Ad-GFP-nm23-H1裸鼠体内抑制人恶性黑色素瘤A375作用的研究

目的探讨Ad—GFP—nm23-H1对人恶性黑素瘤裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,从而为后期nm23-H1基因和腺病毒载体用于人恶性黑色素瘤及其它肿瘤的基因治疗提供一定的理论和方法。方法在裸鼠真皮下建立人A375细胞黑色素瘤动物模型后,设对照组及10^9 PFU／ml、10^10 PFU／ml的Ad—GFP—nm23-H1干预组。经Ad—GFP—nm23-H1干预治疗后,取瘤体称重,计算抑瘤率,通过光镜进行瘤组织病理形态学观察。结果对照组及10^9 PFU／ml、10^10 PFU／ml的Ad—GFP-nm23-H1干预组的平均肿瘤体积和瘤重分别为：1．4129±0．4832mm^3、1．1914±0．3304mm^3、0．75±0．2548mm^3和1．924±0．539g、1．655±0．5754g、1．195±0．2639g。与另两组比较,10^10 PFU／ml的Ad．GFP—nm23-H1干预组对A375具有明显的抑制作用。结论10^10 PFU／ml的Ad—GFP—nm23-H1干预组对裸鼠移植A375实体瘤有明显的抑制作用。     

VEGF—A和VEGF—C在皮肤恶性黑色素瘤表达的临床病理意义

目的：内皮细胞生长因子（Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）与恶性肿瘤转移密切相关,研究发现VEGF过度表达与恶性黑色素瘤转移有关,在本研究中通过研究VEGF在恶性黑色素瘤中的表达及与临床病理指标的相关性,为以VEGF为靶的抗转移治疗提供依据。方法：应用免疫组织化学技术检测恶性黑色素瘤中VEGF-A和VEGF-C表达,及与临床病理特点和生存状态的关系。结果：VEGF—A在皮肤恶性黑色素瘤中的阳性表达率是83．33％（30／36）,在色素痣中阳性表达率是15％（3／20）,两组间有显著性差异（P〈O．05）。VEGF—C在皮肤恶性黑色素瘤中的阳性表达率是88．9％（32／36）,在色素痣中阳性表达率是10％（2/20）,两组间有显著性差异（P〈0．01）。VEGF-A和VEGF—C表达与年龄、性别、肿瘤形态、肿瘤大小无显著关系,但与淋巴结转移和封闭血管环形成有关,VEGF-A和VEGF—C阳性病例淋巴结转移率和封闭血管环出现率显著高于VEGF-A和VEGF-C阴性病例。有统计学意义。对VEGF-A和VEGF-C表达与恶性黑色素瘤生存状态的关系分析显示,VEGF-A和VEGF-C表达阴性的病例的生存期和生存率均显著高于VEGF-A和VEGF-C表达阴性的病例,有统计学意义。结论：VEGF-A和VEGF-C表达与恶性黑色素瘤的淋巴结转移、血管形成和生存期相关,这两种蛋白过度表达反映黑色素瘤处于进展状态和预后差,可以作为黑色素瘤诊断、预后和复发预测的指标和靶向治疗的靶蛋白。     

原发性子宫颈恶性黑色素瘤1例并文献复习

目的 探讨1例原发性子宫颈恶性黑色素瘤（primary malignant melanoma of the cervix, PMMC）的临床病理学特征、鉴别诊断、治疗及预后。方法 应用HE染色、免疫组织化学染色对武汉市中心医院收治的1例PMMC的临床病理特点及免疫表型进行分析,并进行相关的国内外文献复习。结果 大体标本呈乳头状,色暗红,局灶灰黑,大小4 cm×4 cm;镜下见不规则巢团样排列的肿瘤细胞弥漫浸润子宫颈壁,肿瘤细胞主呈上皮样,胞质较丰富,核多形较明显,少数细胞可见清晰核仁,未见明显色素颗粒;免疫组织化学表型：S-100、SOX-10、melan-A、MiTF弥漫强阳性,p16、vimentin阳性,CD34、D2-40示脉管,Ki-67增殖指数约50%,HMB-45、PCK、p40阴性。结论 PMMC是一种恶性程度极高、临床上罕见的肿瘤,术前诊断主要依赖临床表现、病理活检及免疫组织化学染色结果。手术治疗为主,术后结合辅助治疗,预后差。     

