β—胡萝卜素高产丛霉菌株的筛选及发酵

从自然界中分离出２７株丛霉菌,筛选了β－胡萝卜素高产菌株,考察了液态发酵和半固态发醇生产胡萝卜素的适宜条件。在含糖蜜和尿素的液态培养中进行静态发酵时,每升发酵液中生成２０ｍｇ～９０ｍｇβ－胡萝卜素。在用玉米胚、糖蜜和尿素制成的半固态培养基上进行发酵时,获得较高浓度（０．８４６ｍｇ／ｇ干基）的β－胡萝卜素。     

利用发酵促进剂提高红酵母β-胡萝卜素产率

为提高红酵母生物合成β-胡萝卜素的产量,分别研究了几种添加物对发酵过程的促进效应。试验结果表明：分别添加硫胺素、核黄素、大豆油和番茄汁可以显著促进红酵母合成β-胡萝卜素。当按单因素试验确定的最优添加量联合添加硫胺素1.5mg/L、核黄素3mg/L、大豆油5mg/L、番茄汁6mg/L时,试验证实β-胡萝卜素发酵产率可比对照提高80%以上,值得进一步研究。     

氮源种类及溶氧水平对锁掷酵母产类胡萝卜素组分的影响

在锁掷酵母（Sporidioboluspararoseus）发酵产类胡萝卜紊的过程中,发酵产物中类胡萝卜紊种类繁多,而且性质相似,加大了不同色素分离纯化的难度。为定向积累不同种类的类胡萝卜素,以本实验室保藏锁挪酵母JD-2为出发菌,研究了氮源种类和浓度及溶氧对锁掷酵母产类胡萝卜素的影响,并在7L发酵罐中进行了补料分批发酵试验。发现培养基中同时添加有机氮源和无机氮源且溶氧控制较低（5％）时有利于β-胡萝卜素的大量积累,最佳有机氮源和无机氮源分别为玉米浆（20g／L）、硫酸铵（5g／L）。补料分批发酵时β-胡萝卜素产量达到31．28mg／L,红酵母烯12．38mg／L。培养基中只添加有机氮源且相对溶氧控制相对较高（30％）时有利于红酵母烯的大量积累,最佳有机氮源为酵母膏（20g／L）。补料分批发酵时红酵母烯产量达到38．96mg／L,8．胡萝卜素12．36mg／L。     

发酵促进剂对三孢布拉氏霉菌发酵产β-胡萝卜素的影响

通过单因素实验研究了不同浓度的酮康唑,表面活性剂(Span-20,Span-60,Tween-80),正十二烷,β-紫罗兰酮对三孢布拉氏霉菌合成β-胡萝卜素的影响。结果表明当酮康唑添加量为0.003%时,β-胡萝卜素的含量由1 125mg·L-1增加至1 425mg·L-1;与Span-60,Tween-80相比,当Span-20的添加量为0.1%时,β-胡萝卜素的含量最大提高至1 411mg·L-1;发酵培养基中添加1%的正十二烷,相比空白组的β-胡萝卜素含量提高了9%;β-紫罗兰酮添加量为0.1%时,β-胡萝卜素的含量由1 324mg·L-1提升到1 450mg·L-1。     

不同培养方式对牛樟芝活性组分的影响

牛樟芝因含有多种活性成分且在抗癌、保肝等方面有着良好的功效而备受关注。本文考察了固态发酵以及不同液态发酵方式对牛樟芝活性产物的影响。结果显示,固态发酵不同谷物对活性产物的合成有明显的影响,青稞作为发酵谷物基质,其活性产物种类多且含量高,Antrodin C、Antroquinonol产量分别为5 901.27 mg/kg、3 715.76 mg/kg。常规液态发酵菌丝体中主要含有Antrodins类化合物,以Antrodin C为主,但不能合成Antroquinonol类化合物。通过添加前体物辅酶Q_0可以诱导牛樟芝菌丝体在液态发酵中合成Antroquinonol;在此基础上,添加植物油进行同步萃取发酵,能够显著提高牛樟芝菌丝体活性成分种类和产量,除了诱导合成Antroquinonol之外,还有大量Antroquinonol B合成;同时,大多数活性成分在发酵过程中不断被富集萃取,Antrodin C、Antroquinonol产量分别为289.80 mg/L、95.39 mg/L。Antrodin C产量比常规液态发酵提高了7.06倍,而Antroquinonol产量比诱导发酵提高了203.89%。     

