小鼠骨髓细胞的染色体制备

在实验教学中,我们借鉴有关方法,经过多次实践,证明用小鼠骨髓细胞作动物染色体的制备实验,方法简便可靠,结果明显.现介绍如下,供高等院校或中学生物学实验参考. 1.前处理实验用小白鼠(重25克左右),腹腔注射0.1毫升0.1％的秋水仙素溶液. 2.取材注射后2.5—3小时,用乙醚将小鼠麻醉(或直接处死小鼠),立即取出股骨,剔净肌肉. 3.低渗用剪刀将股骨两端剪开,用注射器吸入1毫升0.05M氯化钾低渗液,插入一端,冲洗出骨髓细胞,滴于培养皿中的载玻片上(载玻片置于二根玻棒之上).再加入适量的低渗液,并用滴管展开.盖上培养皿,在37℃下低渗处理20分钟. 4.固定低渗后,往培养皿中缓缓注入甲醇、冰醋酸固定液(3:1),盖上培养皿,固定100分钟.换入无     

杜仲含胶细胞的整体观察

用常现石蜡制片法及变性试剂（澳一碘一冰醋酸）处理,虽然可以观察到杜仲含胶细胞在植物体中的分布部位、密度及直径等,但很难观察到含胶 细胞的整体特征。采用整体透明法,可对合胶细胞整体特征进行观察以获得比较满意的效果,现将制片过程介绍如下：1．配制溶液配制10％的Na0H溶液和澳．碘冰醋酸试剂（碘2．5克,漠1．25克,冰醋酸加至100毫升）。2．取材及变性处理取新鲜的杜仲叶片,用清水冲洗干净,根据观察要求切成小块,放入盛有变性试剂的瓶中（变性试剂大约为材料的20－30倍）,处理48小时,为加速渗透可抽气约5分钟。3．透…     

一种适于课外活动的垂直板培养法

取10×30×0.3厘米玻璃2块,中间铺2—4层普通滤纸,滤纸的一侧粘一条座标纸,选饱满无病种子(先在冷水中预浸5—10小时)胚端朝向一侧整齐地摆放在滤纸上一行或多行,盖上另一块玻璃,浸水端用皮筋固定,上端用铁夹固定,保证种子不移位,将此板插入水中,水面稍低于种子。每隔3天换水一次。为防止发霉,种子及一切用具最好用消毒水消毒。用垂直板可进行下述多项实验: 1.比较不同种子的萌发速度作水稻、小麦、玉米、菜豆等种子垂直板各一块,下端浸入清水中,在25℃条件下避光培养。2—3天后观察各类种子的萌     

常见霉菌的简易培养

1　材料用具　长有根霉、青霉或黄曲霉的馒头、葡萄、玻璃培养皿、解剖针和吸管等。2　培养方法　 1)洗净培养皿、解剖针和吸管。 2 )取 1块刚吃剩的馒头 ,掰成片状 (厚约培养皿高的 1/ 2 ,大小约为培养皿面积的 1/ 2 ) ,置于培养皿内 ,作为培养基。3)将几粒葡萄去皮和种子后 ,置于适量清水中揉碎成汁。 4 )用吸管吸取葡萄汁溶液 ,滴到培养皿中的馒头上 ,直到饱和为止。葡萄汁溶液能促进霉菌的生长。 5 )用解剖针从发霉的食品上挑取青霉的孢子 ,涂于培养皿的馒头表面。重复 4～ 5次后 ,盖上培养皿盖。 6 )重复5 ) ,接种根霉和黄曲霉 ,最后将…     

腺苷酸库及能荷变化与白菜种子萌发的关系

我们测定了大白菜种子萌发时 ATP、ADP、AMP 及E.C.值的变化。结果表明,干种子中 ATP 的含量很低,大量的是 AMP,E.C.值很低。吸胀1小时后 AMP 迅速转变成ATP,E.C.值急速地上升。吸胀2小时后 ATP 增加为干种子时的35倍多,E.C.值超过0.5。24小时仍未萌发的种子,其 ATP 含量比24小时内已萌发的种子低4倍,E.C.值也明显低。在3%O_2中萌发的种子内源 ATP 水平下降,只有将种子再转入空气继续萌发,ATP 恢复到对照(在空气中萌发)的水平时,发芽率才提高到76%。最初1至2小时在3%O_2中或在5×10~(-4)M DNP、1×10~(-5)M CCCP、5×10~3 M IAC 中浸种,ATP 的合成受到抑制,E.C.值也显著降低,其中尤以碘代乙酸处理为甚。实验表明种子萌发与 ATP 水平、E.C.及能库的大小有密切的关系。     

