室内诱导绿眼虫包囊形成的研究

绿眼虫 ( Euglena)是一种常见淡水动物 ,广泛分布在有机质丰富的池塘及湖泊等小型富营养性静水水体中。在环境条件适宜时 ,绿眼虫大量繁殖使所栖水域呈现绿色。一旦生活条件不适宜 ,虫体即能分泌胶质形成包囊 ,以抵御不良环境 ,环境条件改善后又会脱包囊而出。如何在实验室内诱导绿眼虫包囊形成 ,使学生直接观察到这一生命现象 ,目前未见有报道。本研究旨在探讨如何在实验室内诱导绿眼虫包囊的形成 ,它可作为无脊椎动物实验教学中“眼虫形态结构观察”的一个补充。1　材料与方法1.1　材料　实验用绿眼虫采集于南京西郊水沟。沟水呈浅绿色 ,…     

pH值与绿眼虫包囊的形成

绿眼虫(Euglena vlrlclis)隶属于原生动物门(Protozoa)、鞭毛纲(Mastigohora)、植鞭亚纲(Phytomastigina)、眼虫目(Euglenoidina)、眼虫科(Euglenaceae)、眼虫属(Euglena)。绿眼虫在遇到不良环境条件时能分泌胶质形成包囊,一旦条件改善又会脱包囊而出。水环境pH值的变化可诱导绿眼虫形成包囊。本实验采取改变水样液的pH值诱导绿眼虫形成包囊。     

显示绿眼虫的鞭毛和细胞核的制片方法

绿眼虫(Euglena viridis)取材容易,所以在一般动物学教学中,常用作鞭毛虫纲的代表类型。鞭毛和细胞核是绿眼虫的重要细胞器。前者与运动有关,后者在分裂繁殖过程中起着重要的生理作用。此外,在眼虫属(Euglena)种的鉴别上、鞭毛明显的程度、细胞核的大小、形状和地位等,都是较重要的分类特征。但用眼虫一般的染色显示法,常不能获得理想的效果。笔者曾用下列方法染色制片,获得了较理想的结果,现将制作过程介绍于后。 (1)取1/4指管的眼虫培养液,加过半量的波因氏(Boiun’s)固定剂(波因氏固定剂的配方如下:饱和苦味酸溶液     

用高锰酸钾溶液染口腔上皮细胞

学生在观察上皮细胞时,由于视野过亮,反差低,不易观察到。为了解决这个问题,我用高锰酸钾溶液染色,收到了较好效果。方法是:在制好的口腔上皮细胞装片的盖玻片一边,滴一滴0.5%的高锰酸钾溶液,在盖片另一边用吸水纸将装片内的生理盐水吸出,使高锰酸钾溶液渗入装片内使细胞染色。三分钟后,可观察到:     

观察植物细胞有丝分裂实验的一点改进

本实验采用在载玻片上染色的方法,其具体作法是:把解离后漂洗好的根尖放在载玻片上,用两根解剖针将根尖生长点端拨开,滴一滴0.25%的龙胆紫,染色两分钟.然后再滴一滴     

ATP酶组织化学染色孵育方法比较

目的比较经典的ATP酶组织化学染色法中几种孵育方法优缺点,以用于临床诊断中肌纤维分型研究和肌肉疾病病理诊断。方法新鲜的肌肉组织用异戊烷-液氮冷冻,冰冻切片厚度7μm,组织化学染色采用ATP酶滴染法和浸染法两种,采用的两种孵育条件分别为37℃恒温箱(120~180)min和4℃冰箱过夜。结果 4℃过夜滴染的染色效果比37℃滴染的效果好;37℃浸染比4℃过夜浸染效果好。浸染过夜虽然容易有沉淀,但是使用前过滤ATP酶孵育液,染色效果仍然好。结论各种方法和实验条件的改变导致染色结果的不同,临床工作者可根据实际情况,在减少人力和试剂成本前提下,选择使用不同的ATP酶组织化学染色技术,使其得到更广泛的应用。     

草履虫表膜的染色

草履虫的表膜是由许多排列规则的六角形和四边形小区组成,但由于缺乏适当的染色方法,一般不易在实验中用普通显微镜直接观察。本人从多种染色试验中找到了一种简便快速的染色方法,制作的片子用高倍镜即可观察到虫体表膜的构造。同时,还能看到纤毛和剌丝以及它们所处的位置。其制片方法如下:取事先培养好的含有大量草履虫的培养液,滴一滴于载玻片中央。用蘸有少许蓝黑墨水或纯蓝墨水的玻璃棒与载玻片上的草履虫培养液接触并稍加搅拌。这时如果置载玻片于低倍镜下观     

