茵栀黄口服液联合熊去氧胆酸胶囊治疗胆汁淤积性黄疸的临床研究

目的:探讨茵栀黄口服液联合熊去氧胆酸胶囊治疗胆汁淤积性黄疸的临床疗效和安全性。方法:选择2016年9月-2018年3月我院收治的胆汁淤积性黄疸儿童94例,按随机抽签方式分为对照组及观察组,每组47例。对照组给予熊去氧胆酸胶囊治疗,观察组在对照组基础上给予茵栀黄口服液治疗,比较两组患儿治疗前后血清胆红素水平、肝功能及免疫指标水平的变化及不良反应的发生情况。结果:治疗后,两组总胆红素(Total Bilirubin,TBil)、直接胆红素(Direct Bilirubin,DBil)、谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、谷氨酰转肽酶(Glutamyl transpeptidase,GGT)、CD8~+水平均较治疗前显著下降(P0.05),且观察组TBil、DBil、ALT、AST、ALP、GGT、CD8~+水平均显著低于对照组[(86.29±11.07)μmol/L vs.(132.75±16.53)μmol/L、(53.47±6.71)μmol/L vs.(86.72±9.09)μmol/L、(76.53±8.60) U/L vs.(127.05±11.79) U/L、(138.59±12.14) U/L vs.(160.08±15.82) U/L、(206.88±79.04) U/L vs.(270.40±68.19) U/L、(223.04±89.59) U/L vs.(280.62±96.17) U/L、(22.80±3.79)%vs.(26.52±4.30)%](P0.05)。治疗后,两组CD4~+、CD4~+/CD8~+均较治疗前显著上升(P0.05),且观察组CD4~+、CD4~+/CD8~+[(38.91±7.20)%、(1.69±0.55)]均显著高于对照组[(34.67±6.26)%、(1.31±0.49)](P0.05)。治疗期间,两组患儿均没有出现相关不良反应。结论:茵栀黄口服液联合熊去氧胆酸胶囊治疗胆汁淤积性黄疸患儿可有效改善其胆红素水平及肝功能,且具有一定的免疫调节作用。     

微创踝关节融合术治疗老年创伤性踝关节炎中的临床效果及对患者氧化损伤与骨代谢的影响

目的:研究微创踝关节融合术治疗老年创伤性踝关节炎中的临床效果及对患者氧化损伤与骨代谢的影响。方法:收集2014年3月至2015年3月我院收治的94例老年创伤性踝关节炎患者,按随机数表法分为实验组和对照组,每组各45例。两组患者在手术前均进行常规检查,对照组采用常规开放式踝关节融合术,实验组采用微创踝关节融合术。对比两组治疗后血清氧化损伤指标肌红蛋白(MYO)、缺血修饰白蛋白(IMA)、总抗氧化能力(TAC)、丙二醛(MDA)水平,骨代谢指标碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、甲状旁腺素(PTH)、骨钙素(BGP)、降钙素(CT)水平,视觉疼痛模拟评分(VAS)、美国矫形外科足踝协会(AOFAS)评分及不良反应的发生情况。结果:治疗后,实验组血清MYO、IMA、MDA水平显著低于对照组[(20.48±2.59)ng/mL vs.(27.07±2.97)ng/m L,(65.68±8.20)U/L vs.(74.27±9.01)U/L,(5.01±1.03)nmol/L vs.(9.64±2.17)nmol/L](P0.05),血清TAC水平显著高于对照组[(11.40±2.50)kU/L vs.(7.36±1.03)kU/L](P0.05);血清ALP、BGP、CT水平均显著高于对照组[(103.28±12.47)U/L vs.(90.53±10.02)U/L,(11.08±1.42)ng/L vs.(8.01±1.23)ng/L,(61.39±5.87)ng/L vs.(50.28±4.92)ng/L](P0.05),ACP、PTH水平均显著低于对照组[(5.21±0.60)U/L vs.(8.03±0.92)U/L,(42.95±5.38)ng/L vs.(60.49±6.92)ng/L](P0.05);VAS评分显著低于对照组[(1.06±0.23)分vs.(3.79±0.67)分](P0.05),AOFAS评分显著高于对照组[(73.02±6.28)分vs.(65.58±5.13)分](P0.05);不良反应总发生率显著低于对照组[6.66%(3/45) vs. 20.41%(10/49)](P0.05)。结论:微创踝关节融合术可调节老年创伤性踝关节炎患者的骨代谢,增强骨密度,减少术后不良反应,有利于改善患者预后。     

