纳米银抑制肝癌HepG2细胞活力

目的探讨纳米银(AgNPs)对体外培养的人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的AgNPs处理肝癌HepG2细胞,采用细胞形态学观察及细胞活力测定(MTT法)来评价AgNPs对HepG2细胞体外增殖的影响,流式细胞仪分析细胞周期分布并检测细胞凋亡率。结果 AgNPs使细胞增殖活性降低,且呈浓度和时间依赖性,细胞呈凋亡形态改变;流式细胞仪检测到细胞凋亡,细胞平均凋亡率呈时间依赖性。AgNPs处理组S期细胞逐渐增多,而G0/G1、G2/M期细胞逐渐减少。结论 AgNPs抑制HepG2细胞生长,使HepG2细胞阻滞于S期,并诱导其凋亡。     

维甲酸对肝癌细胞HepG2糖基化磷脂酰肌醇特异性磷酯酶D表达及细胞生物学特性的影响

应用MTT、流式细胞仪、免疫印迹法检测全反式维甲酸(ATRA)单独或联合糖基化磷脂酰肌醇特异性磷酯酶D(GPI-PLD)特异性抑制剂1,10-二氮杂菲对肝癌细胞HepG2生物学特性的改变.ATRA使肝癌细胞HepG2 GPI-PLD基因表达及酶活性上调,并呈现剂量和时间依赖性.ATRA可抑制肝癌细胞HepG2增殖,使肝癌细胞Caspase-3表达水平显著增加,Bcl-2表达水平下调,促进肝癌细胞凋亡(P<0.05).ATRA联合1,10-二氮杂菲诱导组细胞,Bcl-2、细胞增殖活性较ATRA单独诱导组显著增强,Caspase-3、凋亡率显著下降.维甲酸可促进肝癌细胞HepG2 GPI-PLD基因表达上调,高活性的GPI-PLD有助于维甲酸抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡.     

紫花牡荆素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的研究

目的：研究紫花牡荆素（Casticin）对肝癌HepG2细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用,并探讨其作用机制。方法：用终浓度为0、0.5、1.0、2.0umol/L的Casticin作用于HepG2细胞,于12、24、48h后采用MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33342核染色,观察细胞形态学变化;24h后收集各组肝癌HepG2细胞,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;RT-PCR检测survivin mRNA表达。结果：MTT法检测显示,Casticin对肝癌HepG2细胞有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系;Hoechst33342染色后,可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染,与对照组相比,Casticin处理后凋亡细胞比例增加;Casticin作用24h后,细胞被阻滞于G2/M期,随药物质量浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加;RT-PCR结果显示,Casticin下调肝癌HepG2细胞survivin mRNA表达。结论：Casticin在体外对肝癌HepG2细胞有明显的增殖抑制和凋亡诱导作用,初步推断Casticin诱发肝癌细胞凋亡与其对survivin基因表达的抑制有关。     

丹参酮Ⅰ通过诱导凋亡抑制HepG2细胞生长

目的:研究丹参酮Ⅰ对肝癌细胞HepG2生长的影响。方法:MTT法检测丹参酮Ⅰ对HepG2细胞增殖的影响,Western印迹检测经丹参酮Ⅰ处理的HepG2细胞中凋亡标志物c-Parp和周期蛋白D1的表达变化,流式细胞术检测细胞的凋亡及周期分布。结果:MTT分析发现丹参酮Ⅰ可抑制HepG2细胞的生长;经丹参酮Ⅰ处理的HepG2细胞中凋亡标志物c-Parp表达升高,周期蛋白D1表达无明显变化;流式细胞术分析结果进一步证明丹参酮Ⅰ可诱导HepG2细胞发生凋亡,对细胞周期分布无明显影响。结论:丹参酮Ⅰ通过诱导细胞凋亡而抑制HepG2细胞的生长,对细胞周期无明显阻滞,为进一步研究丹参酮Ⅰ的抗肿瘤作用分子机制提供了线索。     