常用实验动物标本制作法

一、眼虫 1.自然生活情况眼虫最普通的种类是Euglena gracilis,身体略呈纺锤形,颜色鲜绿,体长约45微米(μ,=1/1000毫米),在有水生植物的池沼中,春夏秋三季均有之,初春与晚秋极多,夏季甚少,春季冰消後10日至20日内(在北京为3月中旬),在含有大量氮质排洩品的水沟中(即平常有尿水流入的水沟)近岸的底上,有一层绿泥,或近岸之水成为鲜绿的汁,这种绿泥和绿汁中是纯粹的E.gracilis。天气稍暖後,各种原生动物和轮虫出现,眼虫即被淘汰。晚秋里(在北京约为10月上半)某些池沼近岸的绿水中,亦有大量眼虫,但不是纯的,除了 E.sracilis 还有 E.veridis(较E.gracilis约大一倍,色亦较深),E.spirogyra (体呈带形,运动极慢,为眼虫中最大者),E.acus(体呈针状)等,还参杂有各种矽藻。     

介绍用洋葱进行质壁分离和复原实验的一种方法

做高中生物实验“观察植物细胞的质壁分离和复原”时,如果没有紫色洋葱,可以用白色洋葱做实验材料。白色洋葱表皮细胞在显微镜下显得比较透明,破损的细胞和完整活细胞的颜色差别不大,所以,学生寻找活细胞和辨别质壁分离与复原状态有些困难。实验时,先将撕取的洋葱表皮用碱性活体染色剂进行短时间染色,就能使被撕破而暴露的细胞质和细胞核染成深色,而活细胞则着色不明显。这样,以破损细胞的深色衬托活细胞的淡色就可以弥补上述的不足之处。实验方法：载片中央滴l～2滴1％。亚甲蓝溶液或1％0龙胆紫溶液,盖上盖玻片,染色lmin左右,…     

绿眼虫的叶绿体

绿眼虫 (Euglena viridis Ehrenberg1830 )为 1种习见鞭毛虫 ,植物学中裸藻门裸藻属的叶绿体特征为“细胞内有许多颗粒状叶绿体 ,分布于原生质近表面 ,称边缘位叶绿体 ,少数种类为中轴位的星状叶绿体 ,数目很少 ,只有 1～ 2个”。国内许多版本 (195 0～ 1992 )《动物学》、《普通动物学》、《无脊椎动物学》、《大学动物学》等对绿眼虫的叶绿本形态描述多为 :“大量圆形叶绿体”、“多个叶绿体”、“有甚多含叶绿素的色素体”,“很多色素体 ,含多量叶绿素”等。陈义《动物学》(195 0 )中明确提出“绿眼虫的色素体 1个 ,在体之中央 ,胞核之…     

蔗糖液在生物制片中的应用

从事生物学研究和教学工作,形态观察是十分重要的.就目前来说,微生物的形态观察主要以涂片镜检法较为快速简捷.无疑,一种好的微生物涂片方法,对于微生物的研究及微生物学的教学工作都是十分必要的.因此,做好微生物涂片这一基本工作,探讨微生物涂片的方法,是一项很重要的工作.我们在从事细菌细胞融合和教学工作中,对微生物涂片的方法进行了探索,发现在微生物涂片中,应用蔗糖液,效果很好.现介绍如下: (一)蔗糖液在一般微生物涂片中的应用 1.方法基本上与常规的微生物涂片方法相同,但不同的是在涂片前应先在清洁的载玻片上滴少许蔗糖液进行擦试;而后由原来加一滴无菌水改为滴加一滴蔗糖液(0.4M—0.6M);再涂菌. 2.优点经我们在不同菌种(细菌、放线菌、酵母菌等)上进行多次实验,发现这种方法具有(1)使载玻片清洁,在一定程度上减少一些印痕;(2)可增加透明度和清晰度,便于进行观察和显微摄影;(3)易使所涂样品分散开来,提高涂片的效果;(4)对革兰氏染色等     

