神经元缺氧复氧损伤时氧自由基的毒性作用及其机制＊

在原代分离培养Ｗｉｓｔａｒ乳鼠大脑皮质神经元上研究了缺氧复氧损伤（Ｈ／Ｒ）对神经细胞乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）,漏出率,死亡率和脂质过氧化物含量的影响,并选用一氧化氮（ＮＯ）合酶抑制剂Ｌ－ＮＧ－硝基－精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）巯基供体Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）和超氧化物歧化酶（Ｃｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ）三种自由基清除剂进行预保护等方法来探讨机制。结果表明 Ｈ／Ｒ损伤引起ＬＤＨ漏出率,细胞死亡率和脂过氧化物含量极显著     

二种不同抗冷性水稻品种剑叶5’－核苷酸酶的细胞化学定位

二种不同抗冷性水稻品种剑叶５’－核苷酸酶的细胞化学定位陈善娜邹晓菊梁斌（云南大学生物系，昆明６５００９１）ＴＨＥＣＹＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＬＯＣＡＴＩＯＮＯＦ５’－ＮＵＣＬＥＯＴＩＤＡＳＥＩＮＳＷＯＲＤＳＨＡＲＰＥＤＬＥＡＶＥＳＯＦＴＷＯＤＩＦＦＥＲ...     

中国伞滑刃线虫属─新纪录（真滑刃目：寄生滑刃科）

中国伞滑刃线虫属─新纪录（真滑刃目：寄生滑刃科）ＴＨＥＮＥＷＲＥＣＯＲＤＯＦＢＵＲＳＡＰＨＥＬＥＮＣＨＵＳＦＲＯＭＣＨＩＮＡ（ＡＰＨＥＬＥＮＣＨＩＤＡ：ＰＡＲＡＳＩＴＡＰＨＥＬＥＮＣＨＩＤＡＥ）￥ＹＩＮＧａｎ－ｌｉｕ;ＦＡＮＧＹｕ－ｓｈｅｎｇ（Ｄｅｐ...     

抗寒剂在福建上杭县早稻育秧中的应用效果

抗寒剂在福建上杭县早稻育秧中的应用效果薛德乾（上杭县临城农技站,３６４２００）ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＥＦＦＥＣＴＳＯＦＴＨＥＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＣＲ－４ＦＯＲＥＡＲＬＹ－ＲＩＣＥＳＥＥＤＬＩＮＧＣＵＬＴＵＲＥＩＮＳＨＡＮＧＨＡＮＧＣＯＵＮＴＹＯ...     

抗旱性不同的两个大豆品种对外源H_2O_2的响应

两个品种的大豆叶圆片经１０－４ｍｏｌ／Ｌ和１０－３ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理１２ｈ后,超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）与谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）活性明显增加,但１０－２ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理却使这些酶活性降低。抗旱性较强的大豆品种小粒豆１号较抗旱性较弱的鲁豆４号能维持较高的叶绿素含量和较高的ＳＯＤ、ＣＡＴ及ＧＲ活性,对Ｈ２Ｏ２的抗性较强。５０μｍｏｌ／Ｌ的亚胺环已酮（ＣＨＭ）能消除Ｈ２Ｏ２对ＳＯＤ、ＣＡＴ与ＧＲ活性的刺激作用,而同样浓度的放线菌素Ｄ（ＡＭＤ）则不能。     

r－干扰素对喉癌细胞系HEP－2HLA－DR抗原和增殖细胞核抗原表达的影响

本实验用人重组ｒ－干扰素（ｒｈｕ－ＩＦＮ）作用ＨＥＰ－２细胞后ＨＬＡ－ＤＲ抗原和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的检测来探讨ｒ－干扰素对ＨＥＰ－２细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达诱导作用及体外抗增殖活性。用单克隆抗体ＣＲ３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ）和Ｋｉ－６７（抗ＰＣＮＡ）。以链霉素一生物素技术（ＬＳＡＢ）检测ＨＥＰ－２细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原和ＰＣＮＡ表达,结果显示：ｒ－ＩＥＮ诱导ＨＬＡ－ＤＲ抗原和抑制ＰＣＮＡ表达其强弱与ｒ－ＩＦＮ剂量有关。资料提示：ｒ－ＩＦＮ不仅对ＨＥＰ－２细胞有细胞毒作用,同时能调节其细胞膜特性,因而在喉癌的治疗中是有效的。     

