烟草受精后胚囊和合子的分离及合子的离体分裂

以酶解－振荡、酶解－解剖及酶解－研磨３ 种方法分离出烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ）受精后生活胚囊。其中以第三种方法效果最好。将分离的胚囊经再次酶解并结合显微解剖，进一步分离出合子、胚乳细胞及其原生质体。以微室饲养法培养离体合子，启动了第一次分裂。     

蓝猪耳卵细胞和合子的分离

蓝猪耳(Torenia fournieri)胚囊部分裸露出胚珠,在光学显微镜下能清楚观察到卵细胞和助细胞的形态结构.用解剖和酶解-解剖两种方法都能分离出生活卵细胞.用前种方法机械分离出的卵细胞数量较少(5%),但避免了酶对配子识别研究的干扰.在后种方法中加入0.1%纤维素酶和0.1%果胶酶既能使分离更加容易操作,又对卵细胞没有致命伤害,能在短时间内分离出较多的卵细胞(18%).用酶解-解剖方法也可分离出授粉14 h后的合子细胞.     

蝴蝶兰合子和胚的分离

该文用酶解一振荡法分离蝴蝶兰受精后的胚囊,然后显微解剖出合子、早期原胚及接近成熟的球形原胚。酶解液由O．7％-1．3％的纤维素酶、0．6％-1．0％果胶酶和10％甘露醇组成,pH5．8,酶解时间20-30min。分离的蝴蝶兰早期原胚和接近成熟的球形原胚均发现有发达的胚柄吸器。     

五唇兰合子与原胚的分离

分离合子和原胚可以为植物受精和胚胎发生提供很好的研究材料, 因此具有重要意义。用酶解-振荡法分离出五唇兰(Doritis pulcherrima)受精后胚囊, 然后以显微解剖获得合子和原胚。酶解液组成为0.7%–1.3%纤维素酶、0.6%–1.0%果胶酶和10%甘露醇, pH值为5.8, 酶解时间0.5–3.0小时。在分离的早期原胚和接近成熟的球形胚中, 珠孔端均有较发达的胚柄吸器。实验获得了对五唇兰胚胎发育的新认识, 合子和原胚的成功分离也为进一步的细胞学和分子生物学研究打下基础。     

烟草合子与二胞原胚在离体培养中的发育

用酶解-研磨法分离烟草与大叶烟草受精后的胚囊,继之以显微解剖分离合子与二胞原胚。将3—5个合子或二胞原胚置于微室的琼脂糖小滴中,以预先培养3—4天、分裂1—2次的烟草、大叶烟草或黄花烟草叶肉原生质体饲养。培养基为KM8p与其它附加成分。在25℃与黑暗下静置培养。培养3—4天,约60%合子完成第一次分裂。多数行不等分裂产生大小两个细胞。12天后形成少数原胚或多细胞团。二胞原胚培养亦分裂为多细胞原胚。研究了合子分离方法、合子发育时期、饲养细胞种类与培养天数等因素对合子离体发育的影响。     

莴苣胚囊细胞分离

用酶解和解剖方法分离了莴苣的卵细胞,助细胞,中央细胞和合子。莴苣子房先在酶液中酶解40～50min,然后在不含酶的分离液中用解剖针解剖子房。在解剖出的胚囊中,可看到卵细胞,两个助细胞和中央细胞的轮廓。将胚囊的合点端切破,轻轻挤压胚囊的珠孔端,四个细胞即可逸出。在最佳条件下,90min可从40个子房中分离出29个胚囊,进一步从中分离出11个卵细胞。分离出的胚囊细胞用显微操作仪收集备用。莴苣卵细胞的成功分离为进行离体受精探索创造了条件。     

莴苣胚囊细胞分离

用酶解和解剖方法分离了莴苣的卵细胞,助细胞,中央细胞和合子。莴苣子房先在酶液中酶解40～50min,然后在不含酶的分离液中用解剖针解剖子房。在解剖出的胚囊中,可看到卵细胞,两个助细胞和中央细胞的轮廓。将胚囊的合点端切破,轻轻挤压胚囊的珠孔端,四个细胞即可逸出。在最佳条件下,90min可从40个子房中分离出29个胚囊,进一步从中分离出11个卵细胞。分离出的胚囊细胞用显微操作仪收集备用。莴苣卵细胞的成功分离为进行离体受精探索创造了条件。     

