复合诱变选育高效转化DHEA为7α,15α-diOH-DHEA的菌株及其转化工艺优化

结合酮康唑抗性筛选法,采用亚硝基胍和低能氮离子注入复合诱变方法筛选得到一株高效生物转化去氢表雄酮(D H E A)为3β,7α,1 5α-三羟基雄甾-5-烯-1 7-酮(7α,1 5α-d i O H-D H E A)的菌株亚麻刺盘孢C o l l e t o t r i c h u m l i n i S T-1,该突变株在底物D H E A投料浓度为1 0 g/L时产物摩尔得率达到3 4.2%,较出发菌株提高了4 6.2%。在此基础上进行培养基组分的优化,采用P l a c k e t t-B u r m a n实验设计考察转化培养基中各组分对产物摩尔得率的影响,有效筛选出葡萄糖、酵母粉和M g S O4·7 H2O浓度对产物摩尔得率影响显著,继而采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,并利用中心组合响应面设计实验对3个显著性因素的最佳水平进行研究,得到最适转化培养基组分为(g/L):葡萄糖2 6.3 4;酵母粉1 2.1 5;玉米浆3.0 0;F e S O4·7 H2O 0.0 1 5;M g S O4·7 H2O0.1 4;K H2P O40.9 0。采用该优化培养基,菌株C.l i n i S T-1的产物摩尔得率达到4 9.3%,较优化前提高了4 4.2%。     

EARLY DEVONIAN FISHES FROM GUIJIATUN AND XUJIACHONG FORMATIONS OF QUJING,YUNNAN,AND RELATED BIOSTRATIGRAPHIC PROBLEMS

Pale0nt0IogicStudiesSubclassGaleaspidaHalsteadTarl0,l9670rderHuanana8piformesJanvier,l975FamilyGantar0stra8pidaeWangetWang,l992GenusCantarostraspisWangetWang,l992CQntarostra8pisgeniWangetWang,l992(Fig.l3Pl-II,4-5)1992,Gantarostraspisgeni,Wang,J.Q.etWang,N.Z.,Fig-l,Pl.l.HolotypeAdorsalshieldV9758,LowerDevonianPosongchongF0rmation,Gu-mu,Wenshandistrict,Yunnan-ReferredspeeimensAdorsalshieldVlO494.1;arostra1pr0cessV1O494.2.Loca1ityandh0riz0nXujiach0ng,Xishan,Qujing,Yunnan,Lowe…     

藜的光合特性研究

5月中旬选取典型晴天用L I-6400便携式光合仪对藜从第一片完全展开叶倒数第3~5片功能叶进行有关光合参数的测定.结果表明:藜的光合日变化呈双峰型,有明显的“午休”现象,第1个峰值出现在8:30左右,P n达到9.34μm o l CO2.m-2.s-1;第2个峰值出现在16:00左右,P n为4.26μm o l CO2.m-2.-s 1.造成光合午休的主要原因是受气孔调节.在400μm o l.m o-l 1CO2浓度下藜的光饱和点(LSP)为1 350μm o l CO2.m-2.-s 1左右,光补偿点(LCP)为22.5μm o l CO2.m-2.-s 1左右;表观量子效率(AQY)为0.035μm o l CO2.m o-l 1photons.二氧化碳饱和点(CSP)在976μm o l CO2.m o-l 1左右,二氧化碳补偿点(CCP)在40μm o l CO2.m o-l 1左右,羧化效率(CE)为0.113 2μm o l CO2.m-2.-s 1.说明藜是一种具有较强耐荫能力的C3型阳性植物.     

数种偶蹄目动物和几种猫科动物的血液学值(表13—14)

玻13橄种们蹄目动物的血液化学及血液值\\项目动物名渗血钙(毫克l分升)血磷(毫克,分升)血葩(毫克/分升) 6252一72血液尿素氮(毫克{分升) 20.910一30 。‘。}。二曰二、川总胆{}翰{翼静掇{鄂巨…{……乳酸脱 氢酶 6003 15一884 692600一800 6003 15一884 951〕.6 ‘36- 1 28弓谷丙转氨酶一卜-一一. 1 72123一20U{ 3。27 .5一9 8。‘只.48一 R .88 5 .95一7 .0 3。5,2。49一 4。61 1371 32一141 8480一1 10 亏5 40一70 Z819.5一36。5 l210一302夕.916一凡92 26185一33弓 ;性.8 2 8 .8一 48 .73 9 .0 7一10 8。08一已.胜 8 .4 7。,斗一9;4。9…     