油蒿和籽蒿种子化学组成的研究

油蒿和籽蒿种子化学组成的研究鲁作民（中国科学院兰州沙漠研究所,兰州７３００００）ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＣＨＥＭＩＣＡＬＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳＩＮＳＥＥＤＳＯＦＡＲＴＥＭＩＳＩＡＯＲＤＯＳＩＣＡＡＮＤＡ．ＳＰＨＡＥＲＯＣＥＰＨＡＬＡ￥ＬｕＺｕｏ－ｍｉｎ（...     

植物抗寒剂CR－4在湖南水稻生产中的应用效果

植物抗寒剂ＣＲ－４在湖南水稻生产中的应用效果段传嘉（湖南省水稻研究所,长沙４１０１２５）ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＥＦＦＥＣＦＳＯＦＴＨＥＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＣＲ－４ＩＮＲＩＣＥＣＵＬＴＵＲＥＯＦＨＵＮＡＮＰＲＯＶＩＮＣＥ￥Ｄｕａｎｃｈｕａｎ－ｊｉ...     

抗寒剂CR－4提高玉米幼苗抗寒力及质膜5＇－核苷酸酶冷稳定性的研究

抗寒剂ＣＲ－４提高玉米幼苗抗寒力及质膜５＇－核苷酸酶冷稳定性的研究孙龙华,简令成,王瑞萍（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＳＴＵＤＩＥＳＯＦＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＣＲ－４ＦＯＲＩＮＣＲＥＡＳＩＮＧＣＯＬＤＨＡＲＤＩＮＥＳＳＡＮＤＳＴＡＢＩ...     

抗旱性不同的两个大豆品种对外源H2O2的响应

两个品种的大豆叶圆片经１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ和１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理１２ｈ后,超氧化岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）与谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）活性明显增加,但１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理却使这些酶活性降低。抗旱性较强的大豆品种小粒豆１号较抗旱性较弱的鲁豆４号能维持较高的叶绿素含量和较高的ＳＯＤ、ＣＡＴ及ＧＲ活性,对Ｈ２Ｏ２的抗性较强。５０μｍｏｌ／Ｌ的亚胺环已酮（ＣＨＭ）能消除     

NO前体和供体对大鼠海马脑片神经元活动的影响

应用细胞记录单位放电技术,在大鼠海马脑片上观察了左旋精氨酸,Ｎ－硝在左旋精氨酸,ＳＩＮ－１,及亚甲基蓝对ＣＡ１区神经元自发放电的影响,旨在了解左旋精氨酸;ＮＯ通路在海马放电中的作用及其可能的机制。实验结果如下：１．用Ｌ－ａｒｇ（１ｍｍｏｌ／Ｌ）灌流海马脑片２ｍｉｎ,在５４个放电单位中有４２个单位放电频率降低,１２个单位无明显反应。     

Quercetin protects against cerebral ischemia/reperfusion and oxygen glucose deprivation/reoxygenation neurotoxicity

Beyond nutrition effect, quercetin is applied as a complement or an alternative for promoting human health and treating diseases. However, its complicated neuroprotective mechanisms have not yet been fully elucidated. This study provides evidence of an alternative target for quercetin, and sheds light on the mechanisms of its neuroprotection against cerebral ischemia/reperfusion (I/R) injury in Sprague–Dawley rats. Oral pretreatment using quercetin has alleviated cerebral I/R-induced neurological deficits, brain infarction, blood–brain barrier disruption, oxidative stress, TNF-α and IL-1β mRNA expression, along with apoptotic caspase 3 activity. The neuroprotective, anti-oxidative, anti-inflammatory, and anti-apoptotic effects of quercetin were replicated in rat hippocampal slice cultures and neuron/glia cultures which suffered from oxygen–glucose deprivation and reoxygenation (OGDR). Biochemical studies revealed a reduction of extracellular signal-regulated kinase (ERK) and Akt phosphorylation, along with an increase in protein tyrosine and serine/threonine phosphatase activity in cerebral I/R rat cortical tissues and OGDR hippocampal slice and neuron/glia cultures. Quercetin alleviated the changes in ERK/Akt phosphorylation and protein phosphatase activities. Inhibition of ERK or Akt alone was enough to cause apoptotic cell death and cytotoxicity in hippocampal slice cultures and neuron/glia cultures, while activators of ERK or Akt alleviated OGDR-induced cytotoxicity. Taken together, our results demonstrate that quercetin alleviated the increment of protein tyrosine and serine/threonine phosphatase activity, along with the reduction of ERK and Akt phosphorylation, which may play pivotal roles in the expansion of brain injury after cerebral I/R.     

