DL-苯丙氨酸酶法拆分

ＤＬ－苯丙氨酸的拆分是以Ｎ－乙酰－ＤＬ－苯丙氨酸铵为起始原料,经猪肾酰化酶不对称水解作用,再经离子交换色谱分离,减压浓缩得到Ｌ－苯丙氨酸和Ｎ－乙酰－Ｄ－苯丙氨酸结晶。     

苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达及酶法合成L-苯丙氨酸

利用基因重组技术 ,在大肠杆菌中克隆并表达苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) (EC4 .3 .1 .5) ,并应用此酶转化肉桂酸生成L 苯丙氨酸。方法是将欧芹苯丙氨酸脱氨酶cDNA亚克隆到组成型表达载体pMG3 6e启动子P3 2下游 ,以菌落PCR法鉴定插入片段的大小和方向都正确的克隆 ,进而以HPLC检测肉桂酸浓度的方法鉴别重组质粒有催化肉桂酸生成L 苯丙氨酸的酶活力。结果获得能表达PAL酶活性的阳性克隆 ,在pH1 0 ,含 1 .0 %肉桂酸、8.0mol/L氨的转化液中 ,3 0℃反应 2 0h ,肉桂酸重量转化率可达 60 %。该基因工程菌有希望用于工业化生产L 苯丙氨酸。     

苯丙氨酸解氨酶(PAL)的生产:适用于L-苯丙氨酸商品化生产的酵母菌株的分离与评价

含有苯丙氨酸解氨酶的微生物已从各种自然环境中分离得到,以L—苯丙氨酸和t—苯丙烯酸盐为底物对丙氨酸解氨酸双向酶活性初步筛选出最好的21株,其中的12株对细胞总产量和来丙氨酸解氨酶活性进行了比较,并选出7株来作了在各种培养基中的PAL诱导程度的试验.根据上述的筛选,对分离株SPA10(已鉴定为Rh-odotorula rudra)的最适条件进行了筛选,在28℃和pH5.0是最适的生长条件,但细胞的苯丙氨酸解氨酶活性已表明在亚适生长温度(36℃)和pH(8.0)时较高。当机体在有各种糖和铵离子的条件下生长时,苯丙氨酸解氨酶的合成受到抑制,控制发酵条件能使苯丙氨酸解氨酶的合成发生在最大生物量水平,在糖耗尽时出现.到达最大合成之后,短时间内细胞内苯丙氨酸解氨酶迅速失活,若补充D.L—异亮氨酸和低浓度D.L—本丙氨酸,改变发酵温度,能使酶催化发酵稳定在100小时以上.上述结果证明了SPA10分离株从反式来丙烯酸生产L—苯丙氨酸进行商业化生产是可行的.     

几种效应物对苯丙氨酸解氨酶稳定性的影响

为了对利用苯丙氨酸解氨酶（PAL）转化肉桂酸生成L-苯丙氨酸的生物转化反应条件进行优化,采用添加效应物的方法来提高苯丙氨酸解氨酶的稳定性,通过单因素实验研究了谷氨酸钠,海藻酸钠,聚乙二醇,甘油,锌粉,氮气等对PAL的稳定性影响,通过正交实验和方差分析,确定在转化液中添加1.0g/L锌粉和20g/L谷氨酸钠作为效应物,L-苯丙氨酸积累浓度提高55%,该两种效应物对PAL的稳定性增加显著。     

一菌双酶法制备L-4-氟苯丙氨酸

利用重组E．coli产天冬氨酸酶和天冬氨酸转氨酶催化生产L-4-氧苯丙氨酸的工艺。实验结果表明最佳转化条件为-37℃,pH值4．5—8．5,菌体与酮酸的质量浓度比为1.5,CTAB的质量分数为0．04％,酮酸的质量浓度11．28g／L,富马酸铵与酮酸的摩尔比为3．0：1．0,添加1mmol／L的Fe^2＋,L-天冬氨酸与酮酸的摩尔比为0．4：1。在最适条件下,经过14h酶转化反应达到平衡,酮酸转化率可达到95％以上,L-4-氟苯丙氨酸得率也可达到80％以上。此法原料简单易得,为L-4-氟苯丙氨酸的制备提供了一种新方法：     

