苏芸金杆菌杀虫剂的效残期研究

苏芸金杆菌是七十年代以来,国内外微生物农药中应用最广,施用面积最大的一种细菌农药。这种农药中主要含有苏芸金杆菌的芽孢和蛋白质晶体毒素,但起杀虫作用的主要成份是后者。近几年国内关于田间自然气候因子对该菌芽孢活性的影响试验有过一些报道,但对蛋白质晶体毒素活性影响的研究却很少。为了探索苏芸金杆菌的使用技术,提高防治效果,我们选用了三种不同血清型的苏芸金杆菌制剂,对其残效期进行了测定。     

我国部分地区土壤中的苏芸金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌

从云南、贵州、四川和陕西4省的土壤中分离到大量苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringie—nsis)和球形芽孢杆菌(Bacillus sphaeticus)菌株。血清型分析表明,苏芸金芽孢杆菌分离株分属于23个血清型中的13个血清型,另有近20％的自凝型菌株及部分与所有标准菌抗血清无反应的菌株。对该两种昆虫病原细菌的生态分布规律进行了分析。研究了全部苏芸金芽孢杆菌分离株对鳞翅目、鞘翅目及双翅目的6种昆虫的毒力特性、伴孢晶体与芽孢的形态,以及晶体蛋白质成分。观察和测定了球形芽孢杆菌分离株的形态和毒力,并分析了部分菌株的晶体蛋白质成分。得到22株高效苏芸金芽孢杆菌和2株高效球形芽孢杆菌。证明苏芸金芽孢杆菌是典型的土壤微生物类群,我国西南地区土壤中的苏芸金芽孢杆菌资源十分丰富。     

苏芸金杆菌生长的氨基酸需求

苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)在葡萄糖无机盐合成培养基上生长不好,很少形成芽孢。Angus和Norris Dulmage发现,苏芸金杆菌在不同培养基上获得的苏芸金杆菌制备物的杀虫活性不同,表明营养条件对苏芸金杆菌生长、芽孢晶体合成有重大影响。本研究用苏芸     

菜青虫感染苏芸金杆菌HD-1血淋巴的生理变化

<正> 苏芸金杆菌Bacillus thuringiensis Berl是一类对多种害虫有致病能力的芽孢杆菌,研究害虫感染以后的病理有重要意义。我们利用苏芸金杆菌HD-1菌粉液浸渍甘蓝叶片喂饲菜青虫,观察染病中毒过程中的症状,并分析在不同染病状态下血淋巴的生理变化,从而进一步研究苏芸金杆菌的致病机理,以便为筛选出对害虫更有毒杀能力的苏芸金杆菌品系或菌株提供理论依据。     

脱氧核糖核酸在炭疽杆菌和腊样菌与苏芸金芽孢杆菌之间的关系

<正>炭疽杆菌,腊样杆菌和苏芸金杆菌已被证明为需氧芽孢杆菌属中三个明显不同的种,因为它们在病原性和一些其它特性方面不同。但也广泛认为它们是非常相似的。事实上一些病原菌可以产生非病原性的子代,与正常的腊样芽孢杆菌很难区别。一些腊样芽孢杆菌与苏芸金芽孢杆菌共同具有某些鞭毛抗原,后者的另一特性是形成细胞内的蛋白结晶。现巳知道枯草芽孢杆菌亦有些类蛋白结晶。Smith和Gordon等在其综合性     

全长δ—内毒素cryIA（c）基因在三种原核细胞中的表达

采用随机引物法标记苏芸金芽孢杆菌δ-内毒素cryIA(b)基因:从苏芸金芽孢杆菌HD-73质粒基因文库中筛选到了分别包含δ-内毒素cryIA(c)基因5’端和3’端的6.5kb和4.3kb两个片段,然后分别缺失其非编码区,重连得到全长3.92kb的crylA(c)基因,用穿梭载体pHT3101亚克隆后分别转化大肠杆菌NM522、枯草杆菌AS1176及苏芸金芽孢杆菌晶体缺陷型4D10(H3ab),得到了具有同一质粒的三种工程菌。SDS-PAGE电泳表明此基因在三个宿主系统中均表达了分子量为133300的原毒素,分子量大小与苏芸金芽孢杆菌HD-73晶体蛋白完全相同,免疫检测表明表达蛋白和天然晶体蛋白具有相同的免疫原性。用提取的粗表达产物对二龄小菜蛾幼虫作杀虫试验,证明三种细胞产生的表达蛋白均具有杀虫活性,测得它们的LD_(50)分别为0.311μg/cm~2、0.024μg/cm~2和0.017μg/cm~2。     