运动对SD大鼠脑组织MDA、SOD和NGF含量的影响

目的:观察运动对脑功能的影响,为临床上运动疗法改善脑功能提供实验依据.方法:雄性SD大鼠24只,随机分为3组,分别为安静对照组(C组)8只,4周运动组(4E)8只,8周运动组(8E)8只,C组安静喂养,不进行运动训练,4E组适应性运动一周后进行4周跑台训练,8E组适应性训练一周后进行8周跑台训练,跑台坡度5°,每周运动5天.两组运动组分别在运动时间结束后取材,取大鼠脑组织,取右脑测定MDA、SOD、NGF含量.结果:经过4周跑台运动后,4E组MDA含量(3.75±0.63)nmol/mgprot,与C组(3.867+0.57)nmol/mgprot相比无明显差异,SOD含量(39.67±8.43)NU/mgprot,高于C组(30.14±9.60)NU/mgprot(P＜0.05),NGF含量(2.13:1±0.37)pg/mgpro高于对照组(1.42±0.12)pg/mgpro(P＜0.01);经过8周跑台运动后,8E组MDA含量(2.12±0.42)nmol/mgprot,低于C组(3.867±0.57)nmol/mgprot(P＜0.05),且低于4E组(P＜0.05),SOD含量(42.20±7.21)NU/mgprot,高于C组(30.14±9.60)NU/mgprot(P＜0.01),NGF含量(2.58±0.43)pg/mgpro高于对照组(1.42±0.12)pg/mgpro(P＜0.01),但与4E组间无明显差异.结论:长期有氧运动可降低大鼠脑组织中脂质过氧化水平,减少氧自由基的损害作用,同时提高NGF水平,促进脑组织再生修复能力.     

ERK信号通路对病毒性心肌炎心肌细胞CAR表达的影响

目的:观察细胞外信号调节激酶(Extracellular Regulated Protein Kinases,ERK1/2)信号通路对病毒性心肌炎(Viral Myocarditis,VMC)心肌细胞柯萨奇病毒-腺病毒受体(Coxsackie-adenovirus Receptor,CAR)表达的影响。方法:新生SD大鼠心肌细胞体外培养48 h后随机分为3组,除对照组外均体外接种柯萨奇B3m病毒(Coxsackievirus B,CVB),建立VMC细胞模型。C组:DMEM对照组;V组:CVB3m感染组;U+V组:接种病毒前30 min,给予ERK1/2通路抑制剂U0126(10μmol/L)。各组分别于种毒后12 h、24 h、36 h取心肌细胞,用Western blot法测定ERK1/2活化水平及CAR表达量,并按上述时间点观察各组心肌细胞形态、搏动情况、细胞损伤程度,取培养液测定乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果:在接种病毒后12 h,V组与C组相比,P-ERK1/2表达增高(3.25±0.61 vs 0.59±0.09,P0.05),CAR表达增高(1.03±0.17 vs 0.78±0.11,P0.05),逐步出现细胞病变,细胞搏动停止,培养液中LDH水平明显增高(1016.67±67.75 vs 336.34±28.67,P0.05),心肌酶学的升高与镜下心肌细胞损伤程度平行;U+V组与V组相比,P-ERK1/2表达降低(1.66±0.28 vs 3.25±0.61,P0.05),CAR表达明显增高(1.73±0.27 vs 1.03±0.17,P0.05),但细胞损伤却明显减轻,LDH水平明显降低(410.06±13.62 vs 1016.67±67.75,P0.05)。动态观察24 h、36 h,同样出现上述变化趋势。结论:ERK1/2信号转导通路参与心肌细胞感染CVB发生急性损伤的过程,并参与调控CAR的表达。在病毒感染后36 h内,阻断ERK1/2信号通路,CAR表达上调,并未加重心肌细胞损伤。     