1988年全国普通高等学校招生统一考试 生物学试题

一选择皿(本皿共30分) 下列每题都有(A)、(B)、(C)、(D)四个答案,其中只有一个是正确的,请将正确答案的代号填入题后的括号内。l一18题每题1分,19一2今题每题2分。 1.下列四组人体消化液中,都含淀粉酶的一组是() (^)唾液、胃液、肠液(B)胃液、肠液、胰液(c)孩液、肠液、唾液(D)肠液、胰液、胆汁 2.组成搪元和核酸的化学元素分别是() (A)c、H、o和c、H、0、N、p(B)c、H、O、p和c、H、O、N、s(c)c、H、0、N和c、H、o、N.p.s(D)C、H、o、s和c、H、o、N、P。S 3.对人休皮肤黑色素不正确的叙述是() (^)黑色素由黑色素细胞产生(B)皮肤…     

野生型p53、bcl2基因在低氧性肺动脉高压大鼠肺内表达及其分布

目的 :探讨野生型 p5 3、bcl2 基因在慢性低氧性肺动脉高压中的作用。方法 :建立慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型 ,用原位杂交的方法观察 p5 3mRNA、bcl2 mRNA在大鼠心脏及肺组织的表达和分布。结果 :缺氧组大鼠肺小动脉壁厚度占血管外径的百分比 (MT % ) 2 9 3 %± 4 5 %明显高于正常对照组 15 2 %± 3 2 % (P <0 .0 1) ,肺小动脉壁 p5 3mRNA表达 0 6 8± 0 12明显弱于对照组 1 12± 0 38(P <0 .0 1) ,而bcl2 mRNA表达 2 38± 1 0 4强于对照组 1 0 9± 0 32 (P <0 .0 1)。结论 :①慢性缺氧能导致肺小动脉重建及肺动脉高压 ;②野生型 p5 3bcl2 基因均参与了慢性低氧性肺动脉高压肺血管重建的调控。     

冬桃的离体繁殖

1植物名称桃（Prunuspersica）品种“冬桃”。2材料类别3年生嫁接苗树冠外缘向阳果枝的嫩梢腋芽。3培养条件基本培养基为MS。（1）芽诱导和增殖培养基：MS＋6－BA0．8～2mg／L（单位下同）＋IBA0．4～0。8＋GA3～5;（2）生根培养基：MS＋IBA0．4～07＋NAAof～03o培养基中含蔗糖3％（W／V）、琼脂0．8％,PH为5．8,培养温度25土豆C,光照度1200IX,照光12h／d。毛生长与分化情况外植体在无菌条件下用0．2％升汞95ml＋95％酒精5ml浸泡8min（使灭菌液更易附着于表面组织）,无菌水冲洗4～5次,然后切成l～2cm长带腋芽的茎段,接…     

A NEW CRICETID FROM THE LUFENG HOMINOID LOCALITY, LATE MIOCENE OF CHINA

CricetidaeRochebrune,l883KowalskiaFahlbusch,1969Kowalskiahanaesp.nov.(Figs.l-3iPl.I)EtymologyNamedinhonourtoProf.HanDefel1whoconductedtheexcava-tionatthesiteinl983andhasmadegreatcontributionstothestudyofthehomi-noidfauna-HolotypeLeftMl(V1o843;2.oOX1.35mm).ParatypesLayerl:6M1,7M2,2M3,l2m1,l2m2,6m3(Vlo844.l-45);Il:3Ml,2M2,2M3,9m1,l3m2,3m3(Vlo844.46-77);IlI:amandib1ewithm1-3(Vlo844.78);IV:adamagedmandiblewithml-3(Vlo844.79);V:l5M1,14M2,8M3,16ml,12m2,9m3(VlO844.8O-l53);VI:onedamage…     

