拟南芥花粉活力的测定及其在花粉发育研究中的应用

花粉发育是植物生活周期中一个重要且复杂的过程, 需要多种基因的参与。花粉发育是否完善可以根据花粉形态特征, 并通过检测花粉的生活力、萌发力、可育性和受精能力等生理特征来判断。以拟南芥候选基因突变体为材料, 通过对花粉的这些生理特征的检测, 可以初步推测候选基因参与花粉发育的功能和作用机制。本文介绍了用于花粉活力测定的几种技术的原理和方法, 以及应用这些方法进行花粉发育研究的进展。     

拟南芥花粉活力的测定及其在花粉发育研究中的应用

花粉发育是植物生活周期中一个重要且复杂的过程,需要多种基因的参与。花粉发育是否完善可以根据花粉形态特征,并通过检测花粉的生活力、萌发力、可育性和受精能力等生理特征来判断。以拟南芥候选基因突变体为材料,通过对花粉的这些生理特征的检测,可以初步推测候选基因参与花粉发育的功能和作用机制。本文介绍了用于花粉活力测定的几种技术的原理和方法,以及应用这些方法进行花粉发育研究的进展。     

垂丝紫荆花粉贮藏及生活力研究

为进行紫荆杂交育种和开发利用,以垂丝紫荆花粉为试材,利用离体培养法、3种染色法（醋酸洋红、TTC和碘-碘化钾染色）对花粉生活力进行测定,并分析不同贮藏温度和时间对花粉萌发的影响。结果显示,培养基中添加蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,垂丝紫荆花粉萌发的适宜培养基为120 g/L蔗糖+40 mg/L硼酸,花粉萌发率达86.23%;醋酸洋红染色法适宜快速测定垂丝紫荆花粉生活力;垂丝紫荆花粉最佳的贮藏温度为 -196 ℃,经济的贮藏方法为-20 ℃。     

培养条件及贮藏温度和时间对木麻黄花粉萌发率的影响

用离体培养的方法研究了不同蔗糖、硼酸浓度,以及不同贮藏温度和贮藏时间对木麻黄(Casuarina)花粉萌发的影响.结果表明:15%的蔗糖是木麻黄花粉萌发的最佳浓度;在15%蔗糖培养基上添加硼酸显著促进木麻黄花粉萌发,250 mg kg-1硼酸是木麻黄花粉萌发的最佳浓度;添加了琼脂的固体培养基更有利于木麻黄花粉萌发;在常温下木麻黄生活力丧失很快,但低温下花粉的萌发力可保持较长时间.     

葫芦科蔬菜花粉萌发特性的研究

试验采用花粉离体萌发技术,对葫芦科７属８种蔬菜花粉生活力进行了较为深入的研究,结果表明：葫芦科蔬菜花粉属于“嗜硼、好气、喜温、较耐储藏”的类型。适量的蔗糖可以提高萌发率,并明显有利于花粉管生长。此外,试验中还发现不同种作物花粉萌发力的差异与花粉萌发孔或沟的特征有明显关系联系。     

胀果甘草花粉生活力测定及甘草的杂交育种

杂交育种是最为传统的选育新品种的方式之一,花粉生活力能够影响其中遗传物质的传递。胀果甘草是3种药典收录的甘草之一,具有许多特殊活性成分。通过TTC法和离体萌发法对2个胀果甘草(Glycyrrhiza inflata)种质资源GJJ-7和GJJ-9花朵开放5个时期(a~e)的花粉生活力进行测定。结果表明,GJJ-7花粉生活力趋势在5个时期呈现波浪型,在a、d时期达到最高;GJJ-9花粉生活力会随着花瓣展开度的变大而升高,在e时期达到最高。离体萌发结果表明GJJ-7和GJJ-9花粉生活力随花朵开放程度增大呈先升高后降低的趋势,萌发力均在c时期最高。杂交结荚率则与离体萌发结果一致,说明离体萌发法测定花粉生活力比TTC法更可靠。以光果甘草(G.glabra) S-7和S-12为母本的杂交组合结荚率低,但能够获得发芽率高的种子;以乌拉尔甘草(G.uralensis) GDN-16为母本的杂交组合结荚率高,但种子发芽率低,说明在甘草杂交中父母本的选择对结荚率有重要影响。     

