Cosmc基因在卵巢癌中生物学功能的研究

目的:明确Cosmc基因在卵巢癌细胞中的生物学功能。方法:本研究采用慢病毒转染技术,在卵巢癌细胞A2780和SKOV3中过表达Cosmc基因,MTT实验、细胞凋亡实验以及Transwell侵袭实验对过表达Cosmc后卵巢癌细胞在生长、凋亡、侵袭等方面的影响。结果:慢病毒转染卵巢癌细胞A2780和SKOV-3后,Cosmc的蛋白表达显著提高;MTT结果显示,与空载体对照组相比,过表达Cosmc的卵巢癌细胞生长能力显著减弱;流式细胞术结果表明Cosmc过表达的卵巢癌细胞凋亡数较空载体对照组细胞显著增加;Transwell实验显示Cosmc过表达的细胞侵袭和迁移能力较空载体对照组显著减少。结论:卵巢癌细胞系中过表达Cosmc基因能抑制卵巢癌细胞的生长和侵袭并促进细胞凋亡。     

TRPC3对上皮性卵巢癌细胞株迁移和侵袭的影响

目的:探讨瞬时受体电位通道C3(TRPC3)对人卵巢癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法:采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测卵巢癌细胞株SKOV3、ES-2和HEY-T30中TRPC3蛋白和m RNA的表达水平。通过Transwell迁移实验(不含Matrigel胶的Transwell小室)和Transwell侵袭实验分别检测卵巢癌细胞株SKOV3、ES-2和HEY-T30的迁移、侵袭能力。结果:在SKOV3、ES-2和HEY-T30三种卵巢癌细胞株中,ES-2中TRPC3的蛋白和m RNA表达均显著高于其他两株(P0.05)。Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验显示卵巢癌细胞株ES-2的迁移、侵袭能力均显著高于其他两种细胞株(P0.05)。结论:瞬时受体电位通道C3(TRPC3)在ES-2人卵巢癌细胞中高表达,并可能促进人卵巢癌细胞的迁移、侵袭。     

VEGF-α诱导对卵巢癌血管生成拟态形成及侵袭、迁移能力的影响

目的探讨细胞因子VEGF-α诱导对卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3细胞系血管生成拟态形成及侵袭、迁移能力的影响。方法采用不同细胞因子诱导卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3细胞系,通过三维培养来观察卵巢癌细胞形成血管生成拟态的能力;以划痕实验和侵袭实验来判断细胞因子诱导对卵巢癌细胞侵袭、迁移能力的影响。结果三维培养结果表明在VEGF-α组SKOV-3和OVCAR-3细胞可观察到大量、明显的血管样网状结构;细胞划痕试验结果表明卵巢癌细胞系经细胞因子诱导后,其迁移能力明显增强;体外侵袭实验表明VEGF-α能够明显增强卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3细胞的体外侵袭能力。结论 VEGF-α能促进卵巢癌细胞系血管生成拟态的形成,并明显增强卵巢癌细胞侵袭和迁移的能力。     

沉默细胞分裂相关基因NUF2的表达对卵巢癌细胞侵袭及迁移的影响

目的:研究沉默细胞分裂相关基因NUF2的表达对卵巢癌细胞侵袭及迁移的影响,并初步探讨其潜在的分子作用机制。方法:用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测卵巢癌组织和细胞中NUF2的表达情况;将卵巢癌HEY、SKOV3细胞分为空白对照组、control siRNA(si-control)组和NUF2 siRNA(si-NUF2)组,用qRT-PCR检测各组细胞的NUF2 mRNA表达水平以验证转染效果;Transwell小室实验和细胞划痕实验检测沉默NUF2后各组细胞侵袭、迁移能力的改变;蛋白印迹法检测各组细胞中Notch通路相关蛋白Notch1、Hes1的表达水平。结果:NUF2在卵巢癌组织或细胞中均高表达,差异均有统计学意义(P0.05);与空白对照组和sicontrol组相比,si-NUF2组细胞中NUF2 mRNA表达水平显著下降(P0.05),侵袭、迁移细胞数明显减少(P0.05),Notch1和Hes1蛋白表达降低。结论:沉默NUF2表达可抑制卵巢癌细胞侵袭、迁移能力,其分子作用机制与抑制Notch信号通路有关。     