Nestin 和SOX2 在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及临床意义

目的:研究巢蛋白(Nestin)和SOX2在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及临床意义。方法:选取2010年1月-2013年1月我院收治的恶性黑色素瘤21例患者(研究组),另选黑色素痣患者21例(对照组),应用免疫组织化学法检测Nestin和SOX2,并比较两组Nestin和SOX2表达,分析其与患者生存期和转移的关系。结果:研究组Nestin和SOX2阳性表达率显著高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05);Nestin、SOX2阳性的恶性黑色素瘤患者生存期显著低于Nestin、SOX2阴性恶性黑色素瘤患者,两组比较差异有统计学意义(P0.05),Nestin、SOX2阳性的恶性黑色素瘤患者与Nestin、SOX2阴性的恶性黑色素瘤患者转移率比较无统计学意义(P0.05)。结论:Nestin和SOX2表达阳性与恶性黑色素有关,且与恶性黑色素瘤的生存期有关。。     

鼻腔鼻窦淋巴瘤相关因素及临床特征研究

目的：探讨早期鼻腔鼻窦淋巴瘤（NHL）相关因素及临床特征。方法：对经我院病理确诊为鼻腔鼻窦NHL的患者及来自同期收治的慢性鼻．鼻窦炎病例各28例,进行回顾性对照研究。统计分析应用SPSS17．0统计软件进行。结果：28例鼻腔鼻窦NHL中,NKfr细胞淋巴瘤18例,外周T细胞淋巴瘤7例,B细胞淋巴瘤3例。统计分析显示,对药物（麻黄素、肾上腺素）收缩反应差OR28．140（1．995．396．972）、发热OR99．366（0．752—13130．619）、粘膜不光滑OR34．665（1．464—820．575）、下鼻甲质地硬oR25．797（1．395-447．001）是鼻腔鼻窦NHL的高危指标。结论：对药物（麻黄素、肾上腺素）收缩反应差、发热、粘膜不光滑、下鼻甲质地硬是早期鼻腔鼻窦淋巴瘤的强危险信号和重要的诊断线索。     

结膜恶性黑色素瘤3例临床病理分析及文献复习

目的探讨结膜恶性黑色素瘤的临床特点及病理学特征,并进行文献复习。方法回顾性分析3例结膜恶性黑色素瘤的临床特点、病理学特征、免疫表型特点及分子生物学特点。结果老年男性患者多见,病程2个月～1年,有近期肿物增大过快病史。肿瘤细胞呈上皮样细胞型、梭形细胞型或者二者混合型,均可见黑色素沉着。免疫表型:3例HMB45、melan A、S-100、cyclinD1和vimentin均为阳性,只有2例p53阳性,3例Ki-67增殖指数25%～60%。分子病理:3例病例中有1例发生了BRAF V600E突变,均未检测到c-Kit突变。3例患者均进行局部肿瘤切除,随访3个月至5年均未复发、转移。结论结膜的恶性黑色素瘤临床较罕见,镜下形态多样,有时缺乏黑色素,melan-A、HMB-45、S-100、cyclin D1、vimentin等免疫组织化学标记可以辅助诊断,分子检测BRAF V600E和c-Kit也有提示作用,早期发现并进行局部肿瘤切除术,效果较好。     

上皮–间充质化在恶性黑色素瘤中的研究进展

恶性黑色素瘤是恶性程度极高的肿瘤,一旦转移致死性极高。上皮–间充质化(epithelialmesenchymal transition,EMT)在恶性黑色素瘤的侵袭转移、耐药、免疫抑制等过程中扮演重要角色。多种相关因子,例如:E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、Twist、Snail、Slug、Zeb1、Zeb2、波形蛋白及mi RNA等参与了EMT过程。该文回顾了EMT在恶性黑色素瘤中的研究进展,目的在于深入发掘EMT在恶性黑色素瘤中的作用,进一步探讨治疗恶性黑色素瘤潜在的新方法。     

