马来沉香组织培养技术研究

以马来沉香茎段为外植体,分别对外植体的消毒、启动培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、炼苗移栽环节进行研究,着重探索马来沉香组织培养技术各个环节的最佳培养基配方,为马来沉香的工厂化育苗提供技术指导。结果表明:马来沉香最佳消毒方法是用0.1%升汞消毒4～5min;启动率最高的培养基配方是1/2MS+6-BA 0.2mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂5.8g·L-1,启动率达70.5%;增殖系数最高的培养基是1/2MS+0.1mg·L-16-BA+25g·L-1蔗糖+5.8g·L-1琼脂,增殖系数达2.9;最佳壮苗培养基是1/2MS+30g·L-1蔗糖+5.8g·L-1琼脂;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 5.0mg·L-1+20g·L-1糖+6g·L-1琼脂,培养2d后移入1/2MS培养基继续培养,生根率为83%;马来沉香移栽较难成活,在泥炭土∶黄泥土(2∶1)的基质上成活率最高,移栽成活率65%。     

北美冬青‘奥斯特’的组织培养和快速繁殖

以北美冬青‘奥斯特’(‘Oosterwijk’)成年雌性优良单株半木质化茎段为材料,建立了组织培养快速繁殖体系。结果表明,WPM+6-BA 0.50 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1可作为启动培养基,最佳的继代增殖培养基为WPM+6-BA 1.00 mg·L-1+NAA0.10 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1,25 d的增殖系数为6.1;生根培养基为1/2WPM+IBA 0.20 mg·L-1+NAA 0.40 mg·L-1,生根率达95.2%,每株平均生根5.7条。经生根培养30 d和日光温室炼苗10 d后,试管苗移入泥炭和珍珠岩(1:1,V/V)混合基质中,移栽后的成活率达98%。该体系的建立为北美冬青规模化生产提供了技术平台。     

小金海棠叶片的组织培养与快速繁殖

1植物名称苹果(砧木)小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et.Jiang). 2材料类别组培苗. 3培养条件以MS为基本培养基.(1)起始和增殖培养基:MS 6-BA 0.2 mg·L-1(单位下同) IAA0.5 3%蔗糖 6.5 g·L-1琼脂;(2)生长培养基:MS 6-BA 0.6 NAA 0.2 GA3 0.3 3%蔗糖 7 g·L-1琼脂;(3)再生培养基:MS 6-BA 1.0 NAA 1.0 TDZ4.0 3%蔗糖 7 g·L-1琼脂;(4)生根培养基:1/2MS IAA 1.0 3%蔗糖 6 g·L-1琼脂.培养基pH调整至5.8,121℃、0.11 MPa灭菌20 min.培养温度为(25±2)℃,光照时间14 h·d-1,光强为40μmol·m-2·s-1.     

大花蕙兰组织培养技术研究

以大花蕙兰Cymbidium hybridum侧芽为外植体,以N6、B5、CC、MS为基本培养基,设计无机大量元素、无机微量元素、有机物三因素四水平正交试验,探究大花蕙兰丛生芽增殖的最佳基本培养基、生长调节剂浓度配比以及诱导生根的最佳生长调节剂浓度。结果显示,大花蕙兰丛生芽增殖的最佳培养基组合为B5无机大量元素+ CC无机微量元素+MS有机物+蔗糖30 g·L-1 +琼脂7 g·L-1 +活性炭0.5 g·L-1(pH 5.8～6.0),诱导丛生芽增殖的适宜生长调节剂浓度配比为6-BA 4.0 mg·L-1 + NAA 0.2 mg·L-1,诱导生根的最佳生长调节剂浓度为NAA 1.0 mg·L-1。     

涅温花楸的组织培养与快速繁殖

1植物名称涅温花楸(Sorbus nevezhinskaia). 2材料类别幼嫩茎段. 3培养条件基本培养基为MS和Nitsch.(1)诱导培养基:Nitsch 6-BA 0.5 mg·L-1(单位下同) NAA0.2;(2)继代增殖培养基:MS 6.BA 0.5 NAA 0.2;(3)生根培养基:1/2MS IBA 0.1 NAA 0.1.以上培养基中均加入6 g·L-1琼脂、30 g·L-1蔗糖,pH 5.8.培养室温度(24±2)℃,光照12 h·d-1,光照强度为30～40 μmol·m-2·s-1     