两种脂肪细胞内脂滴染色方法的比较研究

目的比较油红O染色法和尼罗红染色法对脂肪细胞内脂滴染色的优劣,探讨科研工作中更优的脂滴染色方法。方法采用经典的"鸡尾酒"法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化;诱导分化8d后,对细胞内脂滴进行油红O染色和尼罗红染色,观察脂滴形态并测定甘油三酯含量。结果两种染色方法中甘油三酯的测定结果一致。但油红O染色过程较为繁琐、耗时较长,染料不易清洗干净,导致染料残留,从而引入实验误差,影响测定结果;而尼罗红荧光染色操作简单、耗时短以及背景更洁净。结论尼罗红荧光染色法应用于脂肪细胞内脂滴的鉴定和定量测定更加简单、便捷。     

巧用绿眼虫改良和设计系列探究实验

绿眼虫是一种易于获取和培养的单细胞鞭毛虫。利用其所具备的动、植物双重特性,与学生共同设计了一系列生态学、细胞学和种群学的探究实验。通过简单的单细胞培养体系,学生不仅可以获取生物学实验的技术(配制培养基和使用血细胞计数板等)和数据分析的方法,而且能有效地生成有关于营养方式、水质监测、种群增长的基础概念。     

一种光学显微镜下观察原生质体的染色方法

Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌａｃｔｏｆｅｒｍｅｎｔｕｍ菌液经溶菌酶处理后分别与４种微生物染色液混合,在光学显微镜下比较观察原生质体形态的效果。结果表明;染色样品中的原生质体比未经染色的形态清晰易观察,而且显微照相效果好;其中使用草酸铵结晶紫和复红染色液的效果更佳。该方法程序简单、操作方便、效果明显,还适用于悬滴法观察菌体形态和细菌运动方式。     

墨水染入口腔上皮细胞

在制作人口腔粘膜上皮细胞涂片时,可用纯蓝墨水或红色墨水染色,既省钱、又方便,而且同样收到好的效果。其方法是:擦净载玻片和盖玻片。用牙签刮取口腔颊部粘膜,将刮取物单向均匀地涂在载玻片上,滴一滴纯蓝墨水或红色墨水,加盖玻片即可在显微镜下观察,     

利用药片包装板进行花粉萌发实验

花粉萌发实验时,必须给试验花粉提供一个便于显微镜下观察且具良好通气保温条件的环境,否则花粉萌发率不高且萌发过程不易清楚观察。我们在教学时利用常见的药片和奶片包装板上的凹槽作为培养小室简便易行、效果很好。方法是用银子小心剥出槽内包装的物品,保持槽底透明塑料无折痕或嗜污,将凹槽完整剪下·口向上平置于载玻片上,也可滴一些封片用树胶将其固定,凹槽内滴1～2滴清水。另取一盖玻片滴一滴花粉前发用培养基,将试验花粉撒在培养基表面,反覆盖玻片于凹槽口,然后即可在显微镜下观察花粉萌发或进行花粉管生长的测定。利用药片…     

油红O染色鉴定胰腺星状细胞

目的胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)是一类胞浆内含有Vitamin A脂滴的特殊类型的细胞。油红O能够使脂肪组织及细胞内的脂滴着色。本研究的目的是采用油红O染色的方法对分离培养的PSCs进行鉴定。方法采用Histodenz密度梯度离心分离提取PSCs。异丙醇配制油红O染液,培养的PSCs应用油红O染液染色。结果油红O染色后可清晰显示PSCs内的脂滴。结论油红O染色可以特异性地显示脂滴,是鉴别PSCs的有效方法。     

“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验的改进

"观察DNA和RNA在细胞中的分布"在实际教学中实验效果不理想。通过探究实验发现Triton X-100可以作为代替盐酸解离作用的透膜剂,避免盐酸解离过度影响甲基绿对DNA的染色,取得了非常好的实验结果。Triton X-100在本实验中最适使用浓度为0.1%～1%,最适透膜时间为5 min。系统地总结了前人对"观察DNA和RNA在细胞中的分布"实验的改进,提出一套稳定且行之有效的实验操作方案。     

简易制备牛蛙精巢染色体——观察动物细胞减数分裂

简化常规染色体滴片的操作程序,对牛蛙精巢进行染色体制片,基本观察到精巢组织中细胞行减数分裂各阶段的染色体行为。实验结果表明．用牛蛙精巢制备染色体能相对简捷稳定的获得有效的实验结果．是一种观察动物细胞减数分裂行为的好方法。     

每期10题

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