水分胁迫对澳洲坚果花粉生活力和贮藏性的影响

采集经不同水分胁迫处理的澳洲坚果植株的花粉进行生活力测定和贮藏性研究,结果表明,新鲜花粉生活力随贮藏时间增加而下降。常温下正常发育花粉可保存6d左右,此后萌发率逐渐下降;而处于水分胁迫下的花粉,6d后生活力迅速降低;水分胁迫程度越严重,花粉生活力下降越快。几种处理的花粉有效贮藏期分别是:饱和灌溉处理6d,正常灌溉处理30d,水分亏缺处理10d,严重干旱处理(CK)4d。研究还表明,品种间花粉贮藏性表现为Kau >Pahala >O.C.。澳洲坚果花粉生活力的最佳染色鉴定方法为联苯胺染色法。     

景宁木兰花粉萌发与贮藏特性研究

以景宁木兰的花粉为试材,采用花粉离体培养法,用单因子与正交试验研究不同浓度蔗糖、H3BO3、CaCl2所组成的基本培养基对景宁木兰花粉萌发的影响,同时探讨不同贮藏条件和贮藏时间对花粉活力的影响。结果表明:景宁木兰在30 g·L-1蔗糖+200 mg·L-1H3BO3+200 mg·L-1CaCl2的液体培养基上萌发率最高(74.56%)。低温条件下有利于景宁木兰花粉生活力的保持,在-80℃条件下,花粉生活力下降较慢,并且随着贮藏时间的增加,经过硅胶干燥的花粉的活力明显高于湿润花粉的活力。     

柑桔种间体细胞杂种的花粉特性及贮藏研究

对粗柠檬与“哈姆林”甜橙种间体细胞杂种的花粉特性(形态、花粉量、生活力等)进行了观察、检测,并于-20℃的低温条件下开展了贮藏试验。结果表明：花粉离体萌发的适宜培养基为0．8％琼脂 16％蔗糖 10mg／kg硼酸,萌发率为15．31％,其生活力介于两亲本之间,可作为杂交亲本进一步被利用。贮藏试验结果显示：以真空、干燥(CaCl2或硅胶作干燥剂)贮藏花粉的效果较好。授粉试验证明,贮藏花粉与新鲜花粉的座果率差异不显著,说明低温、真空和干燥是贮藏粗柠檬与“哈姆林”甜橙种间体细胞杂种花粉的较适条件。     

小果短柱茶花粉离体培养系统的研究

山茶的短柱茶组是优良种质资源,有必要对小果短柱茶(Camellia confusa Chang 1941)的花粉萌发和花粉管生长的生理特性进行研究.本文研究了花粉生活力、培养温度及pH对小果短柱茶花粉萌发和花粉管生长的影响.结果表明:最适离体萌发培养基为5%蔗糖、0.003%的硼酸,0.005%的氯化钙和12%的PEG...     

玉米花粉的冷藏研究

本研究的目的是寻找一种可行的花粉贮藏方法。我们采用快速冷冻－真空干燥－常低温保存的方法进行花粉贮藏研究。对贮藏花粉分别作了活性染色,过氧化物酶同工酶活性分析及花粉培养,以测定其生活力（以下称活力）。研究表明,快速冷冻－真空干燥－常低温（－１０℃─－２０℃）保存玉米花粉的方法是可行的。保存１５０天的玉米花粉仍有８％的萌发率。同时证明,常用的各种染色方法只能反映花粉的成熟度,而不能作为检验花粉是否具有活力的唯一标准。而花粉是否能够萌发,即长出正常的花粉管,才是判断花粉活力的主要指标。     