人脐带间充质干细胞来源的外泌体减轻肝脏缺血再灌注损伤及机制的初步研究

目的探讨人脐带间充质干细胞来源的外泌体(huc MSCs-exo)对肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是否具有保护作用及可能的作用机制。方法利用贴壁法提取原代人脐带间充质干细胞(huc MSCs),超速离心方法提取细胞培养上清中的外泌体,分别进行鉴定;在体外实验中利用L02细胞缺氧复氧损伤模型探究huc MSCs-exo对细胞凋亡蛋白表达水平的影响;在体内实验中建立C57BL/6小鼠70﹪HIRI模型,72只小鼠随机分成四组,分别为Sham组(n=18)、IRI组(n=18)、PBS组(n=18)和exo组(n=18)。术后第6 h(n=6)、12 h(n=6)及24 h(n=6)通过检测血清AST及ALT水平、进行肝脏HE染色及CASPASE-3免疫组化实验,进一步探究huc MSCs-exo对HIRI的作用,多组组间比较采用方差分析。结果首先成功分离提取原代huc MSCs及huc MSCs-exo并进行鉴定;在体外,通过Western Blot实验证明huc MSCs-exo可降低L02细胞缺氧复氧(1﹪O2缺氧6 h,复氧2 h)损伤后细胞凋亡蛋白cleaved-CASPASE-3及cleaved-PARP表达水平;在体内,huc MSCs-exo处理后血清转氨酶水平较IRI组有所降低,这种差异在再灌注12 h的AST[(2895.0±998.6)U/L vs(971.8±797.8)U/L,t=4.010,P=0.004]及再灌注24 h的AST[(1926.0±377.2)U/L vs(597.2±524.8)U/L,t=5.231,P=0.000]、ALT[(2074.0±750.3)U/L vs(555.3±493.8)U/L,t=4.379,P=0.002]中具有统计学意义,肝脏HE染色及肝组织CASPASE-3免疫组化结果同样提示huc MSCs-exo可减轻C57BL/6小鼠70﹪HIRI。结论 Huc MSCs-exo可通过抗凋亡机制减轻HIRI,这为临床缓解HIRI提供新的治疗方向,其具机制有待进行更深入的研究。     

吡格列酮联合阿卡波糖对2型糖尿病患者血清RBP4、Leptin、Visfatin水平的影响

目的:探讨吡格列酮联合阿卡波糖治疗2型糖尿病的临床效果及对患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)、瘦素(Leptin)、内脂素(Visfatin)表达的影响。方法:选择2015年10月至2017年10月我院接诊的90例2型糖尿病患者为本研究对象,通过随机数表法将其分为观察组(n=46)和对照组(n=44)。对照组在常规治疗基础上给予阿卡波糖治疗,观察组在对照组基础上联合吡格列酮治疗,两组均连续治疗12周。比较两组治疗前后血糖、动态血糖、胰岛细胞功能、血清RBP4、Leptin和Visfatin水平的变化和不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hPBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)均明显低于对照组[(6.58±1.30)mmol/L vs.(7.47±1.44)mmol/L,(9.20±1.22)mmol/L vs.(10.36±1.31)mmol/L,(5.23±0.46)%vs.(5.88±0.62)%](P0.05);观察组最大血糖波动幅度(LAGS)、平均血糖波动幅度(MAGE)均明显低于对照组低,日平均达标率明显高于对照组[(7.43±1.26)mmol/L vs.(8.58±1.59)mmol/L,(3.39±0.42)mmol/L vs.(5.21±0.69)mmol/L,(90.34±2.40)%vs.(82.01±2.15)%](P0.05);观察组胰岛素β细胞(HOMA-β)明显高于对照组,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)明显低于对照组[(53.84±6.20) vs.(41.85±5.03),(2.84±0.40) vs.(3.72±0.72)](P0.05);观察组血清RBP4、Leptin、Visfatin水平均明显低于对照组[(8.30±1.20)mg/L vs.(10.57±1.65)mg/L,(8.23±1.42)μg/L vs.(10.84±1.79)μg/L,(17.40±2.42)μg/L vs.(24.03±3.06)μg/L](P0.05)。两组治疗期间均未发生头晕、低血糖等药物不良反应。结论:吡格列酮联合阿卡波糖治疗2型糖尿病患者的临床效果显著由于单用阿卡波糖的患者,其可显著患者降低血糖水平和改善IR,其内在机制可能和降低血清RBP4、Leptin、Visfatin的表达相关。     

小骨窗显微手术治疗基底节区高血压脑出血的效果分析及对血清CCCK-18、CTRP-3水平的影响

目的:探讨小骨窗显微手术治疗基底节区高血压脑出血的效果及对血清gaspase切割的细胞角蛋白18(CCCK-18)、补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP-3)水平的影响。方法:选取2016年5月至2018年5月我院收治的160例基底节区高血压脑出血患者,按照随机数表法将其分为观察组(n=82)和对照组(n=78)。对照组采用传统大骨瓣开颅术治疗,观察组采用小骨窗显微手术治疗。观察和比较两组的临床疗效,血肿清除率、术中出血量、术后意识恢复时间、住院时间,治疗前后NIHSS、ADL评分、血清CCCK-18、CTRP-3水平的变化及并发症的发生情况。结果:治疗后,观察组总有效率显著高于对照组[95.12%vs. 79.48%](P0.05);血肿清除率、术中出血量、术后意识恢复时间、住院时间均显著优于对照组[(93.62±3.58)%vs.(85.40±2.19)%,(92.47±12.56)mL vs.(189.25±26.47) mL,(2.01±0.58) d vs.(8.69±2.03) d,(13.39±2.08) d vs.(19.45±3.76) d](P0.05);NIHSS评分显著低于对照组[(9.76±1.42)分vs.(20.57±3.26)分](P0.05);ADL评分显著高于对照组[(86.42±8.64)分vs.(75.39±7.02)分](P0.05);血清CCCK-18水平显著低于对照组[(201.76±32.59) U/L vs.(237.57±39.20) U/L,(29.59±5.19) ng/mL vs.(42.97±7.94)ng/mL](P0.05);CTRP-3水平显著高于对照组[(289.59±35.19)ng/mL vs.(232.97±27.94)ng/mL](P0.05);并发症总发生率显著低于对照组[3.65%(3/82) vs. 14.10%(11/78)](P0.05)。结论:小骨窗显微手术治疗基底节区高血压脑出血的疗效显著,可更有效清除血肿,缓解血肿压迫,改善神经功能,减少继发性损伤,安全性高,可能与其降低血清CCCK-18水平及升高CTRP-3水平有关。     

