甜樱桃品种SSR-PCR反应体系的优化

以甜樱桃品种那翁为试材,研究了樱桃SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响,并比较了采用聚丙稀酰胺凝胶及琼脂糖电泳检测扩增产物多态性的差异.结果表明:在PCR反应体系中,DNA最适浓度30～45 ng;Mg2+的最适浓度范围为1.5～3.0 mmol/L;dNTP最适浓度为0.2～0.3 mmol/L;引物的最适浓度为0.3～0.4 μmol/L;Taq聚合酶在20 μl反应体系中宜加入0.5 U.利用此反应体系,对24份樱桃代表资源进行了SSR反应,用6%的非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳检测,扩增产物在100～250 bp之间,不同品种间DNA谱带多态性丰富.琼脂糖电泳检测的DNA多态性不如聚丙稀酰胺凝胶丰富.     

小金海棠叶片的组织培养与快速繁殖

1植物名称苹果(砧木)小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et.Jiang). 2材料类别组培苗. 3培养条件以MS为基本培养基.(1)起始和增殖培养基:MS 6-BA 0.2 mg·L-1(单位下同) IAA0.5 3%蔗糖 6.5 g·L-1琼脂;(2)生长培养基:MS 6-BA 0.6 NAA 0.2 GA3 0.3 3%蔗糖 7 g·L-1琼脂;(3)再生培养基:MS 6-BA 1.0 NAA 1.0 TDZ4.0 3%蔗糖 7 g·L-1琼脂;(4)生根培养基:1/2MS IAA 1.0 3%蔗糖 6 g·L-1琼脂.培养基pH调整至5.8,121℃、0.11 MPa灭菌20 min.培养温度为(25±2)℃,光照时间14 h·d-1,光强为40μmol·m-2·s-1.     

与植物铁素营养相关的蛋白和基因

介绍铁胁迫下植物铁素吸收的机制Ⅰ、机制Ⅱ系统中铁素吸收、转运的主要相关蛋白及基因(如Fro2,Irt1,Naat,Nas,Fdh,Adh),可能存在的新机制Ⅲ系统中的Nramp基因,铁素储存蛋白(ferritin)及其基因等的研究进展。     

小金海棠中三价铁螯合物还原酶基因的表达分析

以从铁高效基因型小金海棠中克隆得到的三价铁螯合物还原酶基因片段为探针,对小金海棠进行Southern杂交。结果显示,三价铁螯合物还原酶基因在小金海棠基因组中为单拷贝。Northern杂交结果表明:在根中,三价铁螯合物还原酶基因的转录受缺铁胁迫诱导,并随缺铁胁迫时间的延长而增强;在叶中,此种基因的转录水平很高,但不受低铁胁迫诱导。根中的三价铁螯合物还原酶活性随缺铁胁迫的时间进程而不断增强,动态变化与其转录水平的变化趋势一致。     

不同生态类型龙眼种质亲缘关系的ISSR分析

利用ISSR分子标记技术对不同生态类型的39份龙眼种质进行亲缘关系分析。研究结果表明,从100条ISSR引物中筛选出12条重复性好、条带清晰的引物,对39份龙眼种质基因组DNA进行扩增,得到152个位点,其中多态性位点117个,多态性比例为76.97%。供试龙眼种质间遗传相似系数变幅为0.57～0.92,说明ISSR标记能够揭示材料间较高的遗传多样性。UPGMA聚类结果表明,在0.65相似水平可以将39份龙眼种质分为3个类群,类群Ⅰ均为来自中国的南亚热带生态型龙眼;类群Ⅱ包括石硖和大乌圆2个南亚热带生态型龙眼品种,以及热带生态型龙眼四季蜜类型的品种和单株;类群Ⅲ包括来自越南和泰国的龙眼种质。不同生态类型对龙眼的亲缘关系影响不大,热带生态型和南亚热带生态型龙眼相互聚在一起,说明两种不同生态类型龙眼具有较多相同的遗传背景。本试验结果将有助于进一步开展龙眼的分类、遗传与进化研究。     

小金海棠MxYSL5启动子克隆技术的比较

分别利用3种基于PCR技术的染色体步移法克隆了小金海棠MxYLS5基因的启动子,并比较了这三个体系的扩增产物。3种体系都可以获得特异性扩增产物,但扩增条带的长度和数量均不同,其中利用Genome Walking Kit扩增出来的条带特异性较好长度最长,而且特异性引物和简并引物的设计及退火温度的设置对3种体系的扩增产物起着关键的作用。基于PCR技术的染色体步移法为小金海棠MxYLS5基因启动子的克隆提供了一个稳定可靠的技术手段。     

酸樱桃组培快繁技术体系的研究

以酸樱桃(Prunus cerasus)新梢茎尖和带腋芽的茎段为外植体,采用茎段组织培养的方法,用MS和F14培养基,分别添加不同质量浓度的6-苄基氨基腺嘌呤(6-BA)和3-吲哚丁酸(IBA),进行酸樱桃组培快繁技术体系研究。结果表明,MS培养基是适合酸樱桃生长的基本培养基;培养基中分别加入0.5 mg.L-16-BA和0.2 mg.L-1IBA,增殖效果最好,增殖率为4.46倍,有效新梢数可达83.6%;组培苗在1/2MS 0.5 mg.L-1IBA培养基上根诱导效果最好,生根率可达71.4%,平均根长2.1 cm;移栽到蛭石基质中成活率可达80%。     

不同反光膜对设施葡萄光合特性和叶片糖代谢的影响

以‘京秀’葡萄为试材,研究了蓝膜、红膜、铝膜3种反光膜对设施葡萄光合特性和叶片糖代谢的影响。结果显示:红膜和蓝膜处理的葡萄叶片的净光合速率均显著高于对照(不铺设反光膜);在果实发育前期,各处理的叶绿素含量和叶绿素b/a值均大于对照,而后期均低于对照;蓝膜和红膜处理叶片的蔗糖含量较高,而蓝膜处理叶片中的蔗糖合酶(SS)和蔗糖磷酸合酶(SPS)活性最高;各铺膜处理均比对照提高了葡萄果实鲜量和可溶性糖含量、降低可滴定酸含量,且蓝膜处理显著优于红膜和铝膜。研究表明,在设施栽培条件下,地面铺设蓝色反光膜可显著提高葡萄叶片的光合速率和叶片中碳水化合物的关键合成酶活性,并显著提高葡萄果实品质。