复合益生菌制剂"海生元"急性毒性试验研究

目的 :观察复合益生菌制剂“海生元”(HSY)及其核心成分 益生菌 (M9、T9)经两种途径给药的急性毒性反应 ,评价其安全性。方法 :以健康小鼠为对象 ,将HSY、M9、T9三种受试物按i.p(腹腔注射 )和p .o(口服灌胃 )两种给药方式进行急毒试验。每种给药方法分 5个剂量组。i.p小鼠用Bliss法测得受试物的LD50 和 95 %可信限 ,p .o小鼠用安全限度试验测得受试物的最大耐受量。 结果 :1)i.p法测得各受试物LD50 和 95 %可信限 :M9为 898.31mg/ml(770 .18～ 92 5 .79) ;T9为 185 6 .95mg/ml(15 2 1.4 8～ 2 0 10 .36 ) ;HSY为 76 0 5 .2 3mg/ml(6 980 .5 2～ 830 4 .11)。 2 )p .o法测得各受试物最大耐受量及耐受倍数 :健康小鼠最大耐受量分别为M9>4 0 0 0mg/ml,T9>6 0 0 0mg/ml,HSY >15 0 0 0mg/ml;最大耐受量倍数 (即耐受成人每日用量的倍数 )分别为 133倍、2 0 0倍和 5 0 0倍。结论 :HSY、M9、T9口服给药均非常安全。三种受试物比较 ,又以HSY安全程度最高。     

脂质体介导基因编辑载体质粒转染条件的优化

[目的]探讨脂质体介导基因编辑载体质粒转染人食管癌Eca-109细胞的最佳条件。[方法]以基于Cre/Lox P系统的p GT-A1B1和基于CRISPR/Cas9系统的p X458-sgRNA8两种基因编辑载体质粒为实验材料,将环状和线性质粒以不同DNA用量(0. 2、0. 4、0. 6和0. 8μg)和不同DNA与脂质体比例(1∶1、1∶1. 5、1∶2、1∶2. 5和1∶3)转染Eca-109细胞,计算转染效率。[结果]不同DNA用量条件下,p GT-A1B1在0. 4μg和0. 6μg时转染效率较高,p X458-sgRNA8在0. 6μg时转染效率较高,与其它DNA用量比较均有显著性差异(P 0. 05)。不同DNA与脂质体比例条件下,p GT-A1B1在比例为1∶1. 5和1∶2时转染效率较高,p X458-sgRNA8在比例为1∶2. 5时转染效率较高,与其它比例比较均有显著性差异(P 0. 05)。同一种质粒的环状和线性结构形态,在DNA用量或DNA与脂质体比例相同时,转染效率差异不显著(P 0. 05)。[结论]建立了脂质体介导基因编辑载体质粒转染Eca-109细胞的最佳转染条件,质粒p GT-A1B1和p X458-sgRNA8的DNA用量分别为0. 4～0. 6μg和0. 6μg,DNA与脂质体比例分别为1∶1. 5～1∶2和1∶2. 5。     

锦鸡儿属植物染色体制片与3个种的核型分析

对锦鸡儿属植物根尖染色体制片中的几种预处理、解离、染色方法进行了比较.结果表明,用0.002 m o l/L8-羟基喹啉和饱和对二氯苯混和液(1∶1)预处理,1 m o l/L HC l预热60℃解离,改良苯酚品红染色效果较好.对锦鸡儿属植物3个种的体细胞中期染色体制片,核型分析结果表明,小叶锦鸡儿(C arag ana m icrophy lla)为2n=2x=16=8m(2SAT) 4sm 4M,中间锦鸡儿(C.interm ed ia)为2n=2x=16=6m 8sm 2M,青海锦鸡儿(C.ch ing-ha iensis)为2n=2x=16=4m 8sm 4M 2B,核型不对称性为“2A”型.此外,还发现这3种植物的根尖细胞中均有内源有丝分裂现象.     

