.故确定这些特异的氨基酸是研究凝集素结构与功能关系的基础.化学修饰可以鉴别哪些氨基酸位于功能区[2].黄精凝集素(Polyg-onatumcyrtonemaHua.lectin,PCL)是具有多种生物学活性的糖蛋白,二硫键、巯基、色氨酸、金属离子并不影响其兔红细胞凝集活性[3].本文报道用不同试剂修饰酪氨酸,以研究…     

狗脊蕨凝集素的分离纯化与部分性质

狗脊蕨叶组织经磷酸缓冲液抽提,硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sepharose(fast flow)离子交换层析和Sephadex G-100分子筛层析,获得具有凝集活性的狗脊蕨凝集素.用PAGE和SDS-PAGE检测均显示1条蛋白带,提示狗脊蕨凝集素分子只有一个亚基.Sephadex G-100层析和SDS-PAGE测得其相对分子质量在20 kD左右.该凝集素对红细胞有种属专一性,其凝集活性可被木糖、卵粘蛋白所抑制.狗脊蕨凝集素对热相当稳定,以100℃温度加热10 min仍保存部分凝集活性.凝集活性不依赖于金属离子Mg2 、Ca2 、Mn2 .它的中性糖含量为3.1%,Phe含量较高,His含量较低,不含Tyr和Pro.     

泥蚶(Tegillarca granosa Linnaeus)血淋巴液凝集素的分离纯化及其性质研究

泥蚶是一种重要的海产经济贝类,其血淋巴液经硫酸铵二步分级沉淀后,再经Sephadex G- 100凝胶过滤和Sepharose 4B亲和层析纯化制得泥蚶血淋巴液凝集素。经测定,该凝集素分子量约为123Kda,为两个亚基的蛋白质,其相对分子量分别为15 KDa和16 KDa,分子中含5．02％的糖。在氨基酸组成中,天门冬氨酸(Asp)含量最高,其次是谷氨酸(Glu)和组氨酸(His),不含蛋氨酸(Met)。泥蚶血淋巴液凝集素对多种天然或经酶修饰的人或动物红细胞具有不同的凝集作用,其中对兔红细胞的凝集活性最大。半乳糖和乳糖对其凝集活性具有抑制作用。凝集活性依赖于Ca2 ,在pH7．0较稳定,热稳定性不高,在30℃-70℃时凝集效价由原来的25下降为21,当温度超过80℃以后,凝血活性完全丧失。     

孔石莼(Ulya pertusa)凝集素的分离纯化及性质的研究

为抑制肿瘤细胞增殖和防治有关病害提供基础理论依据,将孔石莼(Ulva pertusa)经磷酸盐缓冲液抽提,20%～75%硫酸铵分级沉淀,牛甲状腺球蛋白-Sepharose 4B亲和层析,可以从绿藻孔石莼中纯化出孔石莼凝集素(UPL),在PAGE上显示单一蛋白染色带,在等电聚焦电泳上显示单一蛋白染色带,其pI为8.40.纯化后的UPL的最大紫外吸收峰在285 nm,用Sephadex G-200分子筛层析测得其分子量为11 047.该凝集素可以凝集人的A、B、AB、O型红细胞,且凝集活性相同,在对人(A、B、AB、O)兔、鲤、鲫的红细胞的凝集作用中,兔的凝集作用最强.该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D-半乳糖、D-果糖、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖、γ球蛋白、卵清蛋白所抑制,仅被牛甲状腺球蛋白抑制,最小抑制浓度为6.20 g/L.该凝集素在pH4.0～10.14范围内均有活性,但在pH6.50～9.51范围内活性较高,该凝集活性在85℃加热1 h,活力仍未改变,说明具有很强的耐热性.     