黑莓品种‘Chester’离体培养过程中适宜激素种类和浓度以及光照度的筛选

以黑莓(Rubus spp. )品种'Chester'带腋芽茎段为外植体,对初代培养基、不定芽增殖培养基和生根培养基中适宜的激素种类及浓度进行了筛选,并对增殖培养过程中适宜的光照度进行了研究.结果显示,在初代培养基中添加不同质量浓度的6-BA和NAA对侧芽的萌发和生长有明显的影响,其中,NAA不利于芽的萌发和生长,而添加适量的6-BA可促进芽的萌发和生长;适宜于'Chester'茎段的初代培养基为添加了1.00 mg·L-16-BA的MS培养基(含25 g·L-1蔗糖和5.9 g·L-1琼脂,pH 5.8).单因素实验结果显示,在 'Chester'不定芽的增殖过程中,细胞分裂素主要影响不定芽增殖,而生长素主要影响不定芽生长,以质量浓度低于1.0 mg·L-1的6-BA以及质量浓度低于0.3 mg·L-1的NAA较为适宜;经过进一步的组合筛选,确定适宜于'Chester'不定芽增殖的培养基为添加了0.5 mg·L-16-BA和0.1 mg·L-1NAA的MS培养基(含25 g·L-1蔗糖和5.9 g·L-1琼脂,pH 5.8).在生根培养基中添加高浓度NAA易诱导不定芽基部产生愈伤组织,不利于不定芽生根,因而,'Chester'不定芽适宜的生根培养基为添加了0.10 mg·L-1NAA的1/2MS培养基(含20 g·L-1蔗糖和5.9 g·L-1琼脂,pH 5.8).在不定芽的增殖培养过程中,光照度较强有利于不定芽生长,适宜的增殖培养条件为:光照度3 000 lx、光照时间15 h·d-1、温度(25±2) ℃、相对湿度约70%,此条件下不定芽的增殖系数(1.95)和平均芽长(1.44 cm)最高,芽生长状况良好.     

杂交兰类原球茎增殖中芽分化的控制和快速繁殖

以‘玉女杂交兰’为材料,研究了培养时间、活性炭、切块大小和外源生长调节物质对类原球茎增殖和分化的影响。结果表明,培养时间、活性炭和切割处理对类原球茎增殖和分化影响显著,在培养基中添加活性炭或对类原球茎进行切割均能有效控制增殖过程中的芽分化。将类原球茎切成直径2~3 mm的小块接种到培养基MS＋1.0 mg.L-16-BA＋0.2 mg.L-1NAA＋0.3 g.L-1AC＋30 g.L-1蔗糖＋5.5 g.L-1琼脂中培养40 d,类原球茎增殖率为384.23%。将增殖后的类原球茎接种到培养基1/2MS＋1.5 mg.L-16-BA＋0.1 mg.L-1NAA＋20 g.L-1蔗糖＋5.5 g.L-1琼脂中培养40 d,芽分化率为463.06%。将分化的芽转入培养基1/2MS＋0.5 mg.L-1NAA＋0.5 g.L-1AC＋20 g.L-1蔗糖＋100 g.L-1土豆汁＋5.5 g.L-1琼脂中培养,生根率为100%,平均根分化数为2.80条.株-1。以泥炭土为基质,组培苗的移栽成活率可达97.78%。     

白玉兰的组织培养和快速繁殖

1植物名称白玉兰(Magnolia denudata). 2材料类别休眠顶芽. 3培养条件芽诱导增殖培养基:(1)MS 6-BA 0.2mg·L-1(单位下同) NAA 0.05,(2)MS 6-BA0.5 NAA 0.05,(3)MS 6-BA 1.0 NAA 0.05,(4)MS 6-BA 0.2 NAA 0.1,(5)MS 6-BA 0.5 NAA0.1,(6)MS 6-BA 1.0 NAA 0.1,(7)MS 6-BA2.0 NAA 0.05;诱导生根培养基:(8)1/2MS IBA0.2,(9)1/4MS IBA 0.5.以上培养基加0.7%琼脂、100mg·L-1肌醇,蔗糖除生根培养基为20 g·L-1外其余均为30 g·L-1,pH 5.8.培养温度20～28℃,光照度1 500～2500 lx,光照时间9～11 h·d-1.     

叶下珠组培快繁体系研究

以叶下珠Phyllanthus urinaria带节茎段为外植体,研究生长调节剂浓度、培养基对茎段诱导芽的影响,再以叶下珠无菌芽为材料,开展丛生芽增殖培养、生根培养和炼苗移栽技术研究。结果表明,适合叶下珠茎段诱导芽的培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+琼脂7.5 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+活性炭0.5 g·L~(-1)(pH 5.8~6.0),诱导率达100%;适合叶下珠芽增殖的培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1)+琼脂7.5 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)(pH 5.8~6.0),平均增殖倍数为3.8;生根适宜培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L~(-1)+琼脂7.5 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)(pH 5.8~6.0),生根率达100%;最佳炼苗时间为闭盖2 d后开盖3 d,移栽成活率86.6%。     

金花竹芋的离体培养与植株再生

1 植物名称金花竹芋(Calathea crocata Morr.et Joriss),别名金花冬叶、金苞肖竹芋. 2 材料类别新生侧苗的根状茎. 3 培养条件以MS为基本培养基.(1)芽诱导及继代增殖培养基:MS+6-BA 4.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.5;(2)壮苗培养基:MS+6-BA 2.0+NAA 0.2;(3)生根培养基:1/2MS+NAA 0.5.上述培养基均添加30 g·L-1蔗糖、6 g·L-1琼脂,pH 5.8.