小鼠胚胎体外培养方法的优化及胚胎质量评估

实验采用输卵管收集获得的 2 细胞、原核受精卵和体外受精得到的胚胎。 2 细胞胚胎在所有培养浓度下均达到较高的囊胚发育率 ,而ISF和IVF受精卵在减低培养浓度后发育率显著降低 (p <0 .0 1 ) ,ISF受精卵从高密度 (1 /μl)下约 82 .5 %的发育率到低密度 (1 /1 0 0 0 μl)下 2 2 .3 %的发育率。而IVF胚胎的这两个值分别为 46 .3 %和5 .2 %。2 细胞胚胎与其他两种受精卵相比 ,每个囊胚所含的细胞数目差异显著 (p <0 .0 1 )。添加 1ng/ml(1 /1 0 μl)和 1 0ng/ml(1 /1 0 0 μl)的PAF显著增加了IVF胚胎的囊胚发育率 (p <0 .0 1 )。在胚胎密度为 1 /1 0 μl的培养密度下 ,添加 1 0ng/ml以上的IGF Ⅰ同样改善IVF受精卵的发育能力 (p <0 .0 1 )。培养液中添加EGF对囊胚的发育率没有影响。PAF和IGF Ⅰ协同作用的效果与IGF Ⅰ单独处理的结果并无差异 (p >0 .0 5) ,但高于PAF单独处理组 (p <0 .0 5)。结果表明 ,胚胎生长所需的生长因子在低密度培养条件下被稀释并影响胚胎的正常发育。PAF和IGF Ⅰ作为自分泌性胚胎营养因子在一定程度上补偿了由于低密度培养所带来的负效应。     

链霉菌发酵麦草产木聚糖酶的试验研究

通过正交设计试验 ,找出利用链霉菌和麦草基质发酵生产木聚糖酶的试验条件。培养基 (g/L) :麦草粉 ,4 5 ;(NH4 ) 2 SO4 ,7.5 ;酵母膏 ,8;K2 HPO4 ·3H2 O ,1;MgSO4 ·7H2 O ,0 .5 ;NaCl,0 .3。接种量为 5 .0× 10 8个孢子 / 5 0mL培养基 ,振荡培养 (12 0r/min) 5d     

p53蛋白在周期调节蛋白A1变异引起的雄性小鼠生殖细胞凋亡中的作用

为研究p5 3蛋白在周期调节蛋白A1(cyclinA1)变异引起的雄性小鼠生殖细胞凋亡中的作用 ,以p5 3基因敲除的小鼠和周期调节蛋白A1基因敲除的小鼠杂交 ,获取同胎生单基因变异和双基因同时变异的雄性后代共 4组 12只 .比较它们的性腺和生殖细胞发育 ,并用TUNEL染色法观察和比较生殖细胞的凋亡情况 .在睾丸最大横切面上观察到 :周期调节蛋白A1变异组凋亡细胞最多 (348± 10 4个 ) ,明显高于p5 3 周期调节蛋白A1双基因变异组 (12 1± 38个 ) ,t=3 2 5 79,P =0 0 4 72 .p5 3变异组凋亡细胞最少 (45± 2 4个 ) ,配对t检验显示有非常显著性差异 ,t=8 4 0 13,P =0 0 0 35 .这一研究结果提示 ,p5 3基因可能在雄性生殖细胞的发育中起监视作用 ,并在周期调节蛋白A1变异引起发育异常时启动p5 3途径造成异常细胞的凋亡 .     

p16基因甲基化状态与散发性大肠癌的相关性研究

为探讨p1 6基因甲基化状态与散发性大肠癌发生发展的关系 ,用甲基化特异性的聚合酶链反应 (methylati omspecificPCR ,MSP)结合测序检测散发性大肠癌及相应癌旁组织p1 6基因甲基化状态。研究发现p1 6基因在散发性大肠癌中甲基化率为 2 8 9% (1 3 4 5 ) ,有 8例癌及癌旁组织都发生了甲基化 ;有淋巴结及远处转移的甲基化率为5 0 % (8 1 6 ) ,高于无转移的甲基化率 2 0 8(5 2 4 ) (P <0 0 5 )。p1 6基因高甲基化是散发性大肠癌中常见的分子改变之一 ,大肠癌中p1 6基因高甲基化可能发生在癌变早期并与大肠癌的恶性进展有相关性     

A NEW NEOPLAGIAULACID MULTITUBERCULATE (MAMMALIA) FROM THE LOWER EOCENE OF WUTU BASIN, SHANDONG

TheWutuspecimenswerecol1ectedfromWutuFormation,LowerEoceneinl992andareconcurrentwithChangleIestcsdissetiformis(Insectivora,seeTongandWang,l993),ischyromyidrodents,carpo1estidprimates,primitiveperissodactylsandothermammals.MultituberculataCope,l884PtilodontoideaSloanandVanValen,l965NeoplagiauladdaeAmeghino,189oMesodmopsdaw8onaegen.etsp.nov.(Text-fig.l-2,Pl.l,II)TypeAfragmentaryskullwithrightdP1-M2andleftdP'-M',anear1ycompleterightmandiblewithI,andP'-M,,anincompleteleftmandiblewithP.…     