SPOP对卵巢癌细胞生物学行为的影响及其分子机制的研究

探讨人卵巢癌组织中斑点状蛋白(SPOP)的表达及对其卵巢癌细胞生物行为学的影响及相关机制。采用免疫组化技术分别检测正常卵巢组织10例、卵巢癌组织90例的组织芯片中SPOP的表达;体外培养永生化人卵巢癌细胞株OVCAR-3、SKOV3及永生化的人卵巢表皮上皮细胞株HOSE,RT-PCR、WB检测3种细胞株SPOP的表达。用慢病毒稳定转染OVCAR-3、HOSE细胞株,构建过表达、敲低SPOP的细胞株。流式细胞仪检测转染后细胞株的凋亡,CCK8检测转染后细胞株的增殖情况,Transwell小室检测转染后细胞株的迁移侵袭情况。WB检测转染后细胞株PI3K-Akt通路相关蛋白的表达情况。组织学免疫组化评分显示卵巢癌组织染色明显高于正常卵巢组织。细胞学实验显示,成功构建过表达、敲低SPOP的OVCAR-3细胞,过表达组、过表达空载组、敲低组、敲低空载组细胞凋亡及增殖能力无明显差异;各组细胞迁移及侵袭结果与空载组有明显差异,且差异有统计学意义(p0.05)。过表达组细胞P-GSK3β(Ser9)表达水平明显低于敲低组(p0.05),MMP-9表达水平明显高于敲低组(p0.05)。SPOP在卵巢癌组织中表达上升,且具有促进卵巢癌细胞迁移侵袭的作用,其调节机制可能与p-GSK3β(Ser9)通路相关。     

SPARC基因过表达对卵巢癌淋巴结高转移细胞生物学特性的影响

该研究旨在探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白基因(secreted protein acidic and rich in cysteine gene,SPARC)过表达对卵巢癌淋巴结高转移细胞(SKOV3-PM4)生物学特性的影响。构建SPARC基因的慢病毒表达载体并转染SKOV3-PM4细胞,Real-time PCR和Western blot验证转染后的表达效率,激光共聚焦免疫荧光进行蛋白的细胞定位,细胞计数法和集落形成实验测定细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell小室实验测定细胞体外侵袭、迁移能力。实验结果显示,SPARC蛋白存在于核周及胞质;过表达SPARC基因后,SKOV3-PM4细胞增殖受到明显抑制(P0.05);细胞周期检测结果显示,各期改变无明显差异;体外侵袭、迁移实验结果显示,SKOV3-PM4细胞侵袭、迁移能力显著降低(P0.05)。实验结果表明,SPARC基因在卵巢癌淋巴结转移中可能发挥抑癌基因的生物学作用。     

转录因子FOXM1在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

FOXM1(Forkhead box protein M1)是调控细胞增殖的重要转录因子,近年来研究表明与肿瘤发生密切相关,但与卵巢癌的关系尚不明确.通过检测68例卵巢癌标本、21例卵巢良性肿瘤标本、24例正常卵巢标本以及3株卵巢癌细胞系(A2780细胞、OVCAR3细胞、SKOV3细胞)中FOXM1的表达情况,分析其与临床参数之间的相关性及临床意义.结果显示卵巢癌中FOXM1表达明显高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织,差异极为显著,其中低分化细胞中表达强于中高分化细胞(P=0.013),Ⅲ～Ⅳ期表达强于Ⅰ～Ⅱ期(P=0.011),但与病理类型无关;FOXM1在3株卵巢癌细胞系中均有较强表达.FOXM1在卵巢癌组织及3种卵巢癌细胞系中存在高表达,且与卵巢癌分化程度及临床分期有关.     