活性氧和线粒体ATP敏感钾通道介导肿瘤坏死因子α对缺氧/复氧心肌的保护作用

在培养的乳鼠心肌细胞上,研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对缺氧/复氧损伤心肌的保护作用的机制。结果发现：(1)用TNF-α(10—500U／ml)预处理,缺氧/复氧后心肌细胞内锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性增高、乳酸脱氢酶(LDH)释放量减少(P＜0．05);(2)用抗氧化剂N-乙酰半既氨酸(NAC,1mmol/L)、抗霉素A(antimycin A,50μmol/L)、2-巯基丙酰氨基乙酸(2-MPG,400μmol/L)和铜／锌超氧化物歧化酸(Cu/Zn,SOD)抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸盐(DDC,100nmol/L)预处理,可取消TNF-α的抑制缺氧/复氧心肌细胞LDH释放和诱导Mn-SOD活性增高的作用;(3)mitoKATP通道抑制剂5-羟基癸酸(5-HD)预处理可阻断TNF-α对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用;选择性mitoKATP通道开放剂diazoxide(50μmol/L)预处理可减少复氧后心肌细胞LDH的释放(P＜0．01),其作用可被5-HD(100μmol/L)和NAC所抑制。上述结果表明,活性氧和线粒体ATP敏感钾通道参与介导TNF-α对缺氧/复氧损伤的心肌保护作用。     

一氧化氮对谷氨酸诱发的大鼠海马脑片CA1区神经元活动的抑制

用细胞外记录单位放电技术,在大鼠海马脑片上观察了Ｌ－精氨酸（Ｌ－ａｒｇ）、Ｎ－硝基Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）及ＳＩＮ－１对谷氨酸（ｇｌｕｔａｍａｔｅ,Ｇｌｕ）诱导的ＣＡ１区神经元放电的影响。旨在了解Ｌ－精氨酸：ＮＯ通路在谷氨酸诱发的海马放电中的作用及其可能的机制。结果如下：（１）用ＧｌＵ（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）灌流海马脑片１ｍｉｎ,１２个放电单位放电频率明显增加,表现为癫痫样放电;（２）海马脑片２ｍｉ     

肝细胞生长因子对氧糖剥夺/再灌注神经元的保护作用

本文旨在探讨肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）对神经元氧糖剥夺/再灌注损伤的影响。取原代培养12d的Sprague-Dawley大鼠大脑皮层神经元,无糖、无氧（95%N2＋5%CO2）孵育2h后,换含25mmol/L葡萄糖的培养液、常氧培养0-24h,以MTT比色法检测细胞活力、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）漏出率作为细胞损伤指标,建立体外氧糖剥夺/再灌注损伤细胞模型;用流式细胞仪和Hoechst33258染色分析细胞凋亡率;用RT-PCR和Western blot分别检测大鼠脑皮层神经元HGF受体c-Met mRNA和蛋白的表达。于氧糖剥夺2h/再灌注24h处理前2h,加入不同终浓度（5-120ng/mL）的HGF,观察HGF对皮层神经元的影响。结果显示,c-Met表达于皮层神经元,氧糖剥夺2h/再灌注24h后,c-Met mRNA和蛋白表达均显著上调,神经元细胞活力明显降低,LDH漏出率和细胞凋亡率显著增高。HGF预处理明显促进氧糖剥夺/再灌注损伤神经元的存活,降低LDH漏出率,最大效应剂量为80ng/mL。流式细胞术和Hoechst33258染色结果均显示,HGF（80ng/mL）显著降低氧糖剥夺/再灌注神经元的细胞凋亡率。此外,c-Met抑制剂SU11274（5μmol/L）完全阻断HGF的神经保护作用。结果表明,HGF对皮层神经元氧糖剥夺/再灌注损伤具有直接的保护作用,呈一定的剂量依赖关系,并能有效对抗神经元凋亡。     