悬铃木花粉生活力及贮藏力的研究

以30~40年生悬铃木(Platanus acerifolia)的花粉为试材,研究了不同培养基对其萌发的作用,同时探讨了不同贮藏条件和贮藏时间对花粉生活力的影响。结果表明:悬铃木花粉在15%蔗糖 0.01%硼酸的培养基上培养24 h后萌发率最高;附加琼脂的固体培养基对花粉的萌发影响不大;50 mg/L的赤霉素对悬铃木花粉的萌发没有明显的抑制或促进作用;花粉干燥后在低温4℃下贮藏能保持较长的生活力,比未经干燥25℃和4℃下贮藏分别长35 d和20 d。     

天女木兰花粉形态特征及其生活力

对天女木兰（Magnolia sieboldii）花粉的采集时期、形态以及培养的温度和培养基进行了研究,并探讨贮存温度和时间对花粉生活力的影响。结果表明,扫描电镜观察到的花粉形状和萌发孔与其他已报道的木兰科植物相同,但大小和花粉外壁的纹理不同。在花瓣刚刚展开的初花期采集的花粉生活力最高。25℃下最适于花粉的萌发;花粉在含10％蔗糖＋0．1％硼酸的培养基上培养14h的萌发率最高,0．01％～0．05％的氯化钙对花粉的萌发影响不显著,0．1％的氯化钙对花粉的萌发有抑制作用。随着贮存时间的延长,花粉萌发率不断降低。不同贮存温度下花粉萌发率的降低速度依次为-10℃〈4℃〈25℃,-10％下贮藏5d的花粉萌发率降低了48．8％,10d后萌发率降低为0。     

不同脱水处理对桔梗花粉离体萌发及贮藏性能的影响

对桔梗花粉离体萌发条件进行了筛选,并采用花粉离体萌发法测定了不同干燥方式和贮藏时间处理对桔梗花粉生活力的影响;同时采用人工授粉的方法研究了不同处理后桔梗花粉授粉结实能力的变化。结果表明：（1）30℃培养1.5h是桔梗花粉离体萌发和花粉管生长的最佳培养条件。（2）不同干燥方式、不同干燥时间处理后桔梗花粉萌发率和花粉管长度均有所下降,但下降幅度不同,其中以干燥箱45℃烘干处理1.5h~2h下降最少,其花粉耐藏性也有明显提高。（3）不同干燥方式处理桔梗花粉后其授粉结籽率的变化明显不同,阴置2h处理的花粉结籽率最低,而干燥器内放置6h、日晒2h和烘干1.5h处理后花粉结籽率略有变化;干燥处理后随贮藏时间的增加,其授粉结籽率均呈下降趋势,但45℃烘干1.5h处理的花粉结籽率下降速度最慢,其授粉结籽能力可保持5d左右。     

云南含笑花粉萌发研究

应用离体培养和人工授粉的方法对云南含笑花粉的萌发进行了研究。栽培和野生云南含笑花粉的萌发率有很大的差异,分别为20％和90％。首次报道了云南含笑的花粉粒在离体培养基上萌发2条花粉管的现象。云南含笑花粉在灰岩含笑花柱头上的萌发率和萌发时间与离体培养基上的相同,表明灰岩含笑的柱头对云南含笑的花粉没有排异现象。     

花粉离体培养基的优化和苯达松除草剂对敏感型水稻恢复系'Mc526'花粉活力的影响

建立了适合水稻花粉离体萌发的液体培养基配方,并用花粉萌发和碘-碘化钾（I2-KI）染色测定法检测了喷施苯达松后含敏感致死基因的水稻恢复系‘Mc526’的花粉生活力。结果表明,苯达松处理前期（施后14d）,‘Mc526’花粉活力与未作处理的接近;处理后期（施后5-8d）略低于未作处理的,但差异不显著。苯达松对母本结实率影响不显著。     