TRPM3通过Wnt/β-catenin信号通路诱导上皮性卵巢癌细胞上皮间质转化的作用研究

目的:探讨瞬时受体电位离子通道3(Transient receptor potential melastatin 3,TRPM3)对卵巢癌侵袭转移和上皮细胞间质转化(Epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响及其分子作用机制。方法:采用小干扰RNA沉默上皮性卵巢癌细胞株中HEY及SKOV3中TRPM3的表达,通过Transwell实验和划痕实验检测上皮性卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力的变化,Western Blot检测EMT相关蛋白、Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达情况。结果:与对照组细胞相比,干扰组的上皮性卵巢癌细胞迁移和侵袭能力均明显减弱,EMT相关蛋白的上皮细胞标志分子E-cadherin的表达上调,间质细胞标志分子N-cadherin和EMT相关转录调控因子Snail的表达下调,Wnt/β-catenin通路相关蛋白CyclinD1、β-catenin的表达下调。结论:TRPM3可能通过激活Wnt/β-catenin通路促进卵巢癌细胞的上皮间质转化过程,进而增强其侵袭转移的能力。     

卵巢癌组织中dbpA的表达及其对卵巢癌细胞增殖的影响

目的:探讨dbp A蛋白在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:通过荧光定量和蛋白质免疫印迹方法检测临床卵巢癌组织和正常癌旁组织中dbp A的表达量;设计合成针对dbp A基因的双链小干扰RNA转染人卵巢癌细胞系SKOV3和A2780细胞,用荧光定量和蛋白质免疫印迹方法检测细胞中dbp A的表达量,MTT法和克隆形成试验检测细胞的增殖能力和克隆形成能力,流式细胞术检测各组细胞周期和细胞凋亡的变化。结果:dbp A在卵巢癌组织、SKOV3和A2780细胞中表达较癌旁正常卵巢组织显著升高。沉默dbp A后,SKOV3和A2780细胞中dbp A蛋白表达量显著降低,SKOV3和A2780细胞增殖能力和克隆形成能力显著下降(P0.05),G0/G1期细胞百分比显著增加(P0.01),S期细胞百分比明显减少(P0.05),细胞凋亡率显著升高(P0.01)。结论:dbp A在卵巢癌组织和卵巢癌细胞SKOV3和A2780中过表达,沉默dbp A基因后可抑制SKOV3和A2780细胞的增殖能力和克隆形成能力。     

人卵巢癌A2780 细胞侵袭转移与HES1 相关性

目的:探讨人卵巢癌细胞A2780中的HES1表达与人卵巢癌侵袭及转移的关系。方法:分别运用实时RT-PCR、WesternBlotting及细胞免疫荧光法检测γ分泌酶抑制剂作用前后A2780细胞中HES1的表达水平,Transwell小室试验及MTT法分别用于检测细胞的侵袭、迁移及黏附能力。结果:下调A2780细胞中HES1的表达水平后,A2780细胞的黏附、侵袭及转移能力下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HES1的表达与人卵巢癌细胞的侵袭及转移密切相关,下调其表达可抑制卵巢癌细胞的黏附、侵袭及转移能力。     

LncRNA D5在卵巢癌组织中的表达及其功能研究

目的:探讨LncRNA D5在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞糖代谢的影响和与卵巢癌患者预后的关系。方法:采用实时定量聚合酶链反应法(q RT-PCR)测定62例卵巢癌患者组织LncRNA D5表达,Kaplan-Meier生存分析其表达与患者预后的关系,设计合成LncRNA D5/p EX-2真核过表达质粒,分别在卵巢癌细胞SKOV3、A2780中进行转染,实验分为空白对照组及转染组,48 h后测定卵巢癌细胞SKOV3、A2780的葡萄糖摄取能力、糖酵解速率、氧耗以及乳酸排除率。结果:LncRNA D5在良性卵巢肿瘤或正常卵巢组织中表达比较均一,其在卵巢癌中的表达与良性卵巢肿瘤或正常卵巢组织相比,具有显著差异(P0.05)。LncRNA D5表达下调的卵巢癌患者总生存期和无瘤生存期均较LncRNA D5表达上调的卵巢癌患者明显缩短(P0.05)。通过转染上调A2780、SKOV3中的LncRNA D5,细胞的葡萄糖摄取能力、糖酵解速率以及乳酸排出显著上调,而细胞的氧消耗明显下降(P0.05)。结论:LncRNA D5在卵巢癌中表达异常,与卵巢癌患者的预后不良相关,LncRNA D5对卵巢癌细胞的糖酵解能力具有一定的调控作用。     