酸奶菌群发酵糖蜜产复合有机酸化剂的研究

【背景】开发安全、有效、稳定、适口性好、对环境无危害的无抗饲料添加剂是我国畜牧业的重中之重,酸化剂作为功能性饲料添加剂在众多替抗产品中有较大的优势。【目的】通过酸奶菌群发酵甜菜糖蜜制备低成本乳酸型复合液态酸化剂。【方法】以11种不同的新疆农牧民传统发酵酸奶菌群为出发菌,经MRS培养基富集乳酸菌群,选择产酸量高的菌群进行甜菜糖蜜发酵试验,并对菌群发酵时间、发酵条件、糖蜜浓度、氮源及中和剂进行优化。【结果】在糖蜜浓度为100 g/L、培养基未灭菌且37℃静置发酵48 h时,B2菌群发酵乳酸产量为34.52 g/L,总酸为83.42 g/L,加入中和剂Na₂CO₃后其乳酸产量达73.42 g/L,总酸达到169.37 g/L;B5菌群发酵乳酸产量可达61.12 g/L,总酸可达112.50 g/L,加入中和剂Ca（OH）₂后其乳酸产量达74.37 g/L,总酸为137.26 g/L。B2菌群发酵原液对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及产气荚膜杆菌均有较强的抑制作用;B5菌群发酵原液则对产气荚膜杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O...     

酵母菌利用糖蜜发酵产麦角甾醇的工艺条件优化

麦角甾醇是由酵母菌产生的具有重要经济价值的代谢产物。为了提高酵母菌利用糖蜜发酵生产麦角甾醇的产量,通过响应面分析法优化了发酵培养基配方,并在5 L发酵罐对发酵过程pH控制和底物流加补料方式进行了优化。结果表明,利用优化后的发酵培养基,即糖蜜总糖40 g/L,KH2PO4 1 g/L,K2HPO4 1.86 g/L,CuSO4·5H2O 17.5 mg/L,FeSO4·7H2O 13.9 mg/L,MgSO4·5H2O 12.3 mg/L,玉米浆10 mL/L,麦角甾醇产量比优化前提高了29.5%;利用恒定pH控制策略,在5 L发酵罐进行分批发酵,使麦角甾醇产量提高了62.1%;进一步采用底物流加补料策略,使麦角甾醇产量达到1 953.85 mg/L,是分批发酵的3.2倍,而且麦角甾醇产率比分批发酵提高了42.7%。为酵母菌发酵糖蜜产麦角甾醇的产业化应用奠定了基础。     

甘蔗糖蜜发酵生产柠檬酸

从8株黑曲霉A.niger菌株中筛选获得1株适应甘蔗糖蜜深层发酵柠檬酸的菌株A.niger-94,研究了巴基斯坦糖蜜的预处理方法,结果表明：巴基斯坦糖蜜不同于国产糖蜜,CaO处理法是最适宜的糖蜜种子培养基预处理方法,CaO法＋草酸复合处理则是最适的糖蜜发酵培养基预处理方法,在上述条件下,摇瓶发酵115h左右,与未经处理的糖蜜相比,产酸由3．7g/100ml提高至9．68g/100mg。     

毛云芝菌利用糖蜜酒精废水产漆酶培养基优化

为提高毛云芝菌的漆酶产量,降低生产成本,同时使糖蜜废水中的营养成分得到充分利用,变废为宝,以糖蜜废水作为碳源,对毛云芝菌发酵产漆酶进行研究。在单因素试验基础上,以不同浓度糖蜜废水、尿素含量为自变量,漆酶活力为因变量,采用Box-Behnken设计方法得到最佳的培养基配方为糖蜜废水浓度47%,尿素添加量0.5%,漆酶活力可达1 810.0 U/mL,约为优化前的6倍。说明毛云芝菌利用糖蜜废水作为碳源生产漆酶是可行的,为糖蜜废水资源化利用高效生产有价值产品奠定了理论基础。     

β-胡萝卜素抑制MCF-7细胞生长上调过氧化酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达

为了研究过氧化酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达在β 胡萝卜素影响乳腺癌MCF 7细胞活力中所起的作用,采用MTT法测定细胞活力、Western 印迹检测细胞中PPARγ的蛋白质水平,用RT-PCR从mRNA水平检测细胞内PPARγ、P21^WAF1/CIP1、COX-2和P27表达.研究发现,β 胡萝卜素显著抑制人乳腺癌细胞株MCF-7细胞的生长,β-胡萝卜素对细胞生长的抑制作用呈现出时间和计量依赖关系;β-胡萝卜素能够呈现时间效应地从mRNA和蛋白质水平显著上调PPARγ的表达,β-胡萝卜素能够通过PPARγ调节P21^WAF1/CIP1和COX-2mRNA水平;PPARγ的抑制剂GW9662和抗氧化剂还原型谷胱甘肽（GSH）都能部分阻止由β-胡萝卜素引起的细胞活力下降.研究结果提示,激活PPARγ途径和调制细胞氧化状态是β 胡萝卜素对乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制效应原因之一.     