树突状细胞(DC)瘤苗治疗恶性黑色素瘤的疗效观察

目的:探讨树突状细胞瘤苗联合化疗治疗恶性黑色素瘤的疗效及不良反应。方法:采用多药联合化疗方案续贯联合树突状细胞瘤苗治疗32例恶黑患者,4周为一疗程,连续4个疗程。化学治疗组31例单纯采用联合化疗,方法及药物剂量均同生物化疗组。不良反应依据WHO化疗药物急性及亚急性不良反应分度标准判断。结果:生物化疗组32例中CR 3例,PR18例,有效率65.63%;化学治疗组31例中CR 1例,PR 11例,有效率38.71%。生物化疗组与化学治疗组疗效差异有显著性(P0.05)。两组均无治疗相关性死亡。两组的血液学毒性、消化道反应、肝功能损害、肾功能损害、神经毒性等方面差异无显著性(P0.05)。经对症处理后缓解,不影响治疗。结论:将DC细胞瘤苗免疫治疗与化学治疗有机地结合,充分发挥综合治疗的优势,有提高Ⅲ/Ⅳ期恶性黑色素瘤患者疗效的作用。     

4-氨基苯酚维甲酰胺对肝癌和恶性黑色素瘤细胞的抑制作用

高度恶性肿瘤如肝癌或恶性黑色素瘤病人即使手术治疗,仍然有相当多的病人预后不好,或发生转移。本文研究了自行合成的4-氨基苯酚维甲酰胺(4-HPR),一种维甲酸的衍生物,通过观察对肝癌细胞和恶性黑色素瘤细胞的作用,发现该衍生物具有较强的抑制肝癌细胞迁移能力,7721-k3肝癌细胞的迁移细胞数从对照组的201(27.2,经过6h的作用后即下降到58±5.03(p<0.05,n=4);黑色素瘤细胞则从302±30.1下降到254±25.04(p<0.05,n=4);侵润能力也显著下降,7721-k3细胞穿过人工模拟基底膜的细胞数从对照组的27±13.1下降到11.2±3.3,黑色素瘤细胞则从67.5±10.1下降到24.3±3.2(p<0.05,n=3)。而且发现3μmol/L 4-HPR作用B16黑色素瘤细胞48h可诱导37.11±0.94%细胞的调亡,与相同微克分子浓度的维甲酸相比,具有显著性差别(p<0.05)。但是不能显著诱导7721-k3细胞凋亡。4-HPR诱导B16黑色素瘤细胞凋亡的作用机制尚不清楚,我们利用与肿瘤恶性程度密切有关的乳糖基神经酰胺磺酰基转移酶(CST)基因,转染B16细胞使之高表达以后,可以部分抑制这些细胞对4-HPR诱导凋亡的敏感性,但是不能完全抑制。4-HPR是目前已知毒副作用最小的维生素A类化合物,有可能成为恶性黑色素瘤或肝癌治疗的一个有效的药物。     

Ang2-siRNA慢病毒干预裸鼠移植性恶性黑色素瘤的研究

目的研究血管生成素2小干扰RNA（Ang2-siRNA）对裸鼠移植性恶性黑色素瘤血管形成及其生长的影响。方法建立人恶性黑色素肿瘤裸鼠异种移植瘤模型。在体内使用pNL-EGFP—Ang2-siRNA慢病毒干扰裸鼠移植性恶性黑色素瘤Ang2基因的表达,观察统计各组肿瘤（空白组、空载组、实验组）生长情况。应用实时荧光定量RT—PCR检测肿瘤组织中Ang2基因的mRNA表达水平;CD34单克隆抗体作为血管内皮标志物,免疫组织化学法检测其表达,以评价肿瘤微血管密度。结果成功建立了恶性黑色素瘤裸鼠异种移植瘤模型,实验组肿瘤Ang2基因mRNA水平、微血管密度、肿瘤体积显著小于空白组和空载组（P〈0．01）,空白组和空载组之间无统计学意义（P〉0．05）。结论pNL—EGFP—Ang2-siRNA慢病毒能沉默Ang2的表达,显著抑制恶性黑色素瘤血管的形成和肿瘤的生长,可能为临床恶性黑色素肿瘤的基因治疗开辟新的途径。     

MANAGEMENT OF CANCER OF THE NASAL CAVITY AND PARANASAL SINUSES

Cancer involving the antrum can be cured in a greater percentage of cases if the lesions are detected earlier, specifically diagnosed histologically, and radically managed at the time of the initial treatment. The procedure of choice is, first, surgical removal (with a scalpel) of as much of the tumor as is possible without risk of operative death, then limited but specific cancerocidal radiation as indicated by operative findings or regular postoperative observation. The period of convalescence will be less distressing and shorter with this procedure than with others; and, in those cases in which cure is not effected, palliation will be more satisfactory. The cured patients are cosmetically acceptable without functional disability except for unilateral loss of vision in cases in which exenteration of the orbit is necessary.     