铵培养的粪产碱菌（Alcaligenes faecalis）中固氮酶的生物合成

粪产碱菌A—15的氮素同化途径在铵培养下以GDH途径为主,而氮培养下则以GS/GOGAT途径为主,DEAE—纤维素层析,SDS—PAGE及免疫学试验均证明,粪产碱菌在铵浓度高达30mmol/L时仍有固氮酶合成,但没有固氮活性。铵和氮培养两者细菌粗提液在电泳条带上有些差异。铵培养的粪产碱菌合成的固氮酶,在解阻遏后,仍可出现固氮活性。     

发酵法生产 L—酪氨酸

<正> 1、发明的名称:发酵法制备L—酪氨酸2、专利申请范围:采用谷氨酸棒状杆菌属的L—苯丙氨酸缺陷型,以及对L—苯丙氨酸类似物及磺酰胺有抗性的突变株制造酪氨酸的方法,该突变株在培养基中可以生成和积累L—酪氨酸。3、本发明的详细说明:本发明是关于发酵法制备L—酪氨酸。用发酵法生产L—酪氨酸已知的有谷氨酸微球菌的L—苯丙氨酸缺陷型的制造方法、短杆菌属等的对一氟苯丙氨酸抗性株或棒状杆菌属的L—酪氮酸及L—苯丙氨酸的类似物的抗性菌株的制造方法等。     

发酵法生产 L—酪氨酸

<正> 1、发明的名称:发酵法制备L—酪氨酸2、专利申请范围:采用谷氨酸棒状杆菌属的L—苯丙氨酸缺陷型,以及对L—苯丙氨酸类似物及磺酰胺有抗性的突变株制造酪氨酸的方法,该突变株在培养基中可以生成和积累L—酪氨酸。3、本发明的详细说明:本发明是关于发酵法制备L—酪氨酸。用发酵法生产L—酪氨酸已知的有谷氨酸微球菌的L—苯丙氨酸缺陷型的制造方法、短杆菌属等的对一氟苯丙氨酸抗性株或棒状杆菌属的L—酪氮酸及L—苯丙氨酸的类似物的抗性菌株的制造方法等。     

双波长紫外吸收法测定L-苯丙氨酸含量

采用双波长紫外吸收法测定转化液中L 苯丙氨酸含量 ,测定波长为 2 5 8nm ,参比波长为 2 78nm。由Acr2 78=138.18C+0 .0 0 85γ =0 .9995得到肉桂酸浓度Cr ,再由A2 58=ACr2 58+Acp2 5 8=76 .5 31Cr +.94 4 6Cp +0 .0 36 6 ,计算出L 苯丙氨酸含量Cp。此方法快速、简便、准确度高、除杂效果好 ,适用于生产过程控制。     

从沉淀亮氨酸母液中分离硷性氨基酸上柱液pH的选择

<正> 我们在我所曾报道的活性炭——离子交换树脂联合柱层析分离猪血粉水解液中L—苯丙氨酸等多种氨基酸的新工艺基础上,最近又进行了应用国产732强酸性阳离子交换树脂,从沉淀亮氨酸母液中单柱体分离硷性氨基酸,着重于上柱液最佳pH的选的择实验研究,现将研究情况报告如下:     

大孔NH_4~+型阳离子交换树脂离子交换法提取谷氨酸的研究

采用四种大孔ＮＨ＋４型阳离子交换树脂Ｄ００１、Ｄ６１、Ｄ７２、Ｄ１１３从等电点结晶母液中回收谷氨酸,其中Ｄ６１树脂取得了良好的交换效果。Ｄ６１树脂吸附谷氨酸的离子交换等温线可以用Ｆｒｅｕｎｄｌｉｃｈ方程表示ｑ＝５．３３９（Ｃ＊）０．４４７８。将Ｄ６１树脂上柱交换,测出了不同空间流速下的穿透曲线,得到了适宜的流速为２．１６ｍｌ／ｍｌ．ｈ。     

