通过共转化和花药培养快速获得直链淀粉含量降低且无抗性标记的转基因水稻

用根癌农杆菌共转化的方法将p13W8质粒(含反义蜡质基因)和pCAMBIA1300质粒(含潮霉素抗性基因)导入水稻.经PCR检测,发现在29个T1群体中发生抗潮霉素抗性基因和反义蜡质基因的分离;从1 264个T1单株中筛选到183个只带反义蜡质基因片段的转基因植株.选择了4个直链淀粉含量降低的T1单株进行花药培养,获得正常结实的花培苗34株;经PCR检测,有23株为只含反义蜡质基因而无潮霉素抗性基因的植株.从转化到获得直链淀粉含量降低、遗传稳定的转基因植株仅用了一年半时间.     

<天然药物会议信息>

20 0 1 :Ｊａｎｕａｒｙ 17～ 2 0 ,2 0 0 1:ＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＰｈａｒｍａｃｙＣｈａｉｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ,ＳｃｏｔｔｓｄａｌｅＰｒｉｎｃｅｓｓＲｅｓｏｒｔ,Ｓｃｏｔｔｓｄａｌｅ ,Ａｒｉｚｏｎａ .Ｃｏｎｔａｃｔ:ＮＣＰＡＥｘｈｉｂｉｔｓｍａｎａｇｅｒ(70 3 ) 683～ 3 619(ｆａｘ) .Ｆｅｂｒｕａｒｙ 2 0～ 2 3 ,2 0 0 1:ＥＸＰＯ 2 0 0 1,ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｕｎｉｔｙＰｈａｒｍａｃｉｓｔｓＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＣｈａｉｎＤｒｕｇＭａｒｋｅｔｉｎｇＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＮａｔｉｏｎａｌＨｏｍｅＩ…     

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天然药物会议信息(英文)

Ｊａｎｕａｒｙ 17 2 0 ,2 0 0 1:ＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＰｈａｒｍａｃｙＣｈａｉｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ,ＳｃｏｔｔｓｄａｌｅＰｒｉｎｃｅｓｓＲｅｓｏｒｔ,Ｓｃｏｔｔｓｄａｌｅ,Ａｒｉｚｏｎａ .Ｃｏｎｔａｃｔ:ＮＣＰＡＥｘｈｉｂｉｔｓｍａｎａｇｅｒ( 70 3 )683 3 619(ｆａｘ) .Ｆｅｂｒｕａｒｙ 2 0 2 3 ,2 0 0 1:ＥＸＰＯ 2 0 0 1,ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｕｎｉｔｙＰｈａｒｍａｃｉｓｔｓＡｓｓｏｃｉ ａｔｉｏｎ ,ＣｈａｉｎＤｒｕｇＭａｒｋｅｔｉｎｇＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＮａｔｉｏｎａｌＨｏｍｅＩｎｆｕｓｉｏ…     

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两个反义基因在番茄工程植株中的生理抑制效应分析

用番茄乙烯形成酶（ＥＦＥ）和多聚半乳糖醛酸酶（ＰＧ）反义ｃＤＮＡ转化番茄子叶,获得两个转基因系统,分别比较了两个基因系统果实和叶片的乙烯生成速率,果实中ＥＦＥ酶活性和果胶酶活性,表明反义ＥＦＥ基因在番茄工程植株中能显著抑制ＥＦＥ酶活性和乙烯生成,反义ＰＧ基因则主要抑制是ＰＧ酶活性。     

两个反义基因在番茄工程植株中的生理抑制效应分析

用番茄乙烯形成酶（ＥＦＥ）和多聚半乳糖醛酸酶（ＰＧ）反义ｃＤＮＡ转化番茄子叶,获得两个转基因系统。分别比较了两个基因系统果实和叶片的乙烯生成速率、果实中ＥＦＥ酶活性和果胶酶活性,表明反义ＥＦＥ基因在番茄工程植株中能显著抑制ＥＦＥ酶活性和乙烯生成;反义ＰＧ基因则主要是抑制其ＰＧ酶活性。     

中国内蒙古东西部蒙族和布里亚特人血EAP、ADA、AK1遗传多态性研究

采用ＥＡＰ ＡＤＡ ＡＫ1 同步电泳分型法对内蒙古包头地区蒙族 (西部 ) ,呼伦贝尔盟蒙族(东部 )和布里亚特蒙古族人血痕的红细胞酸性磷酸酶 (ＥＡＰ ,Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅａｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ)、腺苷脱氨酶 (ＡＤＡ ,Ａｄｅｎｏｓｉｎｅｄｅａｍｉｎａｓｅ)、腺苷酸激酶 (ＡＫ1 ,Ａｄｅｎｙｌａｔｅｋｉｎａｓｅ)的遗传多态性进行了调查研究。现报告如下。材料和方法　西部蒙古族人血样 2 0 8例 ,东部蒙古族血样 1 0 9例 ,布里亚特蒙古族血样2 0 4例 ,分别取自内蒙古包头地区、呼盟海拉尔市、鄂温克自治旗。全部献血人员均为…     

ACTA BOTANICA SINICA ,Vol.42 CONTENTS

Ｎｏ .1(Ｊａｎ .,2 0 0 1)ＡＲｅｗａｒｄｉｎｇＦｉｆｔｅｅｎＹｅａｒｓ:ＦｒｏｍＳＬＧｔｏＳＣＲ/ＳＰ11ＣＵＩＨａｉ＿Ｙａｎｇ ,ＬＡＩＺｈａｏａｎｄＸＵＥＹｏｎｇ＿Ｂｉａｏ……………………………………………… ( 1)ＴｈｅＳｔｒｕｃｔｕｒａｌＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＮｕｃｌｅｏｌａｒＤＮＡａｎｄＩｔｓＡｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｉｎＮｕｃｌｅｏｌｕｓｏｆＡｌｌｉｕｍｃｅｐａＣｅｌｌｓ (ｉｎＥｎｇｌｉｓｈ)ＴＡＯＷｅｉ,ＺＨＡＮＧＬｉ＿Ｙｏｎｇ ,ＨＵＡＮＧＢａｉ＿Ｑｕ ,ＪＩＡＯＭｉｎｇ＿Ｄａ ,ＨＥＭｅｎ…     