急性力竭运动后小鼠肾细胞凋亡水平的变化及牛磺酸的保护作用

为探讨急性力竭运动后小鼠(Mus musculus)肾细胞凋亡水平的时相性变化及牛磺酸对肾的保护作用,将56只雄性小鼠随机分为对照组、力竭运动组(分为运动后即刻组、12h组、24 h组和48 h组)及牛磺酸运动组(分为12h组和24 h组),每小组8只,一次性力竭游泳运动后检测肾细胞凋亡水平、Bcl-2和Bax蛋白表达、一氧化氮(NO)含量及结构型一氧化氮合酶(cNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的变化.结果显示,力竭运动后各组小鼠肾细胞凋亡水平呈先升高后下降的趋势,其中运动后24 h组的凋亡水平达峰值(P＜0.05).与对照组相比,运动各组Bax表达均显著增强(P＜0.05).除运动后即刻组外,运动各组Bcl-2表达显著减弱(P＜0.05).各组Bax/Bcl-2比值显著升高,并在运动后24 h达峰值(P＜0.01),后出现下降趋势.小鼠力竭游泳后24 h和48 h肾组织NO含量显著高于对照组(P＜0.05),同时iNOS活性升高(P＜0.01),cNOS活性无显著性变化.相比同时刻运动组,牛磺酸运动组小鼠肾细胞凋亡水平、Bax表达及Bax/Bcl-2比值、iNOS活性显著降低(P＜0.05),Bcl-2表达显著升高(P＜0.05).以上结果表明,急性力竭运动可导致肾细胞凋亡的发生,iNOS、Bax、Bcl-2水平及Bax/Bcl-2比值可能在肾细胞凋亡的发生过程中发挥重要的介导作用.牛磺酸可通过调控iNOS活性及Bax/Bcl-2比值,抑制急性力竭运动后小鼠肾细胞凋亡的发生.     

腺苷蛋氨酸联合白蛋白治疗新生儿黄疸的临床疗效及对血清γ-谷氨酰转移酶、胰岛素样生长因子水平的影响

目的:探讨腺苷蛋氨酸联合白蛋白治疗新生儿黄疸的临床疗效及对患儿血清γ-谷氨酰转移酶、胰岛素样生长因子水平的影响。方法:选取2017年3月至2019年3月我院收治的203例新生儿黄疸患儿,按照随机数表法分为观察组(n=105)和对照组(n=98)。对照组采用白蛋白治疗,观察组采用腺苷蛋氨酸联合白蛋白治疗。观察及对比两组治疗疗效,黄疸消退时间及黄疸指数水平,治疗前后胆红素各项指标、γ-谷氨酰转移酶、胰岛素样生长因子、转铁蛋白水平的变化。结果:治疗后,观察组总有效率显著高于对照组[92.38%(97/105) vs. 80.61%(79/98)](P0.05);黄疸消退时间及黄疸指数水平均显著低于对照组[(4.15±0.82) d vs.(5.31±0.92) d,(56.02±7.36)μmol/L vs.(82.86±9.32)μmol/L](P0.05);间接胆红素、结合胆红素、总胆红素水平均显著低于对照组[(108.75±6.21) d vs.(146.03±7.32) d,(7.49±0.85)μmol/L vs.(9.57±1.02)μmol/L,(117.80±6.52)μmol/L vs.(151.09±8.34)μmol/L](P0.05);γ-谷氨酰转移酶、胰岛素样生长因子均显著低于对照组[(56.01±6.45) U/L vs.(89.56±10.73) U/L,(19.30±2.17) ng/L vs 26.78±3.67) ng/L](P0.05);而转铁蛋白水平均显著高于对照组[(1.96±0.27)g/L vs.(1.60±0.24)g/L](P0.05)。结论:腺苷蛋氨酸联合白蛋白治疗新生儿黄疸的临床疗效显著优于单用白蛋白治疗,其可有效改善患儿的黄疸临床症状,降低血清胆红素、γ-谷氨酰转移酶、胰岛素样生长因子水平。     