重组谷氨酸棒杆菌发酵L-苯丙氨酸培养基的优化

【目的】提高重组谷氨酸棒杆菌发酵L-苯丙氨酸(L-phenylalanine,L-Phe)的产量。【方法】使用正交试验设计以及响应面优化法分别对种子培养基及发酵培养基进行优化,确定了重组谷氨酸棒杆菌发酵L-Phe的最佳种子培养基及最佳发酵培养基。【结果】重组谷氨酸棒杆菌发酵L-Phe最佳种子培养基(g/L):葡萄糖25.0,玉米浆25.0,硫酸铵15.0,硫酸镁1.0,磷酸二氢钾2.0,尿素2.0,p H 6.8-7.0;最佳发酵培养基(g/L):葡萄糖110.0,玉米浆7.0,硫酸铵25.0,硫酸镁1.0,磷酸二氢钾1.0,柠檬酸钠2.0,谷氨酸1.0,碳酸钙25.0,p H 6.8-7.0;在最佳培养基条件下L-Phe产量最高达到9.14 g/L,较优化前的7.46 g/L提高了22.5%。【结论】通过正交试验和响应面分析对重组谷氨酸棒杆菌发酵L-Phe培养基进行优化,明显提高了L-Phe的产量,并确定了葡萄糖、玉米浆和硫酸铵为发酵培养基中影响L-Phe产量的3个关键因子。研究结果为L-Phe的发酵放大提供了依据。     

D-氨基酰化酶拆分D,L-苯丙氨酸制备D-苯丙氨酸

进行了以D,L-苯丙氨酸为原料经D-氨基酰化酶制备D-苯丙氨酸的研究。乙酰-D,L-苯丙氨酸浓度为0.5mol.L-1,给酶量为3×104U.L-1时,24 h拆分率可达到97%。采用阳离子交换树脂进行了拆分液中的D-苯丙氨酸的分离,D-苯丙氨酸的收率为95.4%。采用醋酸酐作为催化剂,在145℃的条件下,乙酰-L-苯丙氨酸可以消旋成乙酰-D,L-苯丙氨酸继续拆分。     

Xylitol production from xylose mother liquor: a novel strategy that combines the use of recombinant <Emphasis Type="Italic">Bacillus subtilis</Emphasis> and <Emphasis Type="Italic">Candida maltosa</Emphasis>

Background  

Xylose mother liquor has high concentrations of xylose (35%-40%) as well as other sugars such as L-arabinose (10%-15%), galactose (8%-10%), glucose (8%-10%), and other minor sugars. Due to the complexity of this mother liquor, further isolation of xylose by simple method is not possible. In China, more than 50,000 metric tons of xylose mother liquor was produced in 2009, and the management of sugars like xylose that present in the low-cost liquor is a problem.     

非蛋白氨基酸的生物合成及其生物学作用

解释了蛋白氨基酸和非蛋白氨基酸,并着重论述了非蛋白氨基酸的生物合成及其生物学作用。非蛋白氨基酸的生物合成主要通过基本氨基酸合成后的修饰、代谢及消旋作用产生,其生物学作用主要表现在能合成其他含氮物质、储藏氮和运输氮、储能、组成细菌细胞壁、毒性作用及药物作用等方面。     

A new pulping process for wheat straw to reduce problems with the discharge of black liquor