miR-181a通过调控上皮间质转化过程影响卵巢癌细胞的迁移和侵袭

目的:探讨mi R-181a在卵巢癌细胞中的表达及对卵巢癌细胞的迁移和侵袭的影响和可能机制。方法:采用细胞免疫荧光检测卵巢癌细胞中抗波形蛋白和E-钙粘蛋白的表达,Western blotting检测mi R-181a对抗波形蛋白和E-钙粘蛋白的表达情况的调控;划痕愈合实验检测mi R-181a对卵巢癌细胞迁移能力的影响;Transwell侵袭实验检测mi R-181a对卵巢癌细胞侵袭能力的影响。结果:增加mi R-181a的表达后,EMT过程中的相关蛋白激活水平下调,mi R-181a一定程度上可以抑制卵巢癌细胞的EMT过程;过表达mi R-181a后可以明显影响Vimentin[D1(4.58±0.85)vs(0.29±0.02),P0.05;D5(4.16±0.79)vs(0.29±0.02),P0.05]和E-Cadherin[D1(4.75±0.41) vs.(4.56±0.38),P0.05;D5(2.19±0.18) vs.(4.56±0.38),P0.05]蛋白的表达;COC1细胞的迁移能力随mi R-181a的表达的增高而降低[(19.24±4.31)%vs.(25.95±6.02)%,P0.05;(51.25±8.75)%vs.(73.49±12.54)%,P0.05];过表达mi R-181a后可以一定程度上减弱卵巢癌COC1细胞的侵袭能力[(74.64±8.21)vs(231.98±21.72),P0.05]。结论:mi R-181a通过调控上皮间质转化过程影响卵巢癌细胞的迁移和侵袭行为。     

OPN对卵巢癌Hey细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的:探讨骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)对卵巢癌Hey细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其可能涉及的分子机制。方法:选择卵巢癌细胞株Hey、HO8910、A2780和正常卵巢上皮细胞IOSE80,采用Western blot检测OPN蛋白的表达情况。对OPN表达量相对较高的Hey细胞株的OPN基因敲减或过表达,运用CCK-8、平板克隆实验、细胞划痕、Transwell侵袭实验等方法研究OPN对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,采用Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、CyclinD1、c-myc的表达情况。结果:OPN在卵巢癌细胞株Hey、HO8910、A2780内均有表达,且表达量均高于正常卵巢上皮细胞IOSE80。si RNA-OPN转染卵巢癌Hey细胞沉默OPN表达,CCK-8和平板克隆实验显示沉默OPN能够降低Hey细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell侵袭实验显示下调OPN可降低Hey细胞的迁移和侵袭能力,Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、CyclinD1、c-myc表达下降。ex-OPN转染Hey细胞使OPN表达升高,与对照组相比,OPN过表达能够增强Hey细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并且Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、CyclinD1、c-myc表达升高。结论:OPN能够促进卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,该作用可能通过促进Wnt/β-catenin信号通路实现。     