S3307对玉米种子萌发及幼苗生长的影响

玉米 (Ｚｅａｍａｙｓ)品种苏玉 1号种子 ,分别用不同浓度Ｓ330 7(浙江省农科院生化实验厂生产的 5 %乳剂 )溶液浸种 (以清水作对照 ) 5ｈ ,经清水冲洗后在室温条件下催芽。盆栽试验 :从各处理中挑选发芽均一的种子于 5月 2 1日播种 ;田间试验 :于 5月 30日将各处理生长均匀的秧苗移入大田。种子萌发3ｄ测定发芽势 ,6ｄ测定发芽率 ,移栽当日各处理随机取样 2 0株进行秧苗素质考测。栽入大田 1 3ｄ时 ,各处理取样 1 0株测定株高、茎粗、叶挺长、干鲜重及根冠比等植株形态指标。获得如下结果 :1 .2 0～ 5 0ｍｇ·Ｌ-1Ｓ330 7浸种后 ,玉米的发…     

豇豆上胚轴切段培养成苗

植物名称:豇豆(Vigna sinensis)。品种:鹰嘴红、杭州豇豆材料类别:上胚轴(种子经70％酒精2分钟、饱和漂白粉液16分钟消毒后,在1/2 MS培养基中黑暗条件下萌发出幼苗。取8天龄幼苗上胚轴上部约2.5—3cm,切成 2—2.5mm切段)。培养条件:2/3 MS 6-BA 1.5mg/1(单位下同) IBA0.5 蔗糖 2％ 活性炭0.3％ 琼脂0.6％,黑暗下培养20天后,再在每天光照11小时,光强     

萌发的种子吸收O_2和放出CO_2的实验

把小麦种子浸泡12小时左右,在垫有湿滤纸的培养皿中使其萌发露白。分装在二只试管内约达3厘米深。把乙试管加些水,在酒精灯上煮沸5分钟,把水倒掉。再用少许药棉塞在试管内,挡住种子。另在250毫升烧杯内装入2％氢氧化钠溶液30—50毫升,并滴进几滴酚酞,溶液呈粉红色,然后将装有种子的两根试管     

60Coγ射线种子辐射对中华猕猴桃组织培养幼苗生长的效应

中华猕猴桃（Actinidia chinensis Planch．）种子的辐照处理在河南省科学院同位素研究所钴源室进行,照射剂量分别为0、50、100、150和200Gy,剂量率为0．5Gy．min^-1。辐照之后的种子用13％的次氯酸钠消毒20min,再用无菌水冲洗3次后,播入铺有滤纸的灭过菌的培养皿中。种子萌发后,选取整齐一致的种子于MS培养基中培养。培养条件为：温度26℃,光照时间12h．d^-1,光强约为30gmol．m^-2．s^-1。试验采用完全随机设计,共5个处理、重复6次。得到如下结果.     

枯枝牡丹的组织培养

植物名称:枯枝牡丹(Paeonia suffruticosa)材料类别:(1)采用盐城卞仓的枯枝牡丹植株的腋芽,于消毒后剥取长约2—3mm的茎尖。(2)将枯枝牡丹种子无菌萌发后,切取上胚轴,长约3mm。培养条件:以MS为基本培养基。(1)腋芽茎尖的诱导培养基.附加BA2mg/L(单位下同),NAA0.2,LH500,蔗糖50g,琼脂粉5g;(2)胚轴的诱导培养基:附加BA2,NAA0.2,LH500,蔗糖80g,琼脂粉5g;(3)生根培养基为1/2MS,附加IAA1,IBA1,蔗糖20g,琼脂粉5g。     