国产兵豆中凝集素的分离纯化与生化特性的研究

从国产兵豆中用葡聚糖凝胶柱层析法分离出一种对人红细胞有凝集作用的凝集素,当其浓度为5—7μg/ml时即可引起血凝。通过电泳分析,分子量、氨基酸组成、糖与金属离子含量的测定,对其纯度进行了鉴定。比较了5种糖对此种凝集素血凝的抑制作用,结果以甲基α-D-甘露糖苷抑制能力最强,D-半乳糖无抑制作用。在交叉亲和免疫电泳中,此种凝集素能对多数原发性肝癌患者血清甲胎蛋白糖基有坟强的结合作用。     

孔石莼(Ulva pertusa)凝集素的分离纯化及性质的研究

为抑制肿瘤细胞增殖和防治有关病害提供基础理论依据 ,将孔石莼 (Ulva pertusa)经磷酸盐缓冲液抽提 ,2 0 %～ 75%硫酸铵分级沉淀 ,牛甲状腺球蛋白 - Sepharose4B亲和层析 ,可以从绿藻孔石莼中纯化出孔石莼凝集素 (UPL) ,在 PAGE上显示单一蛋白染色带 ,在等电聚焦电泳上显示单一蛋白染色带 ,其 p I为 8.40 .纯化后的 UPL的最大紫外吸收峰在 2 85nm,用 Sephadex G- 2 0 0分子筛层析测得其分子量为 1 1 0 4 7.该凝集素可以凝集人的 A、B、AB、O型红细胞 ,且凝集活性相同 ,在对人 (A、B、AB、O)兔、鲤、鲫的红细胞的凝集作用中 ,兔的凝集作用最强 .该凝集素凝集兔红细胞的作用不被 D-半乳糖、D-果糖、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖、γ球蛋白、卵清蛋白所抑制 ,仅被牛甲状腺球蛋白抑制 ,最小抑制浓度为 6.2 0 g/L.该凝集素在 p H4.0～ 1 0 .1 4范围内均有活性 ,但在p H6.50～ 9.51范围内活性较高 ,该凝集活性在 85℃加热 1 h,活力仍未改变 ,说明具有很强的耐热性 .     

Determination of stoichiometry of radioiodination of proteins

A sensitive method for the detection of small quantities of hydrophobic antioxidant free radical scavengers such as butylatedhydroxytoluene (BHT) and butylatedhydroxyanisole (BHA) in aqueous samples is described. The procedure involves extraction of the hydrophobic free radical scavenger into an organic solvent phase, followed by the subsequent reaction of an aliquot of this extract with the stable cation radical tris(p-bromophenyl)amminium hexachloroantimonate (TBACA). In experiments with BHT and BHA, the loss of TBACA absorbance at 730 nm was found to be linearly proportional to the amount of antioxidant added, with quantities of BHT as small as 200 pmol being easily detectable. In aqueous suspensions of dimyristoylphosphatidylcholine vesicles, assays of the aqueous BHT concentration showed that BHT partitioned strongly into the membrane phase, achieving very high BHT/phospholipid ratios. For a given concentration of BHT, partitioning into the membrane phase was greater in large, multilamellar liposomes than in either small, single-walled vesicles or in purified rat brain synaptic vesicle membranes. Direct assay of BHT and BHA in phospholipid membranes, however, was complicated by a nonspecific interaction between TBACA and the phospholipid.     

六种藓类植物茎的比较解剖学研究

通过对6种藓类植物,即褶叶青藓(Brachythecium salebrosum(Web.et Mohr.)B.S.G.)、湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum(Lindb.)Kop.)、侧枝匐灯藓(Plagiomnium maximoviczii(Lindb.)Kop.)、大凤尾藓(Fissidensnobilis Griff.)、大羽藓(Thuidium cymbifolium(Doz.et Molk.)B.S.G.)和大灰藓(Hypnum plumaeforme Wils.)嫩茎和老茎的石蜡切片和显微观察发现,同一藓类植株的嫩茎和老茎,茎结构稳定,不同种藓类植物茎横切面具有不同特征.植物体茎横切面形状、表层细胞的层数、细胞大小和细胞壁厚薄、皮层细胞大小和形状、中轴的有无以及比例等特征可以作为藓类植物的分科分类依据之一.