m6A 去甲基化酶ALKBH5 对上皮性卵巢癌恶性生物学行为的影响及其作用机制研究

摘要 目的：ALKBH5最近被证明是与各种癌症相关的RNA N6-甲基腺苷（m6A）去甲基转移酶之一,但其在上皮性卵巢癌中的作用缺乏研究。本研究旨在探讨ALKBH5在上皮性卵巢癌中的机制。方法：利用蛋白免疫印迹、免疫组化检测ALKBH5在卵巢癌细胞和组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征和预后关系;通过慢病毒感染构建ALKBH5稳定过表达或敲减卵巢癌细胞系,采用CCK-8、平板克隆、划痕、Transwell 迁移和侵袭等实验研究ALKBH5 对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;通过蛋白免疫印迹和斑点印迹实验,探究ALKBH5-HIF-1α环的相互作用情况。结果：ALKBH5在卵巢癌细胞系和卵巢癌组织中高表达,ALKBH5蛋白在卵巢癌组织中的表达与CA125水平、FIGO分期和组织学类型相关,且高表达的ALKBH5水平与较差的预后相关。通过慢病毒感染构建出可靠的ALKBH5敲减/过表达稳转细胞系,CCK-8、平板克隆实验表明敲减ALKBH5降低卵巢癌细胞体外增殖速率和集落形成,划痕、Transwell 迁移和侵袭实验表明敲减ALKBH5可抑制卵巢癌细胞体外迁移和侵袭能力。与对照组相比,过表达ALKBH5增强卵巢癌细胞体外增殖速率、集落形成、迁移和侵袭能力。进一步的实验发现ALKBH5和HIF-1α互相促进表达。结论：m6A去甲基化酶ALKBH5在上皮性卵巢癌中高表达且与预后相关,通过促进卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭发挥致癌基因的作用。因此,抑制ALKBH5的表达可能是靶向治疗上皮性卵巢癌的潜在策略。     

LMTK2基因沉默抑制人上皮性卵巢癌细胞生长和转移的作用机制

摘要 目的：探讨狐猴酪氨酸激酶2（LMTK2）基因沉默对人上皮性卵巢癌(EOC)细胞生长和转移的抑制作用及其可能的机制。方法：通过RT-qPCR和Western-blot检测了人正常卵巢上皮细胞IOSE80和人上皮性卵巢癌细胞系（SKOV3、ES2、OVCAR-3和HEY）中LMTK2的表达,使用Lipofectamine 3000转染试剂将LMTK2的短发夹RNA（shRNA）、阴性对照shRNA、LMTK2过表达重组pcDNA3.1质粒或阴性对照质粒转染到SKOV3细胞中,并分为LMTK2-shRNA组、NC-shRNA组、LMTK2-pcDNA3.1组或NC-pcDNA3.1组。另外,使用PI3K/Akt抑制剂LY294002处理SKOV3细胞1 h。通过CCK-8法测定细胞增殖,Annexin V-FITC/PI染色法测定细胞凋亡,划痕实验评价细胞迁移,Transwell实验评价细胞侵袭。对BALB/c雌性裸鼠皮下注射转染NC-shRNA或LMTK2-shRNA的SKOV3细胞建立体内移植瘤模型,并记录接种28 d内的肿瘤体积。结果：与人正常卵巢上皮细胞IOSE80相比,卵巢癌细胞系（SKOV3、ES2、OVCAR-3和HEY）中LMTK2的mRNA和蛋白表达水平均显著升高,其中SKOV3的LMTK2 mRNA和蛋白表达水平最高（P<0.05）。与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组SKOV3细胞活力、相对迁移面积、侵袭细胞数均显著降低,而细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。此外,与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组SKOV3细胞中Bax的蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2、MMP2、MMP9、p-Akt的蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。LY294002处理逆转了上调LMTK2对SKOV3细胞生长和转移的影响（P<0.05）。在接种第21天和28天时,与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组裸鼠的肿瘤体积显著降低（P<0.05）。结论：LMTK2基因沉默通过抑制PI3K/Akt信号通路降低了人上皮性卵巢癌细胞的生长和转移能力。     

NID1促进人卵巢癌细胞OVCAR-3侵袭转移及分子机制的研究

Nidogen-1(NID1)是新发现的一个候选卵巢癌诊断标志物,该研究旨在初探其在卵巢癌细胞中的生物学功能。首先构建稳定过表达外源NID1的人卵巢癌细胞系OVCAR-3,然后采用划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测细胞的迁移侵袭能力,并通过荧光定量PCR和Western blot检测细胞中上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白和ERK/MAPK通路蛋白的表达情况。结果显示,与空载细胞相比,稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞其划痕愈合能力、细胞迁移和侵袭能力均明显增强。较之空载细胞的上皮细胞样外形,稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞呈间质细胞样外形,其上皮细胞标志分子E-cadherin表达下调,间质细胞标志分子(包括Vimentin和N-cadherin)和EMT相关转录因子Twist-2表达上调。此外,稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞中ERK1/2的磷酸化水平升高,经ERK/MAPK通路的抑制剂U0126下调ERK1/2的磷酸化水平后其Ecadherin、Vimentin、N-cadherin和Twist-2表达水平出现逆转。这些结果提示,NID1可能通过激活ERK/MAPK通路促进卵巢癌细胞的EMT过程,进而增强其侵袭转移的能力。     