广东汉族人群补体C2 , Bf, C4的遗传多态现象

对110例广东汉族人血清作了补体C2, Bf, C4的测定,其基因频率分V1为：C2*C'0.9500, C2*B: 0.0227,C2-,4:0182, C2*QO:O．0091;Bf*S：0．8364, Bf^`F:0．1409, Bf*S07：0．0091, Bf *S025： 0.009i,Bf*S055：0,0045; C4*A3：0.6327,C4*A4：0．1327,C4*_00：0．1020, C4*A5：0．0255 （一4*A2: 0·0918,C4*,41：0．0053;C4*B1：0．4569, C4*B2：0．4416, C4*QO:O．0558,C4*B5：0．0152,C4"}B96： 0.0152, C4*B3:0.0102, C4*B92:0.0051。木调查在我国首次发现一例C2*QO纯合子。     

慢性低O2高CO2对大鼠海马神经细胞TLR4和NFκB的影响

目的：探讨慢性低O2高CO2对大鼠海马神经细胞TLR4和NFκB的影响及作用。方法：采用慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠模型,30只大鼠随机分为正常对照组（NC）、低O2高CO2 2周组（2HH组）和低O2高CO2 4周组（4HH组）,免疫组织化学法检测海马CA1／3区细胞TLR4和NFκB的表达,TUNEL法检测海马细胞凋亡。结果：模型组大鼠海马CA1／3区TLR4蛋白的表达随着时间延长而显著,2HH组（CA1：0．1275±0．0242,CA3：0．1156±0．0376）,4HH组（CA1：0．1522±0．0187,CA3：0．1427±0．0453）,与NC组比较有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。NC组大鼠海马CA1／3区可见NFκB／p65少量表达于胞浆,而模型组可见NFκB／p65在细胞核内不同程度表达,2HH组（CA1：0．1326±0．0324,CA3：0．1301±0．0112）,4HH组（CA1：0．1612±0．0428,CA3：0．1578±0．0365）,与NC组比较分别有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。模型组大鼠海马CA1／3区细胞凋亡明显增多,与NC组比较分别有显著性差异（P〈0．01）,以4HH组为著。结论：TLR4和NFκB激活可能在慢性低O2高CO2大鼠海马神经细胞凋亡中有重要作用。     

血浆高密度脂蛋白胆固醇水平对冠脉介入治疗术后1年不良事件的预测价值

目的：探讨冠脉介入治疗（PCI）术后1年不良心血管事件与高密度脂蛋白胆固醇（rtDL-C）水平变化的关系。方法：本研究收集2009年1月至2010年1月我科收治的435例冠心病且接受PCI治疗患者的一般资料、PCI术后1年随访临床终点,按HDL-C水平分为三组：HDL-C〉1．55mmol／L,HDL-C1．04—1．55mmol／L,I-IDL-C〈1．04／L,比较组间1年临床结果差异,并用多元回归方法分析PCI术后1年死亡的影响因素。结果：HDL-C水平的更低患者相对年轻（69_3±9．5VS65．5±9．2VS62．8±9．2,p=0．007）,同时合并吸烟（14．5％VS13．O％VS24．6％扩0．002）、糖尿痛（23．4％VS27．8％V836．6％,P=0．019）、LVEF〈30％（2．4％VS5．3％VS4．9％’p=0．020）,接受急诊PCI比例更高（4．8％VS6．5％VS7．0％d）=0．034）;且PCI术后1年死亡（2．4％VS2．4％VS6．3％,p=0．008）、再血管化（20．2％VS21．9％VS25．4％,p=0．022）、再次心源性入院（30．6％VS32．0％VS37．3％,p=0．013）、术后6m内心绞痛复发（20．2％VS20．1％VS22．5％,p=0．038）的比例均更高。结论：HDL-C〈1．04mmol／L是导致冠心病患者接受PC术后1年死亡的独立危险因素。