miR-181a通过调控上皮间质转化过程影响卵巢癌细胞的迁移和侵袭

目的:探讨mi R-181a在卵巢癌细胞中的表达及对卵巢癌细胞的迁移和侵袭的影响和可能机制。方法:采用细胞免疫荧光检测卵巢癌细胞中抗波形蛋白和E-钙粘蛋白的表达,Western blotting检测mi R-181a对抗波形蛋白和E-钙粘蛋白的表达情况的调控;划痕愈合实验检测mi R-181a对卵巢癌细胞迁移能力的影响;Transwell侵袭实验检测mi R-181a对卵巢癌细胞侵袭能力的影响。结果:增加mi R-181a的表达后,EMT过程中的相关蛋白激活水平下调,mi R-181a一定程度上可以抑制卵巢癌细胞的EMT过程;过表达mi R-181a后可以明显影响Vimentin[D1(4.58±0.85)vs(0.29±0.02),P0.05;D5(4.16±0.79)vs(0.29±0.02),P0.05]和E-Cadherin[D1(4.75±0.41) vs.(4.56±0.38),P0.05;D5(2.19±0.18) vs.(4.56±0.38),P0.05]蛋白的表达;COC1细胞的迁移能力随mi R-181a的表达的增高而降低[(19.24±4.31)%vs.(25.95±6.02)%,P0.05;(51.25±8.75)%vs.(73.49±12.54)%,P0.05];过表达mi R-181a后可以一定程度上减弱卵巢癌COC1细胞的侵袭能力[(74.64±8.21)vs(231.98±21.72),P0.05]。结论:mi R-181a通过调控上皮间质转化过程影响卵巢癌细胞的迁移和侵袭行为。     

MEK抑制剂抑制吗啡依赖及戒断大鼠脊髓神经元NOS的表达

目的：观察鞘内注射丝裂原活化蛋白激酶抑制剂U0126对吗啡依赖及戒断大鼠戒断症状和痛敏行为以及脊髓神经元NOS表达的影响。方法：采用吗啡依赖及戒断模型,分为正常对照组、依赖组、戒断组（戒断1h）、U0126组,分别作行为学评分（n=8）、免疫组织化学（n=6）和免疫印迹检测（n=4）。结果：①鞘内注射U0126可明显减轻吗啡依赖大鼠戒断症状,戒断组戒断症状评分为28．6±4．89,U0126组为22．5±4．09（P〈0．05）;戒断组TEA评分为13．5±2．55,U0126组为10．0±2．76（P〈0．05）;②鞘内注射U0126可明显减少L5节段脊髓背角Fos阳性神经元的数目,U0126组为287±54,低于戒断组（380±71,P〈0．05）;③U0126组nNOS和iNOS阳性神经元的数目分别为180±32、10．8±2．8,均低于戒断组（239±45,16．8±5．1,P〈0．05）,两给药组脊髓NOS蛋白的表达也显著减少。结论：MEK抑制剂能减轻吗啡依赖及戒断大鼠的戒断症状和在脊髓水平抑制NOS的表达,表明ERK可能参与调控NOS的表达。     

高磷血症维持性血液透析患者的临床分析

目的：比较不同血磷水平的维持性血液透析的尿毒症患者的临床表现和实验室指标,探讨其临床意义。方法：选择上海交通大学医学院附属新华医院（崇明）肾内科28例高血磷（SP〉1．6mmol／L）的维持性血液透析患者为病例组,30例血磷正常（SPN1．6mmol／L）维持性血液透析患者为对照组,比较两组患者的原发病组成,年龄,性别,透析龄,皮肤瘙痒发生率,腰背痛发生率,血钙,血碳酸氢根,血红蛋白,红细胞压积,血碱性磷酸酶,肾功能,血浆白蛋白水平及左心室肥厚发生率。结果：病例组与对照组在原发病组成,年龄（43．2±9．8岁VS40．5±12．2岁）,男女性别比例（16／12vs．17／13）,透析龄（32．56±6．71月vs．35．43±5．82月）等方面无显著性差异（P〉o．05）,有可比性,在血红蛋白（83．22±6．71g／Lvs103．36±5．84g/L）,红细胞压积（24．83±1．92％vs．30．76±1．52％）,血钙（1．71±0．16mmol／Lvs．2．23±0．21mmol／L）,血碳酸氢根（14．2±3．1mmol／Lvs20．6±4．9mmol／L）,血碱性磷酸酶（124．26±16．33U／Lvs．61．47±14．91U/L）,皮肤瘙痒发生率（22／28vs．7／30）,腰背痛发生率（19／28vs．6／30）,左心室肥厚发生率（20／28vs12／30）,有显著性差异（P〈0．05）,肌酐（956±142mmol／LVS．923±156mmol／L）,尿素氮（23．1±6．3mmol／LVS．24．8±8．9retool／L）,血浆白蛋白（30．5±3．8g/Lvs．31．2±2．9g/L）,无显著性差异（P〉0．05）。结论：伴有高磷血症的维持性血液透析患者与血磷正常的患者相比,血碱性磷酸酶,皮肤瘙痒发生率,腰背痛发生率及左心室肥厚发生率较高,而血钙,血碳酸氢根,血红蛋白及红细胞压积较低,有一定差异。     