一氧化氮供体对过氧化氢引起的心肌细胞损伤的保护作用

关于一氧化氮(NO)对心肌细胞是否具有保护作用目前尚存在争议,为探讨NO对过氧化氢(H2O2)引起的心肌细胞损伤是否具有保护作用及其可能的机制,实验将体外培养的新生大鼠心肌细胞分为3组(1)阴性对照组(Normal组);(2)H2O2组H2O2(0.1mmol/L)与心肌细胞共育4h;(3)S-亚硝基-N-乙酰青霉胺(SNAP)+H2O2组NO供体SNAP(0.5mmol/L)处理心肌细胞10min后,加入H2O2与心肌细胞共育4 h.用流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,心肌细胞损伤程度以心肌细胞存活率和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性来表示,同时检测心肌细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.通过激光共聚焦显微术检测在不同处理条件下心肌细胞胞内钙的变化.结果表明,正常心肌细胞LDH活性和细胞存活率分别为631.4±75.6 U/L和93.1±6.2%,细胞凋亡率为0;H2O2处理细胞后可使细胞LDH活性显著增高(1580.5±186.7 U/L,P＜0.01),细胞存活率明显下降(58.3±7.6%,P＜0.01),流式细胞仪检测到大量心肌细胞凋亡,凋亡率为26.4±5.7%;SOD活性较正常细胞19.67±0.85 NU/ml显著下降,为14.73±1.68 NU/m(P＜0.01),MDA含量较正常细胞6.95±0.83μmol/L显著增高,为15.35±3.49μmol/L(P＜0.01).SNAP预处理细胞可显著提高心肌细胞存活率(79.7±9.3%,P＜0.01),降低LDH活性和细胞凋亡率(分别为957.8±110.9 U/L和9.1±3.3%,P＜0.01);并提高细胞抗氧化能力,表现为较H2O2处理组的SOD活性增高(21.36±3.11 NU/ml,P＜0.01),MDA含量下降(9.12±1.47 μmol/L,P＜0.01).激光共聚焦显微镜检测结果表明,H2O2可升高细胞内钙,而SNAP则可降低细胞内钙,SNAP预处理细胞后可取消H2O2升高细胞内钙的作用.上述结果提示,NO供体SNAP可对抗H2O2对心肌细胞的损伤,其机制与提高心肌细胞抗氧化损伤能力和对抗H2O2引起的细胞内钙超载有关.     

Exendin-4对甲基乙二醛诱导PC12细胞氧化应激的影响

目的：探讨肠促胰岛素类似物（Ex-4）对甲基乙二醛（MG）诱导PC12细胞氧化应激的影响及其机制。方法：传代培养PC12细胞,不同浓度MG（0、0.25、0.50、0.75、1.0、2.0 mmol/l）处理PC12细胞12~48 h,或用不同浓度Ex-4（25、50、100、200 nmol/L）预处理24 h后加用MG（0.75 mmol/L）干预24 h后,MTT比色法检测细胞存活率;荧光探针法检测活性氧（ROS）含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）活力。Ex-4（100nmol/L）预处理PC12细胞24h加用MG（0.75 mmol/L）干预1 h后,Western blot检测蛋白P-IκB-α、IκB-α表达情况。结果：随着MG浓度的增加和作用时间的延长,PC12细胞存活率逐渐降低;加用不同浓度Ex-4预处理后,PC12细胞存活率较单独MG处理组逐渐升高。100 nmol/L的Ex-4预处理PC12细胞后,ROS表达量较MG单独处理组下降65.30%（P<0.01）; NAC预处理组（阳性对照）ROS表达量下降107.40%（P<0.01）;Ex-4预处理组SOD活力增加5.30 U/mg prot（P<0.01）;NAC预处理组SOD活力增加8.53 U/mg prot（P<0.01）。Ex-4预处理组P-IκB-α/IκB-α表达比例下降25.50%（P<0.01）; NAC预处理组P-IκB-α/IκB-α表达比例下降35.14%（P<0.01）。结论：Ex-4浓度依赖性地增加MG诱导的PC12细胞的存活率。Ex-4能够减轻MG诱导的PC12细胞的氧化应激,其机制可能涉及抑制蛋白IκB-α的活化。     