广谱重组苏云金杆菌的生产工艺研究

对既杀鞘翅目昆虫又杀鳞翅目昆虫的广谱重组Bt菌株LCJ 0 8,LCJ 12进行了摇瓶发酵和中试发酵。通过 2 .4吨罐发酵试验 ,优化了发酵培养基和发酵条件 ,发酵效价达到 140 0 - 170 0IU/μL(棉铃虫 )和 2 0 0 0CU/μL(柳兰叶甲 )。以直接喷雾干燥和加填充料后喷雾干燥方法生产的粉剂 ,效价分别达到 2 50 0 0 - 34 0 0 0IU/mg和 82 0 0IU/mg。以低倍浓缩工艺生产的悬乳剂 ,毒力效价 2 50 0IU/μL以上。     

三孢布拉氏霉发酵生产β-胡萝卜素的研究

利用三孢布拉氏霉发酵生产天然β－胡萝卜素。在30L发酵罐中,平均生物量31．3g干菌重／L发酵液和胡萝卜素1213．1mp／L;在3M³发酵罐中,平均生物量38.0g干菌重／L发酵液和胡萝卜素1146．5mg／L。将中试样品经HPLC分析,在总色素中β-胡萝卜素占92～96％,其他类胡萝卜素占8～4％;在β-胡萝卜素中,反式异构体占90～95％,9－、13－、15－顺式异构体占10～5％。结晶β－胡萝卜素呈多种形状,但大多数为两端锥形的棱柱体。在胡萝卜素提取中,工艺和技     

产辅酶Q1O酵母的发酵条件研究

研究了豆油、豆粉、胡萝卜汁、西红柿汁、烟叶、β -胡萝卜素、桔子皮汁等自然物的添加对酵母发酵生产CoQ₁₀ 的影响 ,结果表明它们均能大幅度提高酵母菌中CoQ10 的含量。其中豆油、豆粉、西红柿汁、桔子皮汁是富含CoQ₁₀ 和胡萝卜素合成途经中的前体物质因而提高了CoQ₁₀ 的产量 ;烟叶和 β -胡萝卜素阻断了合成 β -胡萝卜素的途经从而起到提高CoQ₁₀ 合成的作用 ;胡萝卜汁的作用可能两     

Breeding of Monascus spp.with high monacolin K production by interspecific protoplast fusion of inactivated parental strains

为获得高产Monacolin K的红曲菌菌株,将经农杆菌介导转化获得的携带潮霉素抗性基因且以甘油为原料液态发酵高产Monacolin K的发白红曲菌H2和以大米为原料固态发酵产Monaco-lin K的烟色红曲菌9908作为亲本,对其原生质体分别进行热灭活及紫外灭活,然后对灭活双亲用PEG作融合剂进行原生质体融合.从融合子中选出有潮霉素抗性的突变株,通过发酵与亲本对比,筛选得到一株以大米为原料固态发酵高产Monacolin K的融合株F12-11,其Monacolin K产量达到8.73 mg/g;较发白红曲菌H2与烟色红曲菌9908分别提高了100.23％和48.98％;一株以甘油为原料液态发酵高产Monacolin K的融合株F13-2,其Monacolin K的产量达到1752.46 mg/L,较发白红曲菌H2与烟色红曲菌9908分别提高了32.98％和1979.33％.     

金针菇菌丝体深层培养工艺研究

在1．8L气升式发酵反应器中,研究了金针菇菌丝体深层培养工艺条件及其特性。结果表明：金针菇菌丝体深层培养可采用玉米、黄豆和糖蜜等廉价原料作主要碳氮源;最适需氧量为1．0—2．0×10^-7mol O₂／ml·min·atm,培养24—72h内,菌丝球生长遵循立方根规律·即x^1/3,=0．786+0．027t。在最佳发酵条件下,摇瓶培养4天,茵丝干重达24．4mg／ml在反应器培养4天,菌丝干重为25．7mg／ml。     