益生菌对胆汁淤积性黄疸大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白的影响

目的探讨双歧三联活菌(培菲康)对胆汁淤积性大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1(zonula oc-cludens-1)和Occludin表达的调控机制。方法雄性3周龄SD大鼠随机分为对照组、模型组和培菲康组,模型组和培菲康组均给予α-异硫氰酸萘酯(ANIT)50 mg/kg一次性灌胃,建立急性肝内胆汁淤积动物模型,培菲康组于造模前4 d开始给予培菲康4.2×107个活菌数/(kg.d)灌胃大鼠。分别于造模后24、48和72 h三个时间点处死大鼠,取末端回肠黏膜组织,采用免疫组化和Western blots免疫印迹法检测紧密连接蛋白ZO-1、闭锁蛋白(Occludin)的分布和表达,并利用图像分析系统对Western blots图像结果进行定量分析。结果ZO-1和Occludin蛋白主要沿大鼠小肠黏膜上皮细胞膜的顶端呈线状分布,模型组大鼠24 h时ZO-1和Occludin的阳性染色较对照组减少,48 h减少最为明显,72 h阳性染色有所恢复,而培菲康组大鼠各时间点ZO-1和Occludin的阳性染色和模型组相比均明显增多。Western blots结果与免疫组织化学结果相一致,模型组24 h已经开始下降(ZO-1 0.1294±0.0481)、(Oc-cludin 0.1950±0.0441),48 h达到最低(ZO-1 0.0395±0.0095)、(Occludin 0.0137±0.0092),72 h开始恢复(ZO-10.2024±0.0498)、(Occludin 0.1494±0.0355),各时间点与对照组(ZO-1 0.2887±0.0237)、(Occludin 0.4266±0.0670)相比差异有统计学意义(P0.01);而培菲康组各时间点蛋白表达分别为24 h(ZO-1 0.2110±0.0367)、(Occludin 0.3056±0.0572),48 h(ZO-1 0.1173±0.0423)、(Occludin 0.0521±0.0123),72 h(ZO-1 0.2601±0.0191)、(Occludin 0.2050±0.0721),与模型组相应时间点数据相比差异有统计学意义(P0.05)。结论双歧三联活菌能够影响胆汁淤积性大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白的分布和表达,可以恢复肠黏膜上皮屏障的完整性。     

白色念珠菌生物膜体外模型的建立及不同检测方法比较

目的建立白色念珠菌生物膜体外模型,为进一步研究白色念珠菌生物膜的耐药机制及干预提供基础。方法平板法培养白色念珠菌生物膜,利用扫描电镜、激光共聚焦显微镜和荧光显微镜等多种检测方法观察生物膜形成情况。结果白色念珠菌能够在玻片上形成典型的生物膜,通过荧光显微镜、扫描电镜和激光共聚焦显微镜下观察白色念珠菌随着时间增加逐渐增加,48 h形成初步生物膜,72 h结构更加复杂和成熟。ISA软件定量化分析显示,SYTO9/PI荧光探针标记的生物膜模型的区域孔径(AP)在24、48和72 h分别为0.95±0.06、0.89±0.01和0.83±0.01,平均扩散距离(ADD)分别为1.16±0.13、1.26±0.06和2.43±0.76,结构熵(TE)分别为4.87±0.34、5.18±0.35和5.47±0.16,两两比较,差异均有统计学意义(P0.05)。Im age-Pro P lus 6.0软件分析显示,生物膜内真菌死亡率分别为(34.71±2.72)%、(36.63±4.20)%和(47.41±2.53)%,与24 h及48 h相比,72 h真菌死亡率增加差异具有统计学意义(P0.05)。结论平板法能够较好地建立白色念珠菌生物膜体外模型,并可利用多种方式检测。     