Tissue kallikrein protects cortical neurons against hypoxia/reoxygenation injury via the ERK1/2 pathway

Systemic or local delivery of human tissue kallikrein gene (hTK) has been shown to be an effective strategy to alleviate cerebral ischemia/reperfusion (I/R) injury, and tissue kallikrein (TK) administration can suppress glutamate- or acidosis-mediated neurotoxicity in vitro. In the present study, the role of TK in hypoxia/reoxygenation (H/R) induced neuronal cell death was investigated. We found that TK administration could remarkably alleviate H/R-induced neuronal injury by reduction of LDH release and promotion of neuron viability. The protective effects of TK could be counteracted by bradykinin B2 receptor (B2R) antagonist HOE140, which could suppress up-regulation of TK on the ERK signal pathway under H/R condition. These results indicate that TK plays an important role in preventing neurons from H/R damage at least partially through the TK-B2R-ERK1/2 pathway.     

Magnesium deficiency augments myocardial response to reactive oxygen species

Magnesium (Mg) deficiency and oxidative stress are independently implicated in the etiopathogenesis of various cardiovascular disorders. This study was undertaken to examine the hypothesis that Mg deficiency augments the myocardial response to oxidative stress. Electrically stimulated rat papillary muscle was used for recording the contractile variation. Biochemical variables of energy metabolism (adenosine triphosphate (ATP) and creatine phosphate) and markers of tissue injury (lactate dehydrogenase (LDH) release and lipidperoxidation), which can affect myocardial contractility, were assayed in Langendorff-perfused rat hearts. Hydrogen peroxide (100 micromol/L) was used as the source of reactive oxygen species. The negative inotropic response to H2O2 was significantly higher in Mg deficiency (0.48 mmol Mg/L) than in Mg sufficiency (1.2 mmol Mg/L). Low Mg levels did not affect ATP levels or tissue lipid peroxidation. However, H2O2 induced a decrease in ATP; enhanced lipid peroxidation and the release of LDH were augmented by Mg deficiency. Increased lipid peroxidation associated with a decrease in available energy might be responsible for the augmentation of the negative inotropic response to H2O2 in Mg deficiency. The observations from this study validate the hypothesis that myocardial response to oxidative stress is augmented by Mg deficiency. This observation has significance in ischemia-reperfusion injury, where Mg deficiency can have an additive effect on the debilitating consequences.     

番茄红素对大鼠乳鼠心肌细胞缺氧复氧的保护作用以及其机制

目的：探讨番茄红素对心肌细胞缺氧复氧的保护作用以及其分子机制。方法：采用原代培养心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分8组：正常对照组,H/R组,H/R＋番茄红素（1,2,4,8,16,32μmol/L）剂量组。观察各组细胞经H/R损伤后,细胞内天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的变化情况,选择正常对照组,H/R组,最佳番茄红素剂量组做MTT分析细胞凋亡,Western检测TRL 4以及NF-κB的表达。结果：番茄红素（16,8,4,2μmol/L）剂量组可显著降低缺氧/复氧损伤心肌细胞内AST、CK、LDH释放量及MDA的生成,并能提高SOD活性。此外番茄红素可减少心肌细胞缺氧/复氧损伤后的心肌凋亡,减少TRL 4受体以及NF-κB的表达。结论：番茄红素具有抗缺氧/复氧损伤,保护心肌细胞的作用,其机制可能是通过抑制TRL 4通路来实现的。