扇贝兰的离体繁殖

1植物名称扇贝兰（Epidendrumcochleatum）。2材料类别成熟葫果中的种子。3培养条件（1）播种培养基为N6;（2）增殖培养基为VW“‘＋6－BA0．5mg／L;（3）壮苗和生根培养基为N。＋10％香蕉汁。培养基中含3％蔗糖、0．7％琼脂,PH5．4。培养温度为25士ZC,每日光照8h,光照度为1800IX。毛生长与分化情况取已停止生长的绿色葫果,先用75％的酒精浸泡30S后再放入10％次氯酸钠溶液中消毒20min,无菌水冲洗4～5次。切开果实,取果内白色粉末状种子接种于培养基（1）上。一个月左右,部分种子由黄变绿并逐渐形成原球体,再经20d左右的培养…     

“春丰1号”厚皮甜瓜的组织培养和快速繁殖

1植物名称日本引进的厚皮甜瓜（Cu－cumismelovar.reliculatus)品种“春丰1号”。2材料类别种子。3培养条件种子先用75％的乙醇浸30s,再用0．1％的HgCl2浸泡10min,最后用无菌水冲洗4遍后,接种在不添加激素的MS固体琼脂培养基上,7－10d后萌发长成实生苗。将实生苗基部第3和第4节位单节切段,分别接种到不同配方培养基中,生长20d,再将试管苗单节切段,接种在相同的培养基上,25d后统计试管苗数,同时观察试管苗的形态学变化。生根培养是将单节切段接种到生根培养基上,25d后统计生根率和根条数,所有处理的样本量均为10株试管苗,3次…     

N-(1-萘乙酰基)-,N’-(4-氨替吡啉基)硫脲对小麦幼苗的几种生理效应

小麦（Triticumaestivum）品种温－2540的种子用0．1％的HgCl2灭菌10min，每份取300粒，分别用N－（1－萘乙酸基）－，N’－（4－氨替吡啉基）硫脲（NAT，先用少量二甲亚砜溶解后，再溶于蒸馏水中）和NAA各50、10、1．0、0．1mg·L－1及蒸馏水浸种17h后，播于铺有3层滤纸的培养皿中，加等量蒸馏水，于25℃培养箱中萌发。胚芽鞘伸长至一定长度后转移到培养缸的尼龙网上，于人工光照箱中进行水培（Hoagland完全营养液，25℃，每天光照11h，光照度1400lx）。苗展开叶片时，喷施与浸种相对应浓度的药液。种子萌发72h时，随机取30粒，用精…     

一种霉菌放线菌悬滴标本的制作方法

青霉(Penicillium)、曲霉(Aspergillum)和放线菌(Actinomycetes)是中学植物实验课必需的实验材料。本人经过摸索,为中学制作出霉菌、放线菌活体悬滴标本和永久装片,很受中学老师们的欢迎,在中学简陋条件下很易制作,效果极佳,现介绍如下。 1.悬滴活标本的制作方法 (1)倒平板 100毫升水中加2克琼脂,煮开使琼脂溶化,待凉至40℃左右(不烫手为度),将该液态琼脂培养基倒入直径90毫米的培养皿中,每皿倒培养基15—20毫升左右,约2—3毫米厚。待琼脂凝固(5—10分钟左右)     

GA3对小麦种子α-淀粉酶诱导形成测定方法的改进

GA3对小麦种子α-淀粉酶诱导形成实验通过外加赤霉素溶液与清水（对照）处理小麦种子24h后萌发1d,比较其α-淀粉酶活性,可了解赤霉素在种子萌发过程中有诱导α-淀粉酶形成的作用。但是,在教学中,我们发现按照张志良和瞿伟菁（2003）主编的《植物生理学实验指导》一书中的方法各用一个调零校对对2组样品进行测定会导致实验结果的可比性降低,     

人参种胚培养中再生植株

植物名称:人参Panax ginseng 材料类别:种胚。取低温沙藏后熟的裂口种子,剥去外亮,先用5％安替福民溶液消毒二十分钟,而后用0.1％升汞溶液灭菌二十分钟,无菌水冲洗3—4次,在超净台上从胚乳中剥出胚,接种在琼脂培养基上培养。培养条件:MS或B_5基本培养基,蔗糖3％,琼脂0.7％,蛋白陈500mg/1。附加激素有BA、NAA和GA。其中赤霉素直接加入培养基,灭菌三十分钟。一般室内培养,温度20—28℃左右,每天光照16小时。生长和分化情况:开始将种胚接种在每升附加2mg BA和 0.5mg NAA的培养基上,一周左右,     