S-100及CD83在溃疡性结肠炎患者结肠黏膜的表达

目的通过检测溃疡性结肠炎（UC）患者结肠黏膜S-100及CD83的表达,探讨其与UC临床活动度、内镜分级的关系。方法取47例UC患者结肠黏膜标本根据内镜及临床活动度进行分级,同时收集正常对照者结肠黏膜标本13例,应用免疫组织化学法检测S-100及CD83在UC患者结肠黏膜的表达水平。结果正常对照组结肠黏膜固有层S-100及CD83弱表达,且二者在UC患者结肠黏膜的阳性细胞数及染色强度,与正常对照组比较差异显著（P〈0.01）,并且有随病变分级的加重逐渐增加的趋势。结论未成熟及成熟树突状细胞（Dendritic Cells DCs）均参与UC的发生。与正常对照组相比UC患者结肠黏膜固有层中S-100及CD83表达上调,在一定程度上反映了疾病的活动度。     

卵巢肿瘤血管生成与TP表达的临床病理研究

目的探讨卵巢肿瘤MVD与TP的关系。方法免疫组化检测101例卵巢肿瘤MVD、TP。结果101例卵巢肿瘤中,腺瘤、交界性肿瘤、卵巢癌三种不同性质卵巢肿瘤中MVD(个/0·03mm2)计数分别为12·87±6·11、25·96±7·09、33·01±10·21,各组间比较差异均有极显著性意义(P<0·01);TP阳性表达率分别为12%(3/25)、33%(7/21)、71%(39/55),卵巢癌与腺瘤、交界性肿瘤TP比较均有极显著性差异(P<0·01)。MVD≤21个/0·03mm2的卵巢癌中TP阳性表达率较低(58·8%,20/34),MVD>21个/0·03mm2的卵巢癌中TP阳性表达率较高(90·5%,19/21),两者比较差异有极显著性意义(P<0·01)。结论1.卵巢肿瘤组织中MVD增高、TP表达上调是反映卵巢肿瘤生物学行为恶性进展的有用指标。2.卵巢癌MVD与TP表达呈正相关,MVD>21个/0·03mm2或MVD与TP指数相应上调的卵巢癌可能生长速度较快,恶性程度较高,提示预后不良。这一发现对进一步探讨卵巢癌的发生发展提供了分子学基础。     

慢性胃炎粘膜内CD3+细胞,S-100+树突状细胞和nNOS表达与幽门螺旋杆菌感染的关系研究

目的　探讨幽门螺旋杆菌 (Hp)与慢性胃炎粘膜内CD3+ 细胞 ,S 10 0 + 树突状细胞和nNOS表达之间的关系。方法　用免疫细胞化学方法 ,检测Hp+ 和Hp 胃炎患者及正常人的胃窦部活检标本。结果　Hp+ 胃炎组胃窦粘膜内CD3+ 细胞和S 10 0 + 树突状细胞数量明显高于Hp-胃炎和正常组 ,且有显著性差异 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,而nNOS呈高表达 ,与Hp-胃炎组相比有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　Hp+ 胃炎患者胃窦粘膜内CD3+ 细胞和S 10 0 + 树突状细胞的增加是机体对Hp的免疫应答 ,而nNOS在Hp+ 胃炎组的高表达可能与Hp感染有密切关系。     

