大鼠胰腺β细胞离子通道的一些特性

实验以单个Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰腺β细胞为对象,用穿孔膜片箝和细胞贴附式记录技术研究ＡＴＰ敏感Ｋ＾＋通道（ＫＡＴＰ）、延迟整流型Ｋ＾＋通道（ＫＤＲ）、Ｃａ＾２＋通道和Ｎａ＾＋通道的有关特性。结果表明：⑴ＫＡＴＰ通道的内流电导约６５ｐＳ,外流电导约３１ｐＳ,反转电位在－６０ｍＶ左右;⑵ＫＤＲ通道在延迟２０ｍｓ后达到最大激活,ＫＤＲ电流约为ＫＡＴＰ的１／３;⑶钙电流在０ｍＶ左右达到４０－６０ｐＡ的峰值,Ｌ     

剪切力诱导微血管内皮细胞K~+通道的开放

利用膜片针及内皮细胞流动小室方法对大鼠脑微血管内皮细胞在剪切力作用下内上细胞壁Ｋ＾＋通道的开放进行了初步研究。结果提示脑微务人皮细胞膜上存在剪切力敏感的Ｔ＾＋通道,剪切方作用后,内皮丰Ｋ＾＋电流明显增大,此电流有明显的短智延迟现象也可以被胞外施抑制,符合ＩＫＶ特征。流动剪切力可以影响内皮细胞膜上的Ｋ＾＋通道的开放引身 离子通透性的增加,进而引起细胞内Ｃａ６２＋的变化,在Ｋ＾＋、Ｃａ＾２＋等离子浓度     

心脏K^＋通道

Ｋ＾＋通道是生物膜上一种调节Ｋ＾＋流的跨膜蛋白质,广泛存在于各种可兴奋的细胞。在维持心脏正常功能方面发挥重要作用。本主要讨论内向整流Ｋ＾＋通道,延迟整流Ｋ＾＋通道,瞬进外向电流Ｋ＾＋通道,毒蕈碱／腺激活Ｋ＾＋通道,ＡＴＰ敏感性Ｋ＾＋通道的基本特性,及其在心脏电生理作用中的重功能,和相关的分子生物学信息。     

细胞外Ba^2＋对内向整流钾通道的阻断作用

实验采用双微电极电压箝（ＴＥＶ）法研究Ｂａ＾２＋对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道（ＩＲＫ１）的阻断作用。细胞外Ｂａ＾２＋浓度分别为０,１,３,１０和１００μｍｏｌ／Ｌ,Ｋ＾＋浓度分别为１０和９０ｍｍｏｌ／Ｌ,可见快速开通道阻断剂Ｂａ＾２＋对ＩＲＫ１的瞬间电流（施加电压后１ｍｓ）的阻断作用依赖Ｂａ＾２＋、Ｋ＾＋、时间和电压;但对ＩＲＫ１的开关特性几乎无影响,ＩＲＫ１对之不通透。三级指数拟合的结     

小鼠巨噬细胞电压依赖内向整流K~＋通道及GM－CSF的影响

采用膜片钳技术,在细胞贴附方式下确定并分析了昆明白小鼠腹腔巨噬细胞电压依赖的内向整流型Ｋ＋通道（Ｋｉｒ）及其基本特性。当电极液含１４５ｍｍｏｌ／ＬＫ＋,保持电位Ｖｐ在－３０ｍＶ以上时,该通道电流发放,电导为４３ｐＳ。改变［Ｋ＋］ｏ,通道外延的反转电位Ｅｒｅｖ接近于封接膜片两侧的Ｋ＋平衡电位Ｅｋ,单通道电导正比于［Ｋ＋］ｏ的平方根,但不同［Ｋ＋］ｏ下,激活通道所需驱动电位ＶＤ相同。单通道显示电压敏感性,具有长短两个开放状态和两个关闭状态。除膜电位外,［Ｋ＋］ｏ是此型通道的另一个门控因素,且在膜电位超极化增高的情况下,其作用更加显著。以粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子ＧＭ－ＣＳＦ（１６ｎｇ／ｍｌ）预浴细胞４８小时,该通道开放概率Ｏ．Ｐ．显著升高,通道激活所需驱动电位的阈值显著下降,通道活动更加频繁。     

细胞外Mn^2＋对内向整流钾通道（IRK1）的阻断作用

目的和方法：采用双微电极电压钳（ＴＥＶ）法研究细胞外Ｍｎ＾２＋对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道（ＩＲＫ１）的阻断作用。结果：细胞外Ｍｎ＾２＋浓度分别为１、１．２５、２．５、５、１０和２０ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｋ＾＋浓度为９０ｍｍｏｌ／Ｌ,可见Ｍｎ＾２＋对ＩＲＫ１的瞬间电流（旋加电压后２ｍｓ）具有Ｍｎ＾２＋浓度依赖性和电压依赖性阻断作用;细胞外加Ｍｎ＾２＋浓度较高时强;细胞外Ｋ＾＋浓度为９０ｍｍｏｌ／     