苯甲基磺酰氟（PMSF）在犬精子4℃保存中的作用

目的探讨4℃保存的条件下,苯甲基磺酰氟（phenylmethylsulfonyl fluoride,PMSF）对犬精子的保护作用。方法犬精子以含不同浓度PMSF的Tris-卵黄液（Tris-egg yolk,EYT）处理后,于4℃低温保存,在24、48、72、96 h分别以伊红、瑞-吉和吖啶橙染色检测精子活率、顶体膜和DNA完整性。结果低温保存24 h后,吖啶橙染色检测DNA断裂率（%）：对照组（5.93±0.32）,实验组：20μg/mL（4.50±0.38）、40μg/mL（4.20±0.25）、80μg/mL（4.21±0.46）、160μg/mL（3.87±0.67）,P〈0.05;各浓度组之间没有明显差异;72 h后,犬精子活率仍〉30%;96 h内,对照组和实验组犬精子在活率、顶体膜完整性上未见明显差异。结论PMSF于4℃低温保存条件下对犬精子具有保护作用,24 h内能有效保护精子DNA双链的完整性,4℃低温保存72 h后,犬精子仍符合人工授精要求。     

大鼠胸主动脉缩窄诱导心肌肥厚模型的建立

目的建立大鼠胸主动脉部分缩窄诱导心肌肥厚动物模型。方法雄性SD大鼠30只,随机分为两组：胸主动脉缩窄组20只和同期假手术组10只。在右无名动脉和左颈总动脉之间将主动脉结扎于8G针头上,随后将针头退出即可。术后10周,采用超声心动图检测心脏、观察心脏的大体剖面以及HE染色、测量心肌肥厚指数评价心肌肥厚的效果。结果术后10周,肉眼观：模型组心脏体积明显大于对照组。M型超声示：模型组较假手术组缩短分数下降,左室内径和室壁厚度明显增加。超声测量结果示：模型组与假手术组比较：室间隔厚度增加明显（2.527±0.269 vs.1.943±0.1）mm,（P〈0.01）;后壁厚度增加明显（2.492±0.242 vs.1.902±0.076）mm,（P〈0.01）;缩短分数略减小（49±7.681 vs.55.7±9.828）（P〉0.05）;左室舒张末期内径、左室收缩末期内径及射血分数均无明显变化。心脏肥厚指数明显增大（3.196±0.11 vs.1.785±0.099）,P〈0.01。结论胸主动脉缩窄可以导致大鼠心肌肥厚,为研究心室肥厚、心肌功能障碍以及心肌重构提供了一个很好的模型。     

Nucleostemin基因在卵巢上皮性肿瘤的表达及与病理分型的关系

目的：研究核干细胞因子Nucleostemin（NS）基因在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨其与肿瘤病理分型的关系。方法：采用RT-PCR及Western blot检测36例卵巢癌组织手术标本,32例卵巢良性上皮肿瘤组织手术标本,12例正常卵巢组织标本中Nu-cleostemin基因及相应蛋白的表达,采用分组对照的方法对比3组样本中NS基因及蛋白的表达情况,并进行相对定量研究。采用统计学方法检测NS基因的表达是否与临床病理分级及血清CA125存在关联。结果：①卵巢癌组织中NS的阳性表达率显著高于良性肿瘤组织及正常卵巢组织;②卵巢癌组织中,淋巴结转移组NS的表达水平高于未转移组;③临床分期Ⅲ期组的表达水平高于ⅠB期组;④中、低分化组的表达水平高于高分化组。结论：卵巢癌组织中存在NS基因的高表达,其表达量与组织类型无关,而与临床TNM分期及组织分级正相关。     

重度OSAS患者前额叶皮质及岛叶1H—MR波谱研究

目的：利用氢质子MRS（IH-MRS）探讨重度阻塞性呼吸睡眠暂停综合症（Severeobstructivesleepapneasyndrome,S-OSAS）患者前额叶皮质及岛叶脑代谢产物特征。方法：选择18例S-OSAS患者（S-OSAS组）和15名健康志愿者（HC组）行左侧前额叶皮质及岛叶1H-MRS检查,测量两组左侧前额叶皮质区及岛叶N-乙酰天冬氨酸／肌酸（NAA／Cr）、胆碱／肌酸（Cho／Cr）值。对患S-OSAS累计时间与前额叶皮质及岛叶NAA／Cr作直线相关分析。结果：与正常对照组相比,S-OSAS患者左侧前额叶皮质、岛叶NAA／Cr比值降低,分别为1．43±0．47、1．34±0．06,对照组分别为1．51±0．65、1．45±0．07;S-OSAS组患者左侧前额叶皮质、岛叶Cho／Cr分别为0．90±0．08、1．195：0．13,对照组分别为0．87±0．07、1．09±0．02,两组差异有统计学意义。前额叶皮质及岛叶代谢物NAA／Cr与患S-OSAS累计时间成负相关性（r值分别为-0．965、-0．955,P〈0．01）。结论：1H-MRS显示S-OSAS患者前额叶皮质及岛叶病理生理变化,从该区代谢物的改变反应出S-OSAS患者执行及情感功能的异常,其NAA/Cr改变程度与患S-OSAS累计时间相关。     