兔眼越桔幼苗胚轴、子叶诱导再生植株

植物名称:兔眼越桔(Vaccinium ashei)材料类别:无菌苗胚轴、子叶。无菌苗培养:种子用70％酒精浸泡1分钟后,转移到10％的漂白精片过滤液中灭菌15分钟,再用无菌水冲洗三次,接种于0.5％琼脂上,培养温度为25～28℃,光强为2,000lx,每日光照16小时。培养3～4周后幼苗高约2～3cm,子叶绿色。于无菌条件下取子叶、胚轴(5～7mm)作为外植体进行诱导培养。     

大花补血草优株无性系的建立

1植物名称大花补血草（Limoniumsinuatum）。2材料类别花茎。3培养条件（1）诱导芽萌发及增殖培养基：MS＋6－BA0．6mg／L（单位下同）＋3％蔗糖。（2）生根培养基：1／2MS＋NAA0·5＋1．5％蔗糖。以上培养基均加0．8％琼脂,PH5．8。培养温度25士2『C,光照度为2000IX,每天光照12h。4生长与分化情况4．1脑芽的增殖培养取大花补血草基部抽出的长5～10cm花茎,去除具有花芽的顶部,用带有l～2个、最多3个腋芽的中部茎作为外植体,在清水中用脱胎棉洗净,70％酒精浸lmin,10％安替福民溶液浸13～15min表面灭菌后,用无菌水冲洗4次,切…     

不同预处理方法对牛皮杜鹃和小叶杜鹃种子萌发的影响

采用3种方法(用100、200、400、600和800 mg·L-1GA3浸种24 h、用清水浸种6、12和24 h以及用超声波处理10、20和30 min)对牛皮杜鹃(Rhododendron aureum Georgi)和小叶杜鹃(R.parvifolium Admas.)种子进行预处理,以未经预处理的种子为对照,选择发芽率、发芽势和发芽指数以及萌发时滞、萌发高峰期、发芽持续时间为分析指标,对预处理后种子的萌发状况进行了比较分析。结果表明:采用适宜的预处理方法对牛皮杜鹃和小叶杜鹃种子的萌发有促进作用;总体上看,GA3浸种的促进作用优于另外2种预处理方法。用不同质量浓度GA3浸种24 h,2种植物种子的发芽率、发芽势和发芽指数均极显著高于对照,萌发时滞和萌发高峰期均较对照缩短;其中,用400 mg·L-1GA3浸种的牛皮杜鹃种子和用600 mg·L-1GA3浸种的小叶杜鹃种子的发芽率最高,分别达到73.50%和81.00%。用清水浸种6 h的牛皮杜鹃种子和用清水浸种24 h的小叶杜鹃种子的发芽率分别显著和极显著高于对照。用功率50 W、频率40 kHz的超声波分别处理10或20 min后,2种植物种子的发芽率均极显著高于对照,其中,用超声波处理20 min的牛皮杜鹃种子和用超声波处理10 min的小叶杜鹃种子的发芽率最高。清水浸种和超声波处理对2种植物种子的萌发时滞、萌发高峰期和发芽持续时间的影响均不明显。研究结果显示:用400mg·L-1GA3浸泡24 h和用600 mg·L-1GA3浸泡24 h分别是牛皮杜鹃和小叶杜鹃种子的最优预处理方法,可极显著提高2种植物种子的发芽率并缩短发芽时间。     

植物姐妹染色单体交换

本文以蚕豆、洋葱、大麦、黑麦为材料,建立了一个植物姐妹染色单体分染(SCD)新技术。种子萌发后的根在含BrdU(1U~(-4)—10(-3)M),FdU(5×10(-8)M—10(-7)M),Urd(10(-6)M)溶液中生长一个细胞周期,然后转入Thd(10(-4)M),Urd(10(-6)M)溶液再培养第二个细胞周期。初生根或者可以在BrdU溶液中连续培养二个细胞周期。以后经秋水仙素前处理,酒精-冰醋酸固定,酶解压片,冰冻法分离盖片与载片,空气干燥2—7天备用。干燥后的染色体标本在40W UV照射下经2×SSC溶液60—80℃温育40分钟。水冲洗后Giemsa染色。此法具简便、快速、分染效果好的特点。 文章着重研究了化学诱变剂EMS、MMC、MH、苯酚和苯对上述作物SCE频率的诱发效应,并讨论了广泛利用植物SCE为检测诱变因素新手段的可能性。