胡萝卜精、卵细胞、助细胞和中央细胞的分离

用两个解剖针挤压胡萝卜花粉使其破裂释放出精细胞。用酶解-解剖方法分离胡萝卜胚囊中的卵细胞、助细胞和中央细胞。胡萝卜胚珠先在酶液中酶解40~50min,然后将其转移到不含酶的分离液中用解剖针解剖胚珠。将胚珠的合点端切破,轻轻挤压胚珠的珠孔,卵细胞、助细胞和中央细胞即可逸出。在最佳条件下,20min可从20个胚珠中分离出5个卵细胞。对分离胚囊细胞的渗透压和酶液成分进行了筛选。分离出的卵细胞用显微操作仪收集。胡萝卜精、卵细胞的成功分离为在双子叶植物中进行离体受精探索创造了条件。     

短柄五加开花后雌蕊的发育状态与受精作用的研究

短柄五加（ＥｌｅｕｔｈｅｒｏｃｏｃｕｓｂｒａｃｈｙｐｕｓＨａｒｍｓ．）开花当天,花药散粉,而雌配子体需经４～５ｄ才发育成熟。证实短柄五加为雄蕊先熟植物。开花第５天,成熟胚囊的比率为５７６９％,其余为退化和不育胚囊。开花第６天,胚囊开始受精。开花第１０天,受精胚囊占胚囊总数的５３５７％。柱头的可授期自开花后第４～５天开始,自花粉萌发至雌雄性核融合大约有２～３ｄ的间隔期。短柄五加受精过程与一般被子植物相同,其受精作用属于有丝分裂前配子融合类型。观察并统计了合子中雌性核仁的数目、存在状态,指出短柄五加合子中从雄性核仁出现到与雌雄性核仁融合为一个大核仁需经历３ｄ左右;如果以胚乳游离核数目为对照,大部分合子中雌雄性核仁的融合发生在３２～１２８个胚乳游离核时期。大多数合子是以雌雄性核仁融合为一个大核仁后进入合子分裂期;少数合子的雌雄性核仁不经融合也进入合子分裂期。观察到多精入胚囊、多精入卵以及成熟胚囊退化的现象。讨论了被子植物受精过程中有关受精终结的标志等问题。     

烟草初生胚胎乳细胞在微室培养中的发育

用酶解－研磨法分离出烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）受精后胚囊和初生胚乳细胞进行微室饲养培养。培养基为Ｋｍ８Ｐ附加各种其他成分,饲养细胞为分裂旺盛的烟草叶肉原生质体,在２５℃下静止暗培养。培养３天后,初生胚乳细胞开始第一次分裂,继续分裂至１４天时形成大的细胞团。首次报道了双子叶植物初生细胞的离体发育。     

观察植物胚胎发育的简便方法

观察植物胚胎发育过程通常采用切片法、胚珠水解压片法、整体解剖法、酶分离法和整体透明等几种方法,其中切片法制作过程复杂;用胚珠水解压片法时,胚珠的其它细胞会覆盖在胚囊上难以观察;整体解剖法的操作要求精细难度较大;酶分离法不能保证所需要的胚珠或子房通过酶解得到其中的胚囊;相比之下整体透明是比较好的方法,但在相差和一般干涉显微镜下只能观察早期的胚囊,如用染色处理,由于子房和胚珠大小不均一,染色时间难以掌握,而且胚囊以外的组织也会着色,影响胚囊内部结构的清晰度,在此我们介绍一种用整体透明直接在微分干涉差显微镜下观察     

分离烟草胚囊的新方法及诱导卵细胞与助细胞原生质体的原位融合

用渗透压冲击和酶解相结合的技术,成功地分离出大量形态完整、结构清晰的烟草生活胚囊。此法用酶浓度低,操作时间短、例于纯化,易于分离胚囊细胞原生质体,为植物雌性细胞操作提供了一种较实用的技术。此外,通过整溶液渗透压,可有效地控制及诱导卵细胞与助细胞原生质体的原位融合。     

酶解压片分离沙田柚胚囊与胚胎发育的研究

用２．５％纤维素酶与２．５％果胶酶混合液在３０℃下对已固定的沙田柚胚珠酶解６－１０小时,分离了开花前,授粉至受精间隔期,合子休眠期,胚和胚乳发育各期的胚囊。用Ｏｌｙｍｐａｓ相差显微装置进行观察与摄影,在胚囊中显示了沙田柚胚胎发育各主要阶段的结构特征。分析了酶解压片技术在柑桔属植物胚胎发育研究的前景。     