Aqueous ammonia mixed with caustic potash as wheat straw pulping liquor was investigated. The caustic potash did not only reduce the NH3 usage and cooking time, but also provided a potassium source as a fertilizer in the black liquor. Excess NH3 in the black liquor was recovered and reused by batch distillation with a 98% recovery rate of free NH3. The black liquor was further treated for reuse by coagulation under alkaline conditions. The effects of different flocculation conditions, such as the dosage of 10% aluminium polychloride, the dosage of 0.1% polyacrylamide, the reaction temperature and the pH of the black liquor on the flocculating process were studied. The supernatant was recycled as cooking liquor by adding extra NH4OH and KOH. The amount of delignification and the pulp yield for the process remained steady at 82-85% and 48-50%, respectively, when reusing the supernatant four times. The coagulated residues could be further processed as solid fertilizers. This study provided a new pulping process for wheat straw to reduce problems of discharge black liquor.     

L-缬氨酸发酵条件的研究

报道了L 缬氨酸高产菌XQ 6(Leu1AHVrα ABhr2 TAhr)摇瓶发酵条件的研究结果。试验结果表明 ,当发酵培养基中葡萄糖、(NH4 ) 2 SO4 、KH2 PO4 、MgSO4 ·H2 O、玉米浆和生物素的最适用量分别为 1 4 %、5 %、0 .1 %、0 .0 5 %、0 .5 %和2 5 μg/L时 ,经发酵培养 72h ,L 缬氨酸积累可达 5 8g/L ,最高为 62g/L。     

Concentration of 6-aminopenicillanic acid from penicillin bioconversion solution and its mother liquor by nanofiltration membrane

In this study, nanofiltration was applied to the concentration of the 6-aminopenicillinic acid (6-APA) from bioconverted penicillin solution and also to its mother liquor. The 6-APA in the solution was concentrated from 0.211 mol/L to 0.746 mol/L by nanofiltration. The final maximum concentration was 3.6 times higher than the initial concentration and the recovery yield was 97% to 99% of the original 6-APA. The concentrated solution was crystallized with the yields of 88.9–90.2% and the purity of the crystallized product was about 98%. The concentration of 6-APA in the mother liquor after crystallization was 0.014 mol/L and thus was concentrated 20–30 fold by nanofiltration and crystallization. The recovery of 6-APA was over 98%. The salts contained in the mother liquor, such as NH₄Cl and KCl, could be removed by allowing them to permeate through the membrane.     

二氯苯磺酸沉淀毛发水解液中亮氨酸和精氨酸的新方法

本文介绍了一种以二氯苯磺酸为沉淀剂从毛发水解液中分步沉淀亮氨酸和精氨酸的方法。利用两种沉淀形成速度的不同,通过控制反应条件,实现了亮氨酸和精氨酸的分步沉淀,确定了沉淀条件对目标氨基酸沉淀效率的影响,得到合适的工艺条件:200g人发,水解得400mL水解液;加50g二氯苯磺酸沉淀剂,在5℃加晶种,间歇搅拌12h,过滤得亮氨酸复合物沉淀;在沉淀亮氨酸之后的母液中再加50g二氯苯磺酸沉淀剂,于相同的温度条件下加晶种,连续搅拌至生成稠厚的沉淀,再静置沉淀12h,过滤得精氨酸复合物沉淀。亮氨酸的沉淀率为71.0%,母液中残留亮氨酸浓度为7.6g/L;精氨酸的沉淀率为76.6%,母液中残留精氨酸浓度为8.9g/L。     

合浦马氏珍珠母液生物活性成分的检测

目的研究合浦马氏珠母贝提取的珍珠母液,对其主要活性成分进行检测分析。方法采用《中华人民共和国国家标准》中的食品氨基酸、牛磺酸和微量元素的测定方法进行检测。结果合浦马氏珠母贝提取的天然珍珠母液含有丰富的活性物质（氨基酸总含量为223．7mg／100ml、牛磺酸总含量为276．4mg／100ml）和多种微量元素（锌、铜、铁、镁、钙等）。结论从马氏珠母贝中提取的天然珍珠母液有潜在的多领域应用和综合开发价值。