白杨2n花粉生命力测定方法及萌发特征的研究

提出了以单倍性花粉为参照,通过活体直接授粉试验观察测定白杨２ｎ花粉生命力的方法,并据此揭示了利用２ｎ花粉选育杂种三倍体时三倍体得率较低的原因。应用这种方法对２ｎ花粉生命力和萌发情况进行测定观察发现,尽管２ｎ花粉保持有一定的萌发力,但与１ｎ花粉相比,天然和人工２ｎ花粉的萌发进程均较迟缓,在参与授精的竞争中处于劣势,这也正是育咎中三倍体得率低的主要原因。此外,秋水仙素诱导产生的２ｎ花粉中,还有２０－３     

响应面法优化麻疯树花粉离体萌发培养基的研究

麻疯树因其种子含油率较高,种子油提炼的生物柴油可部分替代汽油,而成为一种极具潜能的能源作物,但由于产量低,麻疯树在热带、亚热带的发展受到极大限制。杂交育种是提高产量的重要手段,杂交亲本花粉生活力的高低直接影响到育种的成效。因此,寻求麻疯树离体花粉萌发的最适培养基配方,探明花粉萌发培养基中各主要培养基成分间的交互作用对生产上麻疯树杂交结实率和种子产量的提高具有重要意义。该研究以麻疯树开花初期雄花上花药刚散粉时的成熟花粉粒为材料,采用Box-Behnken设计(Box-Behnken design,BBD)的响应面法,对麻疯树花粉离体萌发培养基中各主要培养基成分的浓度配比及各主要培养基成分的交互作用进行了研究。以花粉萌发率为响应指标,建立了4种营养成分(蔗糖、硼酸、硝酸钙、硝酸钾)与花粉萌发率的响应面模型,并对各主要培养基成分的浓度配比进行了优化。通过R软件进行响应面分析的结果表明:4因素对花粉萌发率的影响顺序为蔗糖硼酸硝酸钙硝酸钾;蔗糖与硼酸、蔗糖与硝酸钙、蔗糖与硝酸钾之间的交互作用显著。响应面建模优化后的最佳培养基为13.77%蔗糖+32.14 mg·L~(-1)硼酸+22.21 mg·L~(-1)硝酸钙+19.95 mg·L~(-1)硝酸钾+200 mg·L~(-1)硫酸镁,在此条件下的理论萌发率为99.73%。采用此培养基成分配比得到麻疯树花粉离体试验萌发率为98.97%,与理论响应值相吻合,同时也表明利用BBD设计的响应面模型进行麻疯树花粉离体萌发培养条件优化方法的有效性。     

木本植物花粉生活力测定及生活力下降原因探讨

贮藏花粉,保持花粉生活力在育种和种质保存中具有重要意义。一种贮藏方法的优劣,最终要以贮藏后的生活力为衡量依据。因此,测定花粉生活力是花粉贮藏研究中不可缺少的重要部分。花粉生活力的测定方法很多,刘武林等作过综述。其中被普遍釆     

花粉内的多胺和外源多胺对花粉萌发和花粉管生长的影响

测定了不同生理状态下的油松花粉内的多胺含量,并研究了腐胺和精胺对十种不同植物花粉的萌发和花粉管生长的影响。三种多胺(腐胺、亚精胺和精胺)总量贮藏花粉中高于新鲜花粉,萌发花粉内相对不变。三种生理状态不同的花粉内,亚精胺含量均高于腐胺和精胺。腐胺对花粉荫发和花粉管生长的作用不明显,精胺一般表现为抑制作用,并随浓度而加强,还与植物品种、花粉成熟度、花粉萌发速度、花粉管生长速度和培养基中硼酸的有无有关。一般,容易萌发、成熟较充分,或正在迅速生长的花粉,以及培养基中有硼时受抑制轻。