鼻NK／T细胞淋巴瘤间质清道夫受体A的表达及意义

目的 观察清道夫受体A（scavenger receprorA,SR-A）在鼻NK／T细胞淋巴瘤间质中的表达,探讨其意义。方法 对鼻NK／T细胞淋巴瘤,鼻B细胞淋巴瘤以及鼻部炎症的石蜡标本进行HE染色和SP免疫组织化学染色检测SR-A的表达。结果 SR-A蛋白在鼻NK／T细胞淋巴瘤,鼻B细胞淋巴瘤和鼻部炎症中阳性率分别为92．7％,29．2％和6．25%。统计学分析发现,鼻NK／T细胞淋巴瘤中SR-A的表达与B细胞淋巴瘤和炎症中SR-A的表达均有显著差异（P〈0．001）。结论 SR-A可能在鼻NK／T细胞淋巴瘤的诊断及鉴别诊断中有一定的参考价值。     

白细胞介素-16在脓毒症肝和肺组织中表达的免疫组织化学研究

观察白细胞介素－16（interleukin-16,IL-16)在脓毒症时肝和肺组织中的细胞定位及分布,并探讨其在脓毒症发病中的作用和意义。应用新型敏感的免疫组织化学方法（超敏感－SP法）检测本校近年收集的18例感染、败血症和脓毒症尸检肝和肺组织白细胞介素－16的原位表达,在肝组织中IL－16主要定位于肝窦枯否细胞、单核细胞以及部分中性粒细胞、阳性率达72.3%。肝细胞形态改变主要包括肝窦扩张充血,枯否细胞增生肿胀,肝细胞变性及不同程度的灶性坏死,在肺组织中IL－16定位于肺部质及感染灶内的巨噬细胞,中性粒细胞以及少量淋巴细胞,其阳性率达66.7％。肺组织形态改变主要包括肺泡壁毛细血管扩张充血,间质及肺泡壁内大量炎性细胞浸润,部分肺泡扩张,肺泡壁断裂;可灶性坏死,坏死区肺结构消失,纤维组织增生。同时,观察到IL－16随组织病理变化的加重表达增强的趋势。本研究结果提示IL－16可能在脓毒症所致脏器损害中发挥重要作用。     

小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1/NDPK A的表达

nm23家族除与肿瘤转移抑制有关,它还参与调节正常细胞的发育、增殖、分化及凋亡等过程。运用RT-PCR、Western blot 和免疫组织化学技术,分析小鼠胚泡黏附时子宫内膜着床点和着床旁组织nm23-M1/NDPK A 的表达,以未交配鼠作对照,为进一步阐明胚泡着床的机制提供有意义的实验依据。RT-PCR 结果显示,小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1/NDPK A mRNA 表达明显高于对照组,并且着床点明显高于着床旁,Western blot 和免疫组织化学分析nm23-M1/NDPK A 蛋白表达,也得到一致的结果。提示nm23-M1/NDPK A 参与胚泡着床这一重要生命活动过程。     

去卵巢致骨质疏松症大鼠腺垂体FS细胞中Cx43、S-100蛋白表达--激光扫描共聚焦显微镜观察

检测间隙连接蛋白Cx43、神经组织蛋白S-100在去卵巢致骨质疏松症(OVX-OP)大鼠腺垂体滤泡星形细胞(FS细胞)中的表达.实验采用10月龄未孕产SD雌性大鼠40只,随机均分为卵巢切除组(OVX组,n=20)和假性手术对照组(Sham组,n=20).于术后6周末用双能X线骨吸收测量法(DEXA)测量大鼠全身及腰椎4-6(L4-6)骨密度(BMD).取两组大鼠垂体,制成连续切片.应用FITC标记的IgG探针,对腺垂体组织中Cx43和S-100进行间接免疫荧光染色,并用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)定位和定量分析腺垂体FS细胞中Cx43、S-100的表达.结果发现,术后6周末OVX组大鼠全身及L4-6BMD均明显低于Sham组值(P<0.01,P<0.01).Cx43阳性荧光反应主要定位于相邻的FS细胞的胞浆中和/或胞膜上.OVX组Cx43阳性表达荧光强度和表达阳性率均显著低于Sham组(P<0.01).S-100蛋白表达定位于FS细胞的胞浆中,两组间S-100阳性表达荧光强度和表达阳性率无显著差异(P>0.05).本研究提示,SD大鼠OVX术后6周出现骨质疏松变化;OVX大鼠腺垂体FS细胞数量无明显变化、而Cx43表达显著下降,后者的变化可能与大鼠OVX-OP发生相关.