肝细胞生长因子基因修饰的人脐带间充质干细胞对大鼠慢性肝损伤的治疗研究

目的：研究肝细胞生长因子（HGF）基因修饰的人脐带间充质干细胞（MSC）对Wistar大鼠慢性肝损伤的治疗作用。方法：利用携带人HGF基因的重组腺病毒（Ad～HGF）对MSC进行基因修饰;通过皮下注射CCl4-橄榄油溶液建立大鼠肝损伤模型;56只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、MSC组、HGF组和HGF／MSC组,分别尾静脉注射生理盐水、MSC、Ad-HGF或HGF／MSC,通过血清肝功能检测及肝组织的生化指标、病理切片等评价治疗效果。结果：利用腺病毒将HGF基因转入MSC并确定了最佳感染条件。CCl4-橄榄油诱导4周后,动物肝脏外观出现明显的脂肪变性和血清转氨酶明显升高,表明成功诱导了大鼠慢性肝损伤模型。经过4周治疗,治疗组动物的体重明显升高、肝指数明显降低,动物存活率高于模型组（模型组：50％;MSC组：70％;Ad-HGF组：70％;HGF／MSC组：90％）。肝功能指标测定结果显示,与模型组比较,HGF／MSC组动物的天门冬氨酸氨基转移酶（406.75±35.98 vs.513.75±12.71U／L,P〈0.01）、丙氨酸氨基转移酶（124.6±10.6 vs.169.67＋15.38 U／L,P〈0.05）和总胆红素（14.6±2.08 vs.19.25±1.38g／dL,P〈0.01）均明显降低,白蛋白含量（29.1±1.3vs.22.05±2.61g／L,P〈0.05）明显升高;Ad-HGF组只有天门冬氨酸氨基转移酶（436.0±18.40vs.513.75±12.71U／L,P〈0.05）明显降低;而单纯MSC治疗对肝功能改善不明显。丙二醛测定结果显示,治疗后动物肝组织中的过氧化反应均较模型组显著减弱。HGF／MSC组和MSC组动物肝组织中的羟脯氨酸含量与模型组比较明显降低（69.27±14.58,63.23±13.23 vs.96.59±15.05mg／mL,P〈0.01）。上述实验结果提示3种治疗方式对CCl4-橄榄油引起的大鼠肝损伤均有一定的治疗效果,可减轻CCl。导致的肝损伤程度,增加动物体重,降低肝脏指数,减轻肝组织的过氧化反应,提高动物的存活率,其中HGF／MSC治疗效果最为明显,而且细胞注射没有引起动物的不良反应。结论：3种治疗方式均可改善CCl。导致的肝损伤,其中以HGF／MSC对肝损伤的治疗效果最好。本实验为HGF／MSC的临床研究提供了新的实验数据,为治疗肝损伤提供了新的治疗措施。     

大剂量阿托伐他汀对冠心病合并高尿酸血症PCI术后Scr、hsCRP及NGAL的影响

摘要目的：探讨大剂量阿托伐他汀对冠心病合并高尿酸血症PCI术后scr、hsCRP及NGAL的影响。方法：选取2010年6月至2012年6月间于我院接受诊断和治疗的冠心病合并高尿酸血症患者64例,随机分为观察组与对照组,每组32例。观察组给予大剂量阿托伐他汀治疗,对照组给予常规剂量阿托伐他汀治疗。结果：两组患者治疗前Scr、hsCRP及NGAL水平之间相互比较无显著性差异（P〉0．05）。观察组患者术后24hhsCRP水平为（6．7±1．5）m∥L,72hhsCRP水平回落至（5．7±1．0）mg门L,均明显低于对照组（P〈0．05）。观察组患者术后24hNGAL水平为（59．1±12．3）ng／L,72hNGAL水平回落至（47．8±10_3）ngm,均明显低于对照组（P〈0．05）。观察组心脏不良事件发生率明显低于对照组（P〈O．05）。结论：大剂量阿托伐他汀对于冠心病合并高尿酸血症患者PCI术后有一定的肾脏保护作用,且其安全性良好。