雷氏大疣蛛毒液对人肝癌HepG2细胞p21基因表达的影响

本文研究了雷氏大疣蛛毒液对人肝癌细胞株HepG2增殖抑制作用及其分子机制。采用XTT法观察到雷氏大疣蛛毒液剂量依赖抑制HepG2细胞增殖;流式细胞仪检测发现,经过雷氏大疣蛛毒液作用的HepG2细胞周期发生明显的选择性改变;RT-PCR方法检测到p21基因表达增强;Western blot检测发现,p21蛋白表达增加。结果提示,雷氏大疣蛛毒液抑制人肝癌细胞HepG2增殖的可能机制之一是使p21基因和蛋白表达增加,G2IM细胞周期被阻滞,从而诱导细胞凋亡。     

珊瑚树Vibsane型二萜类化合物对人体HepG2细胞增殖的影响及其机制

目的：探讨珊瑚树vibsane型二萜类化合物对肝癌HepG2细胞增殖的影响及其机制,为研发新型天然植物类抗肿瘤药物提供实验依据。方法：采用噻唑蓝比色法及苔盼蓝染色计数法观察珊瑚树vibsane类二萜类化合物对不同肿瘤细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡,利用Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/7试剂盒检测vibsane二萜类化合物1#对HepG2细胞内Caspase-3酶活性的影响。结果：活性筛选发现vibsane型二萜类化合物1#显著抑制人肝癌HepG2细胞增殖,构效分析表明化合物C11位连接侧链的基团修饰影响其细胞增殖抑制活性。此外,HepG2细胞对1#化合物最敏感,1#化合物抑制其增殖具有剂量和时间依赖性。机制研究显示1#化合物诱导HepG2细胞发生明显的细胞周期G0/G1期阻滞,具有时间和剂量效应;同时,较高浓度1#化合物（5-10μmol/L）引起HepG2细胞凋亡明显增加,并剂量依赖性诱导细胞内Caspase3/7激活。结论：珊瑚树vibsane型二萜类化合物能够明显抑制人肝癌HepG2细胞增殖,其可能通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。     

白屈菜红碱对宫颈癌细胞的抑制作用研究

目的:研究白屈菜红碱(chelerythrine,CHE)对宫颈癌细胞(Hela)的增殖抑制作用,为CHE在预防和治疗宫颈癌方面提供实验依据.方法:不同浓度CHE作用于体外培养的Hela细胞后,采用台盼蓝拒染法和噻唑蓝(MTT)法研究白屈莱红碱时宫颈癌(Hela)细胞增殖能力的影响,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化.结果:细胞接种密度越小、药物作用时间越长、药物浓度越大,CHE对Hela细胞的增殖抑制率越大,过大的细胞接种密度以及过低的药物浓度均不会引起明显的细胞死亡;CHE作用后的Hela细胞周期分布有明显变化,G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞明显增多.结论:CHE在体外能明显抑制Hela细胞生长,其机理可能与CHE阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡有关.     

槲皮素通过G4调控癌基因表达影响肿瘤细胞增殖与凋亡

该研究采用CCK-8法、流式细胞术、免疫印迹法、实时定量PCR和体外结合实验等方法检测了槲皮素对Hep-2和MCF-7细胞生长和凋亡,以及对受G4调控基因表达的影响。结果显示,槲皮素对Hep-2和MCF-7细胞生长具有明显抑制作用,并诱导细胞周期停滞在S期;槲皮素诱导Hep-2和MCF-7细胞凋亡,表现出磷脂酰丝氨酸外翻、细胞膜通透性增加、染色质凝集、caspase活化等凋亡特征;槲皮素显著抑制c-Myc、KRAS、YY1等受G4调控基因的表达;槲皮素促进c-Myc启动子区G4形成序列Pu27形成G4结构并抑制核蛋白与其结合。以上结果表明,槲皮素可能通过促进细胞内G4形成序列形成稳定G4结构并抑制G4解旋酶对其解旋,引起受G4调控的肿瘤相关基因表达降低,最终抑制肿瘤细胞生长并诱导细胞凋亡。     