利用激光微束穿刺法将杀虫蛋白基因导入油菜的研究

利用激光微束照射油菜子叶柄,将来自苏云金杆菌的杀虫蛋白（Ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌｃｒｙｓｔａｌｐｒｏｔｅｉｎ,ＩＣＰ）基因导入油菜细胞中,经植株再生和卡那霉素筛选,获得了转基因植株。对转基因植株进行了ＰＣＲ检测和饲虫实验,发现转基因植株为ＰＣＲ扩增阳性,某些植株表现出了较强的抗虫性。实验结果表明外源抗虫基因已被整合到油菜基因组并得到了表达。     

Glycine—SDS—PAGE测定小分子多肽分子量

小分子多肽分子量的测定 ,目前多采用Ｔｒｉｃｉｎｅ -ＳＤＳ -ＰＡＧＥ系统[1～ 3 ] ,但系统中的Ｔｒｉｃｉｎｅ价格昂贵 ,加之电泳时间较长 ( 3～ 4ｈ) ,为此 ,作者经过实验摸索 ,建立了Ｇｌｙｃｉｎｅ -ＳＤＳ -ＰＡＧＥ测定小分子多肽的方法。1　材料和方法表 1　制胶配方成分分离胶 (ｍｌ)浓缩胶 (ｍｌ)分离胶单体母液 1 3 3 -浓缩胶单体母液 -0 23 2ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ 1 3 3 -(ｐＨ8 8)0 5ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ -0 3 8(ｐＨ6 8)尿素 1 44ｇ -Ｈ2 Ｏ 0 40 910 %ＳＤＳ 40 μｌ 15 μｌ10 %ＡＰＳ 2 5 μｌ 12 μｌＴ…     

人促红细胞生成素基因在番茄中的表达

通过子叶与农杆菌（ＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓＡＧＬ１）共培养,将表达载体ｐＨＬＰＥ中的人促红细胞生成素（ｈＥＰＯ,一种人来源的典型糖蛋白）基因（ｅｐｏ）导入番茄,然后用卡那霉素进行筛选,获得了抗性植株。经点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析,证明部分抗性植株中整合了ｅｐｏ基因。通过对转基因番茄植株叶片的粗提蛋白进行ＥＰＯＥＬＩＳＡ检测,结果表明,ｈＥＰＯ在番茄中的表达量为约４００ｐｇ／ｇ叶片。经用转基因植株叶片粗提蛋白饲喂依赖于ＥＰＯ的ＴＦ１细胞,表明番茄ＥＰＯ具有体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）生物活性,这暗示用植物生产的ＥＰＯ可作为体外药物加以应用。     

TRIASSIC CONODONTS FROM ZHUGANPO AND “WAYAO” FORMATIONS OF GUANLING, SOUTHWEST CHINA

ＳＹＳＴＥＭＡＴＩＣＰＡＬＥＯＮＴＯＬＯＧＹＧｅｎｕｓＣｅｌｓｉｇｏｎｄｏｌｅｌｌａＫｏｚｕｒ ,196 8　　Ｔｙｐｅｓｐｅｃｉｅｓ　Ｇｏｎｄｏｌｅｌｌａ (Ｃｅｌｓｉｇｏｎｄｏｌｅｌｌａ)ｗａｔｚｎａｕｒｉＫｏｚｕｒ ,196 8Ｃｅｌｓｉｇｏｎｄｏｌｅｌｌａｂａｉｙｕｎｅｎｓｉｓｓｐ .ｎｏｖ .(ＰｌａｔｅⅠ ,ｆｉｇｓ .1— 5 )　　Ｅｔｙｍｏｌｏｇｙ　ＮａｍｅｄｆｒｏｍｉｔｓｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｉｎＢａｉｙｕｎｓｅｃｔｉｏｎ ,Ｇｕｉｚｈｏｕ .Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ＡｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅｏｆＣｅｌｓｉｏｇ…     

甘蓝型油菜PEP基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建及转基因油菜的获得

丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个种子的含油量.本研究利用PCR法从甘蓝型油菜花油5号(H045)克隆了PEP基因片段,并与载体pBI121-B构建了反义PEP基因的种子特异性植物表达载体,通过激光微束穿刺法将其转化到甘蓝型油菜中,目前已获得了转基因植株.     

通过根癌农杆菌介导的共转化获得具有蜡质基因反义片段的转基因水稻

在构建剔除潮霉素抗性基因的反义蜡质基因重组质粒p13W8的基础上,用分别携带p13W8质粒和有潮霉素抗性基因的pCAMBIA1300质粒的根癌农杆菌,在不同处理条件下对粳稻3个品种进行共转化.试验结果显示,共感染混合液中pCAMBIA1300菌液比例高,抗性愈伤组织的转化频率也较高;抗性愈伤组织的PCR检测结果表明,潮霉素抗性基因的阳性检测率为98%,反义蜡质基因的阳性检测率为68%.在105株转基因植株中,反义蜡质基因阳性株为30株,占转基因植株的28.6%.乙酰丁香酮处理组的平均转化频率略高于未处理组;在乙酰丁香酮的各种处理中,直接浸泡愈伤组织的转化频率稍高于其它处理方式.