小麦分离合子与幼胚中膜钙和钙调素的分布

用非酶手工显微解剖法分离小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）合子与幼胚。应用金霉素（ＣＴＣ）和氟奋乃静（ＦＰＺ）荧光探针,观察了合子与胚胎发育过程中膜钙和活化钙调素的分布。合子原生质体ＣＴＣ荧光呈极性分布。二细胞至十几个细胞原胚时期各细胞间的ＣＴＣ和ＦＰＺ荧光均匀分布。幼小梨形胚胚体ＣＴＣ和ＦＰＺ荧光稍强于胚柄。接近分化的梨形胚ＣＴＣ荧光仅位于胚体与胚柄之间的几层细胞和胚体腹侧中部的几个细胞中。胚芽刚分化时,胚基部ＣＴＣ荧光较强,ＦＰＺ荧光则仅出现在胚基部。讨论了合子分离技术和膜钙与钙调素（ＣａＭ）在胚胎发育中的可能作用。     

高等植物合子离体培养研究进展

合子是高等植物个体发育的第一个细胞,在研究植物个体发育机理中有着不可替代的位置。植物体内合子细胞分裂并以胚胎发生方式形成新个体的特征在植物生物工程应用中独具特色。随着离体受精技术的发展和合子分离技术的改进,已从多种植物中得到了人工合子和从体内直接分离出了合子。合子离体培养系统的建立为研究高等植物个体发育最初阶段的合子激活机理提供了条件,也为探索利用合子胚胎发生的特征进行植物基因工程打下了基础。另外,探索异种植物间人工杂种合子的培养也是进行远缘杂交的新尝试。     

水稻“双－3”多胚发生的研究

水稻ＭＩＶ（双－３、籼稻）传粉后可以有多个花粉管同时进入胚囊．大多数胚囊的合子发育为一个正常的胚,但是有少数合子胚发生裂生并分化形成双胚芽和一胚根．有些胚囊的助细胞和卵细胞同时受精后,分别发育为助细胞胚和合子胚;有些胚囊中的反足细胞团可直接发育为胚．可见“双－３”水稻除有正常合子胚外还存在助细胞胚和反足细胞匹的多胚现象．     

水稻“双－3”多胚发生的研究

叶秀,陈泽濂,黎垣庆 　　水稻ＭＩＶ（双－３、籼稻）传粉后可以有多个花粉管同时进入胚囊．大多数胚囊的合子发育为一个正常的胚,但是有少数合子胚发生裂生并分化形成双胚芽和一胚根．有些胚囊的助细胞和卵细胞同时受精后,分别发育为助细胞胚和合子胚;有些胚囊中的反足细胞团可直接发育为胚．可见“双－３”水稻除有正常合子胚外还存在助细胞胚和反足细胞匹的多胚现象．     

合子草种子无机元素及脂肪油GC—MS联用分析

本文采用ICP法测定了合子草种子中无机元素含量,共检出20种元素,其中以K元素含量最高为12336．68（ug/g),采用GS－MS联用仪首次分析了合子草种子中脂肪油的组成,共分离鉴定出11种化合物,它们是癸烷,莰醇,月桂酸,肉豆蔻酸,十五烷酸,7－十六（碳）烯酸,软脂酸,十八酸二烯酸,反油酸,硬脂酸及花生酸,其中以不饱和脂肪酸含量最高。为合子草种子资源开发利用提供了实验资料。     

桔梗科4种植物分离配囊的比较研究

应用酶解技术分离出桔梗科四种植物(桔梗、轮叶沙参、杏叶沙参和羊乳)的胚囊。对胚囊的形态结构和贮藏物质的变化作了观察比较。它们的成熟胚囊结构基本相同,均由卵细胞、一对助细胞和中央细胞组成。反足器退化较早。但形态、大小等有一定差异。桔梗胚囊狭长,细胞质浓密;沙参(包括轮叶沙参与杏叶沙参)的胚囊也较狭长,细胞质不如前者浓密;羊乳胚囊非常宽大,而细胞质相当稀薄,与前三种植物的差异较大。它们均含有贮藏物质,显微化学反应表明主要系多糖物质。多糖颗粒的形状、大小各有特点,在胚囊受精前后的消长变化也有不同。其中羊乳与其它三种植物之间的差别较大。     

合子草

一、概述合子草(Actinostemma tenerum Griff)葫芦科(Cueuribitaceae)合子草属(Acti nostemma)一年生攀缓生草本植物。别名有黄丝藤、马爪包儿、天毯草、鸳鸯木鳖、盒儿藤、龟儿草等。合子草全草及种子入药,能利尿消肿,清热解毒。主治肾炎水肿、湿疹、疮疡肿毒。最近,日本报道,合子草中含有大量的与人参皂甙相似的四环三萜达玛烷型皂甙,为此,已引起许多学者的重视。二、植物形态合子草为柔弱草本,枝纤细,疏被长柔毛,后变无毛。叶柄细,长2—6厘米,被短柔