一种只有一个跨膜域的离子通道蛋白

ＩｓＫ蛋白只含有一个跨膜域,但具有电压依赖的慢Ｋ＾＋通道活性。突变分析表明,ＩｓＫ蛋白本身就构成了Ｋ＾＋通道,提示存在一类新的电压依赖性通道蛋白。     

高渗震动对杜氏盐藻细胞跨膜K^＋运输的影响

杜氏盐藻细胞吸收Ｋ＾＋的Ｋｍ为２．８６ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍａｘ为１．３９μｍｏｌ／１０＾８ｃｅｌｌｓ．ｈ。钒酸钠和ＤＥＳ、ＣＣＣＰ、Ｌｉ＾＋抑制藻细胞对Ｋ＾＋的吸收。高渗震动促进藻细胞Ｈ＾＋的分泌,降低Ｋ＾＋的吸收速率,ＣＣＣＰ和Ｌｉ＾＋减弱了高渗震动对藻细胞Ｋ＾＋吸收的抑制。高渗震动对藻细胞Ｋ＾＋分泌有轻微的抑制作用。     

渗透胁迫对高粱根中K^＋累积的刺激作用

本工作中发现,２,４－二硝基酚可有效地洗去高粱根中的Ｋ＾＋,从而提高了测定和比较Ｋ＾＋累积量的显示度和准确性,渗透胁迫下,高粱根中Ｋ＾＋的累积量比对照增加高达６．７倍;同时,组织的Ｈ＾＋分泌明显受到促进,动力学研究表明,经ＰＥＧ胁迫的高粱根对Ｋ＾＋的亲和力显著增强。对照：Ｋｍ＝９．２５ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍ＝２３．６μｍｏｌ ｇ＾－１ＤＷ ｍｉｎ＾－１;ＰＥＧ处理者：Ｋｍ＝２７．２５μｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍ     

电融合构建嗜杀啤酒酵母及其发酵性能的研究

以ＭＫ２－３：Ｋ＾＋Ｒ＾＋ｌｅｕ＾－ｐ＾＋（ｎ）为供体菌,ＡＳ２４２０－１;Ｋ＾－Ｐ＾－ｌｅｕ＾＋ｐ＾０（２ｎ）为受体菌,通过电融合技术构建一批嗜杀啤酒酵母。其中４株融合子具有较高的嗜杀活性,对这４株融合子的遗传性状、ＤＮＡ含主细胞大小、形态、嗜杀质粒ｄｓ－ＲＮＡ提取及电泳等研究表明,这４株菌具有双亲的互补性。对其中ＭＡＲ１的进一步实验表明,ＭＡＲ１的某些发酵性能接近甚至优于亲株ＡＳ２４２０－１,     

cGMP对原代培养猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

３′,５′－环－磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）具有激活血管平滑肌细胞膜上钙激活钾通道（ＫＣａ通道）的作用,从而引起血管平滑肌细胞的舒张。但ｃＧＭＰ激活ＫＣａ物机制存在争论。本工作应用膜片箝技术以原代培养猪冠状动脉平滑肌细胞为对象研究了ｃＧＭＰ影响ＫＣａ通道的机制。实验结果显示：（１）在ｃｅｌｌ－ａｔｔａｃｈｅｄ膜片方式下,当溶液内游离Ｃａ＾２＋浓度为１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ,膜电位为＋７０ｍＶ时,不同浓度的ｃＧ     

两类Ca^2＋通道拮抗剂对脑缺血时Ca^2＋／CaM PKhⅡ活性抑制的保护 …

本文以蒙古沙土鼠双颈总动脉结扎（ＢＣＡＯ）前脑缺血模型Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性变化为指标,研究了以氯胺酮（ＫＴ）、右美沙芬（ＤＭ）、苄丙咯（ＢＰ）及硝苯吡啶（ＮＤ）为代表的配体门控Ｃａ＾２＋通道（ＬＧＣＣ）及电压门控Ｃａ＾２＋通道（ＶＧＣＣ）两类Ｃａ＾２＋通道拮抗剂对缺血性脑损伤的保护作用。结果如下：（１）脑缺血后,胞浆型及颗粒型Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性均明显下降;（２）缺血前单独用药     