全长δ-内毒素cryIA?基因在三种原核细胞中的表达

采用随机引物法标记苏芸金芽孢杆菌δ-内毒素cryIA(b)基因:从苏芸金芽孢杆菌HD-73质粒基因文库中筛选到了分别包含δ-内毒素cryIA?基因5’端和3’端的6.5kb和4.3kb两个片段,然后分别缺失其非编码区,重连得到全长3.92kb的crylA?基因,用穿梭载体pHT3101亚克隆后分别转化大肠杆菌NM522、枯草杆菌AS1176及苏芸金芽孢杆菌晶体缺陷型4D10(H3ab),得到了具有同一质粒的三种工程菌。SDS-PAGE电泳表明此基因在三个宿主系统中均表达了分子量为133300的原毒素,分子量大小与苏芸金芽孢杆菌HD-73晶体蛋白完全相同,免疫检测表明表达蛋白和天然晶体蛋白具有相同的免疫原性。用提取的粗表达产物对二龄小菜蛾幼虫作杀虫试验,证明三种细胞产生的表达蛋白均具有杀虫活性,测得它们的LD_(50)分别为0.311μg/cm~2、0.024μg/cm~2和0.017μg/cm~2。     

苏芸金杆菌五个菌株的晶体蛋白研究

六十年代以来,国外在利用电泳方法研究苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)不同菌株的致病机理方面,做了许多工作。Lecadet曾用含尿素的凝胶电泳和纸电泳研究了血清型Ⅰ的B.t.芽孢和晶体。Somerville等以Alesti为材料,用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行研究。Cooksey以Galleriae、Sotto、Morris、Tolworthi为材料,用圆盘电泳法研究了提取毒蛋白(芽孢、晶体混合物)、晶体蛋白毒素和晶体蛋白溶解物。Glation以B.T.Berliner为材料,用Davis与SDS电泳法进行研究。本文主要报道了用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳研究的苏芸金杆菌不同菌株晶体蛋白的图谱。     

自然光照对天门杆菌杀虫活性的影响

关于紫外线对苏芸金杆菌制剂活性的影响,已有很多报道,但多为芽孢存活数的观察。本文报道在自然光照条件下,天门杆菌芽孢和     

苏芸金杆菌浓缩液的保存和不用二甲苯的防腐剂配方

在苏芸金杆菌浓缩商品制剂中,通常含有3—4％的二甲苯以防止芽孢的萌发。除此以外,二甲苯还能防止各种腐生微生物污染,尤其是肠杆菌和真菌。最近,一种用苏芸金杆菌血清型H3a3b制备的称为Futufa的超浓缩液已经问世,其中不含二甲苯,用于防治枞色卷蛾(属鳞     

苏芸金芽孢杆菌HD-1质粒基因文库的构建

本文报告以λ系列charnn 28为载体,通过限制核酸内切酶Bam HI部分酶解获得“目的”质粒DNA片段,构建了苏芸金芽孢杆菌HD—1的质粒DNA基因文库,所得重组子值超过要求的理论值。为进一步研究苏芸金杆菌HD—1的基因结构以及基因功能奠定了基础。     

苏芸金杆菌制剂的生产和应用

一、苏芸金杆菌制剂的生产苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)1930年前后用于生物防治,最早的商品制剂Sporeine于1938年在法国开始生产。1960年后,美、苏、加、捷、比等国相继投产。目前,商品制剂已达20多种。我国自1959和1961年先后引进苏芸金杆菌和青虫菌,1970年前后,在湖北、上海、湖南、河北等省市建立起生产苏芸金杆菌制剂的专门工厂或车间。苏芸金杆菌制剂的生产方法主要有液体深层发酵     

一些有尾噬菌体的形态和结构

以不同菌株(卡那霉素链霉菌、金色链霉菌、水稻白叶枯病菌、钝齿棒状杆菌、多粘芽孢杆菌和苏芸金杆菌)为寄主分离、选择不同类型有尾噬菌体,在电镜下观察它们的尾部和头部结构。根据负染色造成反差的强弱,结合空壳的构型,利用几何图形作图,可以正确识别噬菌体头部形态,并进行了讨论。此外,还发现苏芸金杆菌上一种尾部末端特殊结构的噬菌体。     