黑色葡萄状穗霉S607耐碱性纤维素酶发酵条件的研究

研究了耐碱性纤维素酶生产菌株黑色葡萄状穗霉S6 0 7(StachybotrysatraS6 0 7)的产酶条件。结果表明 ,S6 0 7的最适生长和产酶 pH为 7.0 ,最适产酶温度为 2 8℃ ,摇床最适转速为 180r/min。在以 2 .0 %纤维素粉和 2 .5 %的麸皮作为碳源时产酶最高 ,添加含 (NH4 ) 2 SO4 、尿素和蛋白胨的复合氮源对生长和产酶有明显的促进作用。在最适培养条件下 ,发酵周期为 4～ 5d ,发酵液中CMC酶活为 2 .12IU /mL ,FP酶活为 1.0 3IU /mL ,β 葡萄糖苷酶活为 0 .86IU /mL。     

L-山梨糖发酵产生维生素C前体——2-酮基-L-古龙酸的研究II．发酵条件的研究

对产生维生素C前体2-酮基-L-古龙酸的优良菌株N1197 A,进行了一系列摇并条件试验。掭加玉米浆及尿素是提高产酸的有效手段,尿素浓度以0.5—0.8％为好,确定了培养基组成(％)为：K2HP4．0.07、KH2PO4 0．03,甘油 0.2,MgSO4．·7H2O 0.01, 轻体CaCO3 0.5,玉米浆0.5,尿素(0.5,自来水配制,自然pH。在碳酸钙添加试验中,当培养基中有尿素时,不加碳酸钙与加碳酸钙产酸量相同。 分批补加尿素或(NH4)2HPO4．使发酵液pH保持在6—6.5,产酸量随着补加次数加多而增加。在发酵过程中,补加尿素调节发酵液pH是本发酵的特点。     

固定化黑曲霉利用糖蜜发酵生产柠檬酸

利用海藻酸钙凝胶包埋黑曲霉W1-2的孢子及菌丝体,制成的固定化细胞经预培养后,用于发酵糖蜜制取柠檬酸。确定了固定化细胞摇瓶发酵生产柠檬酸的最佳条件:糖蜜浓度12%。初始pH值4.0,培养温度30℃等。在此条件下发酵12天,柠檬酸浓度达39 g/L。对分批发酵生产柠檬酸进行了初步研究。     

酿酒酵母中高效积累β-胡萝卜素的代谢途径构建

β-胡萝卜素是一种橘黄色的脂溶性色素，属于类胡萝卜素家族，基于其丰富的生物学活性，在食品、医药、化妆品等领域具有广泛的应用。国内外对β-胡萝卜素市场需求量巨大，特别是天然来源的β-胡萝卜素具有广阔的市场前景，建立适合天然β-胡萝卜素生产的微生物细胞工厂显得尤为重要。本研究利用基因工程手段克隆了β-胡萝卜素生物合成途径中的三个基因，分别是来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的香叶基香叶基焦磷酸合成酶基因(ScBTS1)、红法夫酵母(Xanthophyllomyces dendrorhous)的八氢番茄红素脱氢酶基因(XdCrtI)以及同时具有八氢番茄红素合成酶和番茄红素环化酶的双功能酶基因(XdCrtYB),构建组成型表达载体pYES2-Kan-CrtI-CrtYB-BTS1,并转化至酿酒酵母MKP-o中，最终筛选获得能够生产β-胡萝卜素的酿酒酵母基因工程菌株。结果显示，此工程菌摇瓶产量达到14.53 mg/g细胞干重(DCW)且发酵周期短，不仅可以稳定高效地积累β-胡萝卜素，同时发酵过程中无需添加诱导剂，有利于节约生产成本。因此，可以将其作为一株具有较高β...     

种间双亲灭活原生质体融合选育高产Monacolin K红曲菌

为获得高产MonacolinK的红曲菌菌株,将经农杆菌介导转化获得的携带潮霉素抗性基因且以甘油为原料液态发酵高产MonacolinK的发白红曲菌H2和以大米为原料固态发酵产Monaco-1inK的烟色红曲菌9908作为亲本,对其原生质体分别进行热灭活及紫外灭活,然后对灭活双亲用PEG作融合剂进行原生质体融合。从融合子中选出有潮霉素抗性的突变株,通过发酵与亲本对比,筛选得到一株以大米为原料固态发酵高产MonacolinK的融合株F12．11,其MonacolinK产量达到8．73mg／g;较发白红曲菌H2与烟色红曲菌9908分别提高了100．23％和48．98％;一株以甘油为原料液态发酵高产MonacolinK的融合株F13-2,其MonacolinK的产量达到1752．46mg／L,较发白红曲菌H2与烟色红曲菌9908分别提高了32．98％和1979．33％。