过氧化氢对蚕豆气孔运动和质膜K^＋通道的影响

不同浓度Ｈ２Ｏ２可使蚕豆（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ Ｌ．）叶片气孔关闭,抑制气孔张开,１０ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２最有效,１０μｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２仍明显使气孔关闭。且１０μｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２抑制气孔张开作用能被ＥＧＴＡ所消除,表明Ｃａ＾２＋参与低浓度Ｈ２Ｏ２使气孔关闭的过程。２ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２可使质膜内向Ｋ＾＋通道电流明显减小而外向Ｋ＾＋通道电流显著增加。因此,Ｈ２Ｏ２促进蚕豆气孔关闭主要是通     

植物质膜钾离子转运体研究进展

近年,随着分子生物学技术的不断发展和广泛应用,有关植物质膜钾离子转运体的研究取得重要进展。目前已经克隆到多种质膜钾离子转运体基因并对钾离子转运体生化特性以及结构功能进行广泛研究。研究认为,质膜钾离子转运体可分为钾离子载体和钾离子通道。钾离子通道又可分为内向性Ｋ＾＋通道α亚基、Ｋ＾＋通道β亚基及外生Ｋ＾＋通道等三类。本文对上述质膜钾离子转运体的生化特性以及结构功能研究的进展进行了综述。     

浅述几类K+通道的研究新进展

近些年来,随着生物技术的革新,有关Ｋ＾＋通道的分型、生理调控功能及其分子结构特征、所涉及的遗传或非遗传性通道疾病、特异或非特异性配体及其在通道上的靶结合位点等方面的知识已获得了长足的推进。本文将对几类Ｋ＾＋通道的基因分类及功能特征等方面的研究新进展作一简要的介绍。     

腺苷对缺氧时海马神经元内游离Ca^2＋的影响

实验用Ｆｌｕｏ－３负载细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下直接监测缺氧后分散培养的大鼠海马ＣＡ１区神经元内游离Ｃａ＾２＋浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）的变化,观察腺苷对这种变化的影响并初步探讨其作用机制。结果发现,急性缺氧使海马神经元［Ｃａ＾２＋］ｉ显著升高;腺苷（１００μｍｏｌ／Ｌ）明显抑制缺氧引起的［Ｃａ＾２＋］ｉ增高,腺苷Ａ１受体拮抗剂ＣＰＴ以及Ｋ＾＋通道阻断剂４－ＡＰ和ＡＴＰ敏感性Ｋ＾＋通道阻断剂ｇｌ     

乙型肝炎病毒preC／C基因在杆状病毒载体系统中的表达

通过ＰＣＲ获得长度为６４０ｂｐ的ＨＢＶ ｐｒｅＣ／Ｃ基因片段,将其克隆入转移载体质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＾＋Ｘ３／４,构建出重组质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＾＝Ｘ３／４－ｐＣ＝Ｃ。利用共转染的方法,构建出既能形成多角体又能表达ｐｒｅＣ／Ｃ基因的重组毒株ＴｎＮＰＶ－Ｃ／Ｃ－ＯＣＣ＾＋。该重组毒株中ｐｒｅＣ／Ｃ基因受到串联的双启动子－合成启动子和含ＨｉｎｄⅢ接头的ＸＩＶ启动子的双重调控。     

大脑皮层神经元NMDA受全的单通道特性

本文和膜片箝技术对机械分离培养的大鼠大脑皮层神经元胞ＮＭＤＡ受体的单通道特性进行了研究,实验用细胞贴附和内面向外两种形式记录单离子通道的活动。电极液内含有ＮＭＤＡ或Ｌ－门冬氨酸时,在皮层神经元上常见电导为３５ｐＳ的离子通道。通道对Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋非选择必通透,对Ｃｌ＾－不通透,其平均开放时间和开放概率随超极化程度增大而降低。开放、关闭时间及ｂｕｒｓｔ时程的分布直方图均需双指数拟合。Ｍｇ＾２＋以电压     

海马神经元膜片与细胞分离前后nAChR通道特性的改变

目的和方法：在新生大鼠海马神经元上,用膜片钳技术研究了乙酰胆碱受体单通道特性,离子选择性及细胞内物质对通道活动的影响。结果：该通道对单价阳离子通透,对Ｎａ＾＋和Ｋ＾＋的通透性相近,但不通透Ｃｌ＾－。     

钾离子对盐诱导菠菜甜菜碱累积的影响

无钾条件下盐胁迫处理菠菜幼苗所诱导的甜菜碱积累量及甜菜碱醛脱氢酶活性均比含钾条件下盐处理时低。无Ｋ＾＋２离体叶片可引起组织甜菜碱含量下降;用无Ｋ＾＋培养或Ｋ＾＋通道抑制剂ＴＥＡ处理菠菜幼苗,ＢＡＤＨ活性随处理时间延长出现下降。