我国西南地区和陕西省土壤中苏芸金杆菌和球形芽孢杆菌资源调查简报

为考察我国土壤中苏芸金杆菌和球形芽孢杆菌的种类和分布状况,并从中获得高效和特异菌株,丰富我国杀虫微生物种质库,1988年6—8月,我们从云南、贵州、四川及陕西省采取土样3160份,从中分离出苏芸金杆菌88株,球形芽孢杆菌87株,还有部分菌株尚待确认。两种细菌的分出率(分离菌株数占土样数的百分率)皆为2.8％左右。由于在进行分离时,同一平板挑取的目标菌落一般不超过2个,因此这一分出率要低于土壤中的实际含有率。按常规免疫血清学方法进行初步血清型分析,结果表明,苏芸金杆菌分离     

苏芸金杆菌的一个新血清型

从土壤中分离出一株产生伴孢晶体的芽孢杆菌。该菌株具有苏芸金杆菌的典型特征,严生不规则型晶体,鞭毛抗原及生化反应与已知的苏芸金杆菌21个血清型不㈤,不产生β-外毒素。对棉铃虫、粘虫、大蜡螟及尖音库蚊幼虫均无毒性,是一个新血清型(H22),定名为苏芸金杆菌山东变种(Bacillus thuringiensis serovar shandongiensis, H22)。     

苏芸金杆菌伴孢晶体和芽孢孢衣的蛋白质组分及其与毒力的关系

研究了苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)3个变种6个菌株的提纯伴孢晶体和芽孢对大蜡螟(Galleria mellonella)和大菜粉蝶(Pieris brassicae)的毒力、晶体的蛋白质和多肽成分及芽孢衣中的类晶体蛋白质成分.生物测定表明,晶体毒力高于芽孢,在总数量相同的情况下,晶体和芽孢近1:1的混合物的毒力高于单独的晶体或芽孢.芽孢衣中存在一种类似晶体蛋白质的成分,无晶体突变株及无效野生株的芽孢则无此种蛋白质且对两种昆虫无毒.变种wuhanensis和变种galleriae的晶体含MW138000的主要蛋白质和63000的次要蛋白质,经碱性缓冲液溶解后,上清液含MW138000的蛋白质,沉淀中含MW63000的蛋白质;变种aizawai的晶体中仅含138000的蛋白质.对大蜡螟无毒的HD-11(var.aizawai)晶体的蛋白质成分有别于上述晶体,其胰蛋白酶消化物的SDS凝胶电泳图型显示少2条多肽带,但对大菜粉蝶仍有效.结果表明,苏芸金杆菌的芽孢在昆虫病理中有重要作用,伴孢晶体的蛋白质和多肽成分与它们对昆虫的毒力特性之间有密切关系.     

在国内初次发现的四个苏芸金杆菌亚种

本文报道的五个菌株均是能形成伴孢晶体的芽孢杆菌。从形态与培养性状上看,具有苏芸金杆菌的典型特征。经生化反应与鞭毛抗原的血清反应,证明这五个菌株分属于国内未报道过的四个亚种:菌株L_1为加拿大亚种(B.     

碳、氮、磷三因素对苏芸金杆菌的影响

近年来,Yousten,Rogoff,Aronson等人对于苏芸金杆菌的基本营养需要、代谢途径、伴孢晶体形成的基本要求和抑制晶体形成的因素等方面作了研究,为苏芸金杆菌制剂的生产提供了生理学依据。可是有关苏芸金杆菌对于     

苏芸金杆菌以色列变种在不同培养基上的产毒能力

苏芸金杆菌以色列变种(Bacillus thuringiensis subsp.israelensis)对蚊幼虫的杀虫活性,主要在于蛋白质晶体,而营养条件对晶体的合成有着重要影响。据研究,苏芸金杆菌不同血清型对培养基的要求各有差异。关于适合苏芸金杆菌以色列变种产生毒力的培养基,特别是     

“140”杀虫菌的大池通风培养法

“140”芽孢杆菌是湖北省微生物研究所虫生菌组从棉花小遗桥虫上分离到的一株杀虫茵。1976年10月湖北省科委在湖北省安陆县召开过该菌的鉴定会。实践证明该菌对多种农、林、果、蔬害虫具有较好的毒杀作用。鉴定会指出:该菌无鞭毛,不运动,无H抗原,区别于苏芸金杆菌各变种,定名为苏芸金杆菌无鞭毛变种。该菌在全国十个省市进行了大面积应用试验。下面两篇文章,介绍该菌的土法生产,供参考交流。