miR-125b慢病毒表达载体的构建及其对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移的影响

构建并鉴定miR-125b慢病毒过表达载体,研究miR-125b对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及其可能机制。将PcR扩增的rniR-125b前体序列与经过酶切后的GP—SupersilencingVector进行连接,产生miR-125b重组慢病毒表达载体。将重组慢病毒载体质粒、pGag／Pol、pRev和pVSV-G共转染293T细胞,包装产生慢病毒。使用收获的病毒颗粒感染卵巢癌SKOV3细胞,嘌呤霉素筛选稳定感染细胞株;实时荧光定量PCR（Real．timeqPCR）检测miR-125b在SKV03细胞中的表达;Westernblot检测其潜在靶基因HER-2的表达：MTT实验和Transwell侵袭实验分别观察miR-125b过表达后SKOV3细胞增殖和迁移能力的改变。该研究成功构建miR-125b陧病毒过表达载体,感染卵巢癌SKOV3细胞后,能够过表达miR-125b,并抑制SKOV3细胞的增殖及迁移,降低潜在靶基因HER-2的表达。该研究证叽miR-125b能够抑制SKOV3细胞的增殖及迁移,并可能通过降低潜在靶基因HER-2的表达而实现。     

Maspin在卵巢癌中作用机制的体外研究

目的:检测卵巢癌细胞中Maspin对细胞增殖能力、VEGF和乙酰肝素酶Heparanase(HPA)表达的影响。方法:构建Maspin真核表达质粒,体外转染卵巢癌SKOV3细胞,磺基罗丹明B法((sulforhodamine B,SRB)检测转染后细胞增殖能力变化,细胞免疫化学及半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测VEGF和HPA的表达。结果:成功构建Maspin真核表达质粒并转染于卵巢癌细胞SKOV3后,证实转染目的基因的SKOV3-Maspin细胞中Maspin表达明显增强;转染Maspin cDNA的SKOV3细胞的体外增殖能力明显弱于转染空载体组和未转染组,而后两者之间差异无显著性;转染Maspin cDNA的SKOV3细胞中VEGF的表达明显弱于转染空载体组和未转染组,而后两者之间差异无显著性;但是HPA的表达无明显改变。结论:Maspin可能通过下调VEGF的表达抑制卵巢癌血管生成。HPA表达与卵巢癌的恶性生物学行为密切相关,但与Maspin无明显相关性。     

TRPM3表达上调通过调控Beclin1的表达促进卵巢癌细胞自噬

目的:探讨瞬时受体电位离子通道3(TRPM3)和Beclin1在卵巢癌中的表达和对卵巢癌细胞自噬的影响。方法:收集6例正常卵巢组织标本和20例卵巢癌组织标本,应用免疫组织化学染色法检测TRPM3和Beclin1在卵巢癌组织中的表达,采用western blotting法检测TRPM3和Beclin1在正常卵巢上皮细胞Moody和卵巢癌细胞Hey、ES-2中的表达差异。用TRPM3-siRNA瞬时转染细胞Hey和ES-2,通过western blotting法检测TRPM3基因沉默情况及Beclin1、p62和LC3的蛋白表达变化。结果:在正常卵巢组织和卵巢癌组织中,TRPM3的阳性表达率分别为33.3%、80.0%(P0.05),而Beclin1的阳性表达率分别为33.3%、65.0%(P0.05)。与正常卵巢上皮细胞Moody相比,卵巢癌细胞Hey和ES-2中TRPM3、Beclin1蛋白表达水平明显较高(P0.05)。沉默TRPM3基因表达的卵巢癌细胞中Beclin1和LC3蛋白表达与对照组相比明显降低,而p62表达升高(P0.05)。结论:卵巢癌组织和细胞中TRPM3蛋白呈高表达,可能通过调控Beclin1促进卵巢癌细胞的自噬。