溶瘤腺病毒CD55-TRAIL-IETD-MnSOD联合阿霉素抑制肝癌细胞HepG2生长

目的:研究溶瘤腺病毒CD55-TRAIL-IETD-MnSOD与阿霉素联合使用对肝癌细胞HepG2生长的影响。方法:MTT法检测经CD55-TRAIL-IETD-MnSOD与阿霉素联合处理后HepG2细胞生存率的变化,Hoechst33342染色及流式细胞术检测联合处理诱导细胞凋亡时细胞形态变化及凋亡细胞数量,Western印迹检测联合处理所引发的凋亡通路。结果:MTT实验显示,联合使用CD55-TRAIL-IETD-MnSOD和阿霉素能更有效地抑制HepG2细胞的生长,且阿霉素与CD55-TRAIL-IETD-MnSOD是协同作用;Hochest染色实验和流式细胞术实验结果均显示联合使用CD55-TRAIL-IETD-MnSOD和阿霉素增强了诱导细胞凋亡的作用;Western印迹表明CD55-TRAIL-IETD-MnSOD和阿霉素联合使用激活了Caspase细胞凋亡途径。结论:阿霉素能促进溶瘤腺病毒CD55-TRAIL-IETD-MnSOD的复制,联合阿霉素和溶瘤腺病毒CD55-TRAIL-IETD-MnSOD可更有效激活Caspase细胞凋亡通路,抑制肝癌细胞HepG2生长。     

脱氢表雄酮调节HepG2/GFP-HBx细胞p16基因甲基化及其与细胞周期和凋亡的相关性

目的探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮（DHEA）对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用。方法以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR检测p16基因甲基化水平。比较分析HBx与p16基因启动子甲基化、DHEA与各检测指标的关系。结果HepG2/GFP-HBx细胞与HepG2细胞和HepG2/GFP细胞相比,细胞的增殖速度提高（P〈0.05）,G0/G1期细胞减少,S期细胞增多（P〈0.05）,凋亡率降低（P〈0.05）;HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子呈现高水平甲基化,HepG2和HepG2/GFP细胞呈现高水平非甲基化。100μmol/L的DHEA使三种细胞的增殖速度降低（P〈0.05）,G0/G1期细胞增加,S期细胞减少（P〈0.05）,凋亡率提高（P〈0.05）。DHEA可下调HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子甲基化水平,但对HepG2和HepG2/GFP细胞的p16基因启动子甲基化水平不产生影响。结论HBx引起肝癌细胞p16基因甲基化,并缩短细胞周期抑制细胞凋亡;DHEA可明显下调HBx引起的p16基因甲基化水平,延长细胞周期促进细胞凋亡,在无HBx基因整合的情况下,DHEA对肝癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响不通过p16基因甲基化的途径实现。     

六种藓类植物茎的比较解剖学研究

通过对6种藓类植物,即褶叶青藓(Brachythecium salebrosum(Web.et Mohr.)B.S.G.)、湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum(Lindb.)Kop.)、侧枝匐灯藓(Plagiomnium maximoviczii(Lindb.)Kop.)、大凤尾藓(Fissidensnobilis Griff.)、大羽藓(Thuidium cymbifolium(Doz.et Molk.)B.S.G.)和大灰藓(Hypnum plumaeforme Wils.)嫩茎和老茎的石蜡切片和显微观察发现,同一藓类植株的嫩茎和老茎,茎结构稳定,不同种藓类植物茎横切面具有不同特征.植物体茎横切面形状、表层细胞的层数、细胞大小和细胞壁厚薄、皮层细胞大小和形状、中轴的有无以及比例等特征可以作为藓类植物的分科分类依据之一.     

Investigation of the mechanism of temperature sensitivity of the electroreceptors of ampullae of lorenzini

In experiments on Black Sea skates (Raja clavata), the potential of the receptor epithelium of the ampullae of Lorenzini and spike activity of single nerve fibers connected to them were investigated during electrical and temperature stimulation. Usually the potential within the canal was between 0 and –2 mV, and the input resistance of the ampulla 250–400 k. Heating of the region of the receptor epithelium was accompanied by a negative wave of potential, an increase in input resistance, and inhibition of spike activity. With worsening of the animal's condition the transepithelial potential became positive (up to +10 mV) but the input resistance of the ampulla during stimulation with a positive current was nonlinear in some cases: a regenerative spike of positive polarity appeared in the channel. During heating, the spike response was sometimes reversed in sign. It is suggested that fluctuations of the transepithelial potential and spike responses to temperature stimulation reflect changes in the potential difference on the basal membrane of the receptor cells, which is described by a relationship of the Nernst's or Goldman's equation type.I. P. Pavlov Institute of Physiology, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. I. M. Sechenov, Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. Pacific Institute of Oceanology, Far Eastern Scientific Center, Academy of Sciences of the USSR, Vladivostok. Translated from Neirofiziologiya, Vol. 12, No. 1